生物分子特异性结合之间的相互结合主要依赖于什么力?这些力包括哪几种

核医学教研室年度教学工作总结 篇一:核医学科最新个人年度总结范文 核医学科工作岗位 =个人原创有效防止雷同,欢迎下载= 转眼之间一年的光阴又将匆匆逝去。回眸過去的一年在×××(改成核医学科岗位所在的单位)核医学科工作岗位上,我始终秉承着“在岗一分钟尽职六十秒”的态度努力做好核医学科岗位的工作,并时刻严格要求自己摆正自己的工作位置和态度。在各级领导们的关心和同事们的支持帮助下我在核医学科工莋岗位上积极进取、勤奋学习,认真圆满地完成今年的核医学科所有工作任务履行好×××(改成核医学科岗位所在的单位)核医学科工莋岗位职责,各方面表现优异得到了领导和同事们的一致肯定。现将过去一年来在×××(改成核医学科岗位所在的单位)核医学科工作崗位上的学习、工作情况作简要总结如下:一、思想上严于律己不断提高自身修养 一年来,我始终坚持正确的价值观、人生观、世界观并用以指导自己在×××(改成核医学科岗位所在的单位)核医学科岗位上学习、工作实践活动。虽然身处在核医学科工作岗位但我时刻关注国 篇二:核医学出科小结 核医学出科小结 时间飞逝,第一站核医学实习即将结束似乎以习惯了这样的工作环境,也渐渐的融入了這个大家庭面对即将的出科,有太多的不舍 回顾短短的三周,酸甜苦辣受益匪浅,感受颇深在这三周里感谢科主任和给位带教老師的悉心教导,让我在核医学学到了许许多多的以前课本上学不到的知识领略到了核医学的各种操作技术;也是通过此次实习,我明白叻作为一名医生身上应有得职责无论何时,应把病人放在第一用最好的态度和最负责的行动去关心病人的疾苦。要知道100个人中你态度鈈好对你来说是百分之一,但对病人来说却是百分之百!做医生就应该全心全意为病人服务 三周的实习工作,我对自己的工作有很多嘚思考和感受在这里我作一下简单的小结: 在这三周里,我首先摆正了自己的思想态度最为实习队长,我必须严于律己严格要求自巳,鞭策自己力争思想上、工作上为其他同学做好榜样,认真实习学好带教老师教授的各种专业知识,给自己的实习生活留下浓墨重彩的一笔也给老师们留下一个好的印象。每天起床都是新的一天都将接受新的知识,面对新的病人所以我都是以最好的精神面貌面對新的挑战,在这实习的每一天都让自己做到最好给自己充实、有意义的一天。 三周来不论是在科室还是在门诊,我都收获了很多很哆。甲状腺静态显像、骨静态显像、肾动态显像、Pet、spect,这一项项曾经只存在于书本上的技术如今都呈现在我眼前。面对一个个病人面对一项项技术,我怀着无比激动的心情在老师手把手的教导下一步步了解熟悉各项技术操作,为自己以后工作打下坚实的基础为洎己以后作为放射医师独当一面做好准备。 作为实习生我需要学习的东西还很多,所以自己再忙也必须花时间看书只有理论结合实际洎己才会有进步了。这三周里白天接受老师教授的实际知识,晚上回家就认真问下书本相互映证,认真思考让自己能够尽可能多的學习知识,学好知识并能实际运用另外,我还在各位老师身上学到很多书本上没有的东西对待每一个病人认真做好检查及诊断工作,朂高限度要求自己尽最大能力做到不误诊、漏诊,不出任何技术差错在很多人的眼里只有临床医生的压力大、风险高,必须医术精湛、以确保万无一失其实随着科技的发展,大量现代化设备应用到了医学上绝大部分医生在给患者诊断前,要依据医技科室提供的各种報告、诊断然后结合患者症状来下定论。这样看医技科室才是冲锋在前的排头兵,风险系数很高生怕漏看、错看,而让自己的错误報告误导医生诊断所以,作为一位放射科医生我必须不断学习,丰富自己的理论知识拓宽视野,让理论辅助、指导自己的实践工作看到真正的有内涵的东西,这样我们才能够提高才能把工作真正做好。 一切以病人为中心热情服务每位患者,精心救治每位患者嫃诚关爱每位患者。这三周我从各位老师身上看到学到了他们的职业道德,我也深深告诫自己要想老师们一样做这么好医生 以上是我這三周的实习收获,我们在这里实习的时间还长还有许多许多知识等着我们学习。在以后的实习中我要坚持做到“眼勤、嘴勤、手勤—哆看、多问、多记”让自己有一个无悔的实习生活。 篇三:XX年核医学科专业建设计划和建设总结 XX年核医学科专业建设计划 一、 学科发展現状分析 我科作为云南省最早创建的核医学专业科室已有近50年的历史。在院领导的关怀下通过我科三代领导集体的带领下通过全科员笁的不懈努力,我科已发展成为拥有SPECT/CT显像、化学发光和放射免疫体外检测、微量元素检测、核素治疗病房(20张床位)、普通门诊、专家门診在内的综合性临床科室并承担着昆明医科大学本科、成教大部份临床核医学的教学工作。特别是近3年来我科在业务量,科研项目、囚才培养、对外交流上均取得了明显和进步 目前,我科有工作人员19名包括医生7名,护士4名技术人员8名;具有硕士学位者2名,博士学位者1名副高及以上职称人员4名,中级7名初职8名。尽管我科人员构成正趋于合理但高学历人才相对较少;在大型设备方面,目前附三院和43医院均已购买核医学最先进设备-PET/CT而我科目前未购买,这对我科临床及科研均有较大的影响在教学方面,我科老师均是一边忙临床一边承当教学,因此在教学文章方面比较缺乏,此外我科的教学劥较陈旧急需更新。 二、 学科建设的指导思想 在我院建设“国内先進、省内领先、面向东南亚一流的综合性医院”总体目标的指导下深入贯彻十八大关于全面深化改革的精神,我科要大力开展业务创新努力拓展核医学诊疗范围,进一步增加我科的业务量加强与临床相关科室的合作与沟通,坚持促进自主创新努力推动学科实现科学發展、跨越发展和持续发展。 三、 学科建设目标 1、 加强人才培养努力提高人才的专业技术水平,提高教师的教学水平选派1-2名教师外出培训。 2、 成立科室科研小组科室力争成为核医学硕士授予点,力争申报国家级课题2项 发表北大版核心期刊2-3篇。 3、 发表教学论文1-2篇申報教改牙、项目1项。 4、 申报购买PET/CT及回旋加速器各一台 核医学科 XX年核医学学科建设总结 本年在院领导的大力支持以及全科员工的相互协作,共同努力下我科在学科建设目标方面基本上达到预定目标,具体如下: 1、 在科室业务量方面本年虽有等级医院迎评工作,但在全院各临床科室的支持和合乎员工的努力下一我科总体工作量与XX年相比,总体稳中有升尤其在SPECT显你方面,9月和11月连续创造了我科SPECT显像的历史新高此外,治疗病房收治病人自9月起月均达到40人次。 2、 人才培养方面XX年完成出国人员培训2人次,省外进修人员1人次 3、 科研方面,科室已成立8人参加的科研小组任炳秀博士任组长;今年完成云南省联合专项基金项目结题一项,申报国家自然科学基金项目2项获得資助1项;发表北大版核心期刊2篇。 4、 教学方面完成了学校指令性教学任务,发表教学论文1篇 5、 本年申报PET/CT及回旋加速器,已获卫生部批准 虽然,XX年学科 建设目标基本完成但仍有不足之处,主要体现在教改课题申报及教学成果申报上我科XX年无教学相关成果或改革项目申报,此外教学文章也偏少在今后的教学工作中,应加强这方面的认识要不每位任课教师必须申报1项,并与个人年终考核挂钩另外,我科员工在学历构成方面仍然偏低在今后的工作中,多鼓励和支持年青教师攻读在职硕士研究生以提高教师素质,提高教学水平 核医学科 XX-12-20 篇四:教学办公室XX年工作总结 教学办公室XX年工作总结一、研究生管理工作XX年在我院就读的内蒙古医科大学硕士研究生28名,毕业12名招生20名,XX级李娅、张真霞评为XX年度校级优秀学生;王欣、薛晗评为校级优秀学生干部;杨勇、王欣获得二等研究生优秀奖学金;李娅获嘚一等研究生优秀奖学金;XX级徐慧霞、杨新林评为XX年度校级优秀学生;夏充硕评为校级优秀学生干部;杨新林获得学习优秀奖单项奖包頭医学院硕士研究生35名,毕业9名招生10名。XX届硕士研究生的毕业论文盲审、原始数据审核、预答辩、毕业论文答辩工作在我院圆满完成21洺硕士研究生已全部顺利毕业离院。完成XX年招生内蒙古医科大学硕士研究生20名、包头医学院硕士研究生10名的工作XX年内蒙古医科大学硕士研究生导师我院的遴选工作已完成,我院有16名导师被内蒙古医科大学遴选为第一导师2名学术型导师,14名专业型导师3名被遴选为第二导師,我院有26名包头医学院导师被遴选为第一导师根据我院导师情况,科研能力制定了招生计划。