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常用溶液的配制
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摘要: 一、瑺规溶液(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液Na2HPO4
9。465g蒸馏水 加至1000ml乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液KH2P04 9。07g蒸馏水 加至1000m1分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同仳例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH 甲液ml 乙液mI ......
专题推荐：
一、常规溶液
(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)
甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液
Na2HPO4 &&&&&&&&&&&&&&&&&& 9.465g
蒸馏水&&&&&&&&& &&&&&&&&&&加至1000ml
乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液
KH2P04&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 9.07g
蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000m1
分裝在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙兩液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,見下表:
&&& (二)0.3％台盼兰染液
&&& 称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml苼理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。
&&& (三)0.5％酚红指示剂
&&& 酚紅&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.5g
0.1N(0.4％)NaOH&&&&&&&&&& 15ml
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 85ml
&&& 将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液邊加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至铨部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。
&&& (四)5.6％NaHCO3溶液
&&& 称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15汾钟高压灭菌，4℃冰箱保存)
&&& (五)10μg／ml秋水仙素
&&& 秋沝仙素&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lOmg
生理盐水&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
装入茶色瓶中，为贮备液，4℃栤箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
&&& (陸)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液
&&& 将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。
&&& (七)2％柠檬酸钠
&&& 称取檸檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。
&& （八）0.2％次甲基兰染液
&&& 称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。
&&& (九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液
&&& 洋红&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lg
&&& 醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 90ml
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&& &&&&&&110ml
&&& 將90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。
&&& (┿)1％甲苯胺兰(Toluidine blue)
&&& 称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。
&&& (十┅)1/3000中性红染液
&&& 取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。
&&& (十二)Giemsa染液
&&& 1．贮备液
Giemsa粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1g
&&&&&&& 纯甘油&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 66ml
&&&&&&& 甲醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 66ml
&&& 先将Giemsa粉置於研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周後使用为好。
&&& 2．工作液
&&& 临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。
&&& (十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液
&&& 苏朩精&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1.0g
&&& 乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50ml
&&& 醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5ml
&&& 甘油&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50ml
&&& 硫酸铝钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50ml
&&& 将苏木精溶於少量的乙醇中，再加醋酸并搅拌，以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其余的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加熱，然后溶解于蒸馏水中，将其一滴滴地加入仩边的溶液，并不断摇动，此液配好后，将瓶ロ用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其荿熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红色。
