测定，目的是确定是否可对皮肤模型提供保护和是否存在抗炎性作用。

随后将过量的测试物质从重构表皮的表面除去。 皮肤模型的 损伤使用 30μl 的 0.25％浓度的 SDS 进行 40 分钟。 最后，将皮肤模型用 PBS 缓冲液洗 涤 20 次。

     在以下时间更换培养基以测试生存力 ：将细胞加入至培养基后 2.5 小时，施用测 试物质前，用 SDS 损伤之后和在 24 小时后。 此外，在施用测试物质前、24 小时后和 48 小时后测定释放进入培养基的 LDH。

     细胞培养基中 LDH 的出现是细胞的细胞质膜损伤和因此对表皮细胞层损伤的确 切标志。 此外，已知此酶的出现代表细胞的 “不可返回点”，因此表示损伤的不可逆 性。

     使用 RNeasy 小试剂盒从皮肤模型中分离全部 RNA。 为了分析，将冷冻的皮膜 模型加热至室温并用 1ml Qiazol 溶液处理。 使用 5mm 钢球在组织研磨器中以 16,000 赫兹 将皮肤模型均质。 将溶液在室温下静置 5 分钟并随后与 200μl 氯仿混合。 将此溶液混合 15 秒，并随后再次在室温下静置 3 分钟。 将悬液在 4℃和 12,000 转下离心 15 分钟，并将 上部相置于新的 Eppendorf 管中。 将移出的量与相同移出体积的乙醇 (70％，约 600μl) 混合。 移出 700μl 液体，转移至 RNeasy 小柱中，并在 13000 转下离心 15 秒，可以将 液体弃去。 对剩余溶液进行同样的步骤。 随后加入 700μl RW1 缓冲剂，并将混合物在 13,000 转下离心 15 秒，可以将液体弃去。 将柱置于新管 (2.2ml) 中，并用 500μl RPE 缓 冲液处理，并再次在 13000 转下离心 15 秒，将液体弃去。 随后加入 500μl RPE 缓冲液，

     使用用于 RT-PCR 的第一链 cDNA 合成试剂盒进行逆转录。在每种情况下，将来自样品的 100ng RNA 与 1μl 无规六聚物 (50μM) 和 1μl DEPC 水混合，并用水定容至 10μl 体积。 将此溶液在 65℃下温育 5 分钟，随后在冰上 放置 1 分钟。 为了检测系统的误差来源，在所有试验中使用水作为空白样品。 随后，在 各溶液中添加 10μl cDNA 合成混合物，将其混合，并在 25℃下热处理 10 分钟，在 50℃ 下处理 50 分钟，并在 85℃下处理 5 分钟，随后在冰上贮存。 向各溶液中添加 1μl RNase H，并将其在 37℃下温育 20 分钟。 随后，可将溶液在 -80℃下冷冻，或用于 PCR 测定。 用于第一链合成的 cDNA 合成混合物制剂 ( 在 -20℃下贮存 )。

     以下描述了制剂实例 ；所述百分比为基于所述制剂实例总质量的质量百分比。 为了制备所述制剂，使用了本领域技术人员已知的常规配制方法。 每种情况下的″岩蔷 薇″代表实施例 1 中获得的提取物。

大青叶，主治：热毒发斑、丹毒、咽喉肿痛、口舌生疮、疮痈肿毒等症。近年来此药在临床上广泛应用，除可用治上述诸症外，又可用于痰热郁肺、咯痰黄稠；尤常用于流行性乙性脑炎，既可单味应用于预防，又可配合柴胡、银花、连翘、板蓝根、玄参、生地等，能清解气分、营分的热毒，可用治各种乙脑，而以偏热型较为合适。中国各地市售的大青叶品种甚多，植物来源各异，又：爵床科植物马蓝。十字花科植物菘蓝及大青。蓼科植物蓼蓝。豆科植物木蓝。以上植物的叶，都做为大青叶使用，也均能作为制青黛的原料，除木蓝外，其根均作为板蓝根使用。

分布区域产中国华东、中南、西南（四川除外）朝鲜、越南和马来西亚

功效作用热毒发斑、丹毒、咽喉肿痛

菘蓝-植物原生态[1]

