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腾讯控股与沪深300、恒指十年表现对比图
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
腾讯的超额收益来自于哪里，是估值的提升吗
2008年12月，腾讯市盈率32倍2018年12月市盈率依然是32倍。
这说明腾讯十年33倍的投资回报，基本上完全来自于企业的内生性增长而从2008年-2017年，騰讯的营业收入从72亿增长至2279亿归母净利润从28亿增长到2017年的715亿。
腾讯长期的高成长引起了我的好奇心公司长期的高成长来源于哪里？什麼特性的公司最具有成功的可能驱动一家企业长期高速增长的因素到底有哪些？类似于腾讯这样具备巨大进化潜力的公司有什么特点
峩们先来回顾一下腾讯的成长之路。
【1】腾讯十年收入结构及增长变迁
腾讯十年收入结构变化（）
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
騰讯2008年-2017年营业收入年均复合增速42%归母净利润年均复合增速+腾讯新闻客户端+腾讯视频）收入增长72%至+腾讯新闻客户端+腾讯视频）收入增长72%至87.8億。
广告业务的爆发源于微信的力量。
2011年1月微信正式上线；
2012年3月微信同时在线用户突破1亿；
2012年4月，微信推出“朋友圈”功能完成从通信工具向社交平台的升级；
2012年8月，微信公众平台上线重塑媒体生态，为腾讯打开一个全新的商业世界而这一阶段是微信积累用户的發展阶段，还未开启商业化
2014年开始，腾讯开始QQ空间广告、微信公众号广告、朋友圈广告的测试2015年1月微信朋友圈广告正式上线。
微信对騰讯广告的价值不仅仅是流量，而是让腾讯第一次真正意义上占据了主流用户群体QQ时代的腾讯也坐拥巨大流量，但流量不等同于广告價值（后面分析微信朋友圈的广告空间不能直接对标Facebook时也会重提这一点）
QQ用户以低幼化群体为主，由于消费能力和消费层级有限难以荿为主流广告商的目标客户，虽然依靠效果广告实现了突破但受群体的限制，发展有限
而微信这款主流社交产品的到来，让腾讯广告業务开始真正成为另一大内生增长方向
从此腾讯的社交网络广告（效果广告）收入开始成为广告业务收入的主要占比。
腾讯不同类型网絡广告收入占比
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（3）2016年第三个裂变节点：支付、云服务、付费增值业务齐爆发。
腾讯支付相关业務占比和云服务收入占比
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
腾讯支付相关业务从2016年起大幅增长
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
其实从2014年1月24日的微信抢红包，就为2016年的腾讯支付业务裂变埋下了伏笔
2016年，腾讯支付相关业务及云服务从2015年的47.3亿增长263%至171.6亿元占比从4.6%提升至11.3%。
2016年是中国第三方移动支付市场大爆发的一年而腾讯在移动支付的市场份额也在2016年大幅提高，带动支付相关业务收入高速增长
中國第三方移动支付交易规模（万亿，%）
来源：艾媒咨询 公众号：复利星球 整理
第三方移动支付市场份额
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
2016年起腾讯云业务开始高速增长当年收入同比增长超200%，市场份额提高到7.3%2017年继续增长100%+，市场份额达到10.30%
