实验11 氨基酸的薄层层析分离和鉴定_百度文库
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实验11 氨基酸的薄层层析分离和鉴定
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甘氨酸的鉴别
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进口/国产甘氨酸
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至诚Elisa试剂盒,科研试剂专供网
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甘氨酸公司致力于为广大科研用户提供最佳培养基系列产品应用方案，努力追踪世界最前沿的生物科技。整合优质产品体系,只为让您满意,欢迎来电咨询!
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D-甘露糖对照品
D-甘露糖对照品本公司提供标准品、对照品，纯度&98%，都是经过HPLC检测合格，欢迎来电咨询。同时本公司免费提供elsia试剂盒代测,专业技术操作，数据真实可靠，免费观摩实验。产品价格优惠，品质保证，库存现货，无效果，免费退款。公司严把质量关，确保每一个试剂盒产品质量合格，让您买的省心，用得放心，欢迎来电咨询订购： 021- 。详细信息如下
规格：50mg 100mg
库存：1000
发票：增票/普票
储存：常温避光保存
检测方法：高效液相色谱法
用途：含量测定，鉴别，检验。
保质期：2年。
D-甘露糖对照品固体粉末试剂可用洁净的牛角勺取用。要取一定量的固体时，可把固体放在纸上或表面皿上在台秤上称量。要准确称量时，则用称量瓶在天平上进行称量。液体试剂常用量筒量取，量筒的容量为：5mL、10mL、50mL、500mL等数种，使用时要把量取的液体注入量筒中，使视线与量筒内液体凹面的最低处保持水平，然后读出量筒上的刻度，即得液体的体积。
如需少量液体试剂则可用滴管取用，取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。
为了达到准确的实验结果，取用试剂时应遵守以下规则，以保证试剂不受污染和不变质：
(1)试剂不能与手接触。
(2)要用洁净的药勺，量筒或滴管取用试剂，绝对不准用同一种工具同时连续取用多种试剂。取完一种试剂后，应将工具洗净（药勺要擦干）后，方可取用另一种试剂。
(3)试剂取用后一定要将瓶塞盖紧，不可放错瓶盖和滴管，绝不允许张冠李戴，用完后将瓶放回原处。
(4)已取出的试剂不能再放回原试剂瓶内。
另外取用试剂时应本着节约精神，尽可能少用，这样既便于操作和仔细观察现象，又能得到较好的实验结果
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游离甲状腺素 标准品 免疫测定用 380fmol/支
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硫酸鱼精蛋白 标准品 效价测定 20mg
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人绝经尿促性腺素 (HMG) 标准品 效价测定 FSH 520 IU LH 362 IU
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缩宫素(合成) 标准品 效价测定 16.6 IU
促甲状腺激素 标准品 免疫测定用 600&IU/支
促黄体生成激素 标准品 免疫测定用 530mIU/支
泌乳素 标准品 免疫测定用 9mIU/支
促卵泡生成激素 标准品 免疫测定用 450mIU/支
生长激素 标准品 免疫测定用 1.22mIU/0.61ug/支
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用高效毛细管电泳法鉴别冬虫夏草及其伪品21
?230?；ISSNPharmCare&a；；；?论著?；用高效毛细管电泳法鉴别冬虫夏草及其伪品；古今,刘萍,冯建涌(解放军总医院药材处,北京10；[摘要]目的:应用高效毛细管电泳法鉴别冬虫夏草及；征性电泳图谱,经电泳图谱解析可鉴别两者；[关键词]冬虫夏草;伪品;高效毛细管电泳