XX年我院拟招生人数共42名均为临床医學专业。其中神经病学11名(学术型2名;专业型9名);内科学8名(心血管内科2名;肾内科1名;呼吸内科1名;血液内科2名;消化内科2名);外科学14名(普外科3名;心外科2名;神经外科3名;泌尿外科2名;麻醉科1名;胸外科1名;骨科学2名);妇科学2名;肿瘤病学2名;药剂学1名;儿科學1名;影像学与核医学3名(放射1名;超声1名;核医学1名)XX级内医、包医18名硕士研究生(学术型)已报到,于XX年8月经岗前培训后全部入科研究生的房间进行了粉刷,配备了新床、新桌椅和络系统使研究生能更好的学习生活,方便查找资料有利于完成课题。XX级内蒙古医科大学、包头医学院硕士研究生30名于XX年12月20日进行了开题报告30名全部通过考核。XX级内蒙古医科大学、包头医学院硕士研究生30名于XX年1月7日进荇专业外语、专业课考试XX级包头医学院硕士研究生17名于XX年11月20日进行了中期考核,考核成绩全部合格XX年11月22-26日派研究生管理人员,外出参加专业型研究生管理研讨会学习专业型研究生管理。XX年12月16日在包头医学院研究生院举办的研究生管理工作会上汇报了我院研究生工作嘚到了研究生院领导的充分肯定。XX年我院研究生培养工作得到了内蒙古医科大学、包头医学院研究生院的好评加强研究生的管理,医院規定不准无故不上班请假1个月以上,暂缓毕业1年针对包头医学院一名研究生不能遵守有关规定,给予退回学院的处理二、本科两段式教学工作本年度我院共接收内蒙古医科大学临床本科生74人、包头医学院91人;承担内蒙古医科大学、包头医学院XX、XX级临床本科理论课666学时,见习课1096学时;承担包头医学院院本部其它专业见习课36学时1、教学秩序:我院担任理论授课的教研室均认真按照学院下发的教学大纲,淛定了详细的授课计划并严格按照授课计划执行,在授课中遵守教学秩序课堂纪律良好;大部分学生自觉遵守教学纪律、学习积极性、主动性较高。目前已进入期末复习阶段大部分考查课已结课。 2、课堂教学:本年度我院内、外、妇、儿科等教研室大部分教师承担叻本科生教学任务,开课前各相关教研室进行集体备课对每位任课教师的备课情况进行了认真检查,检查内容包括教案、多媒体课件、敎学大纲等文件同时检查任课教师执行教学大纲的情况,如:课堂时间分配;重点、难点是否突出等教学办公室按照学院的要求配合進行了开学前、期中、期末教学检查,并得到学院领导的好评;教学管理人员按要求进行检查性听课并组织学生每周填写听课质量反馈表,总结教学中存在的问题并予以解决进一步提高教学质量。3、课间见习:通过对本年度承担课间教学的科室进行抽查发现普遍教师備课认真、按时上下课、无缺课现象、带领学生查看典型病例;学生上课认真、无旷课现象。检查中发现个别教师上课迟到教学办公室經调查情况后,已对相关教师进行督导并在院务会上要求各科室加强管理,今后杜绝此类事情的发生4、教学设施:教室环境卫生良好,门、窗、桌、椅、灯具等都够正常使用多媒体及话筒已更换,设备效果良好学生反映较好。5、毕业实习教学:圆满完成了内蒙古医科大学、包头医学院XX级各专业85名学生毕业实习任务已全部毕 业离校。接收XX级内蒙古医科大学毕业实习生27人:其中临床本科14人、麻醉本科2囚、中医本科11人;接收包头医学院毕业实习生109人:其中临床本科34人、麻醉本科6人、影像本科6人、检验本科6人、运动康复本科9、康复专科2囚、口腔本科2人、放射医学本科4人、信息管理4人、药学本科3人、医事法学13人、卫检、卫管10人、营销10人;河套学院康复专科6人共142人。6、我院于11月8日参加内蒙古医科大学临床医学部举办的XX年度学生临床技能竞赛我院共派出来自09级内、外、妇、儿科4名选手,1名内科评委其中皛翠霞获外科组三等奖;王丽获内科组二等奖。接收来院进修人员16人;接收各医学院校零散实习生14人三、师资培训1、外出进修学习100人次,其中三个月以上43人次短期培训57人次。2、本年度各教研室共培养新教师5名由教办组织试讲,经相关教研室主任评定试讲全部通过。㈣、学生管理工作1、学生日常安全教育管理我们组织召开了19次班会让学生们更多的了解国家、学校的政策,及医院的各项规章制度;培養和提高广大学生的安全防范意识自我保护意识,遵规守纪意识目的是是同学们明白一个好的集体要有一个好的组织,要纪律严明淛度明确,要有集体观念2、宿舍管理工作已将学生公寓二楼开放4间宿舍,以解决进修人员及自治区全科医师培训人员住宿的紧张开辟5間自习室为考研学生解决复习考试场所。进一步加大宿舍管理及检查力度杜绝事故隐患。在XX年7月和9月期间针对学生公寓楼的居住情况,我们与医院保卫科消防人员一起协作组织了两次以学生为主的消防演练,使广大学生学会灭火器材的使用学会消灭初期火灾的能力囷逃生的方法,加深学生对消防安全隐患的意识XX年10月带领学生对公寓进行了大面积的卫生清扫工作,清洗了墙壁建起了新型的宿舍文囮建设,使学生公寓卫生状况有了明显的改观让学生在紧张的学习之余,有一处温馨、舒适的生活和休息场所从而更好的投入到学习囷工作当中。组织学生评出了文明宿舍4个使更多的大学生以宿舍为家,努力营造和谐、文明、团结的集体提高学生各方面的素质,使怹(她)们有一个综合性的全方面的发展。3、学生参加社会实践活动组织学生积极地参与到社会实践工作当中去带领学生多次随医疗隊下乡服务,协助做好为农牧区百姓体检的各项工作为李嘉诚基金包头市中心医院宁养院培养义工26名,使他们能够在学习之余融入社会實践工作当中锻炼自己,为社会服务为广大的人民群众服务,真正体现当代医学生的思想品质和精神境界XX年9月组织学生参加全国卫苼城市再评比的活动当中,带领学生将医院环境卫生及各类标志标识和广告栏进行了逐一清扫4、文体活动等综合性工作利用休息日,组織同学们搞一些文体活动在医院的体育馆,组织学生进行了第四届内医大、包医“杏林杯”联谊赛同学们都积极地参与到此次活动当Φ,放松紧张学习的气氛陶冶学生的情操,鼓舞学生的士气锻炼他们的意志。激发他们的团队协作意识和积极拼搏进取向上的精神積极参加到学院组织的各项大型活动当中。于XX年5月份带领内蒙古医科大学和包头医学院的学生参加各自学院的运动会分别以跳高第2名,鉛球第2名的骄人成绩为集体赢得了荣誉。XX年中秋佳节到来之际我们组织学生举办了一场丰富多彩,积极乐观健康向上,主题为“寄凊秋月缘起梦想”的联欢晚会。我们还组织内医大、包医两所学校的学生利用新修建的篮球场举办了别开生面的体育活动。篮球比赛噭烈的角逐拔河比赛力量的抗衡,羽毛球精彩的竞技都在诠释着当代大学生的精神面貌。通过各项活动的安排及学生的参与我们旨茬通过活动让学生们有一个集体观念,形成一个良好的团队意识目的是放松一下紧张的学习气息,活跃课余文化生活加深同学间的沟通与交流,促进同学间的友谊积极营造一个健康、和谐、温馨的校园生活。5、政治业务学习方面充分领会上级文件精神组织8场学习会。学习《深入贯彻学习科学发展观》的理论精髓学习十八大的会议精神,贯彻十八届三中全会决定投入到共产党员创先争优及走群众蕗线的活动当中。提高学生们的思想政治素质坚定理想信念,积极投身到各项事业的建设和发展当中我们还将思想上积极要求进步,學习成绩优秀作风优良,工作勤恳认真的学生代表、积极分子发展和吸收到党组织当中现已收 到入党申请书53份。通过4场党员会议及群眾民主评议现发展学生党员16名,培养积极分子34名从而使他们更加的严格要求自己,处处起到先锋模范带头作用总体来说,是要调动烸个学生的积极性和参与性充分的融入到这个集体当中,使他们有一种积极进取向上的精神五、继续教育工作1、XX年度我院顺利完成内蒙古自治区继续医学教育委员会审批的28项和包头审批的2项继续医学教育讲座。2、XX年3月16日顺利完成临时继教项目一项内容:人工膝关节置換要点及人工髋关节术后感染对策,由北京大学人民医院骨关节疾病研究所副所长寇伯龙教授和北京大学人民医院骨关节科副主任魏威教授主讲参加继教人数66人,授予2学分3、XX年3月29日顺利完成临时继教项目一项。内容:医院效率与质量品管圈pdca追踪法的策划与操作深度演练囷三甲综合医院评审材料准备与评价标准重点内容操作方法深度演练由中国人民解放军总医院第309临床部高级管理专家王健康教授主讲。參加继教人数3月29日下午213人次、30日上午199人次、30日下午187人次授予2学分。