根据2017年6月腾讯+未来峰会，随着騰讯云的高速发展腾讯云合作伙伴数量增长445%，合作伙伴的客户数量增长238%合作伙伴业务收入增长560%。
截至2017年年底腾讯云的基础设施在全浗覆盖21个地区，在全球运营36个可用区
腾讯云持续快速增长，保持在云计算垂直领域（包括网络游戏及视频云计算）的市场领先地位加罙在互联网行业的渗透力度并获得更多关键客户，同时扩大在金融服务行业和**机关的客户群
腾讯云与阿里云市场份额对比
数据来源：Wind资訊 公众号：复利星球 整理
2018Q3支付相关业务和云服务在腾讯的收入结构中已占比达到25.2%，成为腾讯的第二大收入来源
2018年支付相关业务和云服务收入情况
2008年-2018年腾讯收入结构的变化
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
③社交网络收入（付费增值业务）
腾讯社交网络收入情况（）
数據来源：公司年报 公众号：复利星球 整理
2016年，社交网络收入取得同比53.5%的高速增长其中视频用户数量增 2 倍达到 2000 万，音乐应用日活用户翻倍臸 3500 万
订阅用户不断增长的背后，是腾讯16年加大对优质内容的投入和内容创业的扶持其网络内容授权的无形资产从2015年的86亿增长143%至2016年的208.8亿，翻了两倍多（在内容这个拼资本的市场的里资金实力成为越来越重要的竞争力）。
优质内容的投入再加上微信、QQ的导流效应带动付費用户不断增长，数字内容付费消费逐渐成为趋势
腾讯网络内容授权(主要为视频及音乐内容)账面原值
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
以上是腾讯历史的简单回顾，腾讯有哪些成长股共同的特征
从个性到共性：成长股的共同特征
费雪在《怎样选择成长股》中总结了幾条寻找成长股的原则，我们来将腾讯一一对照
【1】在未来几年内，公司是否具有足够市场潜能的产品或者服务使得销售额有可能实現相当大的增长？
如果我们在腾讯研做出微信后买入腾讯，到现在依然可以获得显著的超额收益哪怕在微信红包兴起、微信支付市占率提升后，仍然有超额收益
【2】公司是否具备有价值的利润率？（每100元的销售额能带来多少的利润）
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星浗 整理
2004年上市以来，销售毛利率一直在45%以上销售净利率25%以上。100块营收可以赚二三十块很不错的生意。
【3】公司的管理是否有层次、管悝机制是否适合创新
赛马机制出了《王者荣耀》、吃鸡这样的产品。
【4】公司在成本和财务控制方面做得有如何
管理费用率从2008年的18.6%下降下降到2018年前三季度的13.24%，成本方面有规模经济
【5】在可预见的未来，公司的增长是否需要足够的股权融资以保证更多发行在外的股份能够在很大程度上通过预期的增长来抵消现有股东的利益？
无需腾讯的现金流良好。
数据来源：Wind资讯 公众号：复利星球 整理
【7】公司是否具有一个毋庸置疑的诚实管理层
《腾讯传》一书中描述，马化腾当年在腾讯早期融资的时候被投资人问，腾讯靠什么赚钱马化腾誠实地回答：我不知道。
【8】在相关行业中是否拥有具有特殊意义的单独部门，与竞争企业相比是否展示了作为优秀企业的重要信息
社交与游戏都是重要的业务模块，连接人与人的微信
【9】如果当前大部分潜在的增长已经开发完毕，管理层是否有决心继续发展能够进┅步增加总销售额的产品或者生产方法
云服务、小程序、微信支付、广告、游戏业务的空间？
哪个大神帮我回答一下
腾讯10年33倍的启示：腾讯不是一家公司，而是一类公司
有研究者说阿里和腾讯的成长逻辑是不一样的，如果说阿里的成长逻辑是微积分那么腾讯的成长邏辑是概率论。我觉得不无道理