?230?ISSN　PharmCare&Res　药学服务与研究　)　Phn/Fax862212?论　著?用高效毛细管电泳法鉴别冬虫夏草及其伪品古　今,刘　萍,冯建涌(解放军总医院药材处,北京100853)[摘　要]　目的:应用高效毛细管电泳法鉴别冬虫夏草及其伪品。方法:石英毛细管70μm×60cm,电解缓冲液30mmol/L硼酸盐溶液(pH8.5)、电压20kV,检测波长200nm。结果:在该分离条件下,15min可获得冬虫夏草及其伪品的特征性电泳图谱,经电泳图谱解析可鉴别两者。结论:该法简便、快速、准确,可作为中药冬虫夏草及其伪品的有效鉴别方法。[关键词]　冬虫夏草;伪品;高效毛细管电泳;鉴别[中图分类号]　R282.5　　　[文献标识码]　A　　　[文章编号]　05)IdentificationofCordycepsandcounterfeitsbyhigh2performancecapillaryelectrophoresismethodGUJin,LIUPing,FENGJian2Yong(DepartmentofPharmacy,GeneralHospitalofPLA,Beijing100853,China)[ABSTRACT]　Objective:TodistinguishCordycepsandseveralkindsofcounterfeits.Methods:Thehighperformancecapil2laryelectrophoresis(HPCE)with70μm×60cminquartzcapillarycolumnwasused.Theelectricalbuffersliquidwas30mmol/Lboratesolution(pH8.5).Detectingwavelengthwas200nmandvoltagewas20kV.Results:ThespecialphotogramsofCordycepsandtheconfusablespecimenswereobtainedbyHPCEin15minunderthecondition.Withtheaidoftheseillus2trativeplates,recognizationofCordycepsanditscounterfeitsbecameeasy.Conclusion:Themethodisconvenient,quick,accu2rateandeffectivefordistinguishingCordycepsanditscounterfeits.[KEYWORDS]　Chighperformancecapidistinguish[PharmCare&Res,):2302233]　　中药冬虫夏草(Cordyceps)始载于《本草从新》,为名贵中药材,具有补虚损,益精气,止咳化痰之功效,需求量大。据载“:冬在土中,身活如老蚕,有毛能动,至夏则毛出土上,连身俱化为草。”由于它生长于四川、青海等高海拔地区,暂且不能人工栽培生产,采挖时间较短,天,采收季节一过,全球变暖,雪线上移,,少,资源缺乏,出口量逐年增加,,价格连年上扬,因此市场掺伪、假冒现象日益严重。目前鉴别冬虫夏草及其伪品多应用外观、显微、理化等方法,由于亚香棒虫草虫体与地蚕的根均似冬虫夏草,长为3～5cm,直径相似,特别是亚香棒虫草也有子座,断面颜色为类白色,故应用经验不能很好地进行鉴别。文献中偶见应用薄层层析和乙酸纤维素薄膜电泳法进行鉴别的方法,费时费力,不易掌握,鉴别效果不理想。作者采用高效毛细管电泳法(HPCE)对冬虫夏草、亚香棒虫草、地蚕进行鉴别,效果良好。1　材料和方法1.1　仪器和试剂　HPCE仪(德国生产,BECK2MANCOULTERP/ACEMDQCapillaryElectro2phoresisSystem,配有紫外扫描监测器);石英毛细淀器(德国生产);Eppendorf5415D型离心机。试剂均为分析纯。1.2　试药　:,总医院药萍任药师鉴菌科Cl)[Cordycepssinen2sisSacc.]寄生在鳞翅目蝙蝠蛾科昆虫幼。地蚕(Stachysgeobombycis):经鉴定为唇形科植物地蚕(StachysgeobombycisC.Y.Wu)的干燥地下块茎;亚香棒虫草(CordycepshawkesiiGray):经鉴定为麦角菌科植物霍克斯虫草菌(cordycepshawkesiiGray)寄生在栎蚕蛾[phalerodontaalbibasis(chiong)]幼虫上的子座及虫体的复合物。地蚕和亚香棒虫草均由北京卫生学校鉴定教研室李京生老师提供。1.3　电泳条件　电解缓冲液为30mmol/L硼酸盐溶液(pH8.5),电压为20kV,温度20℃,紫外检测波长为200nm,重力进样,时间5s。1.4　三种提取液的配制　(1)Tris2甘氨酸提取液　Tris0.6g、甘氨酸2.88g,加蒸馏水溶解至1000mL。