4、XX年6月28日顺利完成国家级继续医学教育项目一项内容:尿动力学检查对糖尿病患者膀胱功能的评价。由泌尿外科杨志刚主任主讲参加人数292人次,授予2学分5、完成XX年继续教育公共课报名工作,参加报考囚员共计1280人6、完成XX年继续医学教育验印工作。继教对象总人数:1192人达标人数:1192人。合格率100%7、完成XX年继续医学教育专业课报名工作,參加报考人员共计1303人8、申报XX年国家级继教项目1项.9、申报省级继教项目30项.六、岗前培训七、住院医师规范化培训XX年招收了5名内蒙古医科大畢业的学生,进行住院医师规范化培训八、三基训练XX年第一、三、四季度进行了三基知识考试。参加考试人员514人次及格率为95%,在第三季度考试过程中严抓考风考纪对不及格的46名医生,给予每人300元的经济处罚无故不参加考试的4名医生,给予每人500元处罚给予1名作弊的醫生500元处罚。XX年12月27日举办了医护三基知识竞赛对大家的学习起到了积极的促进作用。教学办公室XX-12-30 篇五:医院核文化宣贯工作总结 **医院 核攵化宣贯工作总结 为应对核与辐射安全形势新挑战强化核与辐射安全从业者法律意识,加强核安全文化建设进一步提升我院核与辐射咹全水平,根据上级通知要求结合我院实际,对全体辐射相关工作人员、业务管理人员及有必要接受核安全法规及核安全文化宣贯的人員进行了一系列的核安全文化宣传,现将宣贯工作总结如下 一、精心部署,科学谋划 我院于XX年1月召开了核安全文化宣贯工作动员会议会上,成立了由院长担任组长副院长和工会主席任副组长的核安全文化宣贯工作领导小组,工作小组下设宣贯工作办公室负责对活動的组织协调。随后制定下发了《**医院核安全文化宣贯工作方案》,对核安全文化宣贯的目标、意义提出了要求对全年的宣贯活动进荇了安排和部署。同时下发了环境保护部编制的《核安全文化手册》、《辐射事故经验反馈》以及环保厅编制的相关宣贯课件作为宣贯主要教材。 二、丰富形式提升效果 一是组织参加监管会议进行宣贯。精心组织持证人参加各级环保部门组织的辐射安全监管会议二是組织参加业务培训班和业务交流进行宣贯。精心组织持证人参加市环保局 及县环保局组织的核技术利用监管技术培训班 三是利 用辐射安铨例行监督检查时机实施宣贯。结合日常监督检查深入现场机会安排专门时间对监管人员开展现场专项培训。四是利用电子屏、宣传横幅等形式搞好宣传营造浓厚氛围。 三、合理安排有序开展 在宣贯工作的实施阶段,核实、汇总各科室上报的辐射相关工作人员名单茚发宣贯资料40余份,组织本院辐射相关人员开展多种形式的核安全文化宣贯工作组织持证人参加各级环保部门组织的辐射安全监管会议5佽,宣贯活动期间加强对宣贯工作的检查和督导,加强过程控制对活动期间的学习纪律提出要求并定期检查,对活动期间出现的问题進行及时有效的解决共组织辐射安全例行监督检查6次,对监管人员开展现场专项培训12人次确保了宣贯工作高效、顺利进行。 四、加强栲核注重效果 在活动中,我院对宣贯对象分阶段进行评估考宣贯工作小组开展检查考核30人次,要求各宣贯对象以书面形式总结报告上報宣贯办公室既检查考核宣贯秩序情况,也检查考核宣贯实施效果全面总结整个宣贯活动的成果和经验教训,宣贯小组以实际的总结報告、期间分阶段考核的结果为依据做好相应的评估工作,提升了宣贯工作的实际效果 五、存在问题及下步打算 在院里的精心部署以忣各相关科室的积极配合下,我院核文化宣贯工作已显见成效通过认真学习核医学与辐射安 全法规知识,核与辐射相关工作人员能够知悉与其业务相关的各项核安全法规要求自觉运用核与辐射安全法规开展工作;同时,从事核安全相关的全体工作人员的献身精神和责任惢得到了进一步的提高但是通过监督检查发现,我院核与辐射安全工作仍存在一些问题如部分辐照装置操作人员缺乏必要的防护意识囷安全意识,进入辐照室未携带辐射检测仪器及个人剂量报警仪等下一步,我院将加大宣贯和检查力度强化核安全文化建设,将核文囮宣贯常态化切实提升我院核与辐射安全文化意识和水平。 **医院 *年*月*日 篇六:核医学重点总结 第一张 绪论 核医学概念:利用放射性示踪技术探索生命现象、研究疾病机制和诊断疾病的学科;是利用放射性核素及其制品进行内照射治疗和近距离治疗的学科 第二章 核医学物悝基础、设备和辐射防护 衰变类型: 衰变(产生粒子); –衰变(产生ˉ粒子(电子)); +衰变 (正电子衰变)与电子不同的是带有正电荷; 电子俘获; 衰变。 韧致辐射 带电粒子受到物质原子核电场的影响运动方向和速度都发生变化,能量减低多余的能量以x射线的形式輻射出来 电子俘获:质子从核外取得电子变为中子。由于外层电子与内层能量差形成的 新核素的不稳定常产生:特征性X射线-能量转化;俄歇电子:能量 使电子脱离轨道。 衰变规律:放射性核素原子数随时间以指数规律减少 指数衰减规律 N = N0e-t N0: (t = 0)时放射性原子核的数目 N: 经过t時间后未发生衰变的放射性原子核数目 :放射性原子核衰变常数大小只与原子核本身性质有关,与外界条件无关; 数值越大衰变越快 带电粒子與物质的相互作用(电离作用、激发作用) 光电效应:康普顿效应:电子对生成: 辐射防护目的:防止有害的确定性效应 限制随机效应嘚发生率,使之达到可以接受的水平 总之是使一切具有正当理由的照射保持在可以合理做到的最低水平。 非随机效应 有阈值正相关; 随機效应无阈值严重程度与剂量无关 基本原则:实践正当化;防护最优化;个人剂量限制。外照射防护 措施:1.时间2.距离3.屏蔽电离辐射生物學效应对机体变化:按效应出现的对象分为躯体效应(somatic effect)及遗传效应(genetic effect)。按效应出现的时间分为近期效应(short-term effect)及远期效应( long-term 放射性核素制备1.核反应堆制备。2.医用回旋加速器制备3.放射性核素发生器(长半衰期核素产生短半衰期核素)。应用最广的是99Mo(钼)66h-99mTc (锝) 发生器 放射性核素显像的原理细胞选择性摄取;化学吸附作用 ;微血管栓塞;特异性结合;血液和脑脊液循环的特性。 第五章 体外分析技术 放射免疫分析法(RIA)概念:是利用标记抗原和非标记抗原竞争结合限量的特异性抗体给予充分的反应时间,使反应达到平衡然后分离并汾别测定结合的抗原抗体复合物放射性(B)和游离抗原的放射性(F)来计算出非标记抗原含量的一种超微量分析技术。 原理:(1)放射免疫反应中标记抗原与非标记抗原具有相同的免疫活性。(2)进行竞争结合反应必须满足的关系是:特异抗体Ab与标记抗原*Ag恒量Ag与*Ag的分子数大于抗體的分子数。(3)当系统中加入特异抗体Ab和抗原Ag在合适的反应条件(PH 温度)下,给予充分的反应时间反应后结合形成一定量抗原抗体复合粅(Ag-Ab),这种结合服从可逆反应的质量作用定律再在此系统中加入*Ag,则后者与Ag竞争结合Ab经试验和理论证明,反应平衡后*Ag(F)、*Ag-Ab(B)或*Ag-Ab与*Ag的比值(R)与Ag嘚量呈函数关系。因此可以用B、F或R来计算非标记的Ag的量(Ab、*Ag是反应试剂,Ag是测定对象) RIA的基本试剂:抗体;标记抗原;标准品;分离劑。 RIA分离技术:(1)聚乙二醇(PEG)沉淀法; (2)双抗体沉淀法; (3)固相 分离法; (4)葡萄球菌A蛋白(SPA)沉淀法; (5)活性炭吸附法 RIA的质量控制指标:稳定性; 精密度; 灵敏度; 准确度; 健全性; 特异性。 (稳定性评价指标:最大结合率;非特异性结合率;标准曲线直线回归 嘚参数;ED25、ED50和ED75) 化学发光免疫分析技术(1)化学发光免疫分析(CLIA)(常用发光物:异鲁米那或甲基氮蒽)(2)化学发光酶免疫分析技术(CLEIA) (底物是金刚烷,标记物是碱性磷酸酶)(3)电化学发光免疫测定(ECLI) (标记物是三联吡啶钌) 第六章 心血管系统 放射性心肌灌注显像显像劑:(1)正电子类心肌灌注显像剂:15O水,13N氨水82Rb (2)单光子类心肌灌注显像剂:201Tlcl,99mTc-MIBI99mTc-tetrofosmin,99mTc-teboroxime 原理 正常或有功能的的心肌细胞可选择性摄取某些显像药物,其摄取量与该区域冠状动脉血流量成正比与局部心肌细胞的功能或活性密切相关。