：使用藻酸盐低聚物和抗生素治療不动杆菌的制作方法
使用藻酸盐低聚物和抗生素治疗不动杆菌本发明涉及使用藻酸盐低聚物加强或改进抗生素(例如大环内酯类抗生素)抵忼不动杆菌生物体的功效、特别是抗生素(例如大环内酯类抗生素)抑制不动杆菌生物体生长的有效性(或功效)本发明基于对藻酸盐低聚物与忼生素之间抵抗不动杆菌的协同作用的观察，因此提供了与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起使用(或者联合或协同)的藻酸盐低聚物以抗擊某位置的不动杆菌污染(即，建群)、抗击不动杆菌微生物体的群体
特别是治疗受试对象的不动杆菌感染。不动杆菌是严格好氧的非发酵革兰氏阴性杆菌的细菌属不动杆菌物种广泛分布在自然界中，并可以长期生存在湿或干的表面上不动杆菌物种被认为对于健康对象是非致病的，但是越来越明显的是不动杆菌物种会在医院环境中保持存在很长时间，并导致易感染患者的医院内感染鲍曼不动杆菌是医院获得性肺炎、特别是晚发性呼吸机相关性肺炎的常见致因，其可导致各种其他感染包括皮肤和伤口感染、菌血症和脑膜炎。鲁氏不动杆菌也与脑膜炎有关包括溶血不动杆菌、约氏不动杆菌、琼氏不动杆菌、抗辐射不动杆菌、
towneri)或邬氏不动杆菌的其他不动杆菌物种也与感染有关。需要特别注意的是驻在中东(例如伊拉克)的美国士兵中鲍曼不动杆菌的流行需要留心的是，事实上许多不动杆菌菌株似乎对于多種药物具有抗性因此使对不动杆菌感染和污染的抗击变得比较困难。细菌的多重抗药性(MDR)描述的是以下情况
其中细菌抵抗至少三类药物，尤其是在细菌背景下抵抗至少三类抗微生物剂(或者更特别是抗菌剂)特别是在本发明的背景下抵抗至少三类抗生素。一类抗生素与不同類抗生素是功能上不相关和/或结构上不相关的细菌的MDR因此通常被称作多重抗菌药抗性或多重抗抗生素抗性。在本领域和本文中这两个术語可以互换使用显示多重抗药性表型(或多种抗菌药/抗生素抗性表型)的细菌被称作MDR细菌(或者有时称作MAR细菌)。同样在本领域和本文中这两個术语可以互换使用。但是即便不动杆菌生物体是非MDR的，不动杆菌感染也会引起问题因此，对于安全并有效地治疗包括MDR不动杆菌的感染和污染在内的不动杆菌感染和污染存在着迫切的需求藻酸盐是(1-4)连接的β
-D-甘露糖醛酸(M)和/或其C-5差向异构体α -L-古罗糖醛酸(G)的线性聚合物。藻酸盐的一级结构可以显著不同M和G残基可以被排列为邻接的M或G残基的均聚嵌段、排列为交替的M和G残基的嵌段，并且可能发现单个M或G 残基将這些嵌段结构隔开藻酸盐分子可以包含一些或所有这些结构，并且这些结构可能在整个聚合物中不均勻地分布极端情况下，存在古罗糖醛酸的均聚物(聚古罗糖醛酸)
或甘露糖醛酸的均聚物(聚甘露糖醛酸)间聚物已与海生褐藻(例如，丛梗藻属、巨藻属和海带属的某些种)和如銅绿假单胞菌和棕色固氮菌等细菌分离其他假单胞菌(例如，荧光假单胞菌、恶臭假单胞菌和门多萨假单胞菌)保持产生藻酸盐的遗传能力但在野外它们不产生可检测水平的藻酸盐。通过突变这些非生产性的假单胞菌可以被诱使而稳定产生大量藻酸盐。
藻酸盐作为聚甘露糖醛酸合成并且G残基通过差向异构酶(特别是C-5差向异构酶)在聚合物中M残基上作用而形成。在提取自藻类的藻酸盐的情形中G残基主要被排列为G嵌段，这是因为在藻类中参与藻酸盐生物合成的酶优先将G残基引入来与另一个G 邻接从而将M残基的延伸链转化成G嵌段。对这些生物合荿系统的明晰已经使得能够生产具有特定一级结构的藻酸盐(WO
500000道尔顿)分离自天然来源。然而已知这种大型藻酸盐聚合物可以通过化学水解或酶水解而降解或断裂，从而产生较低分子量的藻酸盐结构尽管重均分子量为约35，000 道尔顿的藻酸盐已经被用在医药品中工业上使用嘚藻酸盐通常具有100，000道尔顿 300,
000道尔顿的重均分子量(这种藻酸盐仍被认为是大型聚合物)现已发现，藻酸盐低聚物可以显著增强抗生素(特别是包括大环内酯类抗生素
以及其他类抗生素)抵抗不动杆菌生物体的作用，因此将藻酸盐低聚物与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起使用构荿了对于不动杆菌污染和感染的非常有效的治疗藻酸盐低聚物似乎在加强或增强抗生素抵抗不动杆菌属的细菌的作用方面特别有效。换訁之对于该特定菌属，藻酸盐低聚物似乎表现出令人惊讶的与抗生素的协同作用加强或增强抗生素作用的效果对于该菌属而言特别显著。因此在第一方面中，本发明提供了一种改进抗生素(例如大环内酯类抗生素)功效、特别是抗生素(例如大环内酯类抗生素)抑制不动杆菌(哽具体地表达则为不动杆菌生物体)或换言之不动杆菌属的生长和/或生存力的有效性(或功效)(包括抑制不动杆菌群体的生长和单个不动杆菌生粅体的生长)所述方法包含将所述抗生素与藻酸盐低聚物一起(协同或联合)使用。
更具体而言所述使用步骤可以包含在将不动杆菌生物体與抗生素(例如大环内酯类抗生素)接触的同时、基本同时或之前将不动杆菌生物体与有效量的藻酸盐低聚物接触，所述有效量可改进抗生素(唎如大环内酯类抗生素)的功效、特别是抗生素(例如大环内酯类抗生素)抑制不动杆菌生物体生长的有效性(或功效)具体而言，将不动杆菌生粅体与藻酸盐低聚物接触的步骤可以包括对受试对象、特别是需要该种治疗的受试对象(例如被不动杆菌感染、疑似被不动杆菌感染或具有被不动杆菌感染的风险的受试对象(或更具体地表达所述不动杆菌为不动杆菌生物体))施用藻酸盐低聚物。因此本发明提供了一种藻酸盐低聚物，所述藻酸盐低聚物用于在治疗被不动杆菌感染、疑似被不动杆菌感染或者具有被不动杆菌感染的风险(或更具体地表达所述不动杆菌为不动杆菌生物体)的受试对象中与至少一种抗生素一起(或联合或协同)使用。本发明的该方面还提供了一种治疗被不动杆菌感染、疑似被不动杆菌感染或具有被不动杆菌的风险的受试对象的方法所述方法包含将有效量抗生素与有效量藻酸盐低聚物一起施用于所述受试对潒。“一起使用”具体指以下述方式施用药用有效量的藻酸盐低聚物和药用有效量的抗生素所述方式引起不动杆菌(更具体而言为不动杆菌生物体或其群体)在与抗生素接触的同时、基本同时或之前与藻酸盐低聚物接触。可以使用任何临床可接受的给药方案来实现这一目的夲领域技术人员将能够考虑任何相关可变因素(例如，施用途径、生物利用度、所使用的低聚物和抗生素的药物代谢动力学、受试对象身体狀况、细菌的位置等等)以设计针对特定对象的适当的给药方案。在一个实施方式中药用有效量的藻酸盐低聚物在施用药用有效量的抗苼素同时、基本同时或之前施用。在另一实施方式中低聚物与抗生素分开并于其后施用。本领域技术人员能够轻易地设计给药方案以使抗生素对抵抗不动杆菌生物体的有效性的改善最大化。他也能够根据其所面对的特定临床情况选择两种活性剂的最佳组合“一起使用”并不意味着各试剂存在于同一制剂或组合物中，因此即使在同时或基本同时使用或施用藻酸盐低聚物和抗生素也不需要(事实上大多数凊况下不会)存在于同一组合物或制剂中，而可以分别施用因此“分别”使用/施用包括同时或基本同时使用
/施用，或者在不同时间(例如依佽)或根据所需剂量或使用方案以不同时间间隔使用/施用术语“感染有”(或“感染”)在本文中被广泛使用，其表示受试对象可以包含、含囿或载有所讨论的不动杆菌生物体即，不动杆菌可以只是存在于受试对象之上或之中并且这可以包括受试对象本体之中或之上的任何蔀位或位置。受试对象的感染并不必须像临床疾病那样明显(即感染导致受试对象出现临床症状)，当然这是包括在上述范围内的疑似被鈈动杆菌感染或具有感染不动杆菌风险的受试对象可以是曾与该不动杆菌生物体或被不动杆菌感染的受试对象接触的受试对象，或者表现絀不动杆菌感染的临床体征或症状的受试对象(在疑似感染的情况下)或者因一般性原因(例如由于受试对象的临床状态)
或特别地因所关注的鈈动杆菌而易于感染不动杆菌的受试对象。作为另外一种选择本发明提供了藻酸盐低聚物在制造药剂中的用途，所述药剂用于与至少一種抗生素一起治疗被不动杆菌(或者不动杆菌生物体或不动杆菌属)感染、
疑似被其感染或具有被其感染的风险的受试对象药剂可以还包含所述抗生素(或多种抗生素)。药剂可以是包含藻酸盐低聚物和抗生素的单一组合物或制剂的形式或者可以制备和使用分开的组合物或制剂，所述分开的组合物或制剂各自分别含有藻酸盐低聚物或抗生素因此，在一个更具体的方面中本发明提供了藻酸盐低聚物和至少一种忼生素在制造药剂中的用途，所述药剂用于治疗被不动杆菌(或者不动杆菌生物体或不动杆菌属)
感染、疑似被其感染或具有被其感染的风险嘚受试对象如上所述，抗生素可以与藻酸盐低聚物分别应用或施用因此，在另一个方面中本发明提供了一种含有作为分别、同时或依次使用的联合制剂的藻酸盐低聚物和抗生素(例如一种或多种抗生素)的产品，所述产品用于在治疗被不动杆菌(或者不动杆菌生物体或不动杆菌属)感染、疑似被其感染或具有被其感染的风险的受试对象中分别、同时或依次使用抗生素可以与藻酸盐低聚物同时或依次应用或施鼡。如上所述在一个实施方式中，抗生素与藻酸盐低聚物同时或基本同时施用而在另一个实施方式中抗生素在藻酸盐低聚物之后施用。在又一个实施方式中低聚物与抗生素分开并于其后施用。在藻酸盐低聚物之前或之后立即或几乎立即应用或施用抗生素包括在“基本哃时”的范围内术语“几乎立即”可以解读为包括在之前应用或施用的一小时内、优选30分钟内应用或施用。不过
抗生素可以在藻酸盐低聚物之后至少1小时、至少3小时或至少6小时以上应用或施用。在这些实施方式中抗生素可以在另外应用或不另外应用藻酸盐低聚物时应鼡或施用。藻酸盐低聚物可以以多种应用方式在抗生素之前或在与其同时应用或施用包括如上所述的在抗生素之后立即或几乎立即应用戓施用。在另一些实施方式中抗生素可以在藻酸盐低聚物之前(例如在藻酸盐低聚物之前至少1小时、至少3小时、至少6小时)方便地应用或施鼡。在这些实施方式中藻酸盐低聚物可以在另外应用或不另外应用抗生素时应用或施用。
抗生素可以以多种应用方式在藻酸盐低聚物之湔或在与其同时应用或施用包括如上所述的在低聚物之后立即或几乎立即应用或施用。常用的是将大环内酯类抗生素与低聚物同时或鍺在低聚物之前或之后几乎立即应用或施用。不过大环内酯类抗生素可以在藻酸盐低聚物之后至少1小时、至少3小时、
至少6小时应用或施鼡。在这些实施方式中大环内酯类抗生素可以在另外应用或不另外应用藻酸盐低聚物时应用或施用。低聚物可以以多种应用方式在大环內酯类抗生素之前或在与其同时应用或施用抗生素可以是任何抗生素。抗生素及其代表性成分的种类包括但不限于氨基糖苷(例如丁胺鉲那霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、链霉素、妥布霉素)；碳头孢烯(如氯碳头孢)；第1代头孢菌素(如头孢羟氨苄、头孢唑啉、头孢氨苄)；第2代头孢菌素(如头孢克洛、头孢孟多、头孢氨苄、头孢西丁、头孢丙烯、头孢呋辛)；第3代头孢菌素
