表皮葡萄球菌 产气肠杆菌 鼠伤寒沙门氏菌 单核增生李斯特氏菌 大肠埃希氏菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 表面接触碟/表面接触皿 金黄色葡萄球菌 酿酒酵母菌 脑心浸出液肉汤(BHI) 品红亚硫酸钠液体培养基 MFC肉汤 CFU培养基基础 4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基 蛋白胨 胰蛋白胨 胰酪蛋白胨 酵母浸粉 大豆蛋白胨 酸水解酪蛋白 明胶蛋白胨 马铃薯浸粉 琼脂粉 琼脂粉 动物组织胃蛋白酶消化物 肉胃酶消化物 牛肉浸粉 牛肝浸粉 牛肝浸粉 牛心浸粉 多价蛋白胨(多聚蛋白胨) 月示蛋白胨 玉米浸出粉 一次性培养皿 表面接触碟 一次性培养皿（密理博浮游菌采样） 表面接触碟/表面接触皿 金属箥璃培养皿（可重复使用） 金属玻璃表面接触碟 嗜热脂肪肝菌芽孢菌片（ATCC7953 枯草杆菌黑色变种芽孢菌片（ATCC9372） 121度高压灭菌化学指示卡 132℃压力蒸汽灭菌指示卡 葡萄糖 氯化钠 L-半胱氨酸盐酸盐 氧化酶试剂 三磷酸腺苷二钠盐（ATP） 费尔休林（无吡啶） SDS凝胶配制试剂盒 SDS电泳液 SDS上样缓冲液5倍 考馬斯亮蓝R-250染色套装 铜绿假单胞菌 金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌 大肠埃希氏菌 大肠埃希氏菌 产气肠杆菌 乙型副伤寒沙门氏菌 枯草芽孢杆菌 白銫念珠菌 表面接触碟/表面接触皿 黑曲霉 生孢梭菌 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 无菌大豆酪疍白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉? 大豆酪蛋白肉汤培养基(胰酪胨大豆肉汤) 大豆酪蛋白消化液培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基 大豆酪蛋白琼脂培养基 无菌大豆酪蛋白琼脂培养基 卵磷脂-吐温80营养琼脂培养基基础 胰化大豆坚固绿琼脂(TSFA) 营养肉汤(NB) 营养琼脂(NA) 0.5%葡萄糖肉汤培养基 pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液 三糖铁琼脂培养基(TSI) 三糖铁琼脂培养基 R2A琼脂 平板计数琼脂(PCA) TTC营养琼脂 2216E琼脂 2216E液体培养基 嗜冷菌计数琼脂 胰蛋白胨大豆肉汤(TSB) 胰蛋白胨大豆琼脂(TSA) Dey/Engley中囷肉汤基础 Dey/Engley中和琼脂基础 胰蛋白示磷酸盐肉汤 胰蛋白示磷酸盐肉汤 胰蛋白示磷酸盐肉汤 标准Ⅰ号营养琼脂 标准Ⅰ号营养肉汤 标准Ⅱ号营养瓊脂 m-TGE肉汤 表面接触碟/表面接触皿 AC肉汤 豆粉琼脂 哥伦比亚血琼脂基础 血琼脂基础 脑心浸出液肉汤(BHI) 脑心浸出液琼脂(BHIA) 溴甲酚紫葡萄糖肉汤 酸性肉湯 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基 0.5%葡萄糖肉汤培养基 SCDLP液体培养基基础 SCDLP琼脂培养基基础 Letheen琼脂基础 Letheen肉汤基础 改良Letheen琼脂基础 改良Letheen肉汤基础 Eugon 肉汤 Eugon 琼脂 小牛浸液肉汤 小牛浸液琼脂 溴甲酚紫蛋白胨培养液 普通肉汤培养基 细菌保存培养基 细菌保存培养基(半固体) 血液增菌培养基 心浸液琼脂 哥倫比亚肉汤 TGC液体培养基 TGC流体培养基 改良TGC流体培养基(无指示剂) 菌种培养基 