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【整理】如何使用Photoshop给细胞照片添加比例尺
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背景：本人在给文章修图的时候惊闻要给细胞照片添加比例尺，很急很关键。于是到处打听方法，比如：“拍的时候就可以添加呀”（废话！早这样我还急个毛线呀）；再比如：照着文献里同样放大倍数的图片比对一下再添加嘛（麻烦！还不精确）。最后只好求助于万能的百（gu）度（ge），找到了一个既精确又方便的方法，在这里分享给大家。方法：首先你得准备搞清楚一下几个参数1. 确定照片的实际放大倍数：包含3个方面：①物镜的放大倍数（Objectivelens Mag.）；②转接环（C-mount）的放大倍数；③图像采集器，也就是相机的放大倍数（lens Mag.）。物镜的放大倍数，我就不解释了。转接环的放大倍数呢，请看Fig.1，敝实验室使用的转接环乃Olympus U-TV0.63XC。所以它的放（suo）大（xiao）倍数就是：0.63！好了，现在到了最关键的步骤：确定图像采集器的放大倍数。以Olympus DP71为例，我查阅了说明书，其实是个广告（Fig.2）得到图像采集器的放大倍数是2。到此，我们便能确定所得的照片到底是放大了多少倍的了，即：放大倍数=物镜的放大倍数×转接环的放大倍数×图像采集器的放大倍数——（公式1）注意：如果所使用的图像采集软件对拍摄下来的照片有放大，那么直接使用图像采集器的放大倍数就不对了。所以，更加通用的公式是这样的，敝实验室使用的Image-Pro express就没有放大，拍下来的就是原汁原味的照片（Fig.3）：显示器的对角线长（准确的说法是显示器上拍照窗口的对角线长）和CCD的对角线长在各自的说明书上是可以查到的。2. 确定CCD上每一个像素点的大小：这包含两个方面：①CCD上单个像素点的大小；②拍照时是否使用了Binning功能。CCD上的单个像素点大小是可以查到的（Fig.4）：很负（zhuang）责（bi）得讲几乎所有光学显微镜配备的图像采集器的每个像素大小都是6.45μm。之后就是确定binning了，本人并不知道什么叫binning于是就查了资料，然而我并没有看懂，所以就把链接分享给大家了（/learning-academy/ccd-binning-what-does-binning-mean）。不过！不懂什么是binning并没有影响！在拍照时就会有binning这个选项（Fig.5）：CCD binning一般有1*1，2*2，4*4等。在照片的详细信息（或者标题）里就可以查到该照片的binning，如果是1*1，那么binning就是1；如果是2*2，那么binning就是2，以此类推。此时，我们就可以确定CCD上的每个像素点的大小啦！CCD像素大小=单个像素点长度（μm）×binning——（公式2）3. 激动人心的时刻到了接下来我们就算出了照片上每1个像素所代表的真实长度（Actual Pixel Size）是多少了。APS=（公式2）÷（公式1）——（公式3）我们想在照片上添加一个长100μm的标尺，只需要用100÷APS就行了。所得的值代表了在这张照片上，“100μm”是多少像素。只要用Photoshop画一个长为该像素的直线就行了。什么？不会用Photoshop？如果使用的是CS6之后的版本，请点击“图像-分析-置入比例标记，然后输入那个算出的像素值”，如果是CS4或CS5，请直接点击“分析-置入比例标记，然后输入那个算出的像素值”。好了，不能再暴露年龄了。正文：请看，本人用4×的物镜，0.63×的转接口和2×的图像采集器拍这一张塑料直尺的照片，每个格子代表1mm。然后根据（公式1）求出了：总放大倍数=4*0.63*2=5.04根据（公式2）求出了：CCD像素大小=6.45μm*1=6.45μm然后根据（公式3）求出了：APS=6.45μm÷5.04=1.28μm比如，我们要加一个长1mm也就是1000μm的比例尺，只要用1000μm÷1.28μm=781，也就是说我们要在该照片上画一个长为781像素的直线。然后笑什么笑，没见过尺子有误差呀。其实，本人并没有就这样轻易地go die。根据这个误差，我反求出了敝实验室使用的软件其实将图像放大了，所以再回顾一下Fig.3，最后一项的值应该是3。得到了校正值，以后就可以放心使用啦！结论：其实，没有什么其实。就是以后做实验拍照早就应该把比例尺添加了，省得现在再弄，烦！参考文献：Olympus DP71的说明书和小广告，以及
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是不是软件的问题导致没有scale bar的呀？
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很详细！赞！不过我这么懒得还是喜欢直接在每个倍数下拍了标尺，然后等比例添加到图片上
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关于丁香园【求助】这些图片上的比例尺是怎么做上去的?
请各位大师看一下,这些图片上的比例尺是怎么做上去的,谢谢!
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fengyonghe
这是飞机大梁的实物照片，与显微镜、扫描无关。标尺肯定是后期做的。按标尺计算这一段大梁长1.5米。上面标注的数字代表在全部长度上不同位置的坐标。在软件photoshop cs中可以完成标定。wanghw689(wanghw689) 发表:请各位大师看一下,这些图片上的比例尺是怎么做上去的,谢谢!
谢谢各位大师的答复！这些图片我认为应该不是显微镜拍的，因为如果图上的比例尺是正确的话，那么上面那张图至少要有1米多长，显微镜应该是拍不了的。通过后处理，线条可以画上去，文字可以写上去，可是比例尺是需要要标定的，上图中，可能是如何做的比例尺的标定呢，还望请各位发表高见，谢谢！
ps的吧、....
fengyonghe
不是乱标，是示意的标注，而且我算准了那个位置。误差±0.5mm驰奔(srd2009) 发表:比例尺肯定不能乱标
比例尺肯定不能乱标
fengyonghe
可能是系统自带的，也可以后期自己加入，例如下面方框里的。
左右两个箭头是对称的，估计是自带的。
目前大部分显微镜与电脑连接的设备，都带有尺寸计算功能，直接往图上标注就行了。
是不是在word里面加文本框加的？或者是ps处理的fengyonghe(fengyonghe) 发表:我圈起来的箭头是倾斜的，应该是后来标上去的。
fengyonghe
我圈起来的箭头是倾斜的，应该是后来标上去的。
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偏光镜照片如何换算标尺
在偏光镜下拍的照片，目镜10倍，物镜40倍，想在照片上添加标尺，如何换算呢，比如照片中的1cm代表实际距离多少
我的显微镜上没有自带相机，都是自己用相机对着目镜拍的，更是不精确，我认为你拍出的照片自动带标尺，那个标尺肯定是对的，因为你相机在放大的时候，标尺也在跟着放大。
这个貌似不对吧
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