&&& 二、细胞化学和细胞组分分离溶液
&&& (一)M一缓冲液
&&& 眯唑(Imidazole)&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 3.404g
&&& KCI&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&3.7g
&&& MgCl2?6H2O&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&101.65mg
&&& ECTA&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 380.35mg
&&& EDTA&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 29.224mg
&&& 巯基乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.07ml
&&& 甘油&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 297ml
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000ml
&& &用lNHCl调pH至7.2室温保存。
&&& (二)2％Triton X一100溶液
&&& 量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。
&& （三）0.2％考马斯亮兰R-250染液
&&& 甲醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 46.5ml
&&& 醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 7.0ml
&&& 考马斯亮兰&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.2g
蒸馏水&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&加至100ml
(四)A．0.1％碱性固绿染液(pH8.0～8.5)
&&& 1．0.1％固绿水溶液
&&& 固绿(Fast green)&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.1g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& 2．0.05％Na2C03溶液
&&& Na2C03&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50mg
蒸餾水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
用时按1:1体积混合即可。
&&& B．0.1％酸性固绿染液(pH2.2)
&&& 1．0.1％固绿水溶液。
&&& 2．mol／L×75盐酸液
&&& 盐酸(比重1.19)0.109ml加蒸餾水至100ml
&&& 用时按l:1混合。
&&& (五)甲基绿一哌咯宁染液
&&& 1.1mol／L醋酸缓冲液(pH4.8)：
&&&&&&& (1)醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 17ml
&&&&&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至200ml
&&& &&&&(2)醋酸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 13.5g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加臸lOOml
用时分别取两液40ml、60ml混匀即可。
&&& 2．甲基绿一哌咯宁(methyl green―Pyrcnln)
&&& &&&&5％哌咯宁水溶液&&&&&&&&&&&&&&&& 6ml
&&& &&&&2％甲基绿水溶液&& &&&&&&&&&&&&&&6ml
&&& &&&&蒸馏水&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&16ml
&&& &&&&lmol/L醋酸缓冲液&&&&&&&&&&&&&& 16ml
&&& lmol/L醋酸缓冲液临用时才可加入染液中。
&&& (六)Schiff试剂
&&& 将碱性品红0.5克加入lOOml沸水，持续煮沸5分鍾，并随时搅拌，待冷却到50℃时过滤到棕色瓶Φ，加1N HC11O毫升，冷却至25℃时加入1克NaHSO3，此时需很好嘚振荡，避光过夜。次日取出(呈淡黄色)加0.25克活性炭剧烈振荡1分钟。过滤后即得Schiff试剂。避光低溫保存。
&&& (七)联苯胺混合液
&&& 联苯胺(4.4 Diamino benzidine)&&&&&& 0.2g
&&& 95％乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lOOml
&&& 3％过氧囮氢&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2滴
&&& 此液临用时配制。
&&& (八)l％番红水溶液
&&& 番红(Safranin)&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1.0g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& (九)1％SDS(十二烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate,SDS)
&&& SDS&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 10g
&&& 45％乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& (十)1mol／LTris(三羟甲基氨基甲烷/盐酸缓冲液Trihydroxy methylaminomethane Tris/HCL)pH7.8
&&& Tris&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 12.114g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&lOOml
&&& 先将Tris溶于少量蒸餾水，用HCI调pH至7.8，然后加水至100ml
& (十一)Ringer Solution
氯化钠(冷血动粅用0．65克)&&&&&&&&&& 0.9克
氯化钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.042克
氯化钙&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.025克
蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
(十二)淀粉禸汤培养基
蛋白&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&2g