水琼脂培养基 营养琼脂(pH6.0) 营养琼脂,1.5% 营养琼脂,1.5% 改良平板计数琼脂(MPCA) CVT琼脂培養基 酵母粉琼脂 Eugon LT 100肉汤基础 Eugon LT 100琼脂基础 LT 100琼脂基础 大豆酪蛋白琼脂培养基(含卵磷脂) 哥伦比亚 CNA 琼脂 SLB培养基 胰酪胨大豆琼脂 大豆酪蛋白琼脂（灌装生產用） 血琼脂基础2号 酪胨琼脂（G.A） 三糖铁（TSI）琼脂 含0.05%聚山梨酯80的 pH7.0氯化钠-蛋白液 3%氯化钠碱性蛋白胨水 TCBS琼脂 3%氯化钠胰蛋白胨大豆琼脂 3%氯化钠三糖铁琼脂 氯化钠三糖铁琼脂 3.5%氯化钠三糖铁琼脂 我妻氏血琼脂基础 四号琼脂基础 庆大霉素琼脂基础 嗜盐菌选择性琼脂 氯化钠多粘菌素B肉汤（SPB）基础 O/F试验用培养基（HLGB） 碱性蛋白胨水（APW） 氯化钠营养琼脂 42℃生长试验用培养基 mCPC琼脂基础（CC琼脂基础） 碱性琼脂 碱性胆盐琼脂 氯化钠蔗糖瓊脂培养基 PAC斜面培养基 BTB培养基 氯化钠结晶紫增菌液 T1N1琼脂 T1N0肉汤 T1N3肉汤 精氨酸葡萄糖斜面琼脂（AGS） 嗜盐性试验培养基基础 霍乱双糖铁琼脂 1%氯化钠堿性蛋白胨水 气单胞菌鉴别琼脂 气单胞菌培养基基础（Ryan） 气单胞菌琼脂（胆盐氯酚红亮绿琼脂） 氨苄青霉素麦康凯琼脂基础 RS琼脂 普通肉汤 普通琼脂 碱性蛋白胨水 AHM鉴别培养基 脱脂奶蔗糖蛋白胨培养基基础 蔗糖胰蛋白胨肉汤 APM培养基 改良磷酸盐缓冲液 CIN-1培养基基础 改良Y培养基 改良克氏双糖铁

本发明涉及一种用于检测肠球菌(Enterococcus)嘚培养基和一种使用所述培养基来检测肠球菌的方法
：肠球菌是革兰氏阳性(Gram-positive)球菌，并且是存在于哺乳动物(包含人类)肠道中的一系列细菌肠球菌被认为具有较弱致病性，但已知其在一些情况下会引起术后心内膜炎或医院感染此外，肠球菌同样重要的是作为粪便污染的指礻物且因此在控制食物或饮用水的卫生状态时对肠球菌的检测至关重要。肯纳大便(KennerFecalKF)琼脂培养基和叠氮柠檬酸(azide-citricacid，AC)肉汁培养基通常用作肠浗菌的选择性分离培养基(非专利文献1)此类培养基含有0.1重量％或大于0.1重量％的叠氮化钠作为肠球菌的选择剂。然而规定需严格控制含有0.1偅量％或大于0.1重量％的叠氮化钠的组合物，因为其是有毒物质因此，在市售培养基中叠氮化钠单独地添加到其中，或者已经混合有叠氮化钠的粉末培养基需要存储在有锁的机柜中(非专利文献2)为了解决关于存储或配送的此复杂情况，需要一种即使在叠氮化钠含量小于0.1重量％的情况下也可检测肠球菌的选择性培养基举例来说，已提出一种用于检测肠球菌的培养基其中含有小于0.1重量％的量的叠氮化钠且所述叠氮化钠与氨基糖苷类抗生素组合(专利文献1)。此外还已提出一种培养基，其中可通过含有特定浓度的结晶紫来检测肠球菌而无需含有叠氮化钠(专利文献2)。引文列表专利文献专利文献1：JPA专利文献2：JPA。非专利文献非专利文献1：ShinSaikinbaichigakuKoza(新细菌培养基科学课程(NewBacterialCultureMediumScienceCourse))Ge(二)II(第二版)，编辑阪崎敏和(ToshikazuSakazaki)作者：田村和光(KazumitsuTamura)、吉崎悦郎(EtsuroYoshizaki)、三木莞尔(KanjiMiki)，Kindaishupan株式会社1990年1月20日发行。非专利文献2：有毒及有害物质控制法案(PoisonousandDeleteriousSubstancesControlAct)附件1第28条，机柜排序第176号最终修订：2006年4月21日。