t2噬菌体侵染大肠杆菌的实验实验中,离心的方法是密度梯度离心还是差速离心,为什么?

差速离心法和密度梯度离心法的區别

两者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮扔中的颗粒进行分离的技术.差速离心是一种较为简便的分离法,常用于细胞核和细胞器的分离.因为茬密度均一的介质中

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标准方法:Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度忣红细胞裂解法1)取一50ml聚乙烯管无菌采集人外周静脉血,加4.4ml3.8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml上述全血300gX20min,离心室温。2)吸出富含血小板的上清2500gX15min,制备无血小板血浆(platelet-poorPlasma,PPP)3)余下的沉降全血加入5ml6%Dextran(分子量500,000,用无菌生理盐水配制)并用生理盐水(0.9%)调节最终体积至50ml,轻轻、彻底混匀室温沉降30min。4)吸出富含白细胞的上层液275gX6min。5)沉淀的细胞用8mlPPP-生理盐水(1:4)重悬并移到15ml离心管中。6)悬液细胞上面加入3mlFicoll-Hypaque(密度1.077)750gX5min,室温7)吸取富含中性粒细胞和红细胞层,用0.155MNH4Cl重悬细胞使红细胞裂解,然后中性粒细胞用含0.25%BSAHanks平衡液(HBSA无钙)洗2次,最终用HBSA(含钙)重懸8)用此法可得95%以上的中性粒细胞。

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