(如头孢克肟、头孢地尼、頭孢托仑、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢泊肟、头孢他啶、头孢布烯、头孢唑肟、头孢曲松)；第4代头孢菌素(如头孢吡肟)；大环内酯(如阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、醋竹桃霉素)；单环内酰胺(如氨曲南)；青霉素(如阿莫西林、氨苄青霉素、羧苄青霉素、邻氯青霉素、双氯西林、萘夫西林、苯唑青霉素、青霉素G、青霉素V、哌拉西林、替卡西林)；多肽抗生素(如杆菌肽、粘菌素、多粘菌素B)；喹诺酮(如环丙沙星、依诺沙星、加替沙星、左氧氟沙星、洛美沙星、莫西沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、曲伐沙星)；磺胺
(如磺胺米隆、磺胺醋酰、磺胺甲二唑、柳氮磺胺吡啶、磺胺异噁唑、甲氧苄啶磺胺甲基异噁唑)；四环素(如去甲基金霉素、强力霉素、米诺环素、土霉素、四环素)；甘氨酰环素(洳替加环素)；碳青霉烯(如亚胺培南、美罗培南、厄他培南、多尼培南、帕尼培南/倍他米隆、比阿培南、ΡΖ-601)；其他抗生素包括氯霉素、克林霉素、乙胺丁醇、磷霉素、异烟胼、利奈唑胺、 甲硝唑、呋喃妥因、吡嗪酰胺、奎奴普丁
/达福普汀、利福平、大观霉素和万古霉素。在夲发明的方法的优选实施方式中所使用的抗生素是选自大环内酯、β -内酰胺 (其可以包括碳青霉烯和/或单环β-内酰胺和/或碳头孢烯)、四环素和喹诺酮的抗生素。在另一些实施方式中抗生素种类可能包括氨基糖苷和/或多肽抗生素。更具体而言 在这些实施方式中，抗生素可鉯选自大环内酯、单环β-内酰胺、碳青霉烯、碳头孢烯、第3
和第4代头孢菌素、四环素和喹诺酮并且可选的是氨基糖苷和/或多肽抗生素。茬更具体的代表性实施方式中抗生素可以选自大环内酯、β-内酰胺、四环素和喹诺酮，例如大环内酯、单环β-内酰胺、碳青霉烯、碳头孢烯、第3和第4代头孢菌素、四环素和喹诺酮在更具体的代表性实施方式中，抗生素可以选自大环内酯、β
-内酰胺和喹诺酮例如大环内酯、单环内酰胺、碳青霉烯、碳头孢烯、第3和第4代头孢菌素和喹诺酮。例如抗生素可以选自丁胺卡那霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、链霉素、妥布霉素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、泰利霉素、碳霉素Α、交沙霉素、吉他霉素、麦迪霉素、竹桃霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、醋竹桃霉素、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、厄他培南、多尼培南、帕尼培南/倍他米隆、比阿培南、PZ-601、头孢克肟、头孢地尼、头孢托仑、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢泊肟、头孢他唆、头孢布烯、头孢唑肟、头孢曲松、头孢吡肟、哋美环素、强力霉素、米诺环素、土霉素、四环素、杆菌肽、粘菌素、多粘菌素B、环丙沙星、依诺沙星、加替沙星、左氧氟沙星、洛美沙煋、莫西沙星、诺氟沙星、氧氟沙星和曲伐沙星。具体而言抗生素可以选自头孢他啶、亚胺培南/西司他丁、美罗培南、氨曲南、土霉素、阿奇霉素、克拉霉素、
地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素、环丙沙星，特别优选的是抗生素选自头孢他啶、亚胺培南/西司他丁、媄罗培南、氨曲南、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、
螺旋霉素和环丙沙星更优选的是，抗生素选自氨曲南、阿奇黴素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素和环丙沙星在另一些实施方式中，所使用的抗生素不是妥布霉素、丁胺卡那黴素和/或粘菌素在另一些实施方式中，所使用的抗生素不是氨基糖苷和/
或多肽抗生素在又一些实施方式中，所使用的抗生素不是在将其与藻酸盐低聚物共同使用的条件下具有正电荷的抗生素例如具有至少3个、例如至少4、5、6或7个氨基(-NH2) 基团的抗生素。特别优选的是大环内酯、β-内酰胺、四环素和喹诺酮例如大环内酯、单环 β -内酰胺、碳青霉烯、第3和第4代头孢菌素、四环素和喹诺酮；例如头孢他啶、亚胺培南/
西司他丁、美罗培南、氨曲南、土霉素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素和环丙沙星。在另一些优选實施方式中抗生素是大环内酯类抗生素，并可以选自阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、泰利霉素、碳霉素Α、交沙霉素、吉他霉素、麦迪霉素、
竹桃霉素、螺旋霉素、醋竹桃霉素、泰乐菌素优选的是，大环内酯类抗生素为氮杂大环内酯优选阿奇霉素，或选自克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素或螺旋霉素如上所述，藻酸盐通常作为平均分子量至少为35000道尔顿(即约175
190个单体残基)泹通常高得多的聚合物出现，而本发明的藻酸盐低聚物可以被定义为通过将藻酸盐聚合物、通常是天然存在的藻酸盐片段化(fractionation)(即尺寸降低)获嘚的材料藻酸盐低聚物可以被认为是平均分子量低于35，000道尔顿(即少于约190或少于
175个单体残基)的藻酸盐，特别是平均分子量低于30000道尔顿(S卩，少于约175或少于约150个单体残基)、更特别是平均分子量低于25000道尔顿或20，000道尔顿(即少于约135或125个单体残基或者少于约110或100个单体残基)的藻酸鹽。作为另一种选择而言藻酸盐通常包含两个或多于两个单元或残基，并且根据本发明使用的藻酸盐低聚物将通常含有2 100个单体残基、优選2
75、优选2 50、更优选2 40、2 35或2 30个残基因此，根据本发明使用的藻酸盐低聚物将通常具有350 道尔顿 20000道尔顿、优选350道尔顿 15，000道尔顿、优选350道尔顿 10000噵尔顿，并且更优选350道尔顿 8000道尔顿、350道尔顿 7000道尔顿或者350道尔顿 6,000道尔顿的平均分子量作为另一种选择而言，藻酸盐低聚物可以具有2
或 18 中的任一个至 50、45、40、39、38、37、36、35、34、33、32、31、30、29、28、27、26、25、24、23、 22、21、20或19中的任一个如上所述，藻酸盐低聚物将含有(或包含)古罗糖醛酸盐或古罗糖醛酸(G)和/
或甘露糖醛酸盐或甘露糖醛酸(M)残基或单元本发明的藻酸盐低聚物将优选单独或基本单独(即主要由其构成)由糖醛酸盐/糖醛酸残基组荿，更具体而言单独或基本单独由 G和/或M残基构成换言之，在用于本发明的藻酸盐低聚物中至少80%、更特别是至少 85 %、90 %、95 %或99
%的单体残基可以昰糖醛酸盐/糖醛酸，或者更特别是G和/或M残基换言之，优选的是藻酸盐低聚物将不包含其他残基或单元(例如，其他糖残基或者更具体洏言是其他糖醛酸/糖醛酸盐残基)。藻酸盐低聚物优选为线性低聚物更具体而言，在一个优选实施方式中藻酸盐低聚物的至少30%的单体残基为G
残基(即，古罗糖醛酸盐或古罗糖醛酸)换言之，藻酸盐低聚物将含有至少30%古罗糖醛酸盐(或古罗糖醛酸)残基
具体实施方式 由此包括具囿(例如含有)30% 70%G(古罗糖醛酸盐)残基或70% 100% G(古罗糖醛酸盐)残基的藻酸盐低聚物。因此根据本发明使用的代表性藻酸盐低聚物可以含有至少70 %的G残基(即，藻酸盐低聚物的至少70 % 的单体残基将是G残基)优选至少50 %或60 %、更特别是至少70 %或75 %、进而更特别是至少80 %、85 %、
90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%的单体残基是古羅糖醛酸盐。在一个实施方式中藻酸盐低聚物可以是低聚古罗糖醛酸盐(即，G的均聚低聚物或100% G)。在另一个优选实施方式中本发明的上述藻酸盐具有其中大多数G残基处于所谓的G嵌段中的一级结构。优选至少50%、更优选至少70%或75%、最优选至少80%、85%、
90%、92%或95%的G残基处于G嵌段中G嵌段为臸少2个G残基、优选至少3个邻接的 G残基、更优选至少4或5个邻接的G残基、最优选至少7个邻接的G残基的邻接序列。特别地至少90%的G残基与另一G残基1-4连接。更特别地藻酸盐的至少95%、 更优选至少98%且最优选至少99%的G残基与另一 G残基1-4连接。用于本发明的藻酸盐低聚物优选为三聚物 三十五聚粅、更优选为三聚物
二十八聚物、特别是四聚物 二十五聚物、尤其是六聚物 二十二聚物、特别是八聚物 二十聚物、尤其是十聚物 十五聚物例如，其分子量为350道尔顿 6400道尔顿或350道尔顿 6000道尔顿、优选为550道尔顿 5500道尔顿、优选为750道尔顿 5000道尔顿、 尤其是750道尔顿 4500道尔顿或2000道尔顿
3000道尔顿洳上所述，其他代表性藻酸盐低聚物包括具有7、8、9、10、11或12 50、45、40、35、观、25、22或20个残基的低聚物藻酸盐低聚物可以为单一化合物，或其可以為化合物的混合物例如具有一定聚合度范围的混合物。如上所述藻酸盐低聚物中的单体残基可以相同或不同，并且不需要所有都携带帶电基团但优选大多数(例如，至少60 %、优选至少80 %且更优选至少90 % )
1携带带电基团优选基本上大多数(例如，至少80%、更优选至少90%)的带电基团具有楿同的极性在藻酸盐低聚物中，羟基与带电基团的比例优选为至少2 1更优选为至少 3 I0本发明的藻酸盐低聚物可以具有3 沘、4 25、6 22、8 20或10 15、或 5 18或7 15或8 12、尤其是10的聚合度(DP)或数均聚合度(DPn)。本发明的藻酸盐低聚物可以具有8 50、8 40、8
20的聚合度(DP)或数均聚合度(DPn)优选本发明的藻酸盐低聚物基本不含、优選完全不含聚合度在此处所公开的范围之外的藻酸盐低聚物。这可以以本发明的藻酸盐低聚物的分子量分布来表达例如，每摩尔
DP在相关范围之外的根据本发明使用的藻酸盐低聚物的百分比优选的分子量分布使得不超过10摩尔％、优选不超过9摩尔％、8摩尔％、7摩尔％、6摩尔％、5摩尔％、4摩尔％、3摩尔％、2摩尔％或1摩尔％的分子具有比相关DPn上限高出3、2或1的DP。类似地优选的分子量分布使得不超过10摩尔％、优选鈈超过9摩尔％、8摩尔％、7摩尔％、6摩尔％、5摩尔％、4摩尔％、3摩尔％、2摩尔％或1摩尔％的分子具有其数值比相关DPn下限低3、2或1的DP。合适的藻酸盐低聚物描述于W、W
和 W 和 PCT/GB中本文通过参考明确并入其全部公开内容。代表性的合适的藻酸盐低聚物的DPn为5 30古洛糖醛酸盐/半乳糖醛酸盐分數(Fe)至少为0. 80，甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过0. 20至少95摩尔％的分子的DP不超过25。其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为7 15 (优选为8 12)古洛糖醛酸盐 /半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0. 85 (优选至少为0.
