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来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-02-10 02:37 标签： 级数

【摘要】：目的:观察术中血液回收(IBS)红细胞Ca2+超载与磷脂酰丝氨酸(PS)暴露之间的关系和细胞形态以及甘露醇-腺嘌呤-磷酸液(MAP液)体外孵育对IBS红细胞Ca2+超载与PS暴露的抑制作用方法:1.随机選择30例接受椎体手术的IBS患者。收集来自同一患者的IBS红细胞和新鲜动脉血各一份,将30例患者的血液样本分为三部分进行实验(每部分10例)2.第一部汾:将IBS红细胞与同一患者新鲜血浆一同孵育,此为实验组(I组),新鲜RBC为对照组(C组)。孵育前、孵育24、48小时后检测Fluo-3和/或AnnexinV阳性细胞及球形细胞的比例、形態变化3.第二部分:将IBS红细胞(Ⅰ组)和新鲜RBC(C组)分别孵育于不同浓度离子霉素中2小时,流式细胞术测定Annexin V和/或Fluo-3阳性细胞比例。4.第三部分:将来自同一患鍺的IBS红细胞和新鲜血浆混合,一半与生理盐(C-NS组)水孵育,一半与MAP(I-MAP组)液孵育,24小时后检测AnnexinV和/或Fluo-3阳性细胞及球形细胞比例和细胞中腺嘌呤核苷酸水平結果:1.第一部分:Ⅰ组孵育前、孵育24、48小时后Fluo-3、AnnexinV、双阳性及球形细胞比例均明显高于C组(P0.001)。Ⅰ组Fluo-3阳性细胞比例与孵育24小时(r 0.92,P0.01)后的球形细胞比例相关48小时后所有球形细胞都是Fluo-3阳性细胞。2.第二部分:Ⅰ组Fluo-3阳性、双阳性细胞的比例均显著高于C组(P0.001),且比例随着离子霉素剂量的增加而增加Ⅰ组AnnexinV陽性细胞的比例均高于C组(P0.05),但组间比较无差异。3.第三部分:I-MAP组中腺嘌呤核苷酸浓度高于C-NS组(P0.001)I-MAP组Fluo-3阳性、双阳性和球形细胞比例显著低于C-NS组中比例(P0.05)。AnnexinV阳性细胞比例没有显著差异结论:1.IBS可能通过诱导形态学改变或通过在RBC表面暴露PS来损伤RBC。形态学变化可能主要与ATP水平降低继而导致细胞内Ca2+增加有关2.PS暴露可以通过依赖和非依赖性Ca2+内流的机理发生。3.MAP液能为IBS红细胞提供能量,降低细胞内Ca2+浓度和Ca2+依赖性PS暴露,改善细胞形态血浆中可能存在促进MAP液能量底物转运进入RBC的载体,对回收RBC有保护作用。

【学位授予单位】：遵义医学院
【学位授予年份】：2018



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【摘要】目的:研究克拉屈滨对人臍静脉内皮细胞EA.hy926生长及分泌活性的影响,探讨克拉屈滨通过抑制内皮细胞活力发挥抗肿瘤的作用机制方法:采用CCK-8法检测不同浓度(0.4~1μmol/L)克拉屈滨對内皮细胞活力的影响;用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡率;Western blot检测细胞凋亡和周期相关蛋白的表达水平;用ELISA法检测上清液肿瘤坏死因子α(tumor h對细胞活力有明显的抑制作用,其半数抑制浓度约为3.644μmol/L,随药物浓度升高和作用时间的延长而抑制作用增强。克拉屈滨作用48 h后,细胞周期被明显阻滞在S期,0.4μmol/L时S期细胞约43.74%,1μmol/L时S期细胞约77.23%克拉屈滨处理后,各组内皮细胞的凋亡率没有显著差异。克拉屈滨处理后,caspase-3与Bax蛋白水平无明显差异;p21水平隨着药物浓度增加而增高,而p53水平随着药物浓度增加而降低(P<0.05)克拉屈滨处理后,上清液中TGF-β1和TNF-α水平升高,VEGF含量减少(P<0.05)。克拉屈滨处理后,上清液中NO含量减少(P<0.05)结论:克拉屈滨能明显抑制内皮细胞EA.hy926的活力,其主要机制与细胞周期阻滞有关。同时克拉屈滨能促进内皮细胞EA.hy926分泌TNF-α和TGF-β1,抑制其分泌VEGF和NO

【刊名】中国病理生理杂志

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