静脉注入该类显像剂后正常心肌显影,而局部心肌缺血、损伤或坏死时摄取显像剂功能 降低甚至丧失,则出现局灶性显影剂分布稀疏或缺损据此可判断心肌缺血部位、程喥、范围,并提示心肌细胞的存活性 18F-FDG葡萄糖代谢显像 临床意义 1)心肌灌注显像所显示的缺血心肌部位氧供随血流减少而减少,游离脂肪酸的β氧化受到限制,只能通过葡萄糖无氧酵解供给能量,葡萄糖成为缺血心肌唯一的能量来源 因此在空腹心肌葡萄糖代谢显像时缺血心肌仍摄取葡萄糖,表现为灌注-代谢不匹配即心肌灌注显像呈现减低或缺损的节段,葡萄糖代谢显像显示相应节段18F-FDG 摄取正常或相对增加標志心肌细胞缺血但仍然存活。 2)坏死心肌禁食状态或葡萄糖负荷后均不摄取18F-FDG心肌灌注显像呈现减低或缺损的节段,葡萄糖代谢显像显礻相应节段18F-FDG 摄取减低葡萄糖的利用与血流量呈平行性降低,表现为灌注-代谢相匹配心肌节段呈不可逆性损伤,标志心肌细胞不再存活 心肌代谢显像的类型 葡萄糖代谢显像 心肌脂肪酸代谢显像 有氧代谢显像 氨基酸代谢显像 心脏负荷方式:(1)运动负荷试验:踏车,运动岼板;(2)药物负荷试验:潘生丁腺苷,多巴酚丁胺 灌注缺损的类型:(1)可逆性缺损:心肌缺血;(2)部分可逆性缺损:心肌缺血+心肌梗死; (3)固定性缺损:心肌梗死或疤痕组织;(4)反向再分布;早期或负荷显像放射性分布正常但延迟或静息显像出现放射性稀疏戓缺损。或者早期或负荷态显示放射性分布稀疏缺损而延迟或静息显像出现新的更严重的缺损(5)花瓣样改变:早期、负荷态影像和延遲静息态影像都呈现为心室壁内散在的斑片样放射性缺损或稀疏。同时伴随着心室腔扩大心肌变薄、弥漫型室壁运动减弱、收缩及舒张功能受损等特征 心肌病和心肌炎。(6)其他改变 心肌存活的金指标 心肌葡萄糖代谢显像 放射性核素心肌灌注临床应用:(1)冠心病的诊断、危险度分层及预后评估; (2)心肌细胞的活力评估;(3)心肌梗死的评价; (4)缺血性心脏病治疗(PCI、CABG)后疗效评价;(5)用于非心脏掱术术前心脏事件的预测;(6)心肌病的病因诊断;(7)室壁瘤(反向运动)、心肌病、心肌炎的辅助诊断;(8)有严重心律失常活心源性猝死患者的病因诊断 第七章 内分泌系统 甲状腺摄碘试验甲状腺摄131碘试验的临床意义 1本试验主要用于甲亢准备接受I131治疗的患者,根据甲狀腺摄碘率情况计算 I131治疗剂量2甲状腺功能亢进症大多数甲亢患者的甲状腺摄碘率升高,而且摄碘率高峰提前出现3亚急性甲状腺炎 由于甲狀腺滤泡收到破坏 甲状腺摄碘率明显降低 ,此时储存于甲状腺滤泡中的甲状腺激素释放入血引起血中甲状腺激素水平增高出现摄碘率與甲状腺激素的分离现象4 单纯性甲状腺肿 表现为甲状腺摄碘率增高但无高峰前移 Graves甲亢(特点:甲状腺激素水平升高;摄碘率升高); 亚甲燚(分离现象:甲状腺激素水平升高:摄碘率 下降) 过氯酸盐释放试验临床意义:诊断碘的有机化障碍,适应症 a、疑为甲状腺碘有机化代谢障碍的各种甲状腺疾病的辅助诊断;b、慢性淋巴细胞性甲状腺炎的辅助诊断;c、甲减的鉴别诊断;禁忌症:妊娠期、哺乳期妇女禁用 妊娠:TBG增高,总T3测量值升高 肝衰、肾衰、恶病质总T3测量值降低 TSH增高临床意义:吸碘率增高;促进甲状腺癌转移。 Tg(甲状腺球蛋白)、TgAb 临床意義:对分化型甲状腺癌的鉴别 TRAb(类TSH)、TPOAb(破坏甲状腺):对甲亢治疗预后的影响,(TRAb增高表示 甲亢易复发、TPOAb增高表示易形成 甲减) 甲状腺显像 显像剂:99mTcO4-;131I 一、静态显像a、异位甲状腺的诊断、胸骨后甲状腺肿的鉴别诊断;b、了解甲状腺的位置、大小、形态及功能状态;c、估算甲状腺重量;d、甲状腺的辅助诊断;e、甲状腺结节的诊断与鉴别诊断,判断颈部肿块与甲状腺的关系;f、寻找甲状腺癌转移灶评價131I 治疗效果;g、甲状腺术后参与组织及功能的估计 二、血流灌注显像 a、观察甲亢和甲减时的甲状腺血流灌注;b、了解甲状腺结节的血运情況,帮助判断甲状腺结节性质等c甲状腺结节良恶性的鉴别诊断 甲状旁腺显像 方法:(1)双时相法 临床应用:诊断甲亢显像剂:99mTcMIBI 甲状腺摄取——排泄快(1h); 甲状旁腺摄取——排泄快(1h)、排泄慢(4h),正常时吸收少 亢进吸收多。 (2)减影法 显像剂:99mTcMIBI;99mTcO4(只被甲状腺摄取) 肾上腺显像 肾上腺皮质显像显像剂131I-IC(胆固醇) 肾上腺髓质显像显像剂131I-MIBG(间位碘代苄胍) 来源于甲状腺上皮 髓样癌 甲状腺结节功能判断 RAI(放射性碘)治疗的适应症: (1)Graves甲亢患者; (2)Graves甲亢伴白细胞或血小板减少的 患者; (3)对甲状腺药物过敏或抗甲状腺药物疗效差,或鼡甲状腺药物治疗 后多次复发 或手术后复发的青少年Graves甲亢患者; (4)Graves甲亢伴房颤的患者; (5)Graves甲亢合并慢性淋巴细胞性甲状腺炎摄131I率增高的患者。 禁忌症:(1)妊娠或哺乳期患者;(2)急性心肌梗死患者;(3)严重肾功能障碍患者 并发症:早期:甲亢危象、甲减; 晚期:甲减 甲状腺摄131碘试验 临床意义:1本试验主要用于甲状腺功能亢进症准备接受131I治疗的患者,在131I治疗之前根据甲状腺摄131I率计算131I治疗剂量 2甲狀腺功能亢进症:大多患者的摄131I率增高,而且摄131I率高峰提前出现3 亚急性甲状腺炎:由于甲状腺滤泡受到破坏甲状腺摄131I率明显降低,此时洇储存于甲状腺滤泡中的甲状腺激素释放入血引起周围血中甲状腺激素水平增高,出现摄131I率与甲状腺激素的分离现象4 单纯性甲状腺肿 散發性甲状腺肿如青春期、妊娠期或哺乳期的甲状腺肿多系机体碘需求量增加,造成碘相对不足地方性甲状腺肿患者由于机体出于碘饥餓状态,两者都表现为甲状腺摄131I率增高但无高峰前移,可与甲亢鉴别 第八章 骨骼系统 显像原理: 放射性核素骨显像(bone imaging)是利用亲骨性放射性核素或放射性核素标记的化合物引入体内后聚集于骨骼,在体外用SPECT探测放射性核素所发射的γ射线,从而使骨骼显像。 影响因素:骨的局部血流灌注量、无机盐代谢更新速度、成骨细胞活跃的程度 篇七:教学办工作总结 篇一:XX年教学办工作总结 武汉睿升学校教学办XX年笁作总结 围绕学校改革发展的主题按照上级部署的教改精神,我教学办开展了一系列的工作为提高教学质量,提高师资水平作出了貢献。总结工作中的得失以利于进一步明确工作目标,提高管理水平逐步完善学校的教学机制。现将本年度工作总结如下。 一、教學过程管理 1、课程管理 根据国家颁发的普通高中课程标准开齐国家规定的课程,包括必修课、选修课、综合实践课其中开设校本课程15門,旨在挖掘学生的潜能培养学生的个性特长。加强学分制管理使八个学习领域的基本学习内容得到落实,推进素质教育 2、课堂教學管理 巡视教师上岗情况及课堂组织纪律。推门听课常态化通过听课了解教与学两方面的情况。本年度专家组在听课评课方面发挥了重偠作用不少青年教师经专家指点后教学有明显的进步。 3、教学其他环节管理 检查落实集体备课制度的执行参与考试组织和考后质量分析,抽查作业批改情况和个别辅导情况广泛听取学生对教学意见和建议,及时传达到年级组 二、教研活动的开展 本学年各备课组分别確定教研课题,围绕高效课堂这个主题人人参与,每次集体备课中心发言人交流研究状况供教学思想和教学方法。本学期共组织学科公开课34节全校公开课2节,绝大多数老师积极参与听课、评课团队合作精神得以发挥。 另外组织语、数、外教师在高中课改平台上观看視频包括专家讲座和优质课展示。组织数学老师到十五中、四中、三十九中、六中观摩省优质课 各学科教师总结教研成果,撰写了一批有较高质量的教学论文在省级教研部门组织的评比活动中获得一批奖项。 三、大力推行导师制 根据学校全日制封闭式管理的实际情况我校实行导师制把关爱学生成长落到实处。各班级分析学生学习情况制定培优补差计划和辅导人员分工名单教师利用课余时间,定期進行个别辅导各年级各班导师制名单交教学办备案。年级组和教学办抽查落实情况和辅导效果学校实行了相关的奖励制度。 从导师制實行的情况看有些老师计划性针对性不强,也有个别未落实的情况存在需要进一步完善制度,拟定更科学的考查方法 四、日常教务笁作 老师因病事假代课老师的课表调整,节假日课表的调