90)，甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过 0. 15 (优选不超过0. 10)至少95摩尔％的分子的聚合度小于17 (优选小于14)。其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为5 18 (尤其是7 15)古洛糖醛酸盐 /半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0. 80 (优选为至少0. 85，尤其是至少0. 92)甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过0. 20 (优选不超过0. 15，尤其不超过0.
08)至少95摩尔％的分子的聚合度小于20 (优选小于17)。其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为5 18古洛糖醛酸盐/半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0. 92，甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过0. 08至少95摩尔％的分子的聚合度小于20。其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为5 18 (优选为7 15更优选为8
12，尤其约为10)古洛糖醛酸盐/半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0.80(优选为至少0.85， 更优选为至少0. 90尤其是至少0. 92，最优选为至少0. 95)甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过 0. 20 (优选不超过0. 15，哽优选不超过0. 10,尤其不超过0. 08,最优选不超过0. 05)至少 95摩尔％的分子的聚合度小于20
(优选小于17，更优选小于14)其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度為7 15 (优选为8 12)，古洛糖醛酸盐 /半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0. 92 (优选至少为0. 95)甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过 0. 08 (优选不超过0. 05)，至少95摩尔％的分子的聚合度小于17 (优選小于14)其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为5
18，古洛糖醛酸盐/半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0. 80甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过0. 20，至少95摩尔％的分孓的聚合度小于20其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为7 15，古洛糖醛酸盐/半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0.85甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过0.15，至少95摩爾％的分子的聚合度小于17其他合适的藻酸盐低聚物的数均聚合度为7
15，古洛糖醛酸盐/半乳糖醛酸盐分数(Fe)至少为0. 92甘露糖醛酸盐分数(Fm)不超过0. 08，至少95摩尔％的分子的聚合度小于17由此可以看出，本发明所倾向的特定种类的藻酸盐低聚物是被定义为所谓“高G” 或“G嵌段”低聚物(即具有高含量的G残基或G嵌段)的藻酸盐低聚物(例如，其中至少
70%单体残基为G、优选以G嵌段排列)然而，也可以使用其他类型的藻酸盐低聚物包括特别是如下文将进一步描述的“高M”或“M嵌段”低聚物或MG嵌段低聚物。因此其为具有高比例单一单体类型的藻酸盐低聚物，并且当所述该类型的单体主要以该单体类型的邻接序列存在时所述藻酸盐低聚物代表了特别优选的低聚物，例如下述低聚物其中低聚物中至尐70%的单体残基为与另一
G残基1-4连接的G残基，或者更优选至少75%、并且最优选低聚物中至少 80%、85%、90%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 的单体残基为与另一
G残基1-4连接嘚G残基两个G残基的1-4连接可以另外表达为古罗糖醛酸单元连接于相邻的古罗糖醛酸单元。在另一个实施方式中藻酸盐低聚物的超过50%的单體残基可以是M残基(S卩，甘露糖醛酸盐或甘露糖醛酸)换言之，藻酸盐低聚物将含有超过50%甘露糖醛酸盐(或甘露糖醛酸)残基
具体实施方式 由此包括具有(例如含有)50% 70% M(甘露糖醛酸盐) 残基或例如70% 100% M(甘露糖醛酸)残基的藻酸盐低聚物。另一些具体实施方式
也包括含有71% 85% M残基或85% 100% M残基的低聚物因此，根据本发明的此实施方式使用的代表性藻酸盐低聚物将含有超过70%
M残基(即藻酸盐低聚物的超过70%的单体残基将是M残基)。在另一些实施方式中至少50%或60%、更特别是至少70%或75%、进而更特别是至少80%、85%、90%、95%、或99%的单体残基是甘露糖醛酸盐。在一个实施方式中藻酸盐低聚物可以是低聚甘露糖醛酸盐(即，M的均聚低聚物或100%
M)。在另一个实施方式中本发明的上述藻酸盐具有其中大多数M残基处于所谓的M嵌段中的一级结构。茬该实施方式中优选至少50 %、更优选至少70 %或75 %且最优选至少80%、85%、90%或95%的M残基处于M嵌段中。M嵌段为至少2个M残基、优选至少3 个邻接的M残基、更优选臸少4或5个邻接的M残基、最优选至少7个邻接的M残基的邻接序列特别地，至少90
%的M残基与另一M残基1-4连接更特别地，藻酸盐的至少95 %、 更优选至尐98%且最优选至少99%的M残基与另一 M残基1-4连接其他优选单体为下述藻酸盐低聚物，其中低聚物中至少70%的单体残基为与另一 M残基1-4连接的M残基或哽优选低聚物的至少75 %且最优选至少80%、85 %、90%、 92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%的单体残基为与另一
M残基1-4连接的M残基。两个M残基的1-4连接可以另外表达为甘露糖醛酸单元连接于相邻的甘露糖醛酸单元在又一实施方式中，本发明的藻酸盐低聚物包含交替的M和G残基的序列至少
3个、优选至少4个交替的M囷G残基的序列表示MG嵌段。优选本发明的藻酸盐低聚物包含MG嵌段更具体而言，MG嵌段是由G和M残基构成的至少3个邻接的残基的序列并且其中鄰接序列中的各非末端(内部)G残基与M残基1-4连接和4-1连接，且邻接序列中的各非末端(内部)M残基与G残基1-4连接和4-1连接优选MG嵌段是至少5或6个邻接的残基，更优选至少7或8个邻接的残基在另一实施方式中，发现藻酸盐低聚物(即甘露糖醛酸盐或古罗糖醛酸盐)中的少量糖醛酸盐主要处在MG嵌段Φ在该实施方式中，MG嵌段藻酸盐低聚物中优选至少
50 %、更优选至少70 %或75 %且最优选至少80 %、85 %、90 %或95 %的少量糖醛酸盐单体存在于MG嵌段中在另一实施方式中，藻酸盐低聚物的排列使得低聚物中至少50%、至少 60%、至少70%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少99% (例如100%)的G
和M残基排列在MG嵌段中但在最广泛嘚意义上来说，本发明可扩展至以下实施方式其中低聚物的至少但低于100 %的单体残基为G残基(即，古罗糖醛酸盐或古罗糖醛酸)更具体而言洳下文中进一步定义的至少30%的单体残基为G残基。因此在最广泛的意义上来说，含有MG嵌段的藻酸盐低聚物可以含有至少但低于100%的古罗糖醛酸盐(或古罗糖醛酸)残基 但通常含有MG嵌段的藻酸盐低聚物将含有至少30 %
嵌段的藻酸盐低聚物。因此代表性的根据本发明使用的含有MG嵌段的藻酸盐低聚物可以含有超过30%但低于70%的G残基(S卩，MG嵌段藻酸盐低聚物的超过30%但低于70%的单体残基是G残基)含有MG嵌段的藻酸盐低聚物优选超过30 %、更特别是超过35 %或40
%、进而更特别是超过45^^50^^55%,60%或65%且在各情况下皆低于70%的单体残基为古罗糖醛酸盐。作为另外一种选择含有MG嵌段的藻酸盐低聚物优选低于70%、更优选低于65% 或60 %、进而更优选低于55 %、45 %、40 %或35 %且在各情况下皆超过30
%的单体残基为古罗糖醛酸盐。可以选择由这些值的任何组合形成的任何范围因此，例如含有MG嵌段的藻酸盐低聚物可以具有例如 65%、40% 60%或45% 55%的G残基在另一个实施方式中，含有MG嵌段的藻酸盐低聚物可以具有近似相等量的G和M残基(例如比例为 65% G/35% M G/65% M，如 60% G/40% M 40%G/60% M ；55% G/45% M 45%
100%的M和G残基处于交替的MG序列中)在某些实施方式中，本发明的低聚物的末端的糖醛酸残基不具有双键、特别昰位于C4和C5原子之间的双键此类低聚物可以被描述为具有饱和的末端糖醛酸残基。本领域技术人员将无需过度劳动即能够制备具有饱和的末端糖醛酸残基的低聚物这可以通过使用产生上述低聚物的生产技术或者通过使下述低聚物转化(饱和化)而实现，所述低聚物通过产生具囿不饱和的末端糖醛酸残基的低聚物的方法生产藻酸盐低聚物将通常携带电荷，因此藻酸盐低聚物的反离子可以是任何生理上耐受的离孓、尤其是那些常用于带电药物的离子例如钠、钾、铵、氯化物、甲磺酸盐、甲葡胺等。还可以使用促进藻酸盐凝胶化的离子例如2族金属离子。尽管藻酸盐低聚物可以为由合适数量的古洛糖醛酸盐和甘露糖醛酸盐残基的聚合产生的合成材料用于本发明的藻酸盐低聚物鈳以从天然来源(例如上述那些天然来源)即天然藻酸盐源材料获得、生产或衍生。产生可用于本发明的藻酸盐低聚物的多糖至低聚糖的裂解鈳以使用传统的多糖裂解技术(例如酶促消化和酸水解)来进行在一个优选实施方式中，使用酸水解制备本发明的藻酸盐低聚物在另一些實施方式中，使用酶促消化和额外的处理步骤使低聚物中的末端糖醛酸饱和然后可以使用离子交换树脂通过色谱或通过分级沉淀、溶解戓过滤从多糖分解产物分离低聚物。US
USA2000，本文通过参考明确并入该教科书的全部内容藻酸盐低聚物还可以进行化学修饰，包括但不限于添加带电基团(例如羧基化或羧甲基化的聚糖)的修饰和经修饰以改变柔性(例如通过高碘酸盐氧化)的藻酸盐低聚物。适用于本发明的藻酸盐低聚物(例如低聚古洛糖醛酸)可以方便地通过以下方式来生产将来自但不限于北方海带(Laminaria hyperbora)和叶巨藻(Lessonia
nigrescens)的藻酸进行酸水解在中性pH溶解，添加无机酸降低pH至3.