(2)碱性蛋白提取液　Tris2HCl溶液011mol/L、0.1%抗坏血酸、巯基乙醇10mmol/L,[作者简介]　古　今(19742),女(汉族),主管药师.E2mail:dxlss@管(70μm×60cm,鑫昌医疗器械厂);800型离心沉ISSN　PharmCare&Res　药学服务与研究　)　Phn/Fax862212?231?pH=8.0。(3)酸性蛋白提取液　枸橼酸80mmol/L、Na2HPO432mmol/L、抗坏血酸5mmol/L、巯基乙醇10mmol/L,pH=2.8。1.5　样品溶液的制备[1]　取冬虫夏草3份各约015g,分别加入Tris2甘氨酸提取液、碱性蛋白提取位)(见表1,图1A);亚香棒虫草的特征峰为峰4和峰6(见表1,图1B),其中峰4的峰面积比为最大,峰高比最高;峰1和峰3为冬虫夏草和地蚕均有的特征峰(见表1,图1A、1C);峰2为冬虫夏草和亚香棒虫草共有的特征峰。表1　冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕Tris2甘氨酸提取液的特征峰迁移时间和峰面积比Table1　Thetransporttimeandpercentagesofcharacte2risticpeaksareaofCordyceps,CordycepshawkesiiandStachysgeobombycisextractedwithTris2glycinesolution冬虫夏草峰编号(t/min)12343.7液、酸性蛋白提取液各5mL,在冰浴中研磨成匀浆状,转移至离心管内,以5000r/min离心20min,取上清药液置eppendorf管中,再以1×104r/min离心10min,备用。地蚕、亚香棒虫草溶液处理方法同冬虫夏草。1.6　方法　HPCE仪开机后先用0.1mol/LNaOH冲洗毛细管2min,再用去离子水冲洗5min,然后用缓冲液冲洗至基线平稳后开始进样,每亚香棒虫草(t/min)地蚕(t/min)3.867时间峰面积比(%)26.时间峰面积比(%)时间峰面积比(%)76.54两次进样之间设定缓冲液冲洗2min。取上述方法配制的样品溶液的上清液进样。2　结果和讨论2.1　三种样品Tris2甘氨酸提取液的特征峰与峰4.06330.524.20413.134.3627.40815.4033.9056值　在Tris2甘氨酸提取液中,冬虫夏草所特有的峰为峰5,峰面积比为第3位,峰高比为11.78%(第310.29610.15图1　冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕的Tris2甘氨酸提取液的HPCE谱图Fig1　HPCEelectrophotogramsofCordyceps,CordycepshawkesiiandStachysgeobombycisextractedwithTris2glycinesolutionA:冬虫夏草;B:亚香棒虫草;C:地蚕2.2　三种样品碱性蛋白提取液的特征峰与峰表2　冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕碱性蛋白提取液的特征峰迁移时间和峰面积比Table2　Thetransporttimeandpercentagesofcharacte2risticpeaksareaofCordyceps,CordycepshawkesiiandStachysgeobombycisextractedwithalkalinicsolution冬虫夏草峰编号12345612.15826.859.24227.2211.39214.63(t/min)3.值　在碱性蛋白提取液中峰1和峰4是冬虫夏草所特有的峰(见表2,图2A);峰2为3种药材共有的,但以地蚕的峰强度最大(见表2,图2C);峰3为地蚕和亚香棒虫草的特征峰(见表2,图2B、2C);峰5为地蚕的特征峰,峰面积比为第2大,可有效鉴别地蚕;峰6为亚香棒虫草的特征峰。2.3　三种样品酸性蛋白提取液的特征峰与峰值　在酸性蛋白提取液中峰1为冬虫夏草和地蚕的特征峰(见表3,图3A、3C);峰2为地蚕和亚香棒虫草的特征峰(见表3,图3B、3C);峰3和峰5为冬虫夏草所特有的(见表3,图3A),其中峰3的峰面积亚香棒虫草(t/min)3.地蚕(t/min)3.