Protein A/AP，碱性磷酸酶标记的蛋白A
Protein A/AP，碱性磷酸酶标记的蛋白A
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公司名称： 上海瑞齐生命科学有限公司
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Protein A/AP，碱性磷酸酶标记的蛋白A，本公司有单抗和多抗，可用于免疫组化（IHC），免疫印迹（WB），酶联免疫（ELISA），IF、IP、流式细胞术等实验。欢迎各位新老客户来电咨询！021-。
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试剂名称：AP标记山羊抗大鼠二抗IgG（特异性的用于WB中与IgG轻链反应，并且经牛、山羊、马、人、小鼠、大鼠、绵羊血清吸附）
英文名称：Alkaline Phosphatase-conjugated AffiniPure Goat Anti-Rat IgG, Light Chain Specific for Western blotting (min X Bov, Gt, Hrs, Hu, Ms, Rat, Shp Ig)
国产/进口：进口
产地/品牌：Jackson
规格：112-055-175&
参考报价：0.5ml
总点击数：405
本半年点击数：22
产品类别：
【背景资料】：AP（Alkaline Phosphatase,，碱性磷酸酶）属于同源二聚体蛋白，分子量为56KDa。碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的酶，即通过水解磷酸单酯将底 物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱磷酸化。碱性磷酸 酶也是目前免疫诊断试剂产品最常用的标记酶之一。与辣根过氧化物酶（HRP)相比，AP用作标记酶的优点是：稳定性高、灵敏度高，缺点是成本高，标记困 难。碱性磷酸酶的色原底物最常用的是对硝基苯磷酸盐(pNPP)。pNPP在碱性磷酸酶的作用下生成对硝基酚(pNP)，其在405nm处有最大吸收。 BCIP/NBT也是碱性磷酸酯酶的常用底物。在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深 蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。【应用类型】：WB（1:5000 - 1:50000）、ELISA（1:5000 - 1:50000）【反应性】：该山羊抗大鼠二抗与大鼠IgG分子的轻链有特异性反应，与其它大鼠免疫球蛋白（包括IgM、IgE、IgD、IgA等）的轻链也有交叉反应（主要是与kappa轻链反应），非常适合用于WB检测。该二抗与血清内非免疫球蛋白无交叉反应；通过血清吸附处理，与牛、山羊、马、小鼠、兔、绵羊血清内蛋白（包括免疫球蛋白）的交叉反应降到最低，但可能与除此以外其它种属的免疫球蛋白有交叉反应。【保存建议】：冻干粉保存在2-8°C，准备用时，根据指示的体积加入三蒸水，产品在2-8°C条件下，未稀释的液体保质期为6周，每天准备新鲜的工作液。如果溶解后想延长保存期，加入等体积的甘油（ACS级别或更好的）使终浓度为50%，保存在-20°C。保质期为收到货物后至少1年，合适的保存方式可以延长保质期。是全球专业从事生产和销售亲和纯化的二抗和纯化免疫球蛋白的公司，其产品主要销往到世界各地的大学科研所和医院里的动物研究以及生物医学研究机构的科学家。作为，艾美捷科技有限公司向您推荐Jackson的各种标记的二抗产品，包括HRP及AP酶标二抗、FITC/Rhodamine /Cy系列/DyLight系列等荧光二抗等均为原装进口包装，高效敏感，能为您提供最值得信赖的抗体产品保障和售后服务。更详细产品说明及价格请点击查询或致电400-与Jackson中国区域代理艾美捷科技有限公司垂询。
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中国生物器材网 电话：021-碱性磷酸酯酶(AP)标记Streptavidin
碱性磷酸酯酶标记Streptavidin
&产品编号: A0312
&产品包装: 0.2ml
&产品价格: 246.00元
产品简介：
&&&&本碱性磷酸酯酶标记Streptavidin(AP-labeled&Streptavidin)也称AP-Streptavidin、Streptavidin-AP或碱性磷酸酯酶标记链霉亲和素，为进口分装，可以用于生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。
&&&&本AP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的碱性磷酸酯酶交联而成，确保产生极低的本底和非常高的灵敏度。本产品的浓度为1mg/ml。
&&&&Streptavidin的分子量为66kD，可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为
Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素，从Streptomyces adidinii中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。Avidin的pI=～10.5，在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。
&&&&碱性磷酸酯酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括蛋白质、核苷酸和生物碱等，并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline
Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测，例如在Western、ELISA、IHC、ICC、
EMSA、Northern、Southern等时，催化BCIP/NBT等显色试剂显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。本产品标记的就是小牛肠碱性磷酸酶。
&&&&本碱性磷酸酯酶标记Streptavidin用于各种常规用途的推荐稀释比例参考下表，实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节碱性磷酸酯酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western，推荐的稀释范围为1:。
IHC/IC/ISH
Southern/Northern
&&&&WB, W IHC, I IC, I ISH, in situ&hybridization.