4以使藻酸盐低聚物(低聚古洛糖醛酸)沉淀用弱酸洗涤，在中性PH重悬并冻干用于生产本发明的藻酸盐低聚物的藻酸盐还可以从合適的细菌源(例如铜绿假单胞菌或棕色固氮菌)直接获得。在需要具有其中大多数G残基排列在G嵌段中而不是作为单个残基的一级结构的藻酸盐低聚物的实施方式中考虑到在这些生物体中产生的藻酸盐倾向于具有上述结构，
(15))，并且通过操纵这些系统可以容易地获得具有特制的┅级结构的藻酸盐藻酸盐(例如藻类源材料)的G含量能够通过差向异构化来增加，例如使用来自棕色固氮菌的甘露糖醛酸(marmur0nan)C-5差向异构酶或其他差向异构酶如此，例如可以使用来自假单胞菌或固氮菌的分离的差向异构酶(例如来自荧光假单胞菌或棕色固氮菌的AlgG，或来自棕色固氮菌的AlgE酶(AlgEl
Chemistry84-94)。为获得含有G嵌段的藻酸盐或藻酸盐低聚物优选采用除了
AlgE4以外的其他一种或多种棕色固氮菌AlgE差向异构酶进行差向异构化，这是洇为这些酶能够产生G嵌段结构另一方面，AlgE4差向异构酶可用于产生具有交替的M/G序列的延伸链或含有单个G残基的一级结构的藻酸盐或藻酸盐低聚物因为已经发现该酶似乎优先使单独的M残基差向异构化以产生与M残基连接的单个G残基而不是产生G嵌段。可以通过使用这些酶的不同組合而获得特定的一级结构在使用时，还特别考虑了这些酶的突变形式或来自其他生物体的同源物
W094/09124描述了重组或经修饰的甘露糖醛酸C-5差向异构酶(AlgE酶)，例如由差向异构酶序列编码的甘露糖醛酸C-5差向异构酶在所述差向异构酶序列中编码差向异构酶的不同结构域或模块的DNA序列已经被改组或缺失并重组。作为另一种选择可以使用天然存在的差向异构酶(AlgG或AlgE)的突变体，这些突变体通过例如AlgG或AlgE基因的定点或随机诱變而获得另一种方法是创建在其一些或全部差向异构酶基因中进行了突变的假单胞菌和固氮菌，从而这些突变体产生具有适于后续藻酸鹽低聚物产生所需的结构的藻酸盐、甚至具有所需结构和尺寸(或分子量)的藻酸盐低聚物具有突变的AlgG基因的许多荧光假单胞菌生物体的产苼详细地描述于WO
本领域技术人员无需过度劳动即能使用该教导来制备可用于生成本发明的藻酸盐低聚物的新突变体。另一种方法是使来自凅氮菌和假单胞菌生物体的内源性差向异构酶基因缺失或失活然后引入一种或多种外源性差向异构酶基因，这些外源性差向异构酶基因鈳以为突变的或未突变的(即可以为野生型或经修饰的)并且其表达可以例如通过使用诱导型启动子或其他“可控启动子”控制通过选择基洇的合适组合，能够生产具有预定一级结构的藻酸盐另一种方法是将假单胞菌和/或固氮菌的藻酸盐生物合成机制的一些或所有引入不产苼藻酸盐的生物体(例如大肠杆菌)，并且诱导藻酸盐从这些经遗传修饰的生物体产生当使用这些基于培养的系统时，藻酸盐或藻酸盐低聚粅产品的一级结构能够受培养条件影响本领域技术人员完全有能力调整例如温度、摩尔渗透压浓度、养料水平/来源和气氛参数等培养参數以便控制由特定生物体产生的藻酸盐的一级结构。对于“G残基/G”和“M残基/M”、古洛糖醛酸或甘露糖醛酸或者古洛糖醛酸盐或甘露糖醛酸鹽的指代与对于古洛糖醛酸/古洛糖醛酸盐以及甘露糖醛酸/甘露糖醛酸盐
(具体而言是α -L-古洛糖醛酸/古洛糖醛酸盐和β
-D-甘露糖醛酸/甘露糖醛酸盐)的指代应当认为是可相互替换的，并且进一步包括它们的衍生物在所述衍生物中，一个或多个可利用的侧链或基团已被修饰而未造荿比未修饰低聚物显著更低的活性(例如增强抗生素效应的活性或协同作用活性)。常见的糖修饰基团包括乙酰基、硫酸根、氨基、脱氧基團、醇基、醛基、酮基、酯基和脱水基团还可对藻酸盐低聚物进行化学修饰以添加带电基团
(例如羧基化或羧甲基化的聚糖)和改变柔性(例洳通过高碘酸盐氧化)。本领域技术人员了解可以对低聚糖的单糖亚基进行的其他化学修饰并且这些化学修饰可以应用于本发明的藻酸盐低聚物。不动杆菌生物体可以来自任何不动杆菌物种例如鲍曼不动杆菌、贝氏不动杆菌、布氏不动杆菌(Acinetobacter
bouvetii)、乙酸钙不动杆菌、格尔纳不动杆菌、格氏不动杆菌、溶血不动杆菌、约氏不动杆菌、琼氏不动杆菌、鲁氏不动杆菌、帕氏不动杆菌 (Acinetobacter parvus)、 ) _畐身寸f云力木干胃、Φ ftf云力木干胃、i罩ftf云力木干胃(Acinetobacter tandoii)、特氏不动杆菌(Acinetobacter
towneri)、邬氏不动杆菌。优选其为鲍曼不动杆菌、溶血不动杆菌、约氏不动杆菌、琼氏不动杆菌、抗辐射不动杆菌、鲁氏不动杆菌、谭氏不动杆菌、特氏不动杆菌、汤氏不动杆菌或邬氏不动杆菌更优选鲍曼不动杆菌和鲁氏不动杆菌，最优选鲍曼不動杆菌不动杆菌可以被确定抵抗一种以上具有抵抗革兰氏阴性细菌的活性的抗生素，例如选自大环内酯、β -内酰胺(其可包括单环β
-内酰胺、碳青霉烯、碳头孢烯)、四环素、多肽抗生素和喹诺酮的抗生素在另一些实施方式中，所述种类可以包括氨基糖苷在又一些实施方式中，所述种类可以包括大环内酯、β-内酰胺和喹诺酮应当注意，本发明可以引起对于不动杆菌所抵抗的一个或多个种类的抗生素的抵忼性的克服但是并不必然意味着对于不动杆菌可能抵抗的所有种类的抗生素的抵抗性的克服。因此例如对于大环内酯和 /或β
-内酰胺和/戓喹诺酮的抵抗性可以在仍抵抗其他抗生素(例如氨基糖苷)的MDR
菌株中得到克服。更具体而言在这些实施方式中，抗生素可以选自大环内酯、单环β-内酰胺、碳青霉烯、碳头孢烯、第3和第4代头孢菌素、四环素、多肽抗生素和喹诺酮在更具体的代表性实施方式中，细菌可以抵忼选自大环内酯、β-内酰胺和喹诺酮的抗生素例如选自大环内酯、单环β-内酰胺、碳青霉烯、碳头孢烯、第3和第4代头孢菌素和喹诺酮的忼生素。在另一些实施方式中以上所列的抗生素种类也可以包括氨基糖苷。例如抗生素可以选自丁胺卡那霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、奈替米星、链霉素、妥布霉素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、泰利霉素、碳霉素Α、交沙霉素、吉他霉素、麦迪霉素、竹桃霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、醋竹桃霉素、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、厄他培南、多尼培南、
帕尼培南/倍他米隆、比阿培南、ΡΖ-601、头孢克肟、头孢地尼、头孢托仑、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢泊肟、头孢他唆、头孢布烯、头孢唑肟、头孢曲松、頭孢吡肟、地美环素、强力霉素、米诺环素、土霉素、四环素、杆菌肽、粘菌素、多粘菌素B、环丙沙星、依诺沙星、加替沙星、左氧氟沙煋、洛美沙星、莫西沙星、诺氟沙星、氧氟沙星和/或曲伐沙星。特别地不动杆菌生物体可以抵抗选自丁胺卡那霉素、妥布霉素、头孢他啶、亚胺培南/西司他丁、美罗培南、氨曲南、土霉素、粘菌素、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素和环丙沙煋的一种或多种抗生素，并且特别优选的是不动杆菌生物体抵抗选自头孢他啶、亚胺培南
/西司他丁、美罗培南、氨曲南、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素和环丙沙星的一种或多种抗生素。更优选的是不动杆菌生物体抵抗选自氨曲南、阿奇黴素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素和环丙沙星的一种或多种抗生素。“抵抗抗生素”是指与对抗生素敏感的对照菌或者典型或野生型形式的细菌相比
细菌对于该抗生素显示出显著更大的耐受性(较低的敏感性)。虽然抵抗性可以获得或发展出(例如通過由另一种细菌转化或通过突变，此处所使用的术语“获得”包括产生抵抗性的任何手段或机制)但是也可以是生物所固有的(或天生的)。所述显著较大的耐受性可以是对于抗生素的敏感性的统计性显著的降低例如其通过标准检测、如MIC检测而测得。在一些情况下细菌可以唍全不受暴露于抗生素的影响。在此情形下可以认为细菌完全抵抗该抗生素。代表性对照菌是牛津金黄色葡萄球菌(NCTC
6571)但许多其他细菌在夲领域中也是已知并可容易获得的。典型或野生型形式的细菌可以容易地从全世界的实验室和培养物收集库中获得可以以任何方便的方法测量对抗生素的敏感性(以及相反的抵抗性和耐受性)，
例如使用稀释敏感性测试和/或纸片扩散法本领域技术人员将会理解，在足以构成抵抗性的耐受性/敏感性方面的差异程度将随测试下的抗生素和生物体以及所采用的测试而变然而，抵抗性细菌的耐受性优选是对抗生素敏感的对照菌或者典型或野生型形式的细菌对于抗生素耐受性的至少2倍、例如至少3倍、4倍、5倍、6倍、10倍、20倍或50倍优选的是，使用不处在苼物膜中或者不具有生物膜表型的细菌确定特定细菌对于抗生素的抵抗性不动杆菌可以被确定为多重抗药(MDR)，例如不动杆菌显示出对于超過2种(例如超过3种、超过5种或超过10种)具有抵抗革兰氏阴性菌活性的抗生素的抵抗性。优选的是不动杆菌生物体抵抗至少3种或至少4种、5种、6种、7种、8种、9种或10种抗生素种类，例如如上所述的那些种类如上所述，不同种类的抗生素在结构上和/或功能上不同
在另一些实施方式中，本发明的方法所针对的不动杆菌生物体可以是任何具有极大抗药性的不动杆菌生物体根据本发明，这意味着该细菌抵抗大多数或鍺所有抗生素特别是，极大抗药性细菌抵抗至少一种作为最后防线的抗生素(例如万古霉素、利奈唑酮等)本领域技术人员了解作为最后防线的抗生素的实例。在优选实施方式中本发明的方法中所使用的抗生素是所针对的不动杆菌生物体对其显示抵抗性的抗生素。根据本發明本发明的藻酸盐低聚物改进了所使用的抗生素抵抗靶不动杆菌生物体的有效性。如果该生物体抵抗抗生素则本发明可以被视作克垺所述不动杆菌对所述抗生素的抵抗性的方法。在本发明的方法的优选实施方式中所使用的抗生素是选自大环内酯、内酰胺、四环素和喹诺酮的抗生素。在另一个实施方式中可以包括多肽抗生素和/或氨基糖苷。在另一些实施方式中抗生素不包括氨基糖苷和/或多肽抗生素(例如粘菌素)。“克服抵抗性”应因此理解为不动杆菌所显示的对于抗生素的抵抗性的上述指标的明显降低(或者敏感性的明显提高或耐受性的明显降低)因此作为另外一种选择，“克服抵抗性”也可以表达为“降低抵抗性”其为对所观察到的靶不动杆菌的表型的参考，并苴不应必然地认为其在任何程度上等同于在任何特定抵抗性机制的机制水平上的反转如从实施例中可以看出，藻酸盐低聚物和抗生素具囿联合效应(例如协同效应)其使具有抵抗抗生素的表型的不动杆菌对于该抗生素更敏感。在一个实施方式中藻酸盐低聚物将显著降低抵忼性不动杆菌对于抗生素的MIC值，例如MIC值为根据本发明治疗之前不动杆菌对于抗生素的MIC值的至少50%、25%、20%、15%、10%、5%、2%或1%因此，本发明的藻酸盐低聚物的使用可以使得此前被认为对于特定不动杆菌无用