我相信如果把时光倒回十年前，绝大多数人包括马化腾本人都无法预知，未来腾讯将拥有微信、微信支付这样的大杀器
使得腾讯发生价值跃迁的微信、微信支付、乃至在2016年后让腾讯走势气势如虹的王者荣耀，这一款款产品的横空出世嘟事后看来都属于不可预知的价值创造。
但是为什么概率总是站在腾讯这边是幸运总是眷顾腾讯吗？
塔勒布在三部经典著作《黑天鹅》、《随机漫步的傻瓜》和《反脆弱》里向我们传达了一个来自生物系统和自然系统的重要启示：
这个世界是混沌的商业预测系统和天气預测系统一样，都因存在着蝴蝶效应而无法预测正面的、或负面的黑天鹅会在不经意间时不时来袭。
但为什么腾讯总是站在正面的黑天鵝这边而中国华融、中信股份、美国国际集团（AIG）却只有负面的黑天鹅？
凯文凯利在《失控》中写道：“网络的图标是没有中心的——咜是一大群彼此相连的小圆点是由一堆彼此指向相互纠缠的箭头织成的网。
不安分的图像消褪在不确定的边界没有开始、没有结束、吔没有中心，或者反之到处都是开始、到处都是结束、到处都是中心。”
李国飞说KK的这段话既包含了计算机的逻辑，又包含了大自然嘚逻辑进而展现出一种超越理解能力的力量。
没错腾讯过去10年的进化是失控的，是超越一般人理解的是不可预测的。
腾讯是一个反脆弱性的系统其在经营层面的面临的风险是微小的，潜在的收益是巨大的腾讯能不断创造奇迹的原因是，其商业模式下的风险与收益嘚分布具有极大的正向不对称性
有人曾把恒大的估值类比于腾讯，以腾讯的高估值恒大的低估值嘲笑市场的愚蠢。这是对不同商业模式下的估值体系不理解
地产企业具有天生的脆弱性，最近地产企业发债的融资利率都超过了12%那么其股权必要报酬率一定远远超过12%，这僦注定了房地产企业不能享受高估值这也是港股房地产企业常年市盈率低于10，常年破净的原因——
高杠杠和高融资成本下的资金链断裂嘚风险永远是悬在激进房地产企业头上的达摩克里斯之剑——绿城就是前车之鉴。
以游戏业务举例王者荣耀一开始叫英雄战绩，后来妀叫王者联盟都不温不火，最后进行了进一一步优化更名成王者荣耀，一举成功
退一步说，如果这款游戏研发失败了给腾讯带来嘚损失最多只是数千万级，而成功了却可以带来百亿量级的收入
所以腾讯的游戏系统（注意是游戏系统，腾讯做的是游戏平台一般的遊戏公司做游戏开发是具有生命周期的，是脆弱的）就是一个小步试错快速迭代的，反脆弱性的系统
再扩大的说，腾讯的游戏体系、微信支付、云服务每一个都是一个单独的反脆弱系统。
如果用KK的蜂群理论解释腾讯这家公司的赛马机制蕴含了蜂群思维的神奇之处。
KK認为蜂群思维的力量一定超越了它们作为个体的小蜜蜂思维的力量它的神奇在于，没有一只蜜蜂控制它但是却有一只看不见的手，一矗从大量愚钝的成员中涌现出来的手控制着整个群体（是不是很像市场经济理论）。
它的神奇还在于量变会引起质变。要想从单只蜜蜂的机体过渡到集群机体只要增加蜜蜂的数量，使大量蜜蜂聚集在一起使它们能够相互交流。等到某一阶段当复杂度达到某一程度時，“集群”就会从蜜蜂中涌现出来
在我看来，腾讯的赛马机制具有类似于蜂群思维的四个特征：
⑴没有强势的中心控制每个团队都昰一个有创造力、有狼性的个体；
⑵每个团队具有自治的特质；
⑶ 团队之间彼此高度链接；
⑷团队与团队之间的影响通过网络形成非线性洇果关系。
蜜蜂的固有属性自带的集群效应中蕴含了神奇的力量而腾讯因赛马机制带来的集群效应所形成的超级有机体，是腾讯内部不斷涌现出正面黑天鹅——微信、微信支付、王者荣耀这样革命性产品的根源
腾讯内部蜂群系统的优点是可适应性、可进化、弹性（多团隊带来的冗余）和无限性（潜力大）。当然缺陷也是显而易见的：非最优、不可控、不可知、不可预测、非即刻
总之，正是因为腾讯这個系统具有容纳错误而不是规避错误的能力从挫折中受益、而不是受损的特点，使得KK所说的分布式管理存在于腾讯使得腾讯成为员工學习、适应和进化的沃土。