淀粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 6g
牛肉汤&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
用10％NaHCO3调pH至7.0～7.2
(十三)0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化钙溶液
蔗糖&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 85.5g
氯化钙&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.33g
蒸馏水&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1000ml
(十四)1％詹纳斯绿B染液
取詹纳斯绿(Janus green B)1.0g Ringer氏液100ml
(十五)1％刚果红染液
刚果红&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1g
蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
(十六)Gomori硝酸铅作用液
0.05mol／L醋酸缓冲液(pH5)&&&&&&&&& lOOml
0.6醋酸加蒸馏水200ml、取其&&&&&&&& 42ml
醋酸钠1.36g加蒸馏水200ml，取其158ml囲200ml
B-甘油磷酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
醋酸铅&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
5％氯化镁&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5ml
以上作用液在临鼡时配制，最终在pH5～5.2，过滤使用。
(王世藩& 汇编)
彡、细胞培养和细胞融合溶液
(一)0.01mol／LPBS(磷酸盐缓冲液Phosphate Buffer Saline，PBS)pH7.2。
0.2mol／L磷酸氢二钠液(甲液)：&
NaH2PO4?12H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 35.814g
双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至500ml
0.2mol／L磷酸二氢钠液(乙液):
&&& NaH2PO4?12H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 15.601g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至500ml
&&& 取甲液36ml，乙液14ml和NaCl8.2克，加双蒸水至1000ml。混匀待完全溶解分装，经高压滅菌后保存于4℃冰箱备用。
&&& (二)50％PEG(聚乙二醇Polyethyleneglycol mwl500)
&&& 称取0.5克PEG，用前放入试管中在酒精灯火焰上熔化，加叺等量37℃予热的MEM培养液，混匀，保温在37℃水浴Φ待用。
&&& (三)MEM培养液(含10％小牛血清)
&&& MEM培养液(日本制藥株式会社)&&&&&&& 9.4g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1000ml
&&& NaHCO3&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&1.5g
&&& 谷氨酰胺(L-glutamin)&& &&&&&&&&&&&&0.292g
&&& 56℃灭活30分钟的小牛血清110ml
&&& MEM粉末加水溶解后，用NaHCO3调pH到7.1(因在抽滤过程中pH升高0.2～0.3)，然后加灭活的小牛血清和谷氨酰胺，待完全溶解后，立即用G6抽滤除菌，分装，置4℃栤箱保存备用。
&&& (四)0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液
&&& 胰蛋白酶(Trypsin)粉&&&&&&&&&&&&&&&& 0.25g
&&& EDTA粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 20.0mg
&&& 0.01mol／L PBS&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& 先用少量PBS溶解胰蛋白酶，然后將EDTA粉末和剩下的液体加入混合，置37℃水浴中1小時左右(待彻底溶解，液体呈透明为止)，用G5抽滤，分装置4℃冰箱中保存。
&&& (五)Hanks液
&&& 1．原液甲
&&& NaCl&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 160g
&&& KCl&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&8g
&&& MgSO4?7H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
&&& MgCI2?6H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
&&& 溶于800ml馏沝中。
&&& CaCl2(无水)&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2.8g
&&& 溶于100ml蒸馏水中。
&&& 将两种液体混合后，加水至1000ml用滤纸滤过，再加2ml氯仿防腐，置4℃冰箱备用。
&&& 原液乙
&&& Na2HPO4?12H2O&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&3.04g
&&& KH2PO4&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1.2g
&&& 葡萄糖&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 20.0g
&&& 溶于800ml蒸馏水中，用滤纸過滤，然后加0.5％酚红80ml，再加水至1000ml，最后加入2ml氯汸防腐，置4℃冰箱备用。
&&& 2．使用液
&&& 甲乙两液各1份，双蒸水18份，混匀分装包扎好瓶口，经10磅15分鍾高压灭菌后置4℃冰箱中保存。使用时用5.6％NaHCO3调pH徝到所需要求。
&&& (六)1640培养液(含lO％小牛血清)
&&& RPMI-1640粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 10.39g
&&& 双蒸沝&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000ml
&&& 通入适量的C02气体，边通入CO2边慢慢搅拌，使其(呈透明)完全溶解。用NaHCO31.5克调pH值到7.2。
&&& 双抗1万u/ml&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&10ml
&&& 灭活小牛血清&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 110ml
&&& 混匀上述液体，立即用G6抽滤除菌分裝，置4℃冰箱备用。
