大夫我现在吃药量大,血凝滴度与病毒量的关系值低会是什么引起

病毒滴度的测定 ? 病毒感染的测量方法 – 直接计数法 ?将病毒与乳胶颗粒混合,电子显微镜观测 ?缺点是无法判断病毒的感染性 – 间接计数法 ?空斑形成单位(plaque forming units,PFUs) ?50%终点法 ?血凝滴度与病毒量的关系试验 ?干扰滴定 第一节 空斑形成单位法 一、基本原理 ? 原理 – 空斑形成单位(plaque forming units,PFUs)试验: ?将不同稀释倍数的病毒与平铺於平板表面的宿主细胞混合当病毒 感染时会造成宿主细胞溶解而形成空斑,每个空斑系由一个病毒颗 粒引起计数空斑数目再乘稀释倍數,得病毒感染的浓度 – 病毒空斑—蚀斑 ?将病毒稀释后移入单细胞培养瓶中吸附1h后,覆盖营养琼脂 ?病毒在琼脂中只感染临近的细胞形成空斑的退化细胞区 ?中性红染色:活细胞染红色;死细胞无色 ?产生CPU的病毒均可用此方法 二、方法与步骤 ? 测定病毒空斑的试验方法 – 病毒杀死感染细胞的检测:产生细胞病变效应 ?中型红:活细胞染红色 ?台盼兰:死细胞染蓝色 ?MTT:溴化二苯基四氮唑,将活细胞染荿深蓝色易于计数,易 分离病毒转化或有抵抗力的细胞 – 未能杀死细胞可产生血凝滴度与病毒量的关系素 ?因能吸附红细胞空斑用血吸附显出 ?用显微镜计数吸附红细胞的空斑 – 细胞融合: ?病毒感染细胞与临近的未感染细胞融合形成多核细胞,用显微镜观 查合胞体空斑 – 空斑中含有病毒的抗原 ?免疫荧光分析 – 免疫组化技术 ?生物素-抗生物素-过氧化物酶染色技术 ?间接免疫过氧化物酶染色 三、空斑形荿单位法测定病毒滴度的计算 ? 空斑形成单位试验技术 – 传代细胞平皿法 6 ?单层细胞浓度为2×10 培养液为RPMI1640,EagleMEM ?病毒液稀释在冰浴盘作10倍稀释,每个稀释度培养2瓶每加一次 样时要新吸管,来回吸三次加至培养瓶无细胞层的瓶壁底角再倾 斜来回摇动,使病毒均匀 2 ?CO 孵箱吸附90min后再用营养琼脂覆盖 ?培养5~8d后,加入0.01%的中性红染色计数空斑 ? 病毒滴度的计数 – 按以下公式计算 ? ?? ??? 空斑形成单位(PFUs/ml) = 1 2 n ?d n ?v X1、X2、Xn :表示同一稀释度在不同培养孔板(实验单位)中数得到的空斑数;n 表示计 数空斑的培养板孔数;v 表示病毒量(ml);d 表示稀释倍数 例:鉯稀释成10-4 的病毒悬液感染细胞,四个培养板孔中的空斑数分别为11,3 及5 个 接种量为0.2 ml 1?1?3 ?5 4 5 空斑形成单位(PFUs/ml) = ?10 = 1.25×10 PFUs/ml

【摘要】:本实验以流感病毒FMl株24LDs病毒量感染小鼠致病毒性肺炎,并以不同药物予以治疗于感染病毒第4天后观察各组肺指数及流感病毒血凝滴度与病毒量的关系滴度,結果显示:宣肺解毒颗粒剂能够显著降低肺指数小剂量宣肺解毒颗粒剂能够显著降低血凝滴度与病毒量的关系滴度;与病毒吐比较,在降低肺指数作用上无显著差异但在降低血凝滴度与病毒量的关系滴度上效果不及病毒吐。说明本方在感染动物体内有抑制病毒增殖和减輕病变的作用

我要回帖

更多关于 血凝滴度与病毒量的关系 的文章

 

随机推荐