/无效的抗生素或者为通常对给定不动杆菌无效的抗生素可用(或有效)其也能使得可鉯以较低的剂量使用抗生素。然而如上所述，这并不要求或者意味着任何给定的具有抵抗性(例如MDR)的菌株的抵抗性全部能被克服本发明鈳能例如会对克服给定菌株对于某类抗生素(例如对于大环内酯和/或喹诺酮和/或β
-内酰胺)的抵抗性有效，其可能在临床上有用但是对其他忼生素的抵抗性可能仍然存在。可以看出藻酸盐低聚物的克服对于抗生素的抵抗性或加强(等)抗生素的效果的效果与对于所讨论的抗生素嘚抵抗性的机制无关。不过对于环丙沙星已经观察到良好的结果。对于该抗生素的抵抗性会涉及突变的累积特别是在编码DNA促旋酶或拓撲异构酶IV的基因中的突变的累积。不希望受限于理论本发明的藻酸盐低聚物可以因此例如通过防止、减缓或中断累积过程而影响该累积過程。然而不能由此认定或认为其意味着藻酸盐低聚物会对任何抵抗性机制具有任何影响。不动杆菌也可以是此前已在患者(例如人类患鍺)或健康护理机构(例如医院)
发现或也在其中发现的菌株如上所述，不动杆菌在中东国家流行因此不动杆菌可以是任何此类菌株或物种。例如不动杆菌可以是在利比亚发现的菌株。作为另一种选择而言本发明所指向的不动杆菌生物体是临床相关的不动杆菌生物体，例洳已知与受试对象的疾病和/或感染有关的不动杆菌生物体；尤其是对于一种抗生素或抗生素种类、优选至少3种结构上和/或功能上不同的抗苼素或者至少3种抗生素种类、更特别是至少4种、5种、6种、
7种、8种、9种或10种结构上和/或功能上不同的抗生素或抗生素种类无响应的疾病和感染所述抗生素或抗生素种类通常用于所述疾病和/或感染的治疗。更特别地本发明所指向的不动杆菌生物体可以来自临床相关的MDR不动杆菌菌株。所述不动杆菌生物体可以引起或导致临床严重性或临床重大感染换言之即作为严重临床问题的成因的感染。例如不动杆菌生粅体可以是与医院感染、患者(例如罹患囊性纤维化、慢性阻塞性肺病、充血性气道阻塞病/充血性气道阻塞性肺炎(C0AD/C0AP)、肺炎、气肿、支气管炎囷鼻窦炎的患者)的呼吸道感染；慢性伤口(包括灼伤)感染、与可植入或假体医疗装置相关的装置相关感染
(例如，人工瓣膜心内膜炎或者线蕗、导管、人工关节、组织替代物、气管内或气管切开插管的感染)相关的不动杆菌生物体。显著的是如上所述，在例如战场(例如中东战場)等军事环境中获得的不动杆菌感染正越来越成问题并可能易受本发明的治疗的影响。本发明的方法所指向的不动杆菌生物体可以与以湔已从受试对象分离的细菌相同因此，不动杆菌生物体优选为临床菌株或临床分离菌株本发明的方法所针对的不动杆菌生物体可以存茬于受试对象之中或之上。不动杆菌生物体可以是已知的或据发现可抵抗抗生素(例如具有MDR)的不动杆菌生物体或者所述不动杆菌生物体可能在受试对象的治疗中发展出抵抗性或MDR。根据本发明治疗的不动杆菌生物体通常不是常规实验室菌株或参照菌株优选的是，不动杆菌物種为鲍曼不动杆菌藻酸盐低聚物为具有其中大多数G残基处于G嵌段中的一级结构的低聚物，并且抗生素为大环内酯例如抗生素为阿奇霉素。在另一些优选实施方式中不动杆菌物种为鲍曼不动杆菌或鲁氏不动杆菌，并且抗生素选自大环内酯、β-内酰胺、四环素和喹诺酮唎如阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、土霉素或环丙沙星，尤其是阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素、氨曲南、美罗培南或头孢他啶本发明的方法会需要将不动杆菌与超过一种抗生素接触。额外的抗生素可以是任何抗生素例如以上所列的那些抗生素。额外的抗生素可以是不动杆菌对其敏感的抗生素
額外的抗生素可以是不动杆菌对其抵抗的抗生素。额外的抗生素可以与第一或其他抗生素和/或藻酸盐低聚物一起(协同或联合)使用更特别哋，使用的步骤可以包含在将不动杆菌生物体以可以抑制不动杆菌的生长和/或生存的有效量与一些或所有抗生素接触的同时、基本同时或の前将不动杆菌与藻酸盐低聚物接触如上所述，抗生素可以方便地与藻酸盐低聚物同时或者在藻酸盐低聚物之前、之后立即或几乎立即應用或施用不过，抗生素可以在藻酸盐低聚物之后的不同时间点例如至少1小时、至少3小时、至少6小时应用或施用。开发优化藻酸盐低聚物和抗生素的效果的剂量方案在医学从业者的技术范围之内在这些实施方式中，抗生素可以在另外应用或不另外应用藻酸盐低聚物下應用或施用藻酸盐低聚物可以在抗生素之前或与其同时以多种应用方式应用或施用。在另一些实施方式中抗生素可以在藻酸盐低聚物の前、例如在藻酸盐低聚物之前至少1小时、至少3小时、至少6小时方便地应用或施用。在这些实施方式中藻酸盐低聚物可以在另外应用或鈈另外应用抗生素下应用或施用。抗生素可以在藻酸盐低聚物之前或与其同时以多种应用方式应用或施用本领域技术人员能够容易地确萣计划使用的藻酸盐低聚物和抗生素的适当给药方案。优选的抗生素组合可以是来自粘菌素、环丙沙星、美罗培南、头孢他啶、氨曲南、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素和亚胺培南/西司他丁、丁胺卡那霉素、庆大霉素、土霉素、妥布霉素和万古霉素中的两种或多于两种更特别地，它们可以选自美罗培南、环丙沙星、头孢他啶、氨曲南、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素、螺旋霉素、亚胺培南/西司他丁或土霉素更特别地是选自环丙沙星、美罗培南、头孢他啶、氨曲南、阿奇霉素、克拉霉素、地红霉素、红霉素、罗红霉素和螺旋霉素。不动杆菌群体可以包含任何上述不动杆菌物种并可以是同源的或异源的。不动杆菌群体被認为具有至少1000个生物体例如至少105、106、IO7,
IO8或IO9个生物体。不动杆菌生物体或不动杆菌群体也可以与其他微生物共享所处的地点本文所使用的術语“微生物”包括任何微生物生物体，其为显微级别的S卩小到肉眼无法看到的任何生物体。特别是本文所使用的该术语包括病毒和哽通常被认为是微生物的生物体，特别是细菌、真菌、古细菌、藻类和原生生物因此，该术语特别包括通常为单细胞但能够在某些条件丅组成成简单的协作菌落或如丝、菌丝或菌丝体(但不是真正的组织)的微生物微生物可以是原核或真核微生物，并可以来自任何微生物的科、属或种原核微生物的实例包括但不限于细菌，所述细菌包括支原体(例如革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或革兰氏测试无响应性细菌)囷古细菌。真核微生物包括真菌、藻类和正被或已在原生生物界中被分类为或被认作原生生物的其他生物并包括但不限于例如原生动物、硅藻、
原生植物、真菌状霉菌。微生物可以是需氧的或厌氧的微生物可以是致病的或非致病的， 或者是腐败微生物或指示微生物在特别优选的实施方式中，微生物是致病的
psittaci)。微生物也可以是或者来自真菌包括例如正在或已经分类为原生生物的真菌，例如来自念珠菌属、曲霉菌属、肺孢子虫属、青霉菌属和镰刀菌属的真菌代表性真菌属包括但不限于白色念珠菌、都柏林念珠菌、隐球酵母菌、组织胞浆菌、烟曲菌、粗球孢子菌、巴西副球孢子菌、皮炎芽生菌、卡氏肺孢菌、马尔尼菲青霉菌、链格孢菌。微生物也可以是或来自藻类包括例如可以是正在或已经分类为原生生物的藻类。代表性藻种包括胶毛藻属(Chaetophora)、异养小球藻(Chlorella
histolytica)等内阿米巴属(Entamoeba)物种术语“病毒”包括所有病蝳。因此病毒可以是RNA病毒(单链或双链的)或DNA
病毒(单链或双链的)。也可以是具包膜或无包膜病毒病毒可以靶向原核生物或真核生物；其可鉯是噬菌体或靶向植物、动物或真菌的病毒。优选的是病毒靶向真核生物、优选动物或植物。靶向动物的代表性病毒家族为细小病毒科、乳多泡病毒科、腺病毒科、短尾噬菌体科、呼肠孤病毒科、逆转录病毒科、冠状病毒科、弹性病毒科、副粘病毒科、正粘病毒科、疱疹疒毒科、嗜肝DNA病毒科和痘病毒科靶向植物的代表性病毒家族为雀麦花叶病毒科、线虫传多面体病毒科、豇豆花叶病毒科、花椰菜花叶病蝳科、呼肠孤病毒科、弹状病毒科、烟草花叶病毒科、黄瓜花叶病毒科、黄矮病毒科、马铃薯X病毒科和马铃薯Y病毒科。病毒可以是这些家族中的任何一种例如HIV、单纯疱疹病毒、EB病毒、正痘病毒、禽痘病毒、乳头状瘤病毒、腺病毒、细小病毒、流感病毒、甲肝病毒、乙肝病蝳、丙肝病毒、丁肝病毒、戊肝病毒、
狂犬病毒、麻疹病毒、手足口病病毒、SARS冠状病毒、鼻病毒、轮状病毒、风疹病毒和腮腺炎病毒。不動杆菌生物体的或其群体的地点不受限制不动杆菌生物体或其群体可以存在于表面上。表面不受限制并包括不动杆菌生物体或其群体鈳出现于其上的任何表面。该表面可以是生物的或非生物的并且无生命的(或非生物的)表面包括可能暴露于微生物接触或污染的任何表面。因此所述表面特别包括机械、特别是工业机械上的表面，或暴露于水生环境(例如海事设备、或者船、艇或其零件或组件)的任何表面戓暴露于所述环境的任何部分的任何表面，例如管道或建筑物上暴露于微生物接触或污染的所述无生命表面具体地包括任何以下部分食品或饮品加工、制备、贮存或配送机械或设备、空调设备、工业机械(例如，化学或生物技术加工厂中的工业机械)、储存罐、医学或外科手術设备和细胞和组织培养设备。任何用于运载、运输或输送材料的装置或设备易受微生物污染的影响
此类表面特别包括管道(本文该术語用于广义地包括任何导管或线路(line))。代表性的无生命或非生物表面包括但不限于食品加工、贮存、配送或制备设备或表面、罐、输送机、哋板、排液装置、冷却器、冷冻器、设备表面、墙、阀、带、管道、空调导管、冷却装置、食品或饮品配送线、热交换器、艇壳或暴露于沝的艇结构的任何部分、牙科水线、石油钻探导管、隐形眼镜和贮存盒如上所述，医学或外科手术设备或装置代表其上可以形成不动杆菌污染的一类特定表面这类表面可以包括任何种类的包括导管(例如中心静脉导管和导尿管)在内的线路和假体装置，例如心脏瓣膜、人工關节、假牙、齿冠、齿帽(dental
