血清检测微小RNA采集血液时必须要空腹血清胰岛素参考值吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2017-12-19 02:15 标签： 空腹血清胰岛素参考值

【摘要】：目的:以往研究显示,血壓昼夜节律异常与高血压靶器官损害和心血管事件发生之间显著相关,是独立于血压水平的重要危险因素;褪黑素具有一定的抗炎、抗氧化和降血压作用本论文采用时间生物学的研究方法,探讨褪黑素对高血压患者和高血压模型大鼠血压昼夜节律的影响,为阐明褪黑素参与调节血壓及其昼夜节律的作用机制,提供基础资料和实验依据。方法:(1)选取10名原发性高血压患者,连续7d服用褪黑素,采用动态血压监测,记录患者24小时动态血压,利用余弦分析软件,分析患者服药前后血压水平及其昼夜节律的变化(2)将无线发射子植入自发性高血压大鼠(SHR)腹主动脉,测量SHR动态血压,利用餘弦分析软件,分析SHR大鼠血压昼夜节律。在收缩压节律峰值前1h,对大鼠分别注射5mg/kg/d、10mg/kg/d、20mg/kg/d褪黑素,绘制褪黑素-降压率剂量反应曲线,确定褪黑素干预剂量(3)在收缩压节律峰值和谷值前1h(峰值组、谷值组),分别对大鼠注射10mg/kg/d褪黑素,比较不同时点注射褪黑素对大鼠血压及其昼夜节律的影响。(4)在收缩壓节律峰值、谷值前1h,对峰值组、谷值组大鼠分别注射10mg/kg/d的褪黑素,在注射后0h、1h、2h,取大鼠尾静脉取血,采用ELISA方法,测定不同时点注射褪黑素对大鼠血清中褪黑素、内皮素、血管紧张素Ⅱ、一氧化氮和一氧化氮合成酶的影响(5)将人脐静脉血管内皮细胞分三组进行培养,分别是正常气压培养組、加压24KPa培养组、加压24KPa+褪黑素(10μM)培养组。收集各组6h、12h 18h、24h培养液,采用ELISA方法测定不同时点内皮素、血管紧张素Ⅱ、一氧化氮和一氧化氮合成酶嘚水平变化情况(6)收集6h和18h加压24KPa培养组、加压24KPa+褪黑素(10μM)培养组细胞,提取RNA进行m RNA基因表达谱芯片测定,筛选褪黑素处理后差异表达的基因,通过GO和KEGG分析,初步获得褪黑素调控血压昼夜节律的可能信号通路。结果:(1)原发性高血压患者连续服用7天褪黑素后,收缩压较服用前降低9.39mm Hg,舒张压较服用前降低6.6mm Hg一例患者服用褪黑素后,恢复了已经消失的血压昼夜节律。(2)SHR大鼠注射褪黑素后,与对照组比较,收缩压、舒张压、平均压中值变化无统计学差异;血压节律峰值前注射褪黑素后,与对照组比较,收缩压振幅下降46.38%,峰值相位提前3.73小时,舒张压振幅下降30.83%,峰值相位提前6.27h小时,平均压振幅下降47.34%,峰值楿位提前4.96小时,差异均具有统计学意义;血压节律谷值前注射褪黑素后,与对照组比较,收缩压振幅下降24.74%(P0.05),峰值相位延迟了0.66小时(P0.05),舒张压振幅下降26.96%(P0.05),峰值楿位延迟了2.15小时(P0.05),平均压振幅下降4.9%(P0.05),峰值相位延迟了1.58小时(P0.05);(3)注射褪黑素后2h,与对照组比较,节律峰值组SBP、DBP、MBP分别下降11.56%、12.66%、12.02%,差异均具有统计学意义;节律穀值组SBP、DBP、MBP分别下降10.45%、16.63%、12.88%,差异均具有统计学意义(3)节律峰值前注射褪黑素后,1h和2h与0h比较,血清MT分别上升了7.80%和10.38%,ET分别下降了23.34%和14.65%,Ang NOS含量明显升高,差异均具有统计学意义。6h褪黑素处理组与24KPa组相比,共检测出335个差异表达基因,其中上调基因121个,下调基因214个;18 h褪黑素处理组与24KPa组相比,共检测出157个差异表达基因,其中上调基因63个,下调基因94个经GO和KEGG分析,这些差异表达基因主要参与细胞周期、细胞昼夜节律调节、与NO合成有关的c GMP-PKG通路、以及与血压调節有关的肾素/胰岛素分泌的信号通路。结论:(1)一定剂量的褪黑素能够显著降低高血压患者和高血压大鼠的血压,并影响血压昼夜节律的参数,如血压变化的振幅和峰值相位,从而改变血压昼夜波动的类型(2)褪黑素对血压昼夜节律的影响,可能通过血管活性因子如ET、Ang II、NO和e NOS的介导实现的。(3)褪黑素可直接作用于血管内皮细胞,上调腺嘌呤环化酶G蛋白偶联受体通路,激活与昼夜节律调控相关的通路(circadian entrainment),从而发挥调节血压昼夜节律的功能

【学位授予单位】：苏州大学
【学位授予年份】：2018


【摘要】：目的:模拟社会应激、社会应激复合高脂饮食建立两种形式的应激相关NAFLD,研究慢性应激通过促进脂肪动员在HPA-FFA层面诱导加重NAFLD的作用机制方法:32只250±10g雄性wistar大鼠随机区组設计分为正常组、高脂饲料组、慢性应激组、慢性应激复合高脂饲料组,造模8周后取材,检测肝重、脾重、体重、内脏脂肪重,计算肝指数、内髒肥胖指数;检测血清AST、ALT、FFA等;显微镜观察肝组织油红O染色冰冻切片、肝组织HE染色切片;rt-PCR检测海马体皮质醇受体,肝内乙酰辅酶A羧化酶、HMG-CoA还原酶,内髒脂肪与皮下脂肪激素敏感性脂肪酶与脂肪甘油三酯脂肪酶mRNA相对表达量。结果:慢性应激组大鼠出现了轻度的NAFLD,复合模型组大鼠出现了重度的NAFLD慢性应激组、复合模型组大鼠血清AST、ALT、FFA,脾重、肝指数、肝内ROS含量显著升高,摄食量显著降低,海马体皮质醇受体、肝内乙酰辅酶A羧化酶mRNA相对表达量显著降低。慢性应激组大鼠内脏脂肪组织激素敏感性脂肪酶、脂肪甘油三酯脂肪酶rnRNA相对表达量显著升高,复合模型组皮下脂肪组织激素敏感性脂肪酶、脂肪甘油三酯脂肪酶mRNA相对表达量显著升高血清FFA与血清皮质醇含量线性相关,与胰岛素抵抗指数线性相关。结论:两种形式嘚应激相关NAFLD模型成功建立,应激可以通过促进脂肪动员从HPA-FFA层面诱导加重NAFLD

支持CAJ、PDF文件格式仅支持PDF格式


我要回帖

更多关于 空腹血清胰岛素参考值 的文章

 

随机推荐