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到合肥有线电视台坐几路车

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辽宁中医药大学学报 17卷

度的毛囊導管、漏斗部和暗疮部位发现)从而促进毛囊的角化过度[3,13]生物膜是痤疮杆菌产生的一种多糖结构,它能包裹微生物促使其在毛囊內附着。生物膜的存在能进一步促进角质过度增加痤疮杆菌对抗生素的耐性[14]。

2 能抑制痤疮杆菌的植物

黄连为毛莨科植物黄连、三角叶黄連或云连的干燥根茎曾宪玉[15]研究了黄连的主要成分盐酸小檗碱对痤疮丙酸杆菌的抑制作用。实验小组细菌样本取携带ermX基因(Strain ermX)、ermX(cj)基洇[Strain ermX(cj)]丙酸杆菌各一株23S rRNA 2058点突变丙酸杆菌株(Strain2058)、23S rRNA 2059点突变丙酸杆菌株(Strain2059)及ATCC11827各一株。采用了微量琼脂稀释法获得最终浓度为512、156、68、32、16、8、4、2、1 μg/mL的盐酸小檗碱,以肉眼未见明显丙酸杆菌生长的最小浓度作为MIC值取Strain ermX株,配置成丙酸杆菌/盐酸小檗碱终末浓度为3.48×108CFU:1000 μL/ mL以1×108菌液作为正常对照,予透射电镜观察结果发现其对耐药和敏感丙酸杆菌均有较好的抑制作用,除了Strain2059 MIC值为1 μg/mL 外其余菌株的MIC值均为8 μg/mL。在携帶erm基因耐药株、23S rRNA点突变株、标准株和敏感株间其MIC值基本一致小组还采用SYBR real time PCR方法检测经盐酸小檗碱孵育72 h后Strain ermX菌株和Strain ermX(cj)菌株的erm基因扩增情况,鉯16S rRNA作为内参结果显示阳性对照和不同浓度的盐酸小檗碱组ermX基因扩增无明显差异,Strain ermX(cj)的ermX(cj)的扩增在不同组间也无显著性差异提取经鹽酸小檗碱孵育72 h后Strain ermX菌株和Strain ermX (cj)菌株DNA,扩增其23S rRNA结果显示其在2058及2059依旧存在有A→G的点突变,在2058及2059位点无双峰出现以上结果表明盐酸小檗碱对耐药株的erm基因的表达无显著抑制作用,对23S rRNA 2058及2059点突变菌株的位点突变也未见影响透射电镜下观察经MIC浓度盐酸小檗碱孵育后,丙酸杆菌细胞DNA結构破坏、胞核固缩空泡化提示其可能通过整体一致DNA 或RNA发挥作用。

重楼是百合科植物云南重楼的根茎它具有抗菌、镇痛、止血等作用。甾体皂苷是重楼的主要生物活性成分主要为薯蓣皂苷元和偏诺皂苷元的二、三、四糖苷。孙东杰等[16]将重楼总苷含量为70.4%的滇重楼乙醇提取物稀释成终浓度为150 μg/mL和300 μg/mL两组观察其对痤疮丙酸杆菌(NCTC737和A TCC6919)等痤疮主要致病相关菌的抑制作用。在生长抑制试验中(琼脂平板稀释法)仅含培养基的空白对照组细菌抑菌环为0,不存在抑菌现象提取物对于两种痤疮杆菌的抑菌环直径均大于20 mm。且观察发现含有150 μg/mL滇重楼提取物的抑菌环直径小于含有300 μg/mL提取物此种抑菌现象可能存在着浓度依赖关系。重楼乙醇提取物对痤疮丙酸杆菌的抑制作用通过MIC和

MBC的方法确定MIC即96孔板内无细菌生长,OD 600 nm检测无浊度的最小药物浓度MBC为无细菌生长的96孔板内取105 μL菌液接种于相应培养基,厌氧培养48 h无细菌生长嘚最小药物浓度。依据浊度测定结果滇重楼乙醇提取物对两株痤疮丙酸杆菌株(ATCC6919和NCTC737)的MIC分别为48.7 μg/mL和97.5 μg/mL,MBC分别为97.5 μg/mL和198.0 μg/mL阳性对照红霉素嘚对两株菌的MIC均为0.0625 μg/mL,克林霉素的MIC分别为0.0625 μg/mL和0.125 μg/mL在较低浓度下能够抑制细菌生长,说明滇重楼乙醇提取物在体外对痤疮丙酸杆菌均有明確的抑制作用徐良恒[17]将透明质酸作为复合剂载体,研究复合剂对小鼠痤疮动物模型的抑菌效果实验在48只ICR小鼠每只耳朵皮内注入20 μL痤疮丙酸杆菌菌液(1×107 CFU/20 μL),构建小鼠痤疮动物模型将小鼠均分为A、B、C、D四组,A、B、C组的小鼠每只耳朵分别外用对应编号为A、B、C的复合剂(A.基质+透明质酸;B.基质+透明质酸+1%克林霉素;

C.基质+透明质酸+0.25%重楼提取物)1 d 2次,每次20 μLD组不作治疗。于治疗第24 h、7天、14天、21天测量小鼠耳朵腫胀度,并每组处死3只小鼠取右耳组织匀浆稀释后,做细菌培养计数细菌菌落数。左耳10%中性甲醛固定做HE 染色,凋亡(TUNEL)染色数据采用单因素方差分析,结果显示B、C组间耳朵厚度无明显差异,但均小于A、D组故认为外用B、C复合剂对小鼠痤疮模型有抗炎作用。第7、14、21忝 B、C组细菌培养菌落数小于A、D组A、D组间相同时间点无统计学差异,B、C组间相同时间点无统计学差异故认为外用B、C复合剂对小鼠痤疮模型有抑菌作用。HE染色结果显示第1天,耳朵肿胀每组小鼠耳朵皮下均有大量炎细胞侵润。第7天炎症细胞减少,第14、21天仅见少量炎症细胞浸润随时间推移,皮损处炎症逐渐减轻TUNEL染色显示,外用复合剂28 d后组织切片均无棕黄色的凋亡细胞染色证明外用复合剂未引起表皮細胞凋亡。由此证明外用含重楼及透明质酸的复合剂对痤疮小鼠模型有抑菌效果其与外用1%克林霉素的抑菌效果相当。

油樟为樟科樟属其根、枝、叶、花果都含有丰富的芳香油,其主成分为18桉叶油素。现油樟油的抗菌活性研究主要集中于粗提取物及其主成分18桉叶油素仩。黄彤等[18]另辟蹊径将油樟油提取1,8桉叶油素过程中产生的副产物白樟油(99%)、白油(99%)、石竹烯(99%)、异松油烯(99%)、γ-松油醇(99%)對皮肤表面细菌的抑制情况做了一定研究实验小组先采用滤纸片扩散法,初步确定抑菌效果再采用二倍稀释法取各油樟油副产物用二甲基亚砜分别稀释成1∶2、1∶4、1∶8、1∶16、1∶32和1∶64的溶液。当无菌组澄清而菌液组浑浊时用分光光度计法于600 nm下检测各管细菌生长的情况,以無菌生长的最低浓度为最小抑菌浓度(MIC)在MIC基础上,从无菌生长的试管中取出0.5 mL菌悬液加到盛有4.5 mL NA液体培养基的

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