我想做业务员，可我不知道从哪方面下手，需要做什么准备，谁能教教我，谢谢！_百度知道
我想做业务员，可我不知道从哪方面下手，需要做什么准备，谁能教教我，谢谢！
我有更好的答案
第一是不齿于做业务的阶段。 　　不知道是什么原因，刚工作的时候我把跑业务看成是很低等的工作，业务员是最没有技术含量工种，这种人腹中无物巧舌如簧，让人不齿。这个时候我以从事技术工作为荣，我认为作业后台写写文案，编编文字是最高尚的工作。那时候我其实也有创收任务，可我不敢跟客户谈，总是表白自己是后台技术人员，钱跟我无关，这种表白带来的后果不言而喻，这是个死要面子活受罪的阶段。现在想起来这个阶段的我很尴尬，我的对手都很老练，他们笑眯眯的看着我掩耳盗铃，我是个蹩脚的演员，有没有看过张艺谋《一个都不能少》魏敏芝的表演唱：“我们的祖国是花园……”就那感觉，像个小丑。　　 　　第二阶段是在领导的带领下做业务的阶段。 　　这个阶段还在给别人打工，总经理确定了业务方向，部门领...
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请问做PAGE电泳MARKER总是跑不开，不知道为什么，请高手指教
请问做PAGE电泳MARKER最上面的两条总是跑不开，今天做了一板SDS胶结果连Marker都看不到条带，不知道为什么，请高手指教，因为这个已经重复做了好多次了，结果还是一样，都不知道该怎么办？谢谢啦。
提供的信息太少，无从判断。
你的胶是自己配的还是pre－casted（买来现成的）？浓度是多少？梯度胶？running buffer？新鲜还是用过多次了？ Marker是什么？最大的有多大？
重复性这么好说明你某个环节出了问题，暂时不要重复了，逐个排除一下（每次改变一个条件）看看。 你的分离胶浓度是多少？跑胶的电压（电流）是多少？跑多长时间？电泳液的配方？是否新配？以上都会影响SDS-PAGE中蛋白的涌动。一般分离胶的浓度小（8% or 10%），电压120V 2h，新配的电泳液，只要marker本身没用质量问题，都能跑出来的。 可能是你的胶浓度太大，分子量大的条带分不开也是可能的。我跑过15％的胶，245kd的分的开。不知你是啥情况，或者发个图 : Originally posted by ssssllllnnnn at
提供的信息太少，无从判断。
你的胶是自己配的还是pre－casted（买来现成的）？浓度是多少？梯度胶？running buffer？新鲜还是用过多次了？ Marker是什么？最大的有多大？
重复性这么好说明你某个环节出了问题，暂 ... 恩，谢谢。我的胶都是自己配的，后来SDS的marker出来了，就是PAGE的还是分不开，12%分离胶，5%浓缩胶，Marker最大是116KDa : Originally posted by 冷月絮清风 at
你的分离胶浓度是多少？跑胶的电压（电流）是多少？跑多长时间？电泳液的配方？是否新配？以上都会影响SDS-PAGE中蛋白的涌动。一般分离胶的浓度小（8% or 10%），电压120V 2h，新配的电泳液，只要marker本身没用质量 ... 谢谢，现在我的SDS的Marker跑出来了,就是PAGE还是分不开，感觉用的都是新的，没什么问题 : Originally posted by pengchenping at
可能是你的胶浓度太大，分子量大的条带分不开也是可能的。我跑过15％的胶，245kd的分的开。不知你是啥情况，或者发个图 谢谢你。我用的是12%的分离胶，116KD的，SDS的分开了，现在就是PAGE的仍然分不开您好：　|　
> 求助帖.本人明天早上5点半去机场赶早班飞机，不知道小区里有没有
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求助帖.本人明天早上5点半去机场赶早班飞机，不知道小区里有没有人能帮忙？
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感激涕零，谢谢楼主的好贴
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没看完~~~~~~ 先顶，好同志
能发这么好的帖子，太谢谢了
非常高兴遇到这么好的帖子 谢谢
不错的贴，太喜欢了，大家都顶啊
khjkjhkj55
家，每周都要去医院透析，一家三口只能靠父亲1000多元
> 求助帖.本人明天早上5点半去机场赶早班飞机，不知道小区里有没有
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电泳为什么是蛋白质小分子跑在最下面
在跑电泳时候，用SDS把蛋白质电荷中和掉之后，蛋白质到底是以什么个顺序跑啊。
按照分子大小，小的在前，大的在后。 中和掉电荷后，凝胶的作用就类似于分子筛，以及你分离胶浓度的不同，分离蛋白大小的能力就不同，在电泳时，蛋白分子量小的跑的要快，离点样孔远，分子量大的则跑得慢，里点样孔近 SDS可以与蛋白质结合，使得蛋白质带上比自己氨基酸残基侧链多得多的电荷，使得每个蛋白质的电荷密度与原本等电点和分子量无关。而且SDS与蛋白质的结合物构型都是短棒型，只是随分子量大小而变长。聚丙烯酰胺凝胶内部有很多大小不一的孔径，小分子的短棒容易通过，大分子的棒受到小孔径的阻挡，只能通过大孔径才能顺利通过，所以最终小分子短棒速度快，大分子长棒速度慢。
需要注意的是，这确实是分子筛效应，但是这个的所有孔径都在凝胶上，凝胶处于夹板之间没有空隙，不存在没有凝胶的空间，长棒不能通过没有孔径的空隙穿过。这和Sephadex凝胶过滤分离蛋白质不一样，Sephadex凝胶是球状，存在外水体积，洗脱液不带电，蛋白质依靠分子量来分离，小分子蛋白质能穿过众多小孔径和大孔径所以速度最慢，大分子蛋白质不能穿过小孔径只能穿过大孔径和无孔径的外水体积所以出来最快。 同样上述观点 说明很到位 蛋白质是带电荷大分子能进行分子凝胶，分子量小的蛋白质能通过凝胶孔径，大分子量的不能通过孔径，且电泳凝胶没有凝胶间隙，所以大分子跑得慢，小分子跑得快 : Originally posted by 冼亮淀粉酶 at
SDS可以与蛋白质结合，使得蛋白质带上比自己氨基酸残基侧链多得多的电荷，使得每个蛋白质的电荷密度与原本等电点和分子量无关。而且SDS与蛋白质的结合物构型都是短棒型，只是随分子量大小而变长。聚丙烯酰胺凝胶内部 ... 你好 想向您请教一下有关蛋白质分子量的问题。我看到有文献说蛋白质中7S的分子量在000Da之间，11S分子量在000Da，从两一篇文献中（蛋白酶水解大豆分离蛋白的分子水平表征）看到凝胶电泳图显示7S的分子量大小大于11S，我有点糊涂了，两者到底哪个分子量大，希望大侠不吝赐教 : Originally posted by jixiaoman12 at
你好 想向您请教一下有关蛋白质分子量的问题。我看到有文献说蛋白质中7S的分子量在000Da之间，11S分子量在000Da，从两一篇文献中（蛋白酶水解大豆分离蛋白的分子水平表征）看到凝胶电泳图显示 ... 7S？我接触到的是KD为单位的多，不了解S，不好意思。