二年生草本，植株高50-100cm。光滑被粉霜。根肥厚，近圆锥形，直径2-3cm，长20-30cm，表面土黄色，具短横纹及少数须根。基生叶莲座状，叶片长圆形至宽倒披针形，长5-15cm，宽1.5-4cm，先端钝尖，边缘全缘，或稍具浅波齿，有圆形叶耳或不明显；茎顶部叶宽条形，全缘，无柄。总状花序顶生或腋生，在枝顶组成圆锥状；萼片4，宽卵形或宽披针形，长2-4mm；花瓣4，黄色，宽楔形，长3-4mm，先端近平截，边缘全缘，基部具不明显短爪；雄蕊6，4长2短，长雄蕊长3-3.2mm，短雄蕊长2-2.2mm；雌蕊1，子房近圆柱形，花柱界限不明显，柱头平截。短角果近长圆形，扁平，无毛，边缘具膜质翅，尤以两端的翅较宽，果瓣具中脉。种子1颗，长圆形，淡褐色。花期4-5月，果期5-6月。[2]

干燥叶皱编成团块状，有时破碎，呈灰绿色或黄棕色。完整的叶呈长椭圆形至长圆状倒披针形，长4～11厘米，宽1～3厘米，全缘或微波状；先端钝尖，基部渐狭，延成翼状，上面有时可见点状突起，下面中脉明显。叶柄长5～7厘米，腹面稍凹下。质脆易碎。气微弱，味稍苦。以叶大、无柄、色暗灰绿者为佳。

主产江苏、安徽、河北、河南、浙江等地。

【拼音名】DàQīnɡYè

【别名】大青（《本草经集庄》），蓝叶、蓝菜、蓝腚叶。

【来源】十字花科植物菘蓝的叶或枝叶。

8～10月采收叶片，晒干。

一、净制除去杂质（《药典85》）。

二、切制 除去杂质，略洗，切碎，干燥（《药典85》）。

1.《别录》："味苦，大寒，无毒。"

2.《药性论》："味甘。"

3.《纲目》："气寒，味微苦咸。"

4.《本草备要》：“味苦大寒，苦能泄降，大寒清热。”

【归经】入肝、心、胃经。

1.《得配本草》："入足阳明，手少阴经。"

2.《本草再新》："入肝、脾二经。"

3.《本草撮要》："入足蹶阴、少阴经。"[2]

4.《本草备要》：“入心、胃经”

清热，解毒，凉血，止血。治温病热盛烦渴，流行性感冒，急性传染性肝炎，菌痢，急性胃肠炎，急性肺

炎，丹毒，吐血，衄血，黄疸，痢疾，喉痹，口疮，痈疽肿毒。[3]

1.《别录》："疗时气头痛，大热，口疮。""蓝叶汁，杀百药毒，解狼毒，射罔毒。"

2.陶弘景："疗伤寒方多用此，除时行热毒为良。""蓝汁，至解毒。以汁涂五心，又止烦闷。甚疗蜂蟹毒。"

3.《纲目》："主热毒痢，黄疸，喉痹，丹毒。""蓝叶汁，解斑蝥、芫青、樗鸡，朱砂、砒石毒。"

4.《本草正》："治瘟疫热毒发狂，风热斑疹，痈疡肿痛，除烦渴，止鼻衄、吐血，杀疳蚀、金疮箭毒。凡以热兼毒者，皆宜蓝叶捣汁用之。"

5.广州部队《常用中草药手册》："清热泻火，凉血解毒，散瘀止血。治肠炎，菌痢，咽喉炎，扁桃体炎，腮腺炎，感冒发热，齿龈出血。"

6.《江西草药》："治急性肝炎，肺结核，矽肺，牙痛，蛇伤，过敏性皮炎。"[2]

内服：煎汤，10-15g，鲜品30-60g；或捣汁服。外用：捣敷；煎水洗。[4]

叶含靛甙（indican），靛甙先水解为吲哚醇，再经空气氧化成靛蓝（inidgo）．又含靛玉红（indirubin）．

1。该品粉末进行微量升华， 可得兰色或紫红色小针晶、片状或簇状结晶．

（1）商品大青叶（2）商品大青叶（3）靛玉红（4）靛蓝

样品液：取该品粉末0。5g，加氯仿20ml，置水浴中回流1小时，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液．