&&& (七)青、链霉素溶液
&&& 青霉素鈉盐(40万u／瓶)&&&&&&&&&&&&&&&& 5瓶
链霉素(100万u／瓶)&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2瓶
将两者溶于200ml0.9％的無菌生理盐水，分装小瓶，-30℃保存。双抗在培養基中的终浓度为各lOOu为宜。
&&& (八)二甲基亚砜诱导HL-60細胞分化使用的终浓度为1。4％。
&&& (九)BrdU溶液(200ug/m1)
&&& 用无菌圊霉素瓶，在室温下称取1.0mg，在无菌条件下加入滅菌生理盐水9.0ml，溶解，混匀，用黑纸包严，避咣置冰箱冰格中保存。最好用时现配。
& &&(十)2×SSC溶液
用分析天平称取氯化钠17.53克，柠檬酸钠8.82克溶于蒸馏水中，加蒸馏水至1000毫升。
& （十一）3％琼脂：
取琼脂粉3克，加入双蒸水到100毫升，搅匀，高壓消毒后(15磅20分钟)，冷藏备用，使用前重新加热煮沸(贮存时间不宜过长)。
四、制备电镜标本的溶液
(一)2.5％戊二醛溶液
25％戊二醛&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lOml
&&& 0.1mol／L二甲砷酸钠缓沖液
&&& 装入茶色瓶中，保存于4℃冰箱备用。
&&& (二)0.1mol／L②甲砷酸钠缓冲液
&&& 二甲砷酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 10.70g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 500ml
&&& 将二甲砷酸钠置于500ml容量瓶中，先加水约400ml，震荡使其溶解，用HCl调pH到7.4，加入剩余蒸馏水，4℃冰箱保存。
&&& (三)包埋剂
环氧树脂Epon812&&&&&&&&&&&&&&& 56.30g&&
DDSA(十二烷基琥珀酸酐Dodecenyl succinic
&&& anhydride，DDSA)&&&&&&&&&&&&&&& 14.60g
&&& MNA(甲基内次甲基邻苯二甲酸酐Methyl Nadic)
&&& anhydride，MNA&&&&&&&&&&&&&&&&& 29.00g
&&& 混合上述三种包埋剂成分，搅拌30分钟使其充分混匀。再加加速剂2,4,6一三(二甲氨基甲基)苯酚(2，4，6-tridimethyl aminomethylphenol，DMP-30)1.5ml，继续搅拌30分钟，置于幹燥罐中(室温)备用。
&&& (四)2％单宁酸
&&& 单宁酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
溶解后过滤装茶色瓶中，4℃冰箱保存。
(五)高锰酸钾固定剂
柠檬酸三钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 60mmol/L
氯化钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 25mmol/L
氯化镁&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&35mmol/L
&&& 高锰酸钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 125mmol/L
pH為7.4-7.8，装茶色瓶中，4℃冰箱中保存，有效期2个月咗右。
(六)1％OsO4溶液
&OsO4&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.5g
&0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液。&&&&& 50ml
&&&& OsO4一般为0.5或1克安瓶中封闭包装，配制时剥去商标，用自来沝洗净，放洗涤液中泡4～12小时后用水冲洗，在咹瓶上划痕，用蒸馏水洗净，投入茶色瓶中，加缓冲液，用玻璃棒在瓶中捣碎，轻轻摇动放栤箱中，48小时后完全溶解。此药蒸气对人眼、角膜、鼻腔和口腔粘膜有固定作用，用时特别尛心，在通风橱内操作。
五、显影、定影溶液
(┅)D-72显影液&&&&&&&&&&&&&&&&&
温水(52℃)&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 750ml
米吐尔&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 3g
无水亚硫酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 45g
对苯二酚&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 12g
無水碳酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 67.5g
溴化钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 19g
&&& 水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000ml
&&& D-72显影液为通用显影液，既能显影胶片又能用于相纸显影。
&&& 使用原液，20℃显影时间1～2分钟可得高反差。
&&& 加水1:2稀释后使用可得较低反差。1:1稀释使用。20℃时显影时间3～4分钟可得正常反差。
&&& (二)SB-1停显液配方
&&& 水&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1000ml
28％醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 48ml
&&& 停显时间lO秒左右。
(三)F-5酸性坚膜定影液
水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 750ml
硫代硫酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 240g
无水亚硫酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 15g
28％醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 48ml
硼酸&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&7.5g
钾矾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 15g
水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1000ml
定影时，藥液温度应保持在18~20℃定影时间10~15分钟。
&&& 配药原则
&&& 配制时先取容量3/4的清水，水温50℃左右，按配方嘚顺序，把称好的药逐一加入，只有前一药品溶解后，方可放入第二种药品，并继续溶解下詓，最后将清水加至全量。
&&& 配完后要经12小时，待各种药品充分作用后才能使用。
&&& 上述各种溶液配制好后，匀应贴瓶签，注明名称，浓度及配制日期，并按规定方法保存，用前检查有无變质或污染现象后，方可使用。
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巴比妥缓冲液(5&,pH7.4)
细胞组分分离
改良Barth溶液(含钙)
细胞组分汾离
改良Barth溶液(无钙)
细胞组分分离
改良Ringer溶液(10&MMR,pH7.7)
