脂肪组织与脂肪的区别外植体和脂肪组织与脂肪的区别,有什么区别

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紫杉醇(Paclitaxel,商品名 Taxol)是从红豆杉属(Taxusspp.)植物中分离 嘚到的一类新型的具有微管抑制活性的天然二萜类抗肿瘤药物其作用机制独 特,对癌症的临床适应范围较广被认为是抗肿瘤药物研究領域最重大的发现。 目 前 商 品 化 的 紫 杉 醇 及 其 重 要 半 合 成 前 体 10- 去乙酰巴卡亭 Ⅲ

这些物质在植物中的含量都较低。自从太平洋紫杉(短叶紅豆杉 T. brevifolia) 的枝条中发现一株能产生紫杉醇的内生真菌以来从红豆杉植株不同生理学部 位中发现产紫杉烷类物质内生真菌的研究极为迅速,国内外相关产紫杉醇内生 真菌的研究报道较多但仍然缺乏稳定和高产的适用于工业化发酵的菌株。这 些问题的解决就需要分离更高效嘚内生真菌菌株改善分析和检测内生真菌发 酵液中紫杉醇及其类似物含量的方法,优化发酵条件并进一步探寻内生真菌 发酵液中紫杉醇及其类似物的分离纯化工艺。

本论文以从自然界中获得高产紫杉醇菌株为目的对不同生境下太行红豆 杉(T. chinesis)的根、茎和叶不同部位来源的内生真菌进行产紫杉醇活力筛选。 从红豆杉三个部位中共分离内生真菌 186 株根、茎和叶分别为 93、67 和 26

株;其中野生型红豆杉内生真菌 110 株,仿野生型红豆杉内生真菌 76 株从分 离内生真菌的数量和分离效率看野生型红豆杉根部来源的内生真菌更为丰富。 根、茎和叶来源的产紫杉醇菌株发酵液中紫杉醇的平均含量分别为 248.57、 149.09 和 104.94μg/L;其中最高产一株的含量为 622.75μg/L进一步对产紫杉醇 内生真菌发酵液中紫杉醇的定性与定量检测方法进行了研究。采用 C18 固相萃取 柱(SPE)对紫杉醇进行吸附用不同浓度的甲醇-乙酸铵和甲醇分别作为洗脱 剂,之后用高效液相色谱(HPLC)进行分析研究结果发现,流动相为甲醇: 水:乙腈(V/V/V)=20:45:35流速和检测波长分别为 0.70mL/min 和 227nm 的 HPLC 分析条件最佳;而洗脱剂为 80%甲醇时洗脱能仂和效果较好,紫杉醇 的回收率可达到 87.6%因此,本研究建立了快速高效低耗的 SPE-HPLC 对内生 真菌发酵液中紫杉醇的定性与定量分析方法论文对產紫杉醇内生真菌发酵液 中紫杉醇的纯化工艺进行了初步研究,采用非极性 D4020 型大孔树脂对产紫杉 醇内生真菌发酵液进行吸附和解吸附测试结果发现 D4020 型树脂对紫杉醇有

较好的吸附和分离效果。优化工艺条件为:室温下样品溶于体积分数 50%甲

醇-水溶液,上柱液流量为 1.5 mL/min体积分數 80%乙醇-水溶液以流量 0.5 mL/min 洗脱,洗脱剂用量为 7 倍量树脂体积回收率可达 90%。

菌株发酵液中 的该色谱峰进行了分离纯化发现该色谱峰与 10-DAB Ⅲ标准品具有相同的 1H NMR 谱图数据,进一步证实 IRB54 具有产生 10-DAB Ⅲ的能力为 10-DAB Ⅲ 的来源提供了新的参考。论文又对内生真菌发酵液中 10-DAB Ⅲ的快速定性与 定量分析方

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