血放了四度还能提pbmc血培养结果吗

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这个帖子发布于14年零19天前其中嘚信息可能已发生改变或有所发展。

我用人外周血血培养结果树突状细胞PBMC分离后贴壁2h后RPMI轻柔洗两次加GM-CSF 1000u/ml,IL-4 500u/ml第3和第6天再加半量上述因子并換液。第6天同时加脂多糖(Sigma进口分装一家小公司分装的)1ug/ml.
第0,36,8天分别测CD14CD83,发现CD14从第0天的34%左右渐下降到0%但一直无CD83表达。镜下也能觀察到有突起的细胞因经费受限,没有买CD1a,CD86等其他因子
请教各位前辈:为什么CD83不表达?此种情况是不成熟的DC吗脂多糖是不是没有起到促成熟的作用?改用TNF-a促成熟好吗一般应用多少u/ml?

    不知道邀请谁试试他们

  • 政治敏感、违法虚假信息

这个帖子发布于6年零362天前其中嘚信息可能已发生改变或有所发展。

如题最近在申请一个Fellowship,老板想做一下小鼠血中的PBMC细胞我查了些文献,发现都是用人血做的只有極少的几篇文献用小鼠的外周血提取PBMC,但不是看不到文献全文就是Material and Method写的极简略,毫无具体参考价值

试验技术性难点在于,每只小鼠一佽只能获得200ul左右的whole blood因此,要求尽可能多的保留PBMC常规的ficoll密度梯度离心会损失很多细胞。有没有什么好方法能尽可能的从极少量的血液中獲得尽可能多的PBMC呢

希望有成功经验的高手们能分享一下protocol,或提供一些有参考价值的文献谢谢,谢谢!

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