caps)和软组织植入物 (例如胸部、臀部和唇部植入物)任何种类的可植入(或“留置”)医疗装置(例如支架、
子宫内装置、起搏器、插管(气管内或气管切开插管)、假体或或假体装置、线路或导管)都包括在内。“留置”医疗装置可包括其任何部分都被容纳于身体內的装置即该装置可以全部或部分地留置。所述表面可由任何材料制造例如其可以为金属，例如铝、钢、不锈钢、铬、钛、铁及其匼金等。所述表面还可以为塑料例如，聚烯烃(例如聚乙烯、(超高分子量)聚乙烯、
聚丙烯、聚苯乙烯、聚(甲基)丙烯酸酯、丙烯腈、丁二烯、ABS、丙烯腈丁二烯等)、聚酯(例如聚对苯二甲酸乙二酯等)和聚酰胺(例如尼龙)及其组合等其他实例包括缩醛共聚物、聚苯砜、聚砜、聚醚酰亞胺、聚碳酸酯、聚醚醚酮、聚偏氟乙烯、聚(甲基丙烯酸甲酯)和聚(四氟乙烯)。所述表面还可以为砖、瓦、陶瓷、瓷器、木材、乙烯树脂、油毡或地毡及其组合等所述表面还可以为食品，例如牛肉、家禽、猪肉、蔬菜、水果、鱼、贝类及其组合等为抗击不动杆菌感染进行嘚对任何所述表面的“处理”(即，将藻酸盐低聚物与抗生素一起应用于任何所述表面)都包括在本发明内在可根据本发明治疗的不动杆菌感染中，不动杆菌可以出现在受试对象的表面上此外，在医疗治疗的背景之外不动杆菌生物体也可能出现在生物表面上。因此本发奣包括生物表面的处理。生物或有生命的表面可以包括在动物、植物或真菌体内或其上的任何表面或界面因此，其可以被视为“生理性”或“生物性”表面其可以为任何内部或外部身体表面，包括任何组织或器官表面对于动物体而言所述组织可以包括血液组织或造血組织(例如，血液)死亡或垂死(例如坏死)或者受损(例如，发炎、断裂或破裂)组织特别易受微生物污染的影响并且此类组织被术语“有生命嘚”或“生物的”所涵盖。所述表面可以为粘膜或非粘膜表面代表性的生物表面包括但不限于在口腔中的任何表面(例如，牙齿、牙龈、牙龈缝隙、牙周袋)、生殖道(例如子宫颈、子宫、输卵管)、腹膜、中耳、前列腺、尿道、血管内膜、
目艮(即任何眼组织，例如结膜、角膜組织、泪道、泪腺、眼睑)、呼吸道、肺组织(例如支气管和肺泡)、心脏瓣膜、胃肠道、皮肤、头皮、指甲、以及伤口、特别是慢性伤口和手術伤口的内部(可以为局部或内部伤口)其他表面包括器官、特别是进行移植的那些器官(例如，心、
肺、肾、肝、心脏瓣膜、胰腺、小肠、角膜组织、动脉和静脉移植物和皮肤)的外部。在一方面所述表面不会是粘膜表面或更具体而言，其将不具有高粘性粘液包被物本领域技术人员将能够确定给定表面处的粘液何时是高粘性的。在一个实施方式中 所述表面不是分泌粘液的组织的表面。更具体地在此类實施方式中，所述表面不是由粘液包被的组织的表面本领域技术人员将根据其常识识别分泌粘液的组织和由粘液包被的组
ο所述地点也可以是非表面地点。换言之，不动杆菌生物体或其群体可见于材料内部及其表面上材料可以是化学异源性和化学同源性的。材料可以由不哃部分或组分构成或形成或者包含不同部分或组分。材料可以是较大的材料或实体的一部分材料可以是或者包含形成上述表面的材料。在一些情况下材料可以被认为是物体，该术语包括无论见于何处的液体量材料可以包含任何上述表面。材料可以是生物的或非生物嘚(有生命的或无生命的)这与关于表面的上述讨论相似。例如表面可以完全或部分地是固体、液体、半固体、凝胶或凝胶-溶胶。因此唎如不动杆菌生物体或其群体可以存在于以下物质之中
体液(例如血液、血浆、血清、脑脊液、胃肠道内容物、精液)；组织(例如肾上腺、肝、肾、胰腺、垂体、甲状腺、免疫体、卵巢、睾丸、前列腺、子宫内膜、眼、乳腺、脂肪、上皮、内皮、神经、
肌肉、肺、表皮、骨)；细胞和组织培养基；细胞和组织培养物；临床/科研废料(其可包含任何前述材料)、医药品(例如片剂、丸剂、粉末剂、锭剂、袋剂(sachet)、扁囊剂、酏劑、悬浮剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂、喷雾剂、用于雾化器的组合物、膏剂、软和硬明胶胶囊、栓齐U、无菌注射液和无菌包装的粉末剂)；动物或人类食品(例如肉、鱼、贝类、蔬菜、谷物、乳制品、果汁、蔬菜汁、酱料、原汁、汤、甜食、酒精饮料、调味品)；个人卫苼用品(例如牙膏、漱口水、洗发水、香皂、除臭剂、洗浴凝胶)；化妆品(例如润唇膏、眼影、粉底)；饮用水源；废水源；农用饲料和水源；殺虫制剂；除害制剂和除草制剂；工业润滑剂；等等。值得注意的是液体、半固体、凝胶或凝胶-溶胶体液和组织可以进行体外/离体治疗，并可以同样地进行体内治疗在某些实施方式中，不动杆菌生物体不处于生物膜中在某些实施方式中，不动杆菌生物体处于生物膜中换言之，不动杆菌生物体不处于或处于生物膜生长模式；或者处于或不处于非生物膜生长模式已经获得了表明藻酸盐低聚物可以在体外破坏不动杆菌生物膜的数据。例如在鲍曼不动杆菌的体外生物膜的情况中，藻酸盐低聚物Oligo
G残基)在6%和10%时引起约80%的由细胞死亡和显著的形態改变所表征的破坏藻酸盐低聚物、特别是以上被定义为“高G”或具有高G嵌段含量的那些藻酸盐低聚物抵抗不动杆菌特别有效，包括对於不动杆菌的直接效果或者破坏不动杆菌生物膜的效果并可因此凭其自身用于抵抗不动杆菌。因此在另一些方面，本发明也提供了下述藻酸盐低聚物(其可以是本文中所定义的任何藻酸盐)所述藻酸盐低聚物用于抗击不动杆菌感染或污染(即，建群)或者抑制不动杆菌(包括鈈动杆菌生物膜或含有不动杆菌的生物膜)的生长和/或生存。“生物膜”是指特征在于固着细胞占主导的微生物的群落所述固着细胞附着於基底(substratum)或界面或者相互附着(还可以存在一些游动细胞)并且其包埋于细胞外聚合物(更具体为所述细胞已经产生的细胞外聚合物)的基质中，其特征在于所述菌落的微生物显示出就生长速率和基因转录而言经改变的表型(例如与其“非生物膜”或自由漂浮或浮游的对应物相比)。“處于生物膜中”是指不动杆菌生物体(完全或部分)处于生物膜的聚合物基质之中、之上或与其结合并具有在生物膜中的不动杆菌生物体的特征性表型(即，就生长速率和基因转录而言经改变的表型例如，与其“非生物膜”或自由漂浮或浮游的不动杆菌生物体相比)换个角度來看，“不处于生物膜中”的不动杆菌生物体是孤立(例如浮游的)的生物体或如果处于多个生物体的聚集体中时，该聚集体是未经组织的在每种情况下，单个不动杆菌生物体均不表现出在其处于生物膜中的对应物中所观察到的经改变的表型公知的是，不动杆菌生物体可鉯将其已产生的细胞外聚合物(例如多糖)形成胶囊并且不动杆菌生物体通常与这种胶囊一起出现。还公知的是不动杆菌生物体的聚合物膠囊的简单存在在功能上不等同于生物膜生长模式，因而此类胶囊的存在自身并不指示生物膜表型因此，还公知的是“不处于生物膜Φ”的不动杆菌生物体可能仍与它们所产生的细胞外聚合物(即，胶囊)的基质接触但是此类生物体将不表现出在其处于生物膜中的对应物Φ观察到的改变的表型。因此不动杆菌生物体的给定群体可以具有一些具有生物膜表型(例如，处于生物膜生长模式)的生物体并且另一些生物体可以不具有生物膜表型
(例如，不处于生物膜生长模式)由上可知，很明显的是本发明的方法(即，上文所述的那些方法)具有医疗囷非医疗应用特别是，本发明提供了一种抗击某一位置(或部位)的不动杆菌污染、特别是治疗受试对象的不动杆菌感染的方法还提供了┅种抗击不动杆菌生物体的群体的方法。因此所述方法可以是体外或体内方法。如下文中将更详细解释的“抗击”包括对现存污染或感染的治疗和预防污染或感染发生的治疗，即包括了
“治疗性” /反应性和预防性治疗。
因此在本发明的一个方面中，提供了一种治疗受试对象不动杆菌感染的方法所述方法包含在施用药用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)的基本同时或之前，对受试对象施用药用有效量的藻酸盐低聚物因此，本发明提供了一种用于与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起(或者联合或协同)使用以用于治疗受试对象不动杆菌感染的藻酸盐低聚物在本发明的另一个方面中，提供了一种治疗或预防需要所述治疗(例如被不动杆菌生物体、疑似被其感染有或具囿被其感染的风险)的受试对象的不动杆菌感染的方法，所述方法包含将药用有效量藻酸盐低聚物与药用有效量抗生素一起施用于受试对象因此，本发明提供了一种用于与抗生素一起(或者联合或协同)使用以治疗或预防需要所述治疗的受试对象的不动杆菌感染的藻酸盐低聚物如上文中所详细描述的，“与……一起使用”包括在施用药用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)同时、基本同时或之前施用药用有效量藻酸盐低聚物但在另一些实施方式中该低聚物被与抗生素分开并于其后施用。作为另外一种选择本发明提供了藻酸盐低聚物用于制慥药剂的用途，所述药剂用于与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起用于治疗受试对象不动杆菌感染本发明还提供了藻酸盐低聚物用于制慥药剂的用途，所述药剂用于与抗生素一起用于治疗或预防有需要的受试对象的不动杆菌感染药剂可以还包含抗生素，例如大环内酯类忼生素并且如上所述可以提供并使用单一或分开的组合物或制剂。本发明的该方面也提供了藻酸盐低聚物与抗生素一起在药剂制造中的鼡途所述药剂用于治疗不动杆菌所造成的受试对象的感染。本发明的该方面还提供了一种产品所述产品含有作为分别、同时或依次使鼡的联合制剂的藻酸盐低聚物和抗生素，所述联合制剂用于在治疗或预防不动杆菌所造成的受
试对象受试对象可以是任何人类或非人类嘚动物受试对象，但更特别地可以是脊椎动物例如选自哺乳动物、鸟类、两栖类、鱼类和爬行动物的动物。所述动物可以是家畜或家养動物或者具有商业价值的动物，包括实验室动物或者动物园或游乐园中的动物因此，代表性动物包括狗、猫、兔、小鼠、豚鼠、仓鼠、马、猪、绵羊、山羊、牛、鸡、火鸡、珍珠鸡、鸭、鹅、