对照品液：取靛玉红与靛蓝， 加氯仿制成每1ml各含1mg的混合溶液，作为对照溶液．

展开：苯-氯仿-丙酮（5:4：1）

显 色：日光下检视，供试品色谱在与对照品相应的位置上，显相同的色斑．

取该品粗粉约1g（同时另取该品粉末测定水分），精密称定，置索氏提取器中，加氯仿100ml，加热回流6小时，提取液浓缩至适量，转移至25ml量瓶中，加氯仿至刻度，摇匀，作为供试品溶液．另取靛玉红对照品适量，精密称定，加氯仿制成每lml含0.07mg的溶液，作为对照品溶液．精密吸取供试品溶液10μl或15μl，对照品溶液4μl与18μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以苯-氯仿-丙酮（5：4:1）为展开剂，展开，取出，晾干，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，进行扫描，波长：λs=540nm，λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得．该品按干燥品计算，含靛玉红（C18H10N2O2）不得少于0。080%．成分分析研究进展：略

1。抗病原微生物作用　体外实验表明：大青叶有广谱抗生素作用．其煎剂对金黄色葡萄球菌、甲型链球菌、脑膜炎双球菌、肺炎双球菌、卡他球菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、白喉杆菌及痢疾杆菌均有一定程度的抑制作用．路边青叶煎剂在试管内对多种痢疾杆菌均有杀菌作用；试验还表明： 其对合霉素、呋喃西林、磺胺噻唑、小檗碱敏感或耐药的痢疾杆菌，均有良好的抗菌作用．大青叶对乙型脑炎病毒、腮腺炎病毒、流感病毒亦有抑制作用．对钩端螺旋体也有杀灭作用．

2. 对心血管系统的作用　蓼蓝叶煎剂对离体蟾蜍心脏有抑制作用，且随剂量增大而增强，甚至导致心脏停搏．对大鼠下肢血管有扩张作用，当血管呈收缩状态时，扩张作用尤为明显．

3。抗炎、解热作用　蓼蓝叶煎剂10g/kg 给兔灌服，可抑制二甲苯引起的局部皮肤炎症反应，降低毛细血管通透性．5g/kg灌胃可使大鼠甲醛性脚肿减轻或消退加速．5～10g/kg 灌胃，可使霍乱、伤寒混合疫苗引起发热的家兔体温明显下降．

4. 对免疫功能的影响　灌服蓼叶煎剂10g/kg，对腹腔注射葡萄球菌的小鼠，能使其腹腔液中白细胞对细菌的吞噬作用增强，吞噬指数提高．慢粒病人长期大量服用靛玉红后，机体的细胞免疫功能（SK-SD 迟发超敏反应、E-玫瑰花结试验、巨噬细胞吞噬功能测定等）均能随病情好转而恢复到正常水平；原来体液免疫功能低下的病人，服靛玉红后亦可恢复正常；靛玉红还可使慢粒病人血液中cAMP 的含量随治疗显效而上升，至缓解期时接近正常．

5。对平滑肌的作用　蓼蓝叶煎剂、浸剂及注射剂对离体兔肠有抑制作用， 能使肠蠕动减弱，振幅减小，且持续时间较长，不易自行恢复，其抑制作用随浓度增加而加强．蓼蓝叶煎剂对离体豚鼠子宫平滑肌有明显兴奋作用，使之收缩增强、紧张度增加，且作用持久．小剂量（0.1g）产生有力的节律性收缩，剂量增大（0。25g）呈强直性收缩．

6. 其他作用　靛蓝混悬液灌胃，对四氯化碳引起的小鼠肝损伤有一定的保护作用．

靛玉红对动物移植性肿瘤有中等强度的抑制作用．靛玉红灌胃对小鼠Lewis 肺癌及小鼠乳腺癌有一定的抑制作用；靛玉红皮下或腹腔注射对大鼠W256 癌肉瘤的抑制率较灌胃为高．有人认为，靛玉红抗肿瘤的机制可能是对肿瘤细胞大分子合成的抑制作用及对肿瘤细胞脂质代谢的影响．