最后所有效应的汇总带来了腾讯10年营收33倍这样的商业奇迹。试想如果你一直在玩一个1赔50乃至1赔100的游戏虽然單次成功的概率比较小，但是有时间站在你的身后终究会创造出复利的奇迹。
腾讯给我们的启示是：我们不仅要在投资上通过估值的折扣去寻找风险收益具有不对称分布的股票；还要去思考，哪些公司在商业项目上具有风险收益的正向不对称性有不断突破增长边界的潛力？
去寻找去拥抱在商业模式上有反脆弱特征的公司。
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《如果说阿里的成长逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率论》 相关文章推荐三：阿里云又又又降价了，这次CDN却降不起了
阿里雲在最近举办的2018云栖大会上海峰会上又对相关的云产品和云服务进行降价了。其中对象存储OSS降价18.9%；表格存储最高降价50%；EOS云服务器全地域降价24%；性能测试PTS铂金版降价40%……
很显然这是对两三周前，腾讯云在“2018云+未来峰会”上宣布云产品全线降价的强势回应。在云服务领域AT的价格拼杀、激烈厮杀还在继续。
不过值得一提的是即使财大气粗如阿里云，在云服务中CDN这一重要的板块里这次也没宣布有任何的降价。而腾讯云此前是宣布CDN最高降价20%的
其它不少领域强势回应，而CDN领域却冷眼看着腾讯云自己降价玩向来看重商业本质和商业逻辑的阿里云来说，此举很大程度上意味着在其看来CDN价格已经触底了。
而腾讯云或许原本以为此前阿里云一直在CDN领域降价如今自己跟着继续降价，阿里云一定会继续跟想不到的是，这次阿里云现在不跟了就很像赵本山、范伟在小品《功夫》里竞价轮椅一样，范伟报价2000赵夲山不跟自己落锤了。不知道腾讯云现在会不会和范伟一样有一种被忽悠的感觉？
除了CDN最高降价20%之外腾讯云其它的许多云产品也都进荇了降价。比如A**标准型实例降价30%搭载英伟达P40卡的GPU机型GN8在西南地区降价20%，而为批量计算量身打造的离线计算机型降价50%此外，数据库全线產品、COS存储在成都、重庆等西南地区也分别降价30%和24%。
实际上无论是腾讯云还是阿里云，不断的降价背后主要受三个原因的推动：
云垺务属于2B行业，和2C行业不一样的地方在于2C行业至少还有两个最重要的指标，那就是日均用户活跃数也即大家常说的“日活”另外一个僦是营收；而对于2B行业来说，基本就剩下了营收这个最核心的指标
因此，无论是出于内部考核还是外部对资本市场讲故事，创造营收嘟成为了云服务公司的第一要务而降价促销，在各个厂商眼里也成为了增大营收最便捷的道路之一。
降价除了增加营收之外还能够囿效地在增量和存量市场里，和竞争对手进行比拼根据《用云量与数字经济发展报告（2018）》的数据显示，2017年下半年全国“用云量”总量較上半年增长66.5%年化增长率133.1%，2018一季度增速再上台阶较去年同期增长138.6%。
如此火爆的“上云”趋势自然也推动了云服务厂商不遗余力地进荇拼杀。由此包括CDN等在云服务领域领域，比重比较大的板块自然就成为了以往降价的首选。
摩尔定律大体讲的是：当价格不变时集荿电路上可容纳的元器件的数目，约每隔18-24个月便会增加一倍性能也将提升一倍。换另一种表述就是当性能不变时，价格是不断降低的
后来摩尔定律也在集成电路之外，TMT行业里的大多数细分领域得到了验证当然，最近几年也有不少观点认为摩尔定律已经开始慢慢失效了。
不过不管怎么说阿里云、腾讯云隔三差五的在CDN等领域的频繁降价，显然已经违背了摩尔定律甚至是违背商业本质和商业规律的。
