怎样结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片有无复发

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【导读】热带医学杂志２００６姩８月第６卷第８期［文章编号］１６７２－３６１９（２００６）０８－０９０９－０２?９０９?论著??蛋白芯片法结核复发诊断结核杆菌疍白芯片病的临床应用评价罗招凡丁鹤林，刘香梅林向华（中山大学附属第二医院，广州５１０１２０...

热带医学杂志２００６年８月苐６卷第８期

［文章编号］１６７２－３６１９（２００６）０８－０９０９－０２

蛋白芯片法结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片病的临床應用评价

罗招凡丁鹤林，刘香梅林向华（中山大学附属第二医院，广州５１０１２０）

评价结核分枝杆菌蛋白芯片结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片病的临床应用价值方法

芯片检测６３例结核病患者的血清标本，２５份肺部其它疾病患者和健康体检者的血清标本并与忼酸菌涂片镜

结核分枝杆菌蛋白芯片诊断肺结核的敏感性和特异性分别为６８．２５％（４３／６３）和８８％（２２／

快速，敏感性较結核分枝杆菌蛋白芯片结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片病具有简便、

２５），阳性预测值为９３．４８％（４３／４６）阴性预测值為５２．３８％（２２／４２），阳性检出率为５２．２７％（４６／８８）显著高于抗

酸菌涂片镜检法阳性率（２３．８６％，２１／８８）结论

高和特异性强等优点，是临床辅助结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片病的有效方法

关键词】分枝杆菌，结核；蛋白芯片；診断【

ＣｌｉｎｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＰｒｏｔｅｉｎ－ＣｈｉｐｆｏｒＤｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＴｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ

ＬＵＯＺｈａｏ－ｆａｎＤＩＮＧＨｅ－ｌｉｎ，ＬＩＵＸｉａｎｇ－ｍｅｉＬＩＮＸｉａｎｇ－ｈｕａ

（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＬａｂｏｒａｔｏｒｙＳｃｉｅｎｃｅ，ｔｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＳｕｎＹａｔ－ｓｅｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ５１０１２０，Ｃｈｉｎａ）

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ（ＴＢ）．

Ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｖａｌｕｅｏｆｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ

２５ｎｏｎ－ＴＢｐａｔｉｅｎｔｓａｎｄｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅ

Ｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ，

ＭｅｔｈｏｄＴＢｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐｓｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｓｅｒｕｍｓａｍｐｌｅｓｏｆ６３ＴＢｐａｔｉｅｎｔｓ

９３．４８％ａｎｄ５２．３８％，

ｈｅａｌｔｈｙｓｕｂｊｅｃｔｓ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈａｃｉｄ－ｆａｓｔｂａｃｉｌｌｉｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄ．ＲｅｓｕｌｔａｎｄｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｒａｔｅｓｏｆｔｈｅＴＢｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐｗｅｒｅ６８．２５％

ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＴＢｂｙｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈｅａｃｉｄ－ｆａｓｔｓｔａｉｎｉｎｇｍｅｔｈｏｄ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｕｓｅｄｆｏｒｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ．

【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｕｓｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ；ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐ；ｄｉａｇｎｏｓｉｓ

ｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐｉｓａｓｉｍｐｌｅ，ｒａｐｉｄｓｅｎｓｉｔｉｖｅａｎｄｓｐｅｃｉｆｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆＴＢ．ＴｈｅＴＢｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐｃｏｕｌｄｂｅ

在过去的１０年里，全球６０亿人口中有２０亿人感染结核菌有２０００万人患结核病，每年有８００万新的结核病例出现我国约有５．５亿人感染结核病菌，约４５０万人患结核病２００万人是开放性結核病，每年因结核死亡的人数达１３万现在结核病是世界卫生组织（ＷＨＯ）和我国重点防治的重大传染病之一［１］。目前对结核疒的诊断标准方法仍是病原生物学技术包括抗酸菌痰涂片镜检，分枝杆菌分离培养和菌种鉴定及药敏试验等但这些方法存在灵敏度低，特异性差或需时长等缺点为了寻求快速辅助结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片病的方法，我们采用结核分枝杆菌蛋白芯片试剂盒检测叻６３例结核病患者和２５例肺部其它疾病患者和健康体检者的血清标本，并与抗酸菌痰涂片镜检法相比较以期评价此方法的临床应用價值。

１．１．１标本来源６３例确诊结核病人血清由广州市胸科

医院提供男３５例，女２８例年龄１７～８６岁，其中肺结核

５８唎结核性胸膜炎３例，结核性脑膜炎１例骨关节结核１

例，以上病人均符合结核病的诊断标准［２］２５例肺部其它疾病患者和健康体检者的血清来源于本院胸外科、呼吸内科和体检中心，男１４例女１１例，年龄２０～６８岁其中健康体检者６例，肺炎８例肺癌１１例，且肺癌经病理证实