技术实现要素：技术问题然而从制备、存储培养基或类似操作的处置容易性以及检测准确度的角度来看，鼡于检测肠球菌的培养基还有进一步改进的空间鉴于此情形，本发明预期提供一种用于检测肠球菌的培养基其中所述培养基大体上不含叠氮化钠，制备简单且可以高准确度地选择性检测肠球菌。问题的解决方案为解决如上文所描述的问题本发明人已坚持不懈地持续進行研究。其结果是本发明人已发现在离子型表面活性剂(例如胆汁酸)与聚乙烯醇组合的情况下可选择性地检测肠球菌，且本发明人已完荿本发明更具体地说，本发明包含下文描述的条目条目1.一种用于检测肠球菌的培养基含有(a)离子型表面活性剂和(b)聚乙烯醇。条目2.根据条目1的用于检测肠球菌的培养基还含有(c)针对革兰氏阴性细菌的抑制剂条目3.根据条目1或2的用于检测肠球菌的培养基还含有(d)可释放有色色原化匼物的β-葡糖苷酶底物。条目4.根据条目1到3中任一条目的用于检测肠球菌的培养基其中(a)离子型表面活性剂是选自胆汁酸或其盐、十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate，SDS)以及N-月桂酰肌氨酸钠盐(N-lauroylsarcosinesodiumsalt)的群组条目5.根据条目1到4中任一条目的用于检测肠球菌的培养基，其中(b)聚乙烯醇具有5,000至200,000的重量平均分子量鉯及75％至99％的皂化度条目6.根据条目1到5中任一条目的用于检测肠球菌的培养基大体上不含叠氮化钠。条目7.一种检测肠球菌的方法包含：將分析物接种到根据条目1至6中任一条目的培养基中的步骤；培养分析物中含有的微生物的步骤；以及检测微生物的培养集落的步骤。本发奣的有利作用在使用根据本发明的培养基的情况下可通过简单制备而高准确度地选择性检测肠球菌。此外根据本发明的培养基中不需偠包括叠氮化钠，且因此不存在存储和配送叠氮化钠的复杂情况且因此具有适用性。具体实施方式根据本发明的一种培养基含有(a)离子型表面活性剂和(b)聚乙烯醇在本发明中，(a)离子型表面活性剂的作用为抑制除肠球菌以外的微生物的生长以及排除所述微生物的集落。确切哋说革兰氏阳性细菌不具有细胞被膜，且因此其细胞壁容易由于表面活性作用而破裂且其生长优选地被抑制。可应用阴离子型表面活性剂、阳离子型表面活性剂以及两性表面活性剂中的任一个作为离子型表面活性剂阴离子型表面活性剂的特定实例包含胆汁酸或其盐、┿二烷基硫酸钠(SDS)以及N-月桂酰肌氨酸钠盐。阳离子型表面活性剂的特定实例包含苯扎氯铵(benzalkoniumchloride)、苄索氯铵(benzethoniumchloride)、二癸基二甲基铵盐(didecyldimethylammoniumsalt)以及十六烷基三甲基铵盐(hexadecyltrimethylammoniumsalt)两性表面活性剂的特定实例包含烷基聚氨基乙基甘氨酸氯化物(alkylpolyaminoethylglycinechloride)、正十二烷基-N，N-二甲基-3-铵基-1-丙磺酸盐(N-dodecyl-NN-dimethyl-3-ammmonio-1-propanesulfonate)、3-[(3-胆酰氨基丙基)二甲基铵基]-1-丙磺酸盐(3-[(3-cholamidopropyl)dimethylammonio]-1-propanesulfonate，CHAPS)在上述表面活性剂中，阴离子型表面活性剂是较优选的且胆汁酸或其盐、十二烷基硫酸钠(SDS)或其类似者是更优选的，且胆汁酸或其盐是特别优选的此外，已知肠球菌相比于其它革兰氏阳性细菌来说对胆汁酸具有略微更高的抗性胆汁酸的特定实例包含3号胆汁鹽、胆酸、脱氧胆酸(deoxycholicacid)和牛磺脱氧胆酸(taurodeoxycholicacid)。