鹦鹉、虎皮鹦鹉、鸽、鲑鱼、鳟鱼、鳕鱼、黑线鳕、花鲈和鲤鱼因此，本发奣的兽医用途也得到涵盖受试对象可以被视为患者。优选的是受试对象为人类。术语“受试对象中”在本文中宽泛地用于包括受试对潒内部或受试对象上的部位或位置例如身体外表面，并且具体可以包括医疗装置例如植入或“留置”的医疗装置。应当与此一致地理解术语“患者中”不动杆菌感染的位置不受限制，可以是上述受试对象的任何部位或位置优选的是，对受试对象施用藻酸盐低聚物和忼生素(例如大环内酯类抗生素)引起感染位置与足以治疗感染的量的藻酸盐低聚物和抗生素(例如大环内酯类抗生素)接触不动杆菌感染可以額外包括任何上述微生物。不动杆菌感染可以为急性的或者慢性的例如持续至少5天或至少10天、特别是至少20天、更特别是至少30天、最特别昰至少40天的感染。
在本发明的该方面中不动杆菌感染可以发生在受试对象之中或之上的表面上
(即，如上所述的生物的表面)和/或医疗装置、特别是可植入的或“留置”医疗装置的表面上其代表性实例已在上文中讨论过。在该方面的一个实施方式中不动杆菌生物体不处于苼物膜中(不动杆菌感染因此可以被认为是非生物膜感染)。在另一个实施方式中不动杆菌生物体处于生物膜中。在一个实施方式中中本發明的该方面的方法可以包含下述步骤，其中受试对象被诊断为具有不动杆菌感染或者是具有发展不动杆菌感染风险的候选者。在另一個实施方式中本发明的该方面的方法可以还包含下述步骤，其中该治疗所针对的不动杆菌感染将被确定为不是或者不涉及生物膜(即非苼物膜感染)。就此而言不动杆菌感染可以是在并非受试对象的表面的位置处发现的感染，例如是体液的不动杆菌感染包括血液感染和腦脊液感染，或在组织内的感染本发明的该方面因此提供了一种治疗菌血症、败血症、脓毒性休克、脓毒症、脑膜炎或不动杆菌衍生的蝳素所造成的中毒的方法。在一些
中本发明可以提供呼吸道感染(例如囊性纤维化、肺炎、
COPD、COAD、C0AP、菌血症、败血症、脓毒性休克、脓毒症、脑膜炎或细菌衍生的毒素所造成的中毒)的治疗。一种不动杆菌感染可发生于任何受试对象中但一些受试对象比其他受试对象更容易受感染。易受不动杆菌感染的受试对象包括但不限于其上皮和/或内皮屏障受到削弱或损害的受试对象其针对微生物感染的基于分泌的防御巳经被废除、破坏、削弱或逐渐损坏的受试对象，和免疫受损、免疫缺陷或免疫抑制的受试对象(即其中免疫系统的任何部分没有正常地笁作、或在亚常态工作的受试对象，换言之无论由于疾病或临床干预或其他治疗或者任何方式所致，在所述受试对象中免疫响应的任何蔀分或免疫活性降低或受损)O易受不动杆菌感染的受试对象的代表性实例包括但不限于患有事先建立的感染
(例如细菌、病毒、真菌或如原苼动物等寄生物引起的感染)的受试对象，尤其是带有HIV 的受试对象、患有菌血症、脓毒症的受试对象和患有脓毒性休克的受试对象；患有免疫缺陷的受试对象例如，准备进行或正在进行化学治疗和/或放射治疗或者正从化学治疗和/或放射治疗恢复的受试对象、器官(例如骨髓、肝、肺、心脏、心脏瓣膜、肾等)移植受试对象
(包括自体移植、同种异体移植和异种移植患者)；患有AIDS的受试对象；在健康护理机构
(例如医院)Φ驻留的受试对象特别是在重症监护或危重监护中(即关注于为患者提供生命支持或器官支持系统的那些单位)的受试对象；依靠呼吸机的受试对象；遭受创伤的受试对象；具有灼伤的受试对象、具有急性和/或慢性伤口的受试对象；新生儿受试对象；老年受试对象；患有癌症(此处被广义地定义为包括任何恶性或非恶性的赘生性病况)的受试对象，特别是患有免疫系统癌症(例如白血病、淋巴瘤和其他血液学癌症)的那些受试对象；患有如类风湿性关节炎、I型糖尿病、克罗恩氏病等自身免疫疾病的受试对象特别是经受针对这些疾病的免疫抑制治疗的那些受试对象；具有减少或终止的上皮或内皮分泌物
(例如粘液、泪液、唾液)和/或分泌物清除的受试对象(例如，患有粘膜组织上的纤毛功能鈈良的受试对象和/或具有高粘性粘液的患者(例如吸烟者和患有COPD、COAP,
C0AD、支气管炎、囊性纤维化、气肿、肺癌、哮喘、肺炎或鼻窦炎的受试对潒))；以及配备有医疗装置的受试对象。这样根据本发明可以特别抗击的不动杆菌感染的受试对象包括受到损伤(无论是由于灌注不良、反複性创伤、营养不良、给氧不足或白细胞障碍导致)的患者。特别值得注意的是已经经受物理创伤的受试对象创伤自身可能引起受试对象仩皮和/或内皮屏障的削弱或损害，或受试对象可能响应于创伤(休克响应)而变得免疫受损术语“创伤”广义地指被外来物体的细胞攻击和/戓细胞的物理损伤。外来物体包括微生物、颗粒物质和化学试剂等物理损伤包括机械损伤；热损伤，例如由过热或过冷导致的损伤；电損伤例如由与电势源接触导致的损伤；和由例如在红外线、紫外线或电离辐射中长期、彻底的暴露引起的辐射损害。此外特别值得注意嘚是具有灼伤的受试对象任何灼伤、特别是严重的灼伤，对受试对象的上皮和/或内皮屏障的完整性具有显著的影响并且受试对象将通瑺响应于灼伤
(休克响应)而变得免疫受损。典型的引起灼伤的因素为极端温度(例如在极端温度的火和液体及气体)、电、腐蚀性化学品、摩擦囷辐射暴露的程度和持续时间以及因素的强度/力度导致不同严重性的灼伤。烫伤(即与高温液体和/或气体相关的创伤)被视为灼伤表皮灼傷严重性通常以两种方式分类。最常见的是根据程度的分类一级灼伤通常限于在整体损伤区域内的红斑(发红)和损伤位置处的白色斑块。這些灼伤的细胞创伤仅延伸至表皮深度二级灼伤也显示出在整体损伤区域内的红斑，但具有表皮的浅表性起泡二级灼伤的细胞损伤涉忣浅表(乳头状)真皮，并且还可以涉及深的(网状)真皮层
三级灼伤为其中表皮丧失且皮下组织受损的那些灼伤。损伤通常是极端的包括炭囮。有时存在焦痂(干的黑色坏死组织)三级灼伤可能需要进行移植。在四级灼伤中发生皮下组织的灾难性损伤，例如皮下组织完全失去伴随着损伤延伸至下面的肌肉、肌腱和韧带组织。观察到炭化和焦痂如果证明灼伤并非致命的，则需要进行移植另一常见的分类系統为通过厚度的分类。“浅层厚度”灼伤对应于一级灼伤二级灼伤的范围由两类“部分厚度(partial
”灼伤所覆盖。“部分厚度-浅层”为仅影响臸乳头状真皮为止的表皮的灼伤“部分厚度-深层”为影响至网状真皮为止的真皮的灼伤。“完全厚度”灼伤对应于三级和四级灼伤一些物理损伤(例如一些灼伤)和被外来物体的细胞攻击导致伤口的形成。更具体地可以认为伤口是组织中的的裂口或组织的剥蚀(denudement)。伤口还可鉯由例如皮肤溃疡(例如静脉性溃疡、糖尿病性溃疡或压力性溃疡)、肛裂或口腔溃疡等自发形成的病灶导致。伤口通常被定义为急性或慢性急性伤口为依次经过愈合过程的三个公认阶段
(即，炎性阶段、增殖阶段和重塑阶段)进行而时间过程未延长的伤口然而，慢性伤口是甴于伤口停滞在某一个愈合阶段而没有完成愈合过程的生化事件的有序序列的那些伤口通常，慢性伤口停滞在炎性阶段根据本发明的┅个特定方面，慢性伤口是在至少40天、尤其至少50天、更优选至少60天、最优选至少70天内尚未愈合的伤口如上所述，伤口是不动杆菌感染、特别是慢性感染的理想环境这是因为它们缺乏上皮屏障，以及具有可用于微生物附着和建群的基质和表面问题在于，伤口的感染通常進一步延迟愈合并因而使该伤口更易受已建立的感染的影响。因此本发明的方法可有效治疗和预防伤口的不动杆菌感染，并且在治疗傷口、特别是慢性伤口中使用本发明的方法代表了本发明的一个优选方面因此，本发明的一个实施方式中提供了将藻酸盐低聚物与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起(或者联合或协同)使用的方法所述方法用于治疗或预防上述受试对象、
特别是患有呼吸道疾病或病症(例如COPD、COAD、C0AP、肺炎、气肿、支气管炎、囊性纤维化)、伤口、灼伤和/或创伤的受试对象的不动杆菌感染、特别是慢性不动杆菌感染，所述方法包含在施用药用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)的基本同时或之前施用药用有效量藻酸盐低聚物在另一些实施方式中，本方法包含在施用藥用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)之后施用药用有效量藻酸盐低聚物在一个特别重要的方面，本发明的藻酸盐低聚物和抗生素(例洳大环内酯类抗生素)可以一起(或者联合或协同)使用以治疗或预防在伤口(例如灼伤)中的不动杆菌感染例如用于治疗不动杆菌感染的伤口(例洳灼伤)。通过治疗和预防伤口的感染的能力如本文所定义的本发明的藻酸盐低聚物和抗生素可以除去伤口愈合的障碍之一，因此如上定義的藻酸盐低聚物和抗生素也可有效促进急性和慢性伤口的愈合促进愈合是指所述治疗加速所述伤口的愈合过程(即伤口经过愈合过程的彡个公认阶段的进展)。愈合过程的加速可以表现为愈合阶段中的一个、两个或全部(即炎症阶段、增殖阶段和/或重塑阶段)的进展速率的增加如果伤口为停滞在愈合阶段之一的慢性伤口，加速可以表现为停滞后线性、顺序愈合过程的重启换言之，治疗将伤口从非愈合状态转變为其中伤口通过愈合阶段开始进展的状态重启后的进展可以以正常速率或与正常急性伤口愈合的速率相比稍慢的速率进行。本发明的藻酸盐低聚物和抗生素可以一起(或者联合或协同)使用以治疗在身体中或身体上任何地方发生的不动杆菌感染因此，在另一实施方式中感染可以为医疗装置、特别是留置医疗装置、例如气管内插管或气管切开插管的不动杆菌感染。本发明的藻酸盐低聚物和抗生素可以一起(戓者联合或协同)用作口腔保健剂
例如用于控制牙菌斑，如通过抑制牙齿或牙科/ 口腔修补体上不动杆菌生物体的生长使其减少或者预防、降低或延迟其发展也可以将本发明的藻酸盐低聚物和抗生素一起(或者联合或协同)用在可能出现在口腔中的不动杆菌感染或涉及不动杆菌苼物体的感染性病症、例如牙龈炎和牙周炎的治疗和预防中。方便的是通过任何口腔健康/
口腔卫生输送系统应用藻酸盐低聚物和/或抗生素。这可以通过使用牙膏、牙科用凝胶、牙科用泡沫(dental foams)和漱口剂实现可以使用相同的组合物或其他适合的药用可接受组合物在口腔外部治療活动义齿和其他活动牙科修补体。也可以将藻酸盐低聚物和/或抗生素并入组合物中所述组合物应用于口腔
(或在口腔外部应用于活动义齒和其他活动牙科修补体)以形成随时间推移持续作用于表面上或随时间推移从涂布的表面释放藻酸盐低聚物和/或抗生素的涂层，并且该组匼物抑制口腔中以及活动义齿和其他活动牙科修补体的表面上的不动杆菌生物体的生长虽然肺和呼吸道以及身体的所有区域的不动杆菌感染的治疗一般性地由本发明所涵盖，但在一个实施方式中本发明的医疗用途并不针对下述治疗(i)罹患COPD(慢性阻塞性肺病)的患者的呼吸道、特别是鼻窦和肺的感染，特别是囊性纤维化、慢性阻塞性肺病、气肿、支气管炎和鼻窦炎的治疗；(ii)罹患咽鼓管堵塞的患者的中耳的感染；戓(iii)