&&&&本产品如果用于常规的Western检测，以每次检测需10毫升1:2000稀释的本产品计，可以检测40次。
包装清单：
碱性磷酸酯酶标记Streptavidin
保存条件：
&&&&-20℃保存，一年有效。
注意事项：
&&&&本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
&&&&为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。&
使用说明：
1.&Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等请参考相关实验步骤进行。起始稀释浓度按照产品简介中推荐的稀释比例进行稀释。
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使用本产品的文献：
1. Tong L, Wu J, Li J, Ju H, Yan F.
&& Analyst. 2013 Jul 12. [Epub ahead of print].您所在位置： &
&nbsp&&nbsp&nbsp&&nbsp
WB检测方法及常见问题分析.ppt51页
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WB检测方法及常见问题分析 艾碧康生物市场部
钟兴兰 主要内容 WB的基本操作过程和注意事项 WB需要的主要试剂 WB的常见问题及分析 WB基本操作和注意事项 Western Blotting简介 1、标本提取 确定电泳条件 根据待测蛋白状态确定电泳条件： 确定电泳的凝胶浓度
分离的蛋白通过电转膜方式从凝胶中转移到杂交膜上（PVDF，硝酸纤维素或尼龙膜）
选择合适的膜 WB实验原则 设置合适的对照： 阳性对照：明确表达检测蛋白的组织或细胞，用于检测抗体的工作效率 阴性对照：明确不表达检测蛋白组织或细胞，用于检测抗体的特异性 二抗对照：不加一抗，用于检测二抗的特异性 内参对照：检测标本的质量和二抗系统、进行半定量 空白对照：不加一抗和二抗；用于检测膜的性质和封闭的效果 Western Blot 需要的主要试剂 WB需要试剂－膜 常用的有PVDF膜，硝酸纤维素膜或者尼龙膜 WB需要试剂－封闭试剂 BSA或者脱脂奶粉
商业化的封闭试剂：如abcam的Protein Block （ab64226） WB需要试剂－一抗 选择适合检测标本种属的一抗（说明书有验证） 选择适用于WB实验方法的一抗（说明书有验证） 选择单克隆抗体或者经过亲和纯化的多克隆抗体
根据说明书推荐的浓度优化最佳稀释比例 WB需要的试剂－内参 内参的选择 杂交需要试剂－二抗 二抗选择：根据一抗来源种属以及抗体Ig亚型选择合适的二抗。
二抗的使用： 根据说明书推荐浓度使用TBST稀释二抗。 如果说明书没有推荐浓度，可进行多个稀释比例进行摸索最佳稀释度（1:00）。 孵育条件一般为室温1-2小时。
杂交需要试剂－底物 显色底物：操作简单，灵敏度低，如TMB、DAB、BCIP/NBT 化学发光底物：灵敏度高，需要曝光检测设备（暗室、曝光设备和胶片）或者凝胶成
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