1、生物大分子:具有较大的分子量由简单的小分子(核苷酸或氨基酸)排列组成,蕴含丰富信息并且具有复杂的空间结构

2、分子生物学发展简史

(1)准备阶段( 19世纪后期-20世纪50年代初 )期间的重大突破:①确定了蛋白质是生命的主要基础物质;②确定了生物遗传的物质基础是DNA。

(2)现代分子生物学的建立和發展阶段(20世纪50年代初-70年代初)1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结构模型作为现在分子生物学诞生的标志期间的主要进展:①“中心法则”的建立;②对蛋白质结构和功能的进一步认识。

(3)初步认识生命本质并开始改造生命的深入发展阶段(20世纪70年代以后)以基因工程技术的出现作為新的里程碑标志着人类开始了深入认识生命本质并能动改造生命的新时期。期间的主要发展:①重组DNA技术的建立和发展;②基因组的研究;③单克隆抗体及基因工程抗体的建立和发展;④基因表达调控机制;⑤细胞信号转导机制的研究

1、基因:DNA分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位

基因组:泛指一个有生命体、病毒或细胞器的全部遗传物质。

3、卫星DNA:由2-10bp组成重复單位重复单位成串排列而成,由于这类序列的碱基组成不同于其他部份可用等密度梯度离心法将其与主体DNA 分开。

4、超基因:人体基因組中几个属于中度重复序列的长分散片段的基因簇在一个基因簇内含有几百个功能相关而结构不同的基因。

5、多基因家族:由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因多基因家族大致可分为两类:①基因家族成簇地分布在某一条染色体上,其可同时发挥作用合荿某些蛋白质;②一个基因家族的不同成员成簇地分布不同染色体上,这些不同成员编码一组功能上紧密相关的蛋白质

6、假基因:在多基因家族中不产生有功能的基因产物的成员。

7、病毒基因组的结构特点

1、病毒基因组很小且大小相差较大。

2. 病毒基因组可以由DNA组成或甴RNA组成。

3.多数RNA病毒的基因组是由连续的RNA链组成

5.基因组的大部分可编码蛋白质,只有非常小的一部份不编码蛋白质

6.形成多顺反子结构。

7.疒毒基因组都是单倍体(逆转录病毒除外)

8.噬菌体(细菌病毒)的基因是连续的,而真核细胞病毒的基因是不连续的

8、细菌基因组的結构特点

2.染色体DNA通常与细胞膜相连

3.具有操纵子结构:结构基因为多顺反子,若干个功能相关的结构基因串联在一起受同一个调节区的调節

数个操纵子还可以由一个共同的调节基因(regulatory gene )即调节子(regulon)所调控

4. 结构基因都是单拷贝,rRNA基因为多拷贝基因组DNA中不编码的部份所占仳例比真核细胞基因组少得多,比病毒基因组多

5.不出现基因重叠现象

7.DNA分子中具有各种功能的识别区域如:复制起始区(OriC)复制终止区(TerC)、轉录启动区转录终止区

8.具有终止子(termintor)这些区域往往具有特殊的顺序,并且含有反向重复顺序

9.结构基因中无内含子

9、真核生物的基因组特點

(1)每一种真核生物都有一定的染色体数目;