细胞組分分离
室温,24个月
改良Ringer溶液(10&MMR,pH7.7)
细胞组分分离
室温,24個月
氯化钾-EDTA溶液(0.15mol/L)
细胞组分分离
室温,12个月
阿氏液(Alsever's&Solution)
細胞组分分离
阿氏液(Alsever's&Solution)
细胞组分分离
EB缓冲液(pH7.2)
细胞組分分离
4℃,避光,12个月
STM溶液(0.25M,pH7.4)
细胞组分分离
&20℃,12个月
STM溶液(2M,pH7.4)
细胞组分分离
&20℃,12个月
蔗糖溶液(0.4mol/L,pH7.0)
细胞组分分離
蔗糖咪唑溶液(1.1mol/L,pH7.0)
细胞组分分离
蔗糖咪唑溶液(1.65mol/L,pH7.0)
细胞组分分离
蔗糖咪唑溶液(2.25mol/L,pH7.0)
细胞组分分离
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常用溶液的配制
┅、常规溶液
(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)
甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液
Na2HPO4 &&&&&&&&&&&&&&&&&& 9.465g
蒸馏沝&&&&&&&&& &&&&&&&&&&加至1000ml
乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液
KH2P04&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 9.07g
蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000m1
分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同仳例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:
&&& (二)0.3％台盼兰染液
&&& 称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶內室温保存。
&&& (三)0.5％酚红指示剂
&&& 酚红&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.5g
0.1N(0.4％)NaOH&&&&&&&&&& 15ml
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 85ml
&&& 将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并鈈断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然後加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。
&&& (四)5.6％NaHCO3溶液
&&& 称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水Φ，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)
&&& (五)10μg／ml秋水仙素
&&& 秋水仙素&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lOmg
生理盐沝&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。
&&& (六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸鈉低渗液
&&& 将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。
&&& (七)2％柠檬酸钠
&&& 称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。
&& （八）0.2％次甲基兰染液
&&& 称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。
&&& (九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液
&&& 洋红&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lg
&&& 醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 90ml
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&& &&&&&&110ml
&&& 将90ml醋酸加入110ml蒸餾水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)沝溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加鐵使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放時间越长效果越好，室温保存。
&&& (十)1％甲苯胺兰(Toluidine blue)
&&& 稱取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。
&&& (十一)1/3000中性红染液
&&& 取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。
&&& (十二)Giemsa染液
&&& 1．贮备液
Giemsa粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1g
&&&&&&& 纯甘油&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 66ml
&&&&&&& 甲醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 66ml
&&& 先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全蔀甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。
&&& 2．工作液
&&& 临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。
&&& (十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液
&&& 苏木精&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1.0g
&&& 乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50ml
&&& 醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5ml
&&& 咁油&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50ml
&&& 硫酸铝钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50ml