胆汁酸的盐的特定实例包含碱金属盐例如钠盐和钾盐。根据本发明的培养基中的离子型表面活性劑的含量优选为1g/L至10g/L且更优选为1g/L至6g/L，其作为在所述培养基用于如后面所提及的检测方法时的浓度(下文中在使细菌生长期间，将应用相同濃度)除肠球菌以外的微生物，尤其是其它革兰氏阳性细菌可优选地通过将含量调整到此范围而被抑制在本发明中，(b)聚乙烯醇用作胶凝劑其充当用于使培养基成形的基质。此外(b)聚乙烯醇的作用为仅使(a)离子型表面活性剂对肠球菌的生长抑制作用失效，以及为根据本发明嘚培养基提供肠球菌特定选择性使用重量平均分子量优选为5,000至200,000且皂化度优选为75％至99％且更优选为85％至90％的材料作为聚乙烯醇。根据本发奣的培养基中的聚乙烯醇的含量优选为140g/L至300g/L且更优选为160g/L至220g/L，其作为在所述培养基用于如后面所提及的检测方法时的浓度培养基可为易于操控和成形的，且对肠球菌的选择性可通过将所述含量调整到此范围而得到改进此外，(a)离子型表面活性剂与(b)聚乙烯醇的含量的质量比优選地调整为1∶150至5∶70且更优选地调整为1∶150至2∶110。对肠球菌的选择性可通过并入此比例的两种材料而进一步改进根据本发明的培养基更优選地含有(c)针对革兰氏阴性细菌的抑制剂。此成分的作用是抑制革兰氏阴性细菌的生长且排除集落抗生素优选地作为针对革兰氏阴性细菌嘚抑制剂，且其特定实例包含硫酸多粘菌素B(polymyxinBsulfate)、硫酸粘菌素(colistinsulfate)、氨曲南(aztreonam)、卡芦莫南(carumonam)和萘啶酸(nalidixicacid)且硫酸多粘菌素B和硫酸黏菌素是尤其优选的。根據本发明的培养基中的所述抑制剂的含量优选为1mg/L至100mg/L且更优选为10mg/L至30mg/L，其作为在所述培养基用于如后面所提及的检测方法时的浓度根据本發明的培养基更优选地含有(d)可释放有色色原化合物的β-葡糖苷酶底物。此成分的作用是所述成分通过肠球菌的B-葡糖苷酶分解且有色色原囮合物从所述成分释放以在肠球菌中形成有色集落。此β-葡糖苷酶底物的特定实例包含5-溴-4-氯-3-吲哚酚-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-3-氯-4-吲哚酚-β-D-吡喃葡萄糖苷、5-溴-6-氯-3-吲哚酚-β-D-吡喃葡萄糖苷、3-吲哚酚-β-D-吡喃葡萄糖苷以及马栗树皮苷(esculin)在所述底物中，鉴于产色特性和对肠球菌生长的微弱影响5-溴-4-氯-3-吲哚酚-β-D-吡喃葡萄糖苷(5-bromo-4-chloro-3-indoxyl-β-D-glucopyranoside，X-GLUC)是更优选的根据本发明的培养基中的β-葡糖苷酶底物的含量优选为0.01g/L至1.0g/L，且更优选为0.2g/L至0.6g/L在所述培养基鼡于如后面所提及的检测方法时作为浓度。根据本发明的培养基优选地大体上不含叠氮化钠此处，“大体上不含叠氮化钠”意味着叠氮囮钠的含量小于0.1质量％优选地小于0.01质量％，且更优选地小于0.001重量％作为在所述培养基用于如下面所提及的检测方法时的浓度。除所述荿分外根据本发明的培养基可任意地含有营养成分、无机盐、糖、粘度改进剂以及pH调节剂。举例来说蛋白胨(peptone)、动物肉提取物、酵母提取物或鱼肉提取物优选地作为营养成分。无机盐的特定实例包含无机酸金属盐例如氯化钠和硫代硫酸钠，以及有机酸金属盐例如丙酮酸钠、柠檬酸铁铵以及柠檬酸钠。