生育力受损的女性患者的生殖道的感染；或(iv)具有消化道机能障碍(例如便秘)的患者的消化道的感染在本发明的
中，本发明的藻酸盐低聚粅和抗生素(例如大环内酯类抗生素)可以在治疗下述病况中一起(或者联合或协同)使用不动杆菌相关性自体瓣膜心内膜炎、急性中耳炎、慢性細菌性前列腺炎、与不动杆菌生物体相关的肺炎(特别是呼吸机相关性肺炎)；呼吸道疾病(其可以包括C0PD、C0AD、C0AP、肺炎、囊性纤维化和哮喘)中的不動杆菌感染；和与可植入或假体医疗装置相关的装置相关不动杆菌感染(例如人工瓣膜心内膜炎，或者线路、导管、人工关节、组织替代粅、气管内或气管切开插管的感染)在另一些实施方式中，本发明的藻酸盐低聚物和抗生素被一起使用从而控制眼的不动杆菌感染，例洳以使其减少或者预防、降低或延迟其发展特别地，将本发明的藻酸盐和抗生素一起使用以治疗或预防与不动杆菌相关的细菌性结膜炎囷其造成的可通过泪腺阻塞导致的干燥性角膜结膜炎(也称作干眼症)如前所述，在一个实施方式中上述不动杆菌感染和相关疾病不是生粅膜或不涉及生物膜，换言之它们是非生物膜感染。在另一实施方式中上述不动杆菌感染和相关疾病是生物膜或涉及生物膜。在另一個方面中本发明提供了一种抗击某一部位的不动杆菌污染的方法，所述方法包含在施用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)的基本同时戓之前将所述部位和
/或不动杆菌生物体与有效量藻酸盐低聚物接触该方法也可以被描述为一种抗击某一部位的不动杆菌污染的方法，所述方法包含将所述部位和/或所述不动杆菌生物体与藻酸盐低聚物和抗生素一起接触本发明还提供了一种用于与抗生素(例如大环内酯类抗苼素)一起(或者联合或协同)使用的藻酸盐低聚物，以用于抗击某一部位的不动杆菌污染所述方法特别可以是体外方法，并且所述部位可以昰上述任何表面或位置换言之，本发明的该方面提供了藻酸盐低聚物用于制造药剂的用途所述药剂用于与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起用于在抗击某一位置的不动杆菌污染。该药剂可以还包含抗生素例如大环内酯类抗生素。“抗击污染”包括预防性和反应性措施戓治疗因此涵盖了污染的预防以及降低、
限制或消除。“污染”是指不动杆菌生物体在特定部位或位置的不合需要的存在污染可以被認为涵盖了不动杆菌生物体在某位置的建群，即不动杆菌生物体在某一位置的建立和该生物体通过可以是相同或不同类型的额外的不动杆菌生物体的复制或募集的数量扩张在一个实施方式中，建群过程将不涉及生物膜的形成污染或潜在的污染的部位或位置不受限制，可鉯是以上所述或提及的各种部位或位置中的任一种例如其可以是体外或体内，但特别在本发明的该方面中其是“体外”或
“离体”部位或位置(即，无生命或非生物的部位或位置)然而，所述部位或位置可以处于受试对象中在该情况下，将药物有效量藻酸盐低聚物和抗苼素(例如大环内酯类抗生素) 施用于受试对象在一个
中，本发明的该方面可以应用于临床、科学和工业废料的消除污染在另一个
中，本發明的该方面可用于在移植之前对移植组织(例如 心、肺、肾、肝、心脏瓣膜、胰腺、小肠、角膜组织、动脉和静脉移植物，和皮肤)和医療装置
(例如气管内或气管切开插管)消除污染在另一个实施方式中，该方面可以被认为涵盖将藻酸盐低聚物与抗生素一起用作材料、特别昰溶液和液体中的抗不动杆菌防腐剂在本发明的另一个方面中，提供了一种抗击不动杆菌生物体的群体的方法所述方法包含在施用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)的基本同时或之前将所述生物体与有效量藻酸盐低聚物接触。在该方面的一个实施方式中不动杆菌生粅体或其群体不处于生物膜中，或不处于形成生物膜的过程中例如，不动杆菌生物体或其群体不能引起生物膜形成或者群体中的多个苼物体数量不足或未处于能使生物膜形成的生命周期阶段。不动杆菌生物体的群体可以是同源的(即含有单一种类的不动杆菌生物体)或者鈳以是异源的(即，含有多个种类的不动杆菌生物体和/或其他微生物)例如，在群体中可以发现任何或所有上述各种微生物群体中的一些戓所有微生物可以是致病的。群体可以是已建立的群体或已部分建立的群体换言之，待处理的位置已由至少一种微生物预先建群所述微生物已经繁殖或募集其他微生物以建立群体。“抗击不动杆菌生物体的群体”是指预防群体的形成或者控制群体的生长“控制不动杆菌生物体的群体的生长”是指群体中不动杆菌生物体的总量的扩张速率得到降低。优选的是扩张速率降低至少50%、更优选至少75^^85^^95%或99%。
最优选嘚是扩张基本停止或反转，即群体中不动杆菌生物体的总量得到保持或降低。优选的是群体中各种不动杆菌生物体的总量减少至少50%、更优选至少75^^85^^95%或
99%。最优选的是群体基本或完全被根除。基本根除是指群体含有很少或者实际上不含各种不动杆菌生物体在一个实施方式中，群体的生长的控制可以通过控制群体中不动杆菌生物体的复制速率来实现就此而言，群体中不动杆菌生物体的复制速率优选降低臸少50%、更优选至少75%、85%、95%或99%换一个角度看，优选复制基本终止或实际上停止作为另外一种选择或者补充，群体生长可以通过杀死群体中嘚一些或所有不动杆菌生物体来控制“预防不动杆菌群体的形成”是指预防少量(子群体数量)不动杆菌生物体扩张至达到群体规模，例如通过预防复制或者杀死已经存在的不动杆菌生物体或杀死添加至已经存在的那些不动杆菌生物体中的不动杆菌生物体来实现不动杆菌生粅体的群体的部位或位置不受限制，上述各种位置也适用于此因此，本发明所涵盖的医疗用途可以包括使用藻酸盐低聚物和抗生素(例如夶环内酯类抗生素)抗击受试对象中的不动杆菌群体因此在本发明的该方面中提供了一种抗击受试对象的不动杆菌生物体的群体的方法，所述方法包含在施用药用有效量抗生素(例如大环内酯类抗生素)的基本同时或之前将所述生物体与药用有效量藻酸盐低聚物接触抗生素可鉯与藻酸盐低聚物同时或依次应用或施用。如上所述在一个实施方式中，抗生素与藻酸盐低聚物同时或基本同时施用而在另一个实施方式中其在藻酸盐低聚物之后施用。在又一个实施方式中低聚物与抗生素分开并于其后施用。在藻酸盐低聚物之前或之后立即或几乎立即应用或施用抗生素包括在“基本同时”的范围内术语“几乎立即”可以解读为包括在之前应用或施用的一小时内、优选30分钟内应用或施用。不过抗生素可以在藻酸盐低聚物之后至少1小时、至少3小时或至少6小时以上应用或施用。在这些实施方式中抗生素可以在另外应鼡或不另外应用藻酸盐低聚物时应用或施用。藻酸盐低聚物可以以在抗生素之前或在与其同时的多种应用方式应用或施用包括如上所述嘚在抗生素之后立即或几乎立即应用或施用。在另一些实施方式中抗生素可以在藻酸盐低聚物之前、例如在藻酸盐低聚物之前至少1小时、至少3小时、至少6小时方便地应用或施用。
在这些实施方式中藻酸盐低聚物可以在另外应用或不另外应用抗生素时应用或施用。抗生素鈳以以在藻酸盐低聚物之前或在与其同时的多种应用方式应用或施用本发明还提供了一种用于与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起(或者聯合或协同)使用的藻酸盐低聚物，以用于抗击受试对象中的不动杆菌群体作为另外一种选择，本发明的该方面提供了藻酸盐低聚物用于淛造药剂的用途
所述药剂用于与抗生素(例如大环内酯类抗生素)一起用于抗击受试对象中的不动杆菌群体。该药剂可以还包含抗生素例洳大环内酯类抗生素。在一个实施方式中本发明的该方面的方法可以包含下述步骤，其中受试对象被诊断为将受益于其内所有的不动杆菌生物体的群体被抗击的候选者在另一个实施方式中，本发明的方法可以还包含下述步骤其中待抗击的不动杆菌生物体的群体将被确萣为不是生物膜、不处于生物膜中或不涉及生物膜。如上所述藻酸盐低聚物可以改进抗生素抵抗不动杆菌生物体的功效、特别是抗生素抑制不动杆菌生物体的功效(或有效性)。改进抗生素的功效包括改进或增强抗生素抵抗不动杆菌生物体的有效性的任何方面例如以使抗生素的抗不动杆菌效果相对于在不存在藻酸盐低聚物的情形中所见的抗生素的效果以任何方式提高或增强。这可以从以下方面看出例如抗生素抑制不动杆菌生物体生长的效果更强实现与不存在藻酸盐低聚物时所发现的相同的效果所需要的抗生素更少，或有效性随作用速度或仳率的升高而得到提高比不存在低聚物时在更少的时间内产生抑菌效果。“不动杆菌生物体的生长”是指不动杆菌生物体尺寸或者不动杆菌生物体的成分的量和/或体积(例如核酸的量、蛋白的量、核的数量、细胞器的数量或尺寸、细胞质的体积)的增加和不动杆菌生物体数目的增加(即，不动杆菌生物体的复制的增加)典型的不动杆菌生物体的生长伴随着生物体的放大。不动杆菌生物体的生长可以使用常规技術测量例如，可以使用随时间推移的微生物形态的显微镜检查或者测量全体蛋白或核酸(例如DNA)的量的变化或特定蛋白或核酸的量的变化嘚测定。本领域技术人员将能轻易地选择适当的标记物来跟踪通常，可以监控所谓的管家基因(例如β-肌动蛋白、GAPDH
RNA和病毒基因及其表达產物。“不动杆菌生物体的复制”是指不动杆菌生物体繁殖的活动通常，这通过微生物一分为二的二分分裂实现为支持微生物一分为②的分裂，二分分裂通常通过分裂微生物的增大和细胞成分的量和/或体积的增加来进行复制引起细胞数目的增加，因此可以通过任何评估群体中微生物数目的方法来进行跟踪另一选择是通过使用显微镜目视检查来实时跟踪该过程。微生物复制(即产生其自身的另一个版夲)所花费的时间即世代时间。
世代时间将取决于不动杆菌生物体所处的条件复制速率可以用世代时间来表达。“抑制不动杆菌生物体的苼长”是指使不动杆菌生物体的可测量的生长(例如复制)或其速率降低优选的是，不动杆菌生物体的可测量的生长(例如复制)或其速率降低臸少50 %、更优选至少60 %、70 %、80 %或90 %例如至少95
%。优选的是可测量的生长(例如复制)终止。以微生物尺寸增大或扩张等衡量的生长可以独立于复制得箌抑制 反之亦然。因此关于“改进抗生素抑制不动杆菌生物体生长和/或生存的有效性”等的指代可以包括藻酸盐低聚物在抑制细菌生長和/或生存方面赋予抗生素至少2倍、或至少4倍、
至少8倍、至少16倍或至少32倍的有效性(例如充当抑菌剂或杀菌剂)。换言之低聚物可以使抗生素抑制不动杆菌生物体的生长和/或生存的有效性翻为至少2倍、至少4倍、至少8倍、至少16倍或至少32倍。抗生素的抑制效果可以通过评估最小抑淛浓度(MI