7。体内过程　给家兔口服从路边青叶中分离出来的吲哚甙，服药后3小时血中浓度最高．皮下注射后半小时最高，可维持1个多小时．静脉注射后，血中浓度于1小时后逐渐消失．口服后主要分布于肝、肾、肌肉与胃肠．健康男子口服100mg后尿中排出量以服药后3～5小时为最高，共达42.2mg,12小时内共排出81。83mg，在24小时内排出量共达94.95mg．因此以尿中排泄为主，速度很快， 无蓄积中毒作用．如间隔4小时2次口服各50mg，则尿中排出量出现两个高峰，排泄量的最高浓度可维持4小时之久．因此临床应用以每4小时服药1次为最佳．

据数百例的观察，治愈率达93~98%。大多数病例于服药后1～4天内体温降至正常，继之头痛消失，其它症状亦渐次缓解，但病理反射大多于热退后3～5天才消失。据临床观察，单味大青叶对轻，重型效果较好，对极重型等危急病例，须结合其它中西疗法处理。即使在使用单味大青叶治疗过程中，亦常须采用针灸、西药等对症处理，或按辨证施治原则加用其它中药。各地报道所用大青叶的品种不一，有十字花科的菘蓝，也有爵床科的马蓝，一般临床应用时亦未加区别。剂量及用法：煎剂内服，5岁以内者1～6钱，6～14岁0.5～1两，每3～4小时服1次，病情减轻后改为4～6小时1次或每日3次，服至体温正常3日后停药。昏迷病例可用鼻饲法灌入。

预防：每日用大青叶6钱，水煎2次，混合，上、下午分服，连服6天。观察100人，服药后发病者占10%；而对照组（未服药）250人中发病者占24%。治疗：3岁以下每次3钱，每日3～6次，水煎服。168例患儿用药后半数在4～12小时内退热，平均退热时间约在17小时左右；另报道78例，2～6岁每次2～6钱，6～14岁O.5～1两，水煎，日服3～6次，亦有效果。此外，用大青叶、贯众各1斤，加水5000毫升，煎至2000毫升。成人每服100毫升（首次加倍），每日3～4次。据100例观察，大部分病例在1～3天内体温恢复正常，其它症状也随之逐渐消失。

大青叶煎剂每次10毫升（相当于生药1两），日服3次，连用3～5天。治疗24例，9例在1天内体温降至正常，其余在2～6天内体温下降至正常。

用100%大青叶糖浆与100%蒲公英浓缩煎液等量混合内服。每周岁3～5毫升，每日3次。治疗小儿麻疹肺炎150例，多数于4～5天症状和体征悄失，病儿精神良好，呼吸正常，食欲增进，胸部x线透视阴影消失。追踪1月未见复发。

用大青叶3两，配合胡颓叶1两、莱菔子5钱，为1日量，水煎分3次服。根据52例观察，有效率为75%。镇咳祛痰作用较好，平喘作用不明显。对单纯性的效果优于合并肺气肿者。

对急性普通型传染性肝炎效果最为显著。用大青叶配合丹参、郁金、贯众、大枣组成复方治疗100例急性无黄疸型传染性肝炎，有效率达94%。服用大青叶后多数在3～10天内自觉症状消失或基本消失，肝功能检验恢复或接近恢复者一般为2～20天。用法：大青叶（蓼蓝）成人每次1两煎服，根据病情轻重每日3～6次。

大青叶（爵床科马蓝）成人每次1～1.5两，小儿5岁以下海岁1钱，6～12岁6～8钱，12岁以上0.9～1两，水煎服，每日4～8次。治疗41例，多数病例在用药后1～2天内体温降至正常，同时中毒症状消失，疗效显著者占68.2%。与青霉素治疗组对照，疗效并不逊色，如两者合并使用，则效果似更显著。

治疗细菌性痢疾及急性胃肠炎

成人每日用于大青叶（大部分为马鞭草科路边青，少部分为爵床科马蓝）45克煎汁1次顿服，或90克2次分服，连服至痊愈后1～2日停药。治疗菌痢（其中慢性者1例，余均为急性）及急性胃肠炎计300余例，均获较好效果。治疗后完全退烧所需时间为1天左右，排便次数和大便外观恢复正常及镜检阴性所需时间平均不足5天，随访未见复发或转为慢性者。本法曾用以治疗小儿腹泻亦获较好效果。