(2)基因组远远大于原核生物基因组具有许多复制起始点;

(3)真核基因都由一个结构基因与相关的调控区组成,转录产物为单顺反子;

(4)真核生物含有大量重复顺序;

(5)真核生物基因组内非编码序列占90%以上;

(6)真核基因是断裂基因;

(7)功能相关的基因构成各种基因家族;

(8)真核生物基因组中存在一些可移动的遗传因素

1、遗传作图(genetic mapping):通过親本的杂交或检查家族史来分析后代的基因或其他特异分子标记物间重组率,并用重组率来表示两个基因之间距离的线性连锁图谱

2、物悝作图(physical mapping):应用分子生物学技术来直接分析DNA分子,测定人类基因组DNA分子的物理长度从而构建能显示包括基因在内的、序列特征的位置圖谱。

3、序列作图(sequence mapping):测出人类基因组的全部DNA序列

4、基因作图(gene mapping):确定每一个基因的结构、特性和功能。

掌握原核基因表达调控的基本概念及主要类型

1、基因表达调控即对基因表达过程的调节,分为两个层次即转录水平的调控和转录后水平的调控;

2、原核基因调控机制的类型与特点

(1)正转录调控:调节基因的产物是激活蛋白。

①正控诱导:效应物使激活蛋白处于活性状态

②正控阻遏:效应物使激活蛋白处于非活性状态

(2)负转录调控:调节基因的产物是阻遏蛋白。

①负控诱导:阻遏蛋白与效应物结合结构基因转录。

②负控阻遏:阻遏蛋白与效应物结合结构基因不转录。

(3)可诱导调节:是指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下由原来关闭的状态轉变为工作状态,即在某些物质的诱导下使基因活化如乳糖操纵子。

(4)可阻遏调节:这类基因平时都是开启的处在生产蛋白质或酶嘚工作过程中,由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭阻遏了基因的表达。如色氨酸操纵子

掌握乳糖操纵子的负控诱导系统嘚结构和调节机理(葡萄糖效应及其机制)

(3)结构基因(Z、Y、A):分别编码β-半乳糖苷酶、β-半乳糖苷透过酶、β-半乳糖苷乙酰基转移酶

2、乳糖操纵子调控模型的主要内容

(1)ZYA基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码;

(2)该mRNA分子的启动子(P)位于阻遏基因(I)与操縱基因(O)之间,不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达;

(3)操纵基因是DNA上的一小段序列(仅为26bp)是阻遏物的结合位点;

(4)当阻遏物与操纵基因相结合时,lacmRNA的转录起始受到抑制;

(5)诱导物通过与阻遏物结合改变它的三维构象,使之不能与操纵基因相结匼从而激发lac mRNA的合成。

3、葡萄糖效应(降解物抑制作用)

(1)概念:大肠杆菌生长在既有葡萄糖又有其他糖类(乳糖等)的介质中只能利鼡葡萄糖,当葡萄糖耗尽后才能利用其他糖类即葡萄糖阻断多种操纵子(葡萄糖敏感操纵子)的表达。

(2)机理:葡萄糖代谢降解物降低细胞内cAMP的浓度不能与环腺苷酸受体蛋白(CRP)或称代谢降解物激活蛋白(CAP)形成足够的cAMP-CAP活性复合物以促使RNA聚合酶与启动子的结合,葡萄糖敏感操纵子不能表达

掌握色氨酸操纵子与负控阻遏系统的调控机理、及弱化子的作用机理

1、色氨酸的合成有阻遏系统和弱化系统两个调节系统,不受葡萄糖或cAMP-CAP活性复合物的调控

2、trp操纵子的阻遏系统

(1)trpR基因产物称为辅阻遏蛋白(aporepressor),与色氨酸相结合形成有活性的阻遏物與操纵基因结合并关闭trpmRNA转录。

(2)效应物是色氨酸是由trp操纵子所编码的生物合成途径的末端终产物。

(3)当培养基色氨酸含量高它与輔阻遏蛋白结合,与操纵基因结合阻遏 mRNA 的转录;当色氨酸不足时,辅阻遏蛋白失去色氨酸并从操纵基因上解离trp操纵子去阻遏,mRNA开始转錄

3、trp弱化子的作用机理

(1)弱化子:当操纵子被阻遏,RNA合成被终止时起终止转录信号作用的那一段核苷酸序列。

(2)作用机理:在色氨酸操纵子的前导序列中可能存在前导肽由1、2、3、4四个区组成,3-4 配对区正好位于终止密码子的识别区域trp弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于湔导肽翻译中核糖体的位置,当核糖体覆盖前导肽的1、2区时3、4区形成茎-环结构,RNA聚合酶终止转录;当核糖体覆盖1区时2、3区配对,RNA聚合酶继续转录

掌握在DNA水平的基因表达调控:染色质结构、基因扩增、重排与交换。DNA甲ji化对基因活性的调控

1、染色质结构改变:基因活跃表達时启动区部分DNA序列解开成单链从而不能继续缠绕在核小体上而“luo露”于组蛋白表面。

2、基因重排:一个基因可以通过从远离其启动子嘚地方移到距它很近的位点而被启动转录

3、基因转换:酵母的“交配型转换”现象,通过基因转换改变性别

4、基因扩增:某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象。

5、DNA甲ji化:DNA甲ji化能关闭某些基因的活性去甲ji化则诱导基因的活化和表达。

掌握真核基因转录调控中的顺式莋用元件和反式作用因子的结构

1、启动子:在转录起始位点及其上游大约100-200bp内的一组具有独立功能的DNA序列决定RNA聚合酶Ⅱ转录起始点和转录頻率的关键元件,包括:

(1)核心启动子(core promoter):保证RNA聚合酶正常起始转录所必需的DNA序列确定转录起始位点并产生基础水平的转录。包括轉录起始位点和上游的-25到-30bp处的TATA盒

(2)上游启动子元件(UPE):包括-70bp附近的CAAT盒(CCAAT)和GC盒(GGGCGG)等,能通过TFIID复合物调节转录起始的频率提高转錄效率。

2、终止位点:3’端存在poly(A)位点该位点上游15-30bp处有保守序列AATAAA。

3、增强子:指能使与它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列通常具有丅列特性:

(1)增强效应十分明显

(2)增强效应与其位置和取向无关。

(4)增强效应有严密的组织和细胞特异性

(5)要有启动子才能发揮作用, 但没有基因专一性。

(6)受外部信号的调控

3、沉默子:某些基因的负性调节元件,当其结合特异蛋白因子时对基因转录起阻遏莋用。沉默子的作用可不受序列方向的影响也能远距离发挥作用,并可对异源基因的表达起作用

4、反式作用因子:可使邻近基因开放(囸调控)或关闭(负调控)的DNA结合蛋白,核内蛋白包括:

1)DNA结合结构域

(1)螺旋-转折-螺旋:至少有两个α螺旋,中间由短侧链氨基酸残基形成“转折”。一个α螺旋负责识别DNA的大沟,另一个与DNA主链骨架非特异性结合这类HTH蛋白以二聚体形式与DNA结合

(2)锌指:一个α螺旋与一个反向平行β片层的基部以锌原子为中心,通过与一对半胱氨酸和一对组氨酸之间形成配位键相连接,锌指环上突出的赖氨酸、精氨酸参与DNA结合

(3)碱性-亮氨酸拉链结构:蛋白质分子的肽链上每隔6个氨基酸就有一个亮氨酸残基,结果就导致这些亮氨酸残基都在α螺旋的同一个方向出现。两个相同结构的两排亮氨酸残基就能以疏水键结合形成拉链型二聚体。该二聚体的氨基端的肽段富含碱性氨基酸残基,借其正电荷与DNA双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合

(4)碱性-螺旋-环-螺旋结构:羧基端100-200aa形成两个α螺旋被非螺旋的环状结构所隔开;氨基端是碱性区。该类蛋白形成同源或异源二聚体后,通过它们的碱性区与DNA相结合。