时间峰面积比(%)18.4619.55时间峰面积比(%)时间峰面积比(%)18.6619.3569.9010.02?232?ISSN　PharmCare&Res　药学服务与研究　)　Phn/Fax862212图2　冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕的碱性蛋白提取液的HPCE谱图Fig2　HPCEelectrophotogramsofCordyceps,CordycepshawkesiiandStachysgeobombycisextractedwithalkalinicproteinsolutionA:冬虫夏草;B:亚香棒虫草;C:地蚕表3　冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕酸性蛋白提取液的特征峰迁移时间和峰面积比Table3　Thetransporttimeandpercentagesofcharacte2risticpeaksareaofCordyceps,CordycepshawkesiiandStachysgeobombycisextractedwithacidicsolution冬虫夏草峰编号1234569.87539.9311.95814.225.70020.909.22110.862,迁移时间为4.037亚香棒虫草的峰4,迁移时间为4.362min和地蚕的峰1,迁移时间为3.867min。3　讨　论HPCE是先进的分离鉴定技术之一,具有柱效亚香棒虫草时间峰面积比(t/min)4.396(%)52.34地蚕时间(t/min)4.时间峰面积比(t/min)4.258(%)33.12峰面积比(%)67.217.53高、分析时间短、进样量少等特点,可鉴别药材粉末、提取物和成药。所以用HPCE鉴别冬虫夏草及其伪品是一种可行的方法。在HPCE分析过程中,,,,最完全,。如有对照品的药材品种应以对照品的出峰时间为参照;而中草药多没有对照品,根据考察条件设定以15min为度。在本次实验中,样品用量为0.5g,实际上样品量可以再减少,因为它的进样量为1×1029L级,检测限为10-15～10-12mmol/L。作者选用了3种比占第3位,峰高比最大,可有效鉴别冬虫夏草;峰4和峰6为亚香棒虫草的特征峰。　　综合3,夏草与亚香棒虫草、。结果显示,用Tris2草、地蚕和亚香棒虫草优于其他两种提取液。在Tris2甘氨酸蛋白提取液中,它们的最高峰亦为最大峰面积,分别位于不同的迁移时间,即冬虫夏草的峰图3　冬虫夏草、亚香棒虫草和地蚕酸性蛋白提取液的HPCE谱图Fig3　HPCEelectrophotogramsofCordyceps,CordycepshawkesiiandStachysgeobombycisextractedwithacidicsolutionA:冬虫夏草;B:亚香棒虫草;C:地蚕ISSN　PharmCare&Res　药学服务与研究　)　Phn/Fax862212?233?不同的蛋白提取液,这是由于考虑到不同的蛋白质有不同的等电点和溶解性,仅用一种提取液很难将所有的蛋白质提取完全。例如利用碱性缓冲液可以消除分子中带正电的官能团与毛细管表面解离的带负电的硅羟基的吸附作用,提高分离效率。通过此次实验达到了寻找一种有效的提取液用以鉴别冬虫夏草及其伪品的目的。蛋白质中含有很多活性基团,本身也易在受热条件下变性。在提取液中加入抗坏血酸和巯基乙醇是为了防止蛋白质中的活性基团被氧化,冰浴研磨是为了防止蛋白质受热变性。检索中国生物期刊网自1989年至今的文献,未检索到应用HPCE法对冬虫夏草及其伪品进行鉴别的文献。作者认为,该方法具有分辨能力强、速度快、样品量少,只需药材粉末等特点,能够很好地用于冬虫夏草的鉴别。[参考文献][1]　胡　平,罗国安,王如骥,等.中药菟丝子的高效毛细管电泳法鉴别[J].药学学报,):549.[收稿日期]　　　　[本文编辑]　张　莉　　姚春芳[修回日期]　《中国药学文摘》刊物、中国药学文献数据库网络版、光盘2006年征订启事　　中国药学文献数据网络系统即《中国药学文摘》刊物、数据库网络版、数据库光盘是国家科技部重点扶植、国家食品药品监督管理局主管的我国药学文献大型检索和查询系统。该系统于1981年创建,主要收载国内外公开发行的700余种医药学及相关学科期刊中的药学文献,以文摘、简介、题录等形式进行报道。该系统内容涵盖药学各个领域,共设十二个栏目:药学理论与发展动态、生药学和中药材、药物化学、药物生产技术、药剂学和制剂技术、药理学和毒理学、生物药剂学、药物分析、临床应用与药物评价、药品管理、制药设备和工厂设计及包装、药品和新药介绍等。该系统内容丰富,查询方便,可为医药生产、科研、教学、流通、医院药房、药店、药检、情报和管理机构服务。读者可分别从网络、光盘、文本三种途径查到所需要的文献。《中国药学文摘》为月刊,16开,260页左右,约65万字,全年476元。