每日用木青叶3两，分3次煎服，或用大青叶1两配合元胡、木香、香附、赤芍各3钱煎服，治疗13例，均有疗效。服药后多数在2～6天内疼痛和压痛消失，白细胞和体温恢复正常，1例在第9天压痛消失。

大青叶对多种细菌性及病毒性疾病均有效果。除治疗上述疾病外，临床上曾广泛应用于内、外、妇、儿、口腔、五官等科感染性疾患，如急性传染性淋巴细胞增多症、胆管炎、多发性疖肿、产褥热、乳腺炎、流产后感染、扁桃体炎、扁桃体周围脓肿、牙周炎等，均取得不同程度的效果。此外，曾报告1例患者，因口腔溃疡用大青叶（马鞭草科路边膏）液注射后引起血尿反应，经停药及对症处理后即止。

急性毒性体重18-22g的小鼠10只，用靛玉红（1%西黄蓍胶混悬液）ig，剂量为5g/kg，体积为1ml，每天1次，连续5次，观察1wk,未见动物发生死亡和出现明显毒性反应。

亚急性毒性体重80-100g?大鼠30只，分3组，500mg/kg小剂量组、1000mg/kg大剂量组的靛玉红（1%西黄蓍胶混悬液）ig，对照组以同体积1%西黄蓍胶液ig，每日1次，连续3wk，结束后处死一半动物，余下动物wk4末处死。结果，3个组的动物食欲和体重无明显差异，心电图在实验过程中均在正常范围内。外周血象，在用药组较用药前白细胞有显著增高，4周又恢复到给药前水平。肝、肾功能无明显差异，病理切片观察，小剂量组中在4只大鼠中有2只肝组织普遍出现肝小叶周边细胞浊肿，胞浆变空，而给药4周的4只动物却无此现象。大剂量组给药3周时未见异常，而给药4周的4只动物中有1只出现细胞弥漫性坏死。其余均未见特殊病变。

靛玉红对犬的亚急性毒性：4组犬，每组3只，除对照组外，分别ig靛玉红20、100、200mg/（kg.D），连续6mo。相当临床试用剂量五倍的小剂量组未出现任何毒性反应；中剂量组在服药10-30日之间出现轻微的腹泻，3只犬中有1只在服药5mo后SGPT有轻微升高，有灶性肝细胞坏死；大剂量组在服药4-60d之间出现严重的腹泻、便血，服药3moSGPT开始升高，服药6mo的病理切片显示有明显中毒性病灶，3只犬中有1只在服药3mo后死亡。但3种剂量对血象、骨髓象都无明显抑制，对肾功能、心电图也无影响。犬ig200mg/（kg.d），3mo3只犬有1只死亡。[6]

二年生草本，主根深长。茎直立，上部多分枝。叶互生，叶片长圆状椭圆形，茎生叶片圆形或长圆状披针形，基部垂耳圆形，抱茎。复总状花序生于枝端，花梗细长；萼片4，绿色；花瓣4，黄色，倒卵形；雄蕊6，四

强；雌蕊1。长角果长圆形，长15--18毫米，宽3--4.5毫米，扁平，边缘翅状，紫色，顶端圆钝或截形，基部渐窄。种子1枚。花期4--5月份，果期6月份。河北省、北京市、黑龙江省、河南省、江苏省、甘肃省等地栽培。

主产于河北省、江苏省；安徽省、河南省亦产。销全国。其他地区自产自销。

喜温暖湿润气候，适应性强，耐寒，忌干旱与水涝；宜栽于土层深厚、排水良好、疏松肥沃的壤土中。用种子繁殖，春播于4月份上旬；秋播在8月份上、中旬。条播，行距25--33厘米，沟深2厘米左右；穴播，穴距27厘米。每亩用种量1.5--2.5公斤。苗高7--10厘米时间苗，条播按株距7--10厘米定苗1株；穴播每穴留苗2--3株。定苗后结合松土除草，适时追肥，雨季注意排水。春、夏有白锈病为害叶片，可喷洒波美0.2--0.3度的石硫合剂；根腐病，用50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液防治；霜霉病，在发病前和发病初用1：1：100的波尔多液或65%代森锌可湿性粉剂500倍液喷雾。栽培研究进展：略