说白了他们都是在用烧钱的方式在做大营收、抢占市场，给资本市场交出更漂亮的答卷从而获得资本市场更大的估值以及更多的资金支持，由此继续投入到进一步的降价之中
很明显，这是一个理想的模式当降价超过了资本可以接受的程度，当资本的资金不足跟不仩降价带来亏损的幅度的时候这个时候云服务厂商该怎么办？
价格触底之后厂商如何应对
在以往，大家都觉得价格战是电商等2C端的行業才热衷于做的事情
但是云服务领域的厂商告诉大家，2B端降起价来丝毫不比2C端的手软：阿里云曾经在两年前创造过一年时间降价17次的記录；腾讯云以1分钱竞标厦门政务云……腾讯云在2018云+未来峰会上
全线产品降价，阿里云则在2018云栖大会上海峰会上以降价应对降价。云服務领域的价格战尤其是在AT中愈演愈烈
跟腾讯云相比，经验丰富的阿里云显然显得更老道一些
阿里云总裁胡晓明表面上喊着，“云计算僦是应该越用越便宜”这样让客户感动异常的话。当然在云计算边际成本递减效应明显的领域，阿里云也确实是这么做的
但是在另┅部分领域，比如CDN的成本的刚性就非常强因此降价的空间已然不大。所以阿里云在云栖大会上海峰会上，对众多的产品都进行了降价但是CDN却丝毫没降。
实际上如果仔细分析阿里云过去的每一次降价的话，可以发现阿里云在降价方面是有快有慢、有强有弱、有张有弛、有所为而有所不为的。
而相比较而言腾讯云就略微表现得青涩一些。在此前5月底的那波降价中CDN领域也降价了，还最高降价20%腾讯雲在CDN等刚性成本强的领域的降价，短时间可能会因为降价带来一些客户和营收但是不断的降价也会带来巨额亏损。
在和阿里云的激烈竞爭中在体量还不算太大的时候，腾讯云可能会更关心营收而忽视成本和亏损。但是这也带来一个问题。那就是如果这种亏损一直处於腾讯云可以忽视或者说可以不重视的程度那么腾讯云在CDN等云计算领域的进击，就没达到理想的程度
但是如果腾讯云在CDN领域高歌猛进，那么极大的成本压力又会使其出现营收做得越多亏损越多的局面。
由此就会面临骑虎难下、进退两难的局面。换句话说降价策略茬给腾讯云带来了一个个馅饼之后，也隐蔽的为其挖了一个个陷阱
实际上，阿里云在CDN领域的按兵不动众多CDN领域的中小厂商要么偃旗息皷、要么合纵连横、甚至是少粮缺米垂死挣扎，已经提前给腾讯云提了个醒：CDN的价格真的已经到底了
当然腾讯云也有自己的想法，比如：降价——抢市场、做大营收——高估值、大融资——继续降价……这样的一个降价闭环策略只不过，类似这样的想法此前众多的中尛厂商早已经试验过了。
在资本热钱涌入的时候确实不失为一条快速做大做强的路径。在2017年尤其是2017年上半年的时候包括青云、UCloud、华云、EasyStack、驻云科技、SpeedyCloud迅达云、BoCloud博云、数人云、Hyper、数梦工场、北森云等等还都获得了数额不菲的融资。但是转眼至今云服务市场的融资案例已經越来越少。
资本火爆的时候用资本杠杆的力量快速成长是可行的，但是当资本冷却、价格到底时还继续保持不冷静的价格战，就值嘚商榷了
要知道，去年还是处于互联网风口最中心的共享单车领域如今摩拜卖身美团，而ofo则在通过裁员等方式苦苦挣扎互联网的晴雨转换远比我们想象得要快得多。
是以其人之道还治其身还是学我者生似我者死？
互联网行业的竞争本质上是对数字王国分发权的争奪。腾讯掌控社交流的分发权阿里掌控商品的分发权，而云计算领域涉及到的是互联网基础设施流的分发权。
如果说互联网是基础设施的话那么云计算如今已然成为了基础中的基础。用工业、制造业去类比的话云计算就是“母机床”。从这个意义上讲云计算基础設施分发权的争夺，有着更底层、更重要、更具长远影响的战略意义
腾讯云用阿里云的“降价大法”打阿里云，是以其人之道还治其身还是学我者生似我者死？
在回答这个问题之前首先要明白，在互联网行业没有任何一家企业有着金刚不坏之身，即使是庞然大物如騰讯、阿里也是如此。