国家食品药品监督管理局信息中心为指导科研,服务医药,最新推出下列汇编:(1)《动植物药有效成分提取分离和药理(第一集),该汇编详细介绍了各类中药有效成分的提取分离和药理活性筛选的新技术、活性筛选汇编》新方法及最新进展和(第一集),应用。本汇编为大16开,近160万字,700多页。(2)《中药资源调查开发利用资料汇编》化学、开发利用、资源的保护更新及新资源的寻找为宗旨,(第二集:,为大16开,近160万字,700多页。(3)《药物新剂型产品、新辅料及新技术汇编》药物控制释放系统、透皮给药系统、药物靶向系统、术、固体分散技术、经皮释药技术、环糊精包合技术、。汇编内容丰富,实用性强,,、教学、信息人员在实际工作中参考和使(第二集),较全面地搜集并用。本汇编为大16开,300,,(4,并设附录:国内批准的生物生化药品。、操作技术、制造方法,到每一种药物的化学结构或组分、性质、原料、技术路线、工艺过程和必要的注释,均做了详细的论述,可供生物生化制药生产、科研、情报、教学、文献收藏等单位的工作者参考和(4)两部汇编的第二集不包括第一集的内容,而是新形势下国内外的新使用。本汇编为大16开,近170万字,700多页。(3)、工艺、新技术、新动向。两部汇编第一集于2003年出版,已剩数量不多,需要者请速与刘晴联系。读者可直接与本刊编辑部联系。汇入行开户名称:国家食品药品监督管理局信息中心;开户行:建设银行北京展览路支行,账号:0002517;通讯地址:北京西城区北礼士路甲38号;邮编:100810;电话:,,3;传真:;联系人:刘晴,魏金明。欢迎订阅2006年《安徽医药》杂志　　《安徽医药》是由安徽省食品药品监督管理局主管、安徽省药学会主办的综合性学术期刊。主要栏目有综述与讲座、药学研究、药物与临床、药物分析、临床医学、医院药学、小专论、医药工业、临床护理、药品监督、食品质量与安全、药物不良反应、药品检验等。本刊内容丰富,发表周期短,编辑规范,排印精致。读者对象为全国各地医院、药监系统、药品生产经营单位、医药类大专院校、科研机构和有关单位。《安徽医药》是中国核心期刊(遴选)数据库期刊,中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊,并被中国期刊网、中国学术期刊光盘版、万方数据库、中文科技期刊数据库、中文生物医学期刊文献数据库全文收录。本刊为月刊,大16开,80页,CN3421229/R,ISSN。国内外公开发行,邮发代号262175,每期定价8元,全年96元。欢迎在全国各地邮局订阅,也可直接到本编辑部订阅。地址:安徽省合肥市屯溪路253号,安徽省食品药品监督管理局5楼《安徽医药》编辑部;邮编:230022;电话:;传真:;E2mail:ahyy@包含各类专业文献、各类资格考试、应用写作文书、行业资料、生活休闲娱乐、高等教育、中学教育、用高效毛细管电泳法鉴别冬虫夏草及其伪品21等内容。
　冬虫夏草鉴别及保养_农学_农林牧渔_专业资料。冬虫...传统的包装方 法是以 6～8 条,用小红绳扎成一...川草:虫体细,草体长。 伪品主要有地蚕,其状如螺... 　冬虫夏草及各种伪品的鉴别作者:王怀兴 平原县中医院 主管药师 冬虫夏草是中国...三、常见的参假作伪方法: 1、用泥掺和铁粉或磁石粉涂抹在虫草的子座和虫体... 　法相比优势明显,近 年来被越来越多的人认可和使用...孙毓庆,孙国祥等[10]对冬虫夏草、银杏叶等药材、...张义玲等[13]采用高效毛细管电泳技术鉴定桅子及伪品... 　简述:冬虫夏草鉴定及检测项目_临床医学_医药卫生_专业...法( TLCS) 、 TLCS-HPLC 联用法、高效毛细管电泳...4 品口感虫草入口脆如青豆,愈嚼愈香,香味类似香菇... 　四、 分枝虫草。 五、用玉米粉、面粉、石膏等加工压模伪充虫草。 真伪鉴别伪...简易鉴别方法购买冬虫夏草这种昂贵的滋补品,大家首先要考虑的就是如何才能买到... 　毛细管电泳指 纹图谱的研究方法与评价方法及其在中药...孙毓庆与孙国祥等对冬虫夏草、银杏叶、地黄、牡丹皮...因而其人工培育品、代用品及伪品充斥市场,鉴定冬虫... 　冬虫夏草及其混伪品的鉴别 3页 2财富值 冬虫夏草的鉴别 1页 2财富值 鉴别...精心造假:不法分子用有机复合可塑剂、赋形剂、黏合剂、色素、填充 剂等加工制造... 　. . 2 . 煮水当茶喝,而不是用开水泡着喝,此法简单有效 。通常,冬虫夏草...(以 上是伪品)新疆虫草的伪品较好识别。 . . . 地蚕:“虫体”呈梭形。... 　冬虫夏草及其混伪品的鉴别 3页 2财富值 冬虫夏草的鉴别 1页 2财富值 鉴别...鉴别虫草也有多种方法,本文中将会一一介绍。 关键词:冬虫夏草,鉴别,药用价值,...