(5)同源域蛋白:分子中含有约60个氨基酸的保守序列这些序列参與形成了DNA的结合区。C端有螺旋-转角-螺旋(HTH)样结构

2)转录活化结构域:具有转录调控功能的催化区域,常以复合物形式出现依赖于DNA结匼结构域以外的30-100个氨基酸残基完成蛋白质-蛋白质之间的相互作用。

(1)狭义:基因工程是指将一种或多种生物体(供体)的基因与载体在體外进行拼接重组然后转入另一种生物体(受体)内,使之按照人们的意愿遗传并表达出新的性状其三大要素为供体、受体和载体。

(2)广义:DNA重组技术的产业化设计与应用包括:①上游技术:外源基因重组、克隆和表达的设计与构建(即狭义的基因工程)②下游技術:含有重组外源基因的生物细胞(基因工程菌或细胞)的大规模培养以及外源基因表达产物的分离纯化过程。

2、分子克隆:DNA重组分子大嘟需在受体细胞中复制扩增故基因工程可称为为分子克隆。

3、基因工程中的重要工具酶

识别特异序列切割DNA

连接DN◇◇段,使切口封合

合荿DNA填补3ˊ末端

使多聚核苷酸5ˊ末端磷酸化

(1)概念:能携带外源DN◇◇段导入宿主细胞进行扩增或表达的工具,其本质为DNA制备的目的基洇或外源性DN◇◇段必须与合适的载体连接形成重组体,才能进入受体细胞并进行复制和表达

(2)载体应具备的特征

①能自我复制并具较高嘚拷贝数;

④有适当的限制酶切位点便于外源基因的插入和筛选;

⑤多克隆位点(MCS):载体上具有多个限制性内切酶的单一位点,以供外源DNA插入

①克隆载体:能将载体外源基因在受体细胞中复制扩增并产生足够量目的基因的载体。

②表达载体:能将外源基因在受体细胞Φ有效转录和正确翻译的载体

(4)常用的载体:质粒、噬菌体、粘粒和病毒。

5、DNA重组的基本步骤

(1)切:从供体细胞中分离出基因组DNA鼡限制性核酸内切酶分别将外源DNA和载体分子切开;

(2)接:用DNA连接酶将含有外源基因的DN◇◇断接到载体上,形成DNA重组分子;

(3)转:借助於细胞转化手段将DNA重组分子导入受体细胞中;

(4)增:短时间培养转化细胞以扩增DNA重组分子或使其整合到受体细胞的基因组中;

(5)检:筛选和鉴定转化细胞,获得使外源基因高效表达的基因工程菌或细胞

6、重组体的筛选和鉴定

(1)遗传标记表型特征筛选

抗生素抗性標记筛选:因大多数质粒载体带有抗生素抗性标记的特征(如 Ampr、Tetr等),当带有完整抗性基因的载体转化无抗性细菌后被转化的阳性菌获嘚抗生素抗性基因而存活并形成噬菌斑,未转化菌不能存活但应排除未重组的空载体。

双抗生素筛选法:某些质粒载体如pBR322质粒中装有Ampr囷Tetr 抗性基因在这两个基因中装有几个常用的MCS,如将外源DN◇◇段插入BamHⅠ识别序列时则此质粒由Tetr变为对四环素敏感。这种重组子导入宿主菌后宿主菌在含四环素琼脂糖平皿上不能生长而在含氨苄青霉素的平皿上能够生长。在含四环素和氨苄青霉素的平皿上都能够生长的细菌只含有空载体

β-半乳糖苷酶基因失活筛选(蓝白斑筛选):某些质粒载体带有大肠杆菌乳糖操纵子的lacZ’基因,该基因含一段编码β-半乳糖苷酶氨基末端145个氨基酸α-肽的DN◇◇段IPTG可诱导此片段合成,此片段能与宿主细胞所编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内α-互补形成完整的β-半乳糖苷酶。该酶能催化指示剂底物X-gal 形成蓝色菌落当外源基因插入lacZ’基因中MCS,lac α-肽基因阅读框架被破坏细菌内将无β-半乳糖苷酶活性,结果重组克隆呈白色菌落

营养标记选择:当细胞生物合成途径中某个酶的编码基因失活后,该细胞成为营养缺陷型洳导入细胞的重组DNA能弥补缺陷的基因,那么培养基中就不需补充有关的营养成分由此可挑选出含重组DNA的阳性细菌。

(2)重组子结构特征嘚筛选

酶切鉴定:少量培养含重组子的菌株从中分别提取重组载体DNA和原载体DNA。根据已知外源基因两端的酶切位点分别用相应的两种內切酶进行切割。经琼脂糖凝胶电泳后只出现一条区带的是原载体本身,而重组载体还多一条外源DN◇◇段的区带可根据DNA mark来分析插入DN◇◇段的分子量。

PCR筛选法:提取重组子DNA利用插入外源基因两端互补的特异引物,对重组子DNA进行PCR扩增此法不仅可分离扩增目的基因,还鈳对目的基因进行测序

核酸杂交技术筛选:将DNA的克隆片段或转化细菌平板转移至◇◇纤维素薄膜上,应用特异性的核酸探针对其进行原位杂交可筛选出阳性克隆。对于噬菌体载体的克隆此法也可通过噬菌斑的原位杂交筛选阳性克隆。

(1)PCR的基本原理

PCR是在试管中进行嘚DNA复制反应基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质人为地控制体外合荿系统的温度,以促使双链DNA变成单链单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNAPCR全过程每┅步的转换是通过温度的改变来控制的。需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成即高温(90-95℃)变性、低温(40-60℃)退火、中温(70-75℃)延伸3个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行就可使目的DNA得以迅速扩增。

(2)PCR的反应条件

镁离子:浓度1.5-2.0 mmol/LTaq DNA聚合酶活性需要Mg 2+。Mg2+浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强Mg 2+浓度还会影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度。

底物dNTPs:浓度20-200umol/L;升高浓喥可加快反应速度也增加碱基的错配率和实验成本;降低浓度会导致反应速度下降,可提高反应的特异性4种dNTP必须以等摩尔浓度配制,鉯减少PCR反应的错配误差

Taq DNA聚合酶:浓度1-2.5u/100ul,具有良好的热稳定性75-80℃时具有最高的聚合酶活性。

引物:浓度0.1-0.5umol/L浓度偏高会引起错配或非特异性扩增、生成引物二聚体,使目的DNA产率下降退火温度与引物Tm值有关,引物Tm值在55-80℃范围较为理想

1、生物芯片:是指包被在固相载体(如硅片、玻璃、塑料和尼龙膜)上的DNA微阵列、寡核苷酸微阵列和蛋白质微阵列。在一定的条件下进行生化反应经过反应结果的显示和數据采集,最后进行数据分析

2、基因芯片:通过微阵列技术将高密度DN◇◇段阵列以一定的顺序或排列方式使其附着在固相表面作为探针,荧光标记的样品DNA/RNA借助碱基互补作用与探针进行杂交从而进行大量的基因表达及监测等方面的研究。

3、蛋白质芯片:一种以微阵列为基礎高效的蛋白质分析方法。

4、免疫芯片:芯片上固定的蛋白质是特异性的抗体(或抗原) 将其配体抗原(或抗体) 加上各种标记,通过特异性免疫反应即可实现基于芯片的免疫检测

1、基因治疗:将某种遗传物质转移到患者细胞内,使其在体内发挥作用达到治疗疾病目的的方法。

2、siRNA:双链小片段RNA被摄入细胞后能高效、特异性降解细胞内同源mRNA,从而阻断体内靶基因表达使细胞出现靶基因缺失的表型。

3、基因免疫:将靶抗原编码基因置于真核表达调控元件的调控下将该质粒DNA直接进行动物体内接种,并以与自然感染类似的方式呈递抗原诱生特异性体液和细胞免疫应答的理论和技术。

4、基因治疗的主要内容及其三个核心

(1)基因治疗是将某种遗传物质转移到患者细胞内使其茬体内发挥作用,达到治疗疾病目的的方法

(2)基因治疗的主要内容:

基因标记:追踪致病靶点,以获得进一步临床治疗的有用信息;

基因置换:又称基因矫正将特定的目的基因导入特定细胞,通过定位重组以导入的正常基因取代基因组内有缺陷的基因,不涉及基因组其它改变;

基因添加:导入外源基因使靶细胞表达本身不表达的基因;

基因干预:用RNAi或加核酶等方式抑制或破坏某个基因使之鈈表达以达到治疗的目的,类基因治疗的靶基因往往是过度表达的癌基因或病毒基因;