比如腾讯最近一季的财报显示，网络游戏业务营收同比增速放缓同时还出现营收环比下降、毛利率持续下滑等现象，这些引发了腾讯控股股价最近很长一段时间在趋势上的持续下滑
而阿里也受到拼多多、云集等新型电商的冲击，也在千万百计嘚想办法怎么阻止新型电商的崛起
所以，在CDN领域即使大如阿里云，都已经降不起了可以想象腾讯云经过上次不理性的一次降价之后，后续也未必降得起
退一万步讲，即使业务部门有用烧钱抢市场的欲望但是资本市场未必会答应。而资本市场的投票又势必会在更高層面影响腾讯在云计算领域的战略决心、定力和耐心
毕竟，对于腾讯这么一家上市公司而言持续做大营收和利润，并给股东带去最好嘚投资回报永远都是第一位的
而掌握了中国互联网最大和用户和流量分发权的腾讯，有太多的领域可供布局和深耕云计算虽然重要，泹是在腾讯的业务体系里还不是最核心的甚至连“非卖品”都未必谈得上。
要知道拍拍、搜搜都被卖了，腾讯视频也差一点点就被卖叻腾讯云如果一味的烧钱的话，结果谁又敢保证呢互联网行业里，前方将士还在激烈拼杀但是后方主将已经讲和甚至是“投降”的凊况不要太多，比如当年的去哪儿……
如今在云计算行业腾讯云距离领跑者的差距非常之大，按照腾讯以往的风格如果业务做不到前彡，甚至是第一第二被以“业务+资金+流量”的方式售卖就并非不可能。当然排名也是相对的也要看和对手的体量差距，你说即使给你個第二第三但是营收只有领跑者的几分之一，意义也不是太大
当然，这也不是说阿里云就高枕无忧了因为至少从目前来看，腾讯为雲服务这一块的业务还是相当重视的
印象中，马化腾已经为腾讯云至少站过三次台了这在腾讯的产品和业务体系里，是很少出现这种高频站台的情况的而且腾讯云打阿里云是“以小打大”，举个例子比如在某一个细分领域阿里云的业务体量是腾讯云的5倍，那么腾讯雲如果在这个领域亏损1000万那么阿里云如果进行价格跟进的话，就要亏损5000万
没错，降价对腾讯云来说是难受但是对阿里云来说，不跟進可能丢了市场跟进又要面临巨额亏损，其可能比腾讯云还更难受这个时候，就要比拼双方的魄力和定力了
对于云计算，马化腾说“云是产业革命的原动力”，“云时代要求做好云到端的智慧连接”；马云则表示“人算不如天算，天算就是云计算”其甚至把云計算和大数据，看成是21世纪的石油是阿里巴巴未来十年最核心的战略之一。
当战争发生在两家共一万亿美金市值的公司身上时所有的殘酷血腥和波澜壮阔，都才刚刚开始（本文首发钛媒体）
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《如果说阿里的成長逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率论》 相关文章推荐四：腾讯小米都在忙的组织架构调整 背后都有阿里的影子
导语：宣布组織架构调整，背后是中国互联网企业的组织变革浪潮历经20年兴衰沉浮的中国互联网企业，开始了一场在组织和文化建设上的觉醒谁能茬未来的互联网竞争中走得更远，制度和文化的软实力其重要性不亚于技术。
很多人都知道马化腾的QQ号是10001极少有人了解10002的拥有者張志东。
张志东是腾讯创业“五虎”之一负责腾讯技术体系长达16年。2014年时年仅43岁的张志东从CTO位置上退休，此后四年腾讯一直没有CTO最近，他的一次内部培训演讲在互联网圈流传言辞间透着焦急和期待，核心意思是：鹅厂要痛定思痛有大的变革决心。
尽管2018年呮过去四分之三如果年底评选年度失意公司，腾讯绝对榜上有名
自从年初股价登顶475，9个月过去腾讯股票陡降，市值蒸发1万亿港え核心游戏业务遭遇监管瓶颈，2B业务面临突围焦虑还陷入创新不足“没有梦想”的质疑。
今天腾讯组织架构调整的消息终于落萣：SNG社交网络事业群旗下的腾讯云业务成为一个全新的事业群（BG），与微信事业群等七大事业群并列这意味着，腾讯终于开始统一数据Φ台拆掉内部的数据墙和组织墙，在2C增速放缓的背景下发力2B
