测定酪蛋白蛋白质的等电点点

等电沉淀分离酪蛋白方法的探讨_百度文库
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实验二.蛋白质的两性反应与等电点测定
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内容提示:实。验。二。蛋白质的两性反应与 等电点测定。生物化学与分子生物学实验。实验目的。生物化学与分子生物学实验。实验原理。+OH+H+。P。COOH NH3+。+OH+H+。P。COONH3+ pH=pI。P。COONH2。pH&pI。阳离子。兼性离子。阴离子。生物化学与分子生物学实验。? 维持蛋白质胶体稳定的因素: 表面电荷、水化膜。? 在等电点时蛋白质颗粒上的净电。白质溶解度最小,最容易析出沉淀。生物化学与分子生物学实验。? 本实验配制了各种不同 pH 值的。生物化学与分子生物学实验。实验器材与试剂。? 0.5%酪蛋白醋酸钠溶液 ? 0.01%溴甲酚绿指示剂(指示范围: pH3.8-5.4)。? 0.02M HCL溶液、 0.02M NaOH溶液。生物化学与分子生物学实验。实验步骤。取一干净试管。酪蛋白液10滴。观察溶液颜色 并解释现象。生物化学与分子生物学实验。蛋白质的两性反应(2)。边滴加边混匀。有最大沉淀产生,观察溶液颜色变化 继续滴加0.02M HCL溶液。至沉淀消失,观察溶液颜色并解释现象。生物化学与分子生物学实验。蛋白质的两性反应(3)。边滴加边混匀。有最大沉淀产生,观察溶液颜色变化 继续滴加0.02M NaOH溶液。至沉淀消失,观察溶液颜色并解释现象。生物化学与分子生物学实验。实验结果。? 溶液呈蓝色 ? 酪蛋白溶液呈碱性 (pH﹥5.4),使溴甲酚 绿指示剂显蓝色。
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