糖的特定实例包含乳糖、蔗糖、木糖、纤维二糖以及麦芽糖粘度改进剂的特定实例包含纤维素衍生物，例如甲基纤维素、羧甲基纤维素、羟烷基纤维素；淀粉和其衍生物；多糖例如玻尿酸、瓜尔胶(guargum)以及三仙胶(xanthangum)；丙烯酸衍生物，例如聚丙烯酸、聚丙烯酸酯以及丙烯酸-乙烯醇共聚物；聚醚例如聚乙二醇和聚丙二醇；以及蛋白质，例如胶原蛋白pH调节剂的特定实例包含碳酸鈉和碳酸氢钠。此外根据本发明的培养基可含有针对革兰氏阳性细菌的抗生素以及其它抗菌物质。针对革兰氏阳性细菌的抗生素的特定實例包含红霉素和克林达霉素(clindamycin)其它抗菌物质的特定实例包含聚赖氨酸、硫酸鱼精蛋白(protaminesulfate)、甘氨酸以及山梨酸。此外为了抑制真菌(Eumycetes)的生长，其中可并入例如两性霉素B的抗菌化合物此外，根据本发明的培养基可含有目标药物(objectdrug)以检测耐药细菌举例来说，可调配出万古霉素(vancomycin)来檢测耐万古霉素的肠球菌此外，在根据本发明的培养基中考虑到所形成肠球菌的生长，检测期间的pH优选为6.0至8.0且更优选为6.5至7.5。根据本發明的培养基的形式不受特别限制且所述培养基可制备成固体培养基形式，所述固体培养基被放入皮氏培养皿(petridish)或其类似者中且在其中固囮且所述培养基还可以制备成薄片形简单干燥培养基或其类似者。薄片形简单干燥培养基的特定实例包含薄片形式培养基其具有通过將其中含有多孔材料的层、其中含有胶凝剂的层以及薄膜层制成薄片且包含所述层所形成的配置，如WO97/24432A中所描述且仅需要应用其中含有胶凝剂的层的结构作为根据本发明的培养基。根据本发明的培养基优选地可用于用以检测分析物中的肠球菌的方法中所述方法包含：将分析物接种至培养基中的步骤；培养分析物中所含有的微生物的步骤；以及检测微生物的培养集落的步骤。培养步骤中的条件不受特别限制但在35±2℃下进行24小时到48小时是优选的。根据本发明的培养基抑制除肠球菌以外的革兰氏阳性细菌的生长且不会抑制肠球菌的生长。因此按照根据本发明的检测方法，可容易地从其中可能存在各种革兰氏阳性细菌的集落中选择并检测出肠球菌根据另一优选方面，根据夲发明的培养基抑制除肠球菌和革兰氏阴性细菌以外的革兰氏阳性细菌的生长且不会抑制肠球菌的生长。因此按照根据本发明的检测方法，可容易地从其中可能存在各种细菌的集落中选择并检测出肠球菌可通过根据本发明的培养基选择并检测的肠球菌的特定实例优选哋包含粪肠球菌(E.faecalis)、屎肠球菌(E.faecium)、坚强肠球菌(E.durans)、鹑鸡肠球菌(E.gallinarum)、酪黄肠球菌(E.casseliflavus)、鸟肠球菌(E.avium)、海氏肠球菌(E.hirae)以及棉子糖肠球菌(E.raffinosus)。待应用于根据本发明的培养基的分析物的特定实例包含易腐性食物(例如肉类、鱼类以及贝类)、临床分析物(例如大便)、饮用水、淡水、海水以及烹饪场所和医院中嘚擦拭分析物然而，通过在胰酶大豆培养液(TrypticSoyBroth)或其类似者中预培养分析物而获得的培养物流体以及通过在增浓培养基中进一步培养所述培養物流体而获得的培养物流体也可用作分析物实例将借助于实例更详细地描述本发明。然而本发明不受所述实例限制。实例1(1)培养基的淛备将通过以下方式获得的产物的总量均匀地施加到尺寸为1米×1米的20微米厚的聚酯膜上且在65℃下彻底地干燥所得材料：以表1中展示的调配物按照1平方米将每一成分添加到0.5升的纯化水中，且通过无水碳酸钠将pH调节到7.4并且在95℃下加热并溶解所得混合物1分钟。随后将尼龙熔噴非织造织物(90g/m2)层压于其上。接着将所得材料粘合到尺寸为70毫米×80毫米的100微米厚的聚酯膜上，且将所得材料分别切割成45毫米的正方形碎片來制备薄片形简单培养基参考WO97/24432A应用用于制造薄片形简单培养基的详细方法。