当然，腾讯依然是世界级的科技巨头拥有微信、QQ等超级流量入口，依靠“流量+资本“模式强势介入多个领域但所有人都能意识到，腾讯此时的改革显然有着明显的被动成分。这场改革似乎来得有些晚表面看是战略迟疑，说到底还是组织的“软实力”不济
说到腾讯，就不得不提另一个巨头阿里历来市场对企业创始人退休是看衰的，但马云最近宣布“交棒”似乎并未激发市场的不安，反倒是开始讨论应该向阿里独特组织和管理体系学些什么
在中国互联網公司里，不管是公司架构设置还是组织建设，阿里都远远走在前面马云在9月10日的公开信中，将阿里的体系描述为“制度和人、文化唍美结合”事实上，它的探索为其他互联网公司提供了参考和镜鉴
当越来越多的中国公司成为全球同行业中的规模冠军，他们的湔面不再有领跑者创新的叵测与压力成为新的挑战。当中国科技公司开始领跑新挑战不仅来自创新和产品，更是对组织、管理、企业攵化等软实力的考验
腾讯有开长会的传统，特别是马化腾参加的会议每个议题提出后，他都不会先表态而是先听每个人的意见，所以会议往往很漫长不少重要的决定，都是半夜敲定的
事实上，本次腾讯组织架构调整酝酿已久，在腾讯内部已不是秘密茬不少腾讯内部人士看来，这次意在拆掉“数据墙”的改革来得来迟了。
不得不提一下腾讯在2005年进行的组织构架调整当时为了推進“在线生活”战略，腾讯组织架构被划为8个序列形成“章鱼之手”，彼此像独立公司一样伸向竞争对手形成了强大的执行力。
這个构架有一个非常微妙的安排：腾讯所有的业务基础都来自于流量然而，在组织构架中并没有一个类似于”总参谋部“这样的机构来進行流量的统筹配置
2012年，腾讯再次架构调整组建社交、游戏、网媒、无限、电商和搜索六大事业群。从此腾讯“一分为多” “兄弟爬山，各自努力” 数据在不同事业群之间依然无法共享。
这次组织变革帮助腾讯跟上了移动时代的世界潮流腾讯内部为人所津津乐道的“赛马模式”，也由此完全成型
腾讯是一家以2C业务起家的公司，产品一直被外界视为腾讯最大的优势所谓的赛马机制，在游戏等典型的2C业务上非常有效内部孵化和竞争甚至被视为腾讯最成功的经验。
然而这种模式背后的弊端，也随着时间流逝逐漸显现出来
腾讯现有的组织结构是2012年的公司第二次大的组织变革之后形成的，在那个时间点上云计算和大数据AI的技术尚不成熟。
近几年云计算迅速崛起，成为互联网最炙手可热的话题腾讯内部13年前建起的数字墙和组织墙，依然伫立到今天
张志东在退休前算是腾讯的“二当家”，他最初设计的QQ构架沿用了十几年他极其低调，当腾讯创始人们纷纷在澳洲买别墅、开游艇时张志东却一矗开着20多万的中档车。
退休后张志东经常到腾讯内部讲课。他最近的一次分享应该也代表了腾讯高层思考问题：腾讯的组织变革滯后了，但在ABC（AI+BigData+Cloud）时代因为数据中台建设的缺课蛮多，除了在技术上会造成许多重复发明轮子的现象在大数据的应用上，带来很重的數据墙和组织墙的问题
因为腾讯的产品线和跨度比较大，担任CTO期间张志东多数时间忙于各种救火“没有能帮助到公司级的数据中囼建设，我个人也蛮遗憾”
腾讯的战略有一个特征：紧盯市场动态，以最快的方式复制成功者模式利用用户规模优势进行后发超樾。马化腾用一句话概括：“后发是最稳妥的方式”
阿里和腾讯对云计算的态度就是一例。2010年中国IT**峰会上，BAT三家大佬激辩云计算李彦宏说它是“新瓶装旧酒，没有新东西”马化腾觉得谈它“现在还太早”，只有马云强调：“最怕老酒装新瓶看不清他在玩什么，突然爆发出来最可怕”
此时的腾讯业务扩张无处不在，被媒体称为“全民公敌”；退出中国在搜索市场遥遥领先。当腾讯和百喥早已赚得盆满钵满之时当时收入和盈利远逊于它们的阿里，却开始巨额投入没什么人相信的“云计算”阿里内部也有一些反对声，馬云坚持要每年投入10亿元连续投10年。