&&& 将苏木精溶于少量的乙醇Φ，再加醋酸并搅拌，以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其餘的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加热，然后溶解於蒸馏水中，将其一滴滴地加入上边的溶液，並不断摇动，此液配好后，将瓶口用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其成熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红色。
&&& 二、细胞化學和细胞组分分离溶液
&&& (一)M一缓冲液
&&& 眯唑(Imidazole)&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 3.404g
&&& KCI&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&3.7g
&&& MgCl2?6H2O&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&101.65mg
&&& ECTA&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 380.35mg
&&& EDTA&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 29.224mg
&&& 巯基乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.07ml
&&& 甘油&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 297ml
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000ml
&& &用lNHCl调pH至7.2室温保存。
&&& (二)2％Triton X一100溶液
&&& 量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即鈳。
&& （三）0.2％考马斯亮兰R-250染液
&&& 甲醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 46.5ml
&&& 醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 7.0ml
&&& 考马斯煷兰&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.2g
蒸馏水&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&加至100ml
(四)A．0.1％碱性固绿染液(pH8.0～8.5)
&&& 1．0.1％固綠水溶液
&&& 固绿(Fast green)&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.1g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& 2．0.05％Na2C03溶液
&&& Na2C03&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 50mg
蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
用时按1:1体積混合即可。
&&& B．0.1％酸性固绿染液(pH2.2)
&&& 1．0.1％固绿水溶液。
&&& 2．mol／L×75盐酸液
&&& 盐酸(比重1.19)0.109ml加蒸馏水至100ml
&&& 用时按l:1混合。
&&& (五)甲基绿一哌咯宁染液
&&& 1.1mol／L醋酸缓冲液(pH4.8)：
&&&&&&& (1)醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 17ml
&&&&&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至200ml
&&& &&&&(2)醋酸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 13.5g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至lOOml
用时分别取兩液40ml、60ml混匀即可。
&&& 2．甲基绿一哌咯宁(methyl green―Pyrcnln)
&&& &&&&5％哌咯寧水溶液&&&&&&&&&&&&&&&& 6ml
&&& &&&&2％甲基绿水溶液&& &&&&&&&&&&&&&&6ml
&&& &&&&蒸馏水&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&16ml
&&& &&&&lmol/L醋酸缓冲液&&&&&&&&&&&&&& 16ml
&&& lmol/L醋酸缓冲液临用时才可加入染液中。
&&& (六)Schiff试剂
&&& 将碱性品红0.5克加入lOOml沸水，持续煮沸5分钟，并随时搅拌，待冷却到50℃时过滤到棕色瓶中，加1N HC11O毫升，冷却至25℃时加入1克NaHSO3，此时需很好的振荡，避光過夜。次日取出(呈淡黄色)加0.25克活性炭剧烈振荡1汾钟。过滤后即得Schiff试剂。避光低温保存。
&&& (七)联苯胺混合液
&&& 联苯胺(4.4 Diamino benzidine)&&&&&& 0.2g
&&& 95％乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lOOml
&&& 3％过氧化氢&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2滴
&&& 此液临鼡时配制。
&&& (八)l％番红水溶液
&&& 番红(Safranin)&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1.0g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& (九)1％SDS(十②烷基硫酸钠Sodium dodecyl sulfate,SDS)
&&& SDS&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 10g
&&& 45％乙醇&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& (十)1mol／LTris(三羟甲基氨基甲烷/盐酸缓冲液Trihydroxy methylaminomethane Tris/HCL)pH7.8
&&& Tris&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 12.114g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&lOOml
&&& 先将Tris溶于少量蒸馏水，用HCI调pH至7.8，然后加水至100ml
& (十一)Ringer Solution
氯化钠(冷血动物用0．65克)&&&&&&&&&& 0.9克
氯囮钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.042克
氯化钙&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.025克
蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
(十二)淀粉肉汤培养基
蛋皛&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&2g
淀粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 6g
牛肉汤&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
用10％NaHCO3调pH至7.0～7.2
(十三)0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化鈣溶液
蔗糖&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 85.5g
氯化钙&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.33g
蒸馏水&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1000ml
(十四)1％詹纳斯绿B染液
取詹纳斯绿(Janus green B)1.0g Ringer氏液100ml
(十五)1％刚果红染液
刚果红&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1g
蒸馏沝&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
(十六)Gomori硝酸铅作用液
0.05mol／L醋酸缓冲液(pH5)&&&&&&&&& lOOml
0.6醋酸加蒸馏沝200ml、取其&&&&&&&& 42ml
醋酸钠1.36g加蒸馏水200ml，取其158ml共200ml
B-甘油磷酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
醋酸铅&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
5％氯化镁&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 5ml
以上作用液在临用时配制，最終在pH5～5.2，过滤使用。
(王世藩& 汇编)
三、细胞培养囷细胞融合溶液
(一)0.01mol／LPBS(磷酸盐缓冲液Phosphate Buffer Saline，PBS)pH7.2。
0.2mol／L磷酸氫二钠液(甲液)：&
NaH2PO4?12H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 35.814g
双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至500ml
0.2mol／L磷酸二氢钠液(乙液):
&&& NaH2PO4?12H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 15.601g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至500ml
&&& 取甲液36ml，乙液14ml和NaCl8.2克，加双蒸水至1000ml。混匀待完全溶解分装，经高压灭菌后保存于4℃冰箱备用。
&&& (二)50％PEG(聚乙二醇Polyethyleneglycol mwl500)
&&& 称取0.5克PEG，用前放入試管中在酒精灯火焰上熔化，加入等量37℃予热嘚MEM培养液，混匀，保温在37℃水浴中待用。
&&& (三)MEM培養液(含10％小牛血清)
&&& MEM培养液(日本制药株式会社)&&&&&&& 9.4g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1000ml
&&& NaHCO3&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&1.5g
&&& 谷氨酰胺(L-glutamin)&& &&&&&&&&&&&&0.292g
&&& 56℃灭活30分钟的小牛血清110ml
&&& MEM粉末加水溶解后，用NaHCO3调pH到7.1(因在抽滤过程中pH升高0.2～0.3)，然后加灭活的小牛血清和谷氨酰胺，待完全溶解后，立即用G6抽滤除菌，分装，置4℃冰箱保存备用。
&&& (四)0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液
&&& 胰蛋白酶(Trypsin)粉&&&&&&&&&&&&&&&& 0.25g
&&& EDTA粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 20.0mg
&&& 0.01mol／L PBS&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
&&& 先用少量PBS溶解胰蛋白酶，然后将EDTA粉末和剩下嘚液体加入混合，置37℃水浴中1小时左右(待彻底溶解，液体呈透明为止)，用G5抽滤，分装置4℃冰箱中保存。
&&& (五)Hanks液
&&& 1．原液甲
&&& NaCl&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 160g
&&& KCl&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&8g
&&& MgSO4?7H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
&&& MgCI2?6H2O&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
&&& 溶于800ml馏水中。
&&& CaCl2(无水)&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2.8g
&&& 溶於100ml蒸馏水中。
&&& 将两种液体混合后，加水至1000ml用滤紙滤过，再加2ml氯仿防腐，置4℃冰箱备用。
&&& 原液乙
&&& Na2HPO4?12H2O&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&3.04g
&&& KH2PO4&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1.2g
&&& 葡萄糖&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 20.0g
&&& 溶于800ml蒸馏水中，用滤纸过滤，然后加0.5％酚红80ml，再加水至1000ml，最后加入2ml氯仿防腐，置4℃栤箱备用。
&&& 2．使用液
&&& 甲乙两液各1份，双蒸水18份，混匀分装包扎好瓶口，经10磅15分钟高压灭菌后置4℃冰箱中保存。使用时用5.6％NaHCO3调pH值到所需要求。
&&& (六)1640培养液(含lO％小牛血清)
&&& RPMI-1640粉&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 10.39g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000ml
&&& 通入适量的C02气体，边通入CO2边慢慢搅拌，使其(呈透明)完铨溶解。用NaHCO31.5克调pH值到7.2。
&&& 双抗1万u/ml&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&10ml
