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干扰素膜蛋白tet-on tet-off系统稳定细胞系的建立及对CA16病毒的抑制作用
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(1)河北大学生命科学学院 生物芯片研究室, 河北 保定071002;
2)中国科学院微生物研究所,病原微生物与免疫学重点实验室, 北京100101)
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基因的HeLa细胞系并初步探索了IFITM蛋白对柯萨奇病毒A16(CA16)的抑制作用.首先将调控质粒ptet-on tet-off转染进入HeLa细胞,通过G418筛选出阳性克隆细胞系在此细胞系基础上共同转染反应质粒pTRE2-IFITM1/2/3和伴侣质粒pTK-Hyg,通过潮霉素筛选出单克隆细胞系加入多西环素后利用Western印迹筛选出可诱导表达IFITM1/2/3蛋白的单克隆细胞系.使用实时荧光定量PCR
3对CA16的抑制效果最为明显.Tet调控IFITM1/2/3基因表达HeLa细胞系的成功建立,为进一步研究IFITM基因的功能及其抗病毒机理提供了一个悝想的细胞模型.
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