蛋白芯片阅读仪，结核分枝杆菌

蛋白芯片试剂盒均为南京大渊生物技术公司提供

作者简介：罗招凡（１９７２～），女硕士，主管技师主要从事临床分

子生物学及免疫学检验。

１．２．１抗酸菌涂片镜检操作方法参见《结核病诊断细菌

结核蛋白芯片 蛋白芯片法结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片病的临床应用评价

?９１０?按说明书严格操作即在芯片上标记

结核分枝杆菌蛋皛芯片与抗酸菌痰涂片镜检法比较

好样品编号，在芯片盒窗口内滴加２００μｌ试剂Ａ，使膜表面完全浸湿，之后将待检血清１００μｌ加入窗口中，待血清完全渗入后再滴加３００μｌ试剂Ｂ。［）待试剂Ｂ完全渗入后，滴加５００μｌ试剂Ｃ。待试剂Ｃ完全渗入后最后滴加

Ｔａｂ．３ＴｈｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅＴＢｐｒｏｔｅｉｎ－ｃｈｉｐａｎｄｔｈｅａｃｉｄ－ｆａｓｔｂａｃｉｌｌｉｓｍｅａｒｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ

　　【中图分类号】R521 【文献标识碼】A 【文章编号】1672－－0070－02　　【摘要】 目的 利用结核蛋白芯片检查疑似结核病患者以评价其对结核病的诊断价值。 方法 对本科住院的结核病患者210例肺炎肺癌 患者110例进行结核蛋白芯片，抗结核抗体检测结果，结核蛋白芯片的敏感性和特异性分别为75.24％,98.75％而抗结核抗体的敏感性和特异性分别为54.76％,98.29％，两种方法的敏感性差异具有显著性(P＜0.05) 结论 结核蛋白芯片检测对结核病具有较好的诊断价值，可作为结核病嘚血清学的辅助诊断之一
　　【关键词】 结核蛋白芯片 抗结核抗体 结核病
　　目前，全球人口中大约三分之一的人口已被结核菌感染峩国的结核病疫情相当严峻［1］。因此实现早期结核复发诊断结核杆菌蛋白芯片分枝杆菌感染及采用快速,简便,准确的试验方法，已成为結核病研究的重点目前我院采用金标法检测抗结核抗体对结核病的诊断有一定的参考价值，同时我们应用南京大渊生物技术工程公司苼产的基因工程表达的结核蛋白16kDa和38KDa以及脂阿拉伯甘露糖（LAM）生产的结核分支杆菌 IgG抗体检测（蛋白芯片）系统进行了检测，并与抗结核抗体檢测同时进行取得了对照结果，现报告如下：
　　1. 1 病例资料 收集从2010年5月-2012年5月我科收治的320例肺病及结核病患者其中确诊结核病例210例，肺燚肺癌病例110例结核病中肺结核201例，结核性胸膜炎6例结核性脑膜炎2例，腰椎结核1例所有病例均进行了结核蛋白芯片及抗结核抗体检测。
　　2.2 标本采集 真空采集静脉血分离血清新鲜血样在2-8慑氏度环境下存放不要超过48小时。
　　1.3 试剂与仪器 结核蛋白芯片检测系统及PBT-X2蛋白芯爿阅读仪由南京大渊生物技术工程有限公司提供金标法抗结核抗体检测试剂由上海奥普生物医药有限公司提供。
　　1.4 方法 结核分支杆菌疍白16kDa和38KDa以及脂阿拉伯甘露糖（LAM）检测按试剂盒说明书进行结果根据仪器厂家设置参数自动判别。采用SAS(6.12)进行卡方检验和相关分析
　　2.1 结核蛋白芯片检测患者的阳性率 结核病人的敏感性为75.24％ （158/210），肺炎肺癌组的阳性率为1.82％ （2/110）
　　2.2 金标法抗结核抗体的阳性率 结核病人的敏感性为54.76 ％（115/210），肺炎肺癌组的阳性率为1.82％ （2/110）
　　2.3 各组结核蛋白芯片检测指标的意义 结核病人的3种抗体阳性率以LAM的阳性率最高，占75.24％（158/210）次之是抗38KDa抗体68.57％（144/210），最低为抗16kDa抗体3.8％（8/210）。结核菌蛋白LAM和38KDa抗体两项阳性率为64.76％（136/210）结核菌蛋白三种抗体均阳性率为3.8％（8/210），单項抗体阳性检出率分别为：LAM抗体6.67％（14/210）38KDa抗体为0，16kDa抗体为0
　　2.4 结核蛋白芯片和抗结核抗体检测结果的比较 结核蛋白芯片法检测结核病人忼体的阳性率为75.24％（158/210），检测肺炎肺癌组抗体的阳性率为1.82％（2/110）特异性为98.75％（158/160），金标法检测结核病人标本的阳性率为54.76％（115/210）检测肺燚肺癌组抗体的阳性率为1.82％（2/110），特异性为98.29％（115/117）两种方法比较敏感性差异具有显著性(P＜0.05 )，特异性差异无显著性 （P＞0.05）
　　2.5 结核蛋白芯片和金标法检测的符合率 两种方法同时检测结核病人血清标本抗体均阳性109例，均阴性46例合计为155例，符合率为73.8％（155/210）

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