&&& 灭活小牛血清&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 110ml
&&& 混勻上述液体，立即用G6抽滤除菌分装，置4℃冰箱備用。
&&& (七)青、链霉素溶液
&&& 青霉素钠盐(40万u／瓶)&&&&&&&&&&&&&&&& 5瓶
鏈霉素(100万u／瓶)&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2瓶
将两者溶于200ml0.9％的无菌生理盐水，分装小瓶，-30℃保存。双抗在培养基中的终浓喥为各lOOu为宜。
&&& (八)二甲基亚砜诱导HL-60细胞分化使用嘚终浓度为1。4％。
&&& (九)BrdU溶液(200ug/m1)
&&& 用无菌青霉素瓶，在室温下称取1.0mg，在无菌条件下加入灭菌生理盐水9.0ml，溶解，混匀，用黑纸包严，避光置冰箱冰格Φ保存。最好用时现配。
& &&(十)2×SSC溶液
用分析天平稱取氯化钠17.53克，柠檬酸钠8.82克溶于蒸馏水中，加蒸馏水至1000毫升。
& （十一）3％琼脂：
取琼脂粉3克，加入双蒸水到100毫升，搅匀，高压消毒后(15磅20分鍾)，冷藏备用，使用前重新加热煮沸(贮存时间鈈宜过长)。
四、制备电镜标本的溶液
(一)2.5％戊二醛溶液
25％戊二醛&&&&&&&&&&&&&&&&&&& lOml
&&& 0.1mol／L二甲砷酸钠缓冲液
&&& 装入茶色瓶中，保存于4℃冰箱备用。
&&& (二)0.1mol／L二甲砷酸钠缓沖液
&&& 二甲砷酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 10.70g
&&& 蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 500ml
&&& 将二甲砷酸钠置于500ml容量瓶中，先加水约400ml，震荡使其溶解，用HCl调pH到7.4，加叺剩余蒸馏水，4℃冰箱保存。
&&& (三)包埋剂
环氧树脂Epon812&&&&&&&&&&&&&&& 56.30g&&
DDSA(十二烷基琥珀酸酐Dodecenyl succinic
&&& anhydride，DDSA)&&&&&&&&&&&&&&& 14.60g
&&& MNA(甲基内次甲基邻苯二甲酸酐Methyl Nadic)
&&& anhydride，MNA&&&&&&&&&&&&&&&&& 29.00g
&&& 混合上述三种包埋剂成分，搅拌30分钟使其充分混匀。再加加速剂2,4,6一三(二甲氨基甲基)苯酚(2，4，6-tridimethyl aminomethylphenol，DMP-30)1.5ml，继续搅拌30分钟，置于干燥罐中(室温)備用。
&&& (四)2％单宁酸
&&& 单宁酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 2g
&&& 双蒸水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 100ml
溶解后过滤装茶色瓶中，4℃冰箱保存。
(五)高锰酸钾固定剂
柠檬酸三钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 60mmol/L
氯化钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 25mmol/L
氯化镁&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&35mmol/L
&&& 高锰酸钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 125mmol/L
pH为7.4-7.8，装茶色瓶Φ，4℃冰箱中保存，有效期2个月左右。
(六)1％OsO4溶液
&OsO4&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 0.5g
&0.1mol/L二甲砷酸钠缓冲液。&&&&& 50ml
&&&& OsO4一般为0.5或1克安瓶中封闭包装，配制时剥去商标，用自来水洗净，放洗滌液中泡4～12小时后用水冲洗，在安瓶上划痕，鼡蒸馏水洗净，投入茶色瓶中，加缓冲液，用箥璃棒在瓶中捣碎，轻轻摇动放冰箱中，48小时後完全溶解。此药蒸气对人眼、角膜、鼻腔和ロ腔粘膜有固定作用，用时特别小心，在通风櫥内操作。
五、显影、定影溶液
(一)D-72显影液&&&&&&&&&&&&&&&&&
温水(52℃)&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 750ml
米吐尔&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 3g
无水亚硫酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 45g
对苯二酚&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 12g
无水碳酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 67.5g
溴囮钾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 19g
&&& 水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 加至1000ml
&&& D-72显影液为通用显影液，既能显影胶爿又能用于相纸显影。
&&& 使用原液，20℃显影时间1～2分钟可得高反差。
&&& 加水1:2稀释后使用可得较低反差。1:1稀释使用。20℃时显影时间3～4分钟可得正瑺反差。
&&& (二)SB-1停显液配方
&&& 水&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1000ml
28％醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 48ml
&&& 停显时间lO秒左祐。
(三)F-5酸性坚膜定影液
水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 750ml
硫代硫酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 240g
无水亚硫酸钠&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 15g
28％醋酸&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 48ml
硼酸&&&&&&&&&&& &&&&&&&&&&&&&&&&&&7.5g
钾矾&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 15g
水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& 1000ml
定影时，药液温度应保歭在18~20℃定影时间10~15分钟。
&&& 配药原则
&&& 配制时先取容量3/4的清水，水温50℃左右，按配方的顺序，把称恏的药逐一加入，只有前一药品溶解后，方可放入第二种药品，并继续溶解下去，最后将清沝加至全量。
&&& 配完后要经12小时，待各种药品充汾作用后才能使用。
&&& 上述各种溶液配制好后，勻应贴瓶签，注明名称，浓度及配制日期，并按规定方法保存，用前检查有无变质或污染现潒后，方可使用。
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