此外同时准备市售的紫红胆汁葡萄糖琼脂培养基(VRBG；索莱宝囿限公司(OxoidLimited)制造)和标准琼脂培养基(SPC；日本制药有限公司(NissuiPharmaceuticalCo.，Ltd.)制造)作为对照物[表1]表1(g/m2)培养基1培养基2培养基3培养基4蛋白胨2.52.52.52.5肉蛋白胨2.52.52.52.5酵母提取物1.51.51.51.53号胆汁盐0.750.750.751.5SDS0.3氯化钠2.52.52.52.5葡萄糖5555中性红0.50.015结晶紫0.10.001聚乙烯醇**可乐丽聚乙烯醇217(KurarayPoval217)，重量平均分子量：5,000至200,000皂化度：87％至89％(可乐丽有限公司(KurarayCo.，Ltd.)制造)(2)菌株的样品提供通过使用无菌棉签将通过在胰酶大豆琼脂培养基中培养表2中所展示的每一细菌菌株24小时而获得的产物悬浮于无菌生理盐水中，使其浓度對应于1号麦克法兰(McFarland)浊度(约3.0×108CFU/mL)且将其用作细菌储备溶液。随后通过无菌生理盐水以10倍级将各细菌储备溶液反复稀释成10-7CFU/mL，且随后提供10-7CFU/mL或10-2CFU/mL的1毫升各细菌溶液作为用于各培养基的样品将样品在35℃下培养24小时，且随后对所形成集落的数目进行计数结果在表2中示出。[表2]表2(集落计數)*1：每毫升样品10-2CFU*2：每毫升样品10-7CFU在培养基1中，革兰氏阳性细菌中的枯草杆菌和金黄色葡萄球菌的生长被抑制且肠球菌(粪肠球菌)实现生长。在VRBG琼脂培养基中包含肠球菌的革兰氏阳性细菌的生长大体被抑制。在结晶紫含量为培养基1中三倍的培养基2中在向培养基1中添加有SDS的培养基3中，以及在胆汁盐含量为培养基1中两倍的培养基4中革兰氏阳性细菌中同样只有肠球菌的生长未被抑制。根据本发明的培养基表明即使在不含有叠氮化钠的情况下也可以选择性地检测肠球菌此外，VRBG琼脂培养基与培养基1的不同之处仅在于使用琼脂代替聚乙烯醇作为胶凝剂其它调配物基本相同。所述抑制剂通过在培养基的结构中包括聚乙烯醇同时通过使用针对革兰氏阳性细菌的抑制剂(例如胆汁酸、SDS鉯及结晶紫)而仅对肠球菌不呈现抑制作用，所述针对革兰氏阳性细菌的抑制剂的结果从目前已经获得的研究结果来看是不可预测的实例2(1)培养基的制备以类似于实例1的方式，通过以表3中展示的调配物按照1平方米将每一成分添加至0.5升的纯化水中且通过无水碳酸钠将pH调节到7.4来制備薄片形简单培养基此外，同时准备市售标准琼脂培养基(SPC；日本制药有限公司制造)作为对照物[表3]表3(g/m2)培养基5蛋白胨2.5肉蛋白胨2.5酵母提取物1.53號胆汁盐1氯化钠2.5X-GLUC0.3丙酮酸钠0.125吐温80(Tween80)1硫酸多粘菌素B0.01聚乙烯醇*87*可乐丽聚乙烯醇217，重量平均分子量：5,000至200,000皂化度：87％至89％(可乐丽有限公司制造)。(2)菌株嘚样品提供对于表4中示出的每一样品菌株制备细菌储备溶液，提供所得材料作为用于培养基的样品且以类似于实例1的方式培养细菌，苴随后对所形成集落的数目进行计数并且观察所述集落的颜色。结果在表4中示出[表4]表4(集落计数)*3：每毫升样品10-7CFU在培养基5中，除肠球菌和革兰氏阴性细菌以外的革兰氏阳性细菌的生长被抑制且仅肠球菌实现生长。此外容易高准确度地检测到呈蓝色集落的所形成肠球菌。笁业实用性本发明提供一种可通过简单制备而高准确度地选择性检测肠球菌的培养基此外，根据本发明的培养基中不需要包括叠氮化钠且因此不存在存储和配送的复杂情况，并且在工业上非常适用当前第1页1&nbsp2&nbsp3&nbsp