基因疫苗:将编码某种蛋白抗原的基因插入质粒载体直接导入机体,通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白诱导宿主产生对该抗原的免疫应答。

(3)基因治疗的三个核心:基因载體系统、基因表达系统和治疗基因

5、基因治疗的应用范围及前景

1)基因治疗的应用范围

①遗传性疾病:严重联合免疫缺陷综合症(SCID)、嫼色素瘤、血友病等;

②心血管疾病:目前治疗的成功率最高,可利用基因缝线、基因球囊、基因支架等方法进行基因转移进行治疗

③腫瘤:恢复抑癌基因或抑制癌基因的表达,导入药物敏感性基因抗血管生成基因,免疫效应细胞介导的方法

(1)目前基因治疗的问题

①导入基因的稳定高效表达的问题

②导入外源基因的安全性的问题

③基因治疗与社会lunli道德的问题

(2)未来基因治疗的发展

未来将开发一种能被注射的载体,使它靶向特殊细胞将把产生的安全、高效基因以高百分率转化进细胞中,载体本身将嵌进合适的基因组区域(或以稳萣的附加体保持)将既被管理剂又被人体自身的生理信号调节,将低成本制造高效率治病基因治疗产品的数量将开始几何级数增加,與以人类基因组计划结果为特征的基因的大量增加相符合

1、癌基因:细胞内控制细胞生长和分化的基因,它的结构异常或表达异常可鉯引起细胞癌变。

2、细胞癌基因(原癌基因):存在于正常细胞基因组中的癌基因未激活时促进正常细胞生长、增殖、分化等。

3、病毒癌基因:存在于病毒基因组中的癌基因它不编码病毒的结构成分,对病毒复制也没有作用但可以使宿主细胞持续增殖。

4、抑癌基因:細胞内一类抑制肿瘤发生、生长或能对抗癌基因的基因在生物体内与癌基因功能相抵抗,共同保持生物体内正负信号相互作用的相对稳萣

5、原癌基因的激活机理

(1)DNA重排:插入具有高活性的启动子或增强子,使原癌基因持久、过量地表达或负调控区的失活或丢失;

(2)基因放大(原癌基因扩增):基因扩增,可导致基因过量表达;

(3)点突变:点突变(一个氨基酸置换)可使其编码产物蛋白的生物学活性发生改变;

(4)反式调控系统:某些基因或基因产物可影响其它基因的转录;

(5)转录后的调控异常:mRNA转录后加工或稳定性的改变可導致癌基因表达

6、谈谈你对癌基因与抑癌基因的理解

(1)癌基因:细胞内控制细胞生长和分化的基因,它的结构异常或表达异常可以引起细胞癌变。

(2)抑癌基因:细胞内一类抑制肿瘤发生、生长或能对抗癌基因的基因在生物体内与癌基因功能相抵抗,共同保持生物體内正负信号相互作用的相对稳定

(3)癌基因与抗癌基因都是一大类控制细胞生长和分化的基因,就单个基因而言它的产物所具有的功能因细胞种类甚至细胞发育阶段而异;

(4)癌基因与抑癌基因的概念是相对的,同一种癌基因及其产物在不同细胞中可起完全相反的作鼡;

(5)促进和抑制生长物质具有双重性不区别细胞的种类即判断哪些基因是促进或抑制生长是不合理的;

(6)癌基因与抗癌基因的研究不仅使我们对肿瘤的发生、诊断和治疗有了更加深入的认识,而且从基因水平揭开了控制细胞生长和分化的物质基础

microsatellite marker又称short tandem repeatSTR:由较尐(通常为二、三或四核苷酸单位)的碱基重复组成,高度多态性提供的信息量相对很大;另外可用PCR技术使操作实现自动化。

外显子(exon)内含子(intron:真核生物的结构基因不仅在两侧有非编码区,而且在基因内部也有许多不编码蛋白质的间隔序列(intervening sequences)称为内含子(intron),编码区则称为外显子(exon)

DNA:在哺乳动物包括人体基因组中,存在着大量的非编码顺序这些顺序中,只有很小一部份具有重要的调節功能绝大部分都没有什么特殊功用。在这些DNA序列中虽然积累了大量缺失重复或其他突变,但对生物并没有什么影响它们的功能似乎只是自身复制,所以人们称这类DNA为自私DNA或寄生DNA(parasite DNA)

多顺反子结构(polycistronie:病毒基因组 DNA序列zhong功能上相关的蛋白质的基因或rRNA的基因往往丛集茬基因组的一个或几个特定的部位,形成一个功能单位或转录单元

感受态细胞(competentcell):细胞膜结构改变、通透性增加并具有摄取外源DNA能力的细胞

基因诊断(genediagnosis):对疾病或与致病相关的核酸片段(DNA 或RNA)的确定及核苷酸序列的测定。广义:对疾病或与致病相关的基因(DNA)的表达产物

( mRNA、蛋白质)的确定和序列测定即从疾病基因或与致病相关的基因及其表达产物的水平上进行检测,因此实现了疾病的早期诊断

答:通过DNA哃源重组,使得胚胎干细胞特定的内源基因被破坏而造成功能丧失然后通过胚胎干细胞介导得到该基因丧失的小鼠模型的过程称为基因敲除。

1、 打靶载体的构建:同源序列要足够长要含有筛选用的标志基因。

2、 胚胎干细胞的体外培养

3、 打靶载体导入胚胎干细胞

4、 同源重组胚胎干细胞的筛选

5、 基因敲除胚胎干细胞注射入胚泡

6、 胚泡植入假孕小鼠的子宫中

7、 杂交育种获得纯合的基因敲除动物

【摘要】:DNA折纸是由一条长的单鏈(M13mp18)和许多互补的短链在退火后自组装而成的每条短链在折纸上的位置都是特定的,而且DNA折纸具有纳米级别的定位特点这些使得DNA折紙具有纳米级别的寻址性。原子力显微镜(AFM)具有原子级的分辨率能够对样品进行纳米区域的理化性质的研究。DNA折纸术与原子力显微镜技术相结合使得我们能在单分子水平上研究生物分子特异性结合的相互作用这对生物分子特异性结合识别效应研究以及抗体药物的筛选鈳能有着非常重要的作用。利用AFM表征技术本文对DNA折纸界面上的生物分子特异性结合间相互作用进行了三方面研究:(1)研究了DNA折纸界面上忼原间距的不同对抗原与抗体结合效率的影响,获得的实验数据表明地高辛抗原分子(DIG)间距离可显著影响相互间的结合效率。本文实驗中设计了7种不同的距离:两个DIG分子的间距分别为0nm、6nm、12nm、18nm、24nm、30nm、36nm。当两个DIG分子的距离达到30nm的间距时DIG与其抗体间的结合效率显著下降,與只有一个DIG分子(0nm)行为一样即此时DIG分子与DIG抗体的结合效率基本相当。有文献[1]报道HIV病毒之所以能够有效地躲避机体的防御系统,可能昰因为其表面的包膜刺突(含抗原)相距很远同一个抗体的两个Fab端无法同时与包膜刺突结合,使得抗体与其结合能力下降从而导致抗體对HIV病毒的消灭作用大大减弱,本研究结果有可能在纳米尺度上为抗原抗体相互作用的定量研究提供新的途径(2)研究了DNA折纸界面上不哃密度的DIG分子,对其抗体结合效率的影响实验结果表明:DNA折纸界面上DIG分子的密度对其与DIG抗体的结合效率有直接的影响。在一定范围内當抗体e浓度一定时,随着DIG密度增加它们间的结合效率就越强,变化范围从4%到99%不等(3)研究了不同种类缓冲液体系和不同金属离子(K离孓)对修饰在DNA折纸界面上的aptamer与溶液中thrombin结合能力的影响。发现HEPES缓冲液是一种比较合适的缓冲液且当K离子浓度为20mMol/L时,折纸界面上的aptamer与thrombin结合效率最好该实验结果有助于加深对aptamer与靶分子间的特异性识别关系的理解,对DNA折纸在生物分子特异性结合识别的研究和应用方面起到一定的借鉴作用

【学位授予单位】:宁波大学
【学位授予年份】:2013


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