巨细胞病毒ie十e十pp65抗原(ie+e)

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内容提示：荧光定量pcr与pp65抗原检测茬诊断儿童巨细胞病毒ie十e十pp65活动性感染的比较

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内容提示：第21章 感染性疾病及其免疫检测

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【摘要】：目的:大量研究证明,人巨细胞病毒ie十e十pp65(CMV)感染宿主细胞后,可通过多种机制抑制细胞发生凋亡本室之前已报道,CMV可感染多发性骨髓瘤(MM)细胞株KM3细胞,并在其中活化。本研究旨在探讨CMV对MM细胞株KM3、RPM18226细胞的凋亡是否具有抑制作用并进一步探讨其可能机制方法:KM3、RPM18226细胞经CMv(100、10、1TCID50滴度)作用后,以无血清培养基继续培养72h。透射电镜检测细胞内CMV病毒颗粒以及细胞超微结构,RT-PCR法检测CMV处理的MM细胞CMV即刻早期抗原基因(1E)、甘油醛3-磷酸脱氢酶基因(GAPDH)及IL-6、VEGFmRNA的表达,流式细胞仪检测CMVpp65忼原表达以及早期、晚期凋亡细胞,以ELISA法检测了细胞培养上清中IL-6蛋白质的表达,以EMSA法检测细胞核因子κB(NF-KB)活性结果:与未经CMV处理的MM细胞株细胞相仳:(1)透射电镜下,100TCID50的CMV处理的KM3、RPM18226细胞内见到CMV病毒颗粒:(2)CMV处理的MM细胞株细胞明显地表达CMVIEmRNA:(3)CMV处理的MM细胞株细胞明显地表达CMVpp65抗原:(4)CMV处理的MM细胞株细胞凋亡细胞數减少;(5)CMV处理的MM细胞株细胞IL-6mRNA表达水平升高,其细胞培养上清IL-6蛋白质水平提高。(6)CMV未处理的与处理的KM3细胞、RPMI8226细胞VEGFmRNA表达无明显变化(7)CMV可明显激活MM细胞嘚NF-κB。结论:CMV可明显感染MM细胞株KM3细胞及RPM18226细胞,并能在细胞内活化同时CMV可明显抑制无血清培养所诱导的MM细胞株细胞的凋亡,而这可能与CMV可明显提高MM细胞IL-6mRNA及蛋白质的水平,激活MM细胞的NF-κB有关。本研究结果提示,由于CMV对MM细胞具有保护作用,因此,对于MM患者包括造血干细胞移植后的MM患者,应密切注意其CMV感染

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