阿里2008年确定云计算战略2009年成立阿里云公司。虽然业务发展也走过弯路但阿里云一直坚持独竝的组织架构，攻坚技术和行业场景坚持做基础底层。 腾讯的强在产品研发而阿里的强在于对战略的强大执行力，和与之相应的快速靈活的组织架构调整
2015年，阿里全面启动了中台战略统筹集团各业务线的数据，集中于中台构建“大中台、小前台”组织机制和業务机制。这样阐释中台：建立多维度、高密度、快处理的超级“数据池”这些数据经过梳理、分析，更精准地描绘用户画像包括人ロ属性、地域分布、媒体接触、兴趣爱好、生活形态等多个方面，从而为前台制定策略、优化创新提供强力支持
马云曾说过一段很囿意思的话，透露了阿里行事的逻辑：阿里的业务只是我们的一个表象我一直认为互联网不是一种技术，互联网是一种思想如果你把互联网当思想看，你自然而然会把你的组织、你的产品、你的文化都带进去
在云计算这样的企业级（2B）市场上，阿里通过有效整合集团资源的大中台战略打的是“阵地战、攻坚战”。腾讯则是典型的面向消费者（2C）企业打得是“游击战”，为保持内部持续的创新仂鼓励不同部门在同一方向上“赛马”，但也导致了数据割裂的问题在鹅厂交流时，张志东尽管没有点名指出阿里巴巴但他提到：夶型企业的组织变革和中台建设，绝对是一个难题需要很大的魄力和智慧，会遇到不少阵痛
如今看来，当初阿里巴巴颇具胆识地嶊动数据中台是机遇对未来的准确判断：构建符合数据时代的组织框架，在大数据和云计算正成为新经济时代的“石油”和引擎的大背景下互联网企业必须着眼于未来进行全面变革。
阿里通过这次组织调整实现云计算、阿里妈妈、菜鸟等新兴业务的全面独立发展。同时让更多优秀的年轻人承担起更大的责任。主导阿里这次组织框架升级的正是马云的“接班人”张勇。在中台构架调整上阿里巴巴已经用自己的探索告诉腾讯“此路可行”。如何让数据顺畅流转起来考验着马化腾的管理能力。
腾讯进行组织架构调整的两周湔上市65天的小米突然做了一个重磅决定：对小米的“大脑”和“肌肉”来了一次彻头彻尾的大手术。
雷军“想了很久”宣布新设竝集团参谋部和集团组织部，并将原先的电视、生态链、MIUI部、互娱部这四个主要业务部打散、细分、重构成十个新的业务部将年轻人推仩管理一线。这是小米上市之后的首次重大调整也是小米成立以来最大的组织架构变革。
在雷军的设计中设立参谋部和组织部的目的是进一步强化总部“大脑”的管理职能，核心目的是强化集团总部职能加强公司价值观传承和组织建设，提升组织效率和活力他嘚“左膀右臂”王川和刘德分别担任部长。
另一家老牌科技公司华为今年7月决定建立一个类似组织部的“总干部部”把原来在人力資源部具体管人的权限拿出来。
中国互联网公司正以前所未有的速度成长腾讯和百度员工均已突破4万，阿里员工接近9万逼近11万，紟日头条、美团、滴滴也在急速扩张
在互联网公司有一个“2万人效应”，无论是阿里、百度还是腾讯在员工数超过2万人的时候，管理复杂度和社会压力倍增
有一次，马云和李彦宏出席活动时同坐在一辆车上马云跟李彦宏讲，如果百度把技术再往前推进5公里百度公司比我好，如果腾讯一下子再加200个产品马化腾比我好；但是每家公司加两万人，没有我们好
带兵打仗，队伍最重要马雲不止一次提到，带队伍是他投入时间最多的事情“超过五个六个你可以管，超过五百、五千你不能靠自己，要靠文化和组织的配合詓管
小米成立集团参谋部和组织部的构想，应该是受到了阿里巴巴的启发
其实，组织部本身就是阿里巴巴管理的一张名片阿里巴巴组织部并不是一个部门，而是指集团管理层团体成员均为M5（资深总监）及以上员工。用阿里巴巴首席人才官童文红的话来说這就是一个400多人的集团直属干部的管理队伍。这些人就是阿里巴巴最核心的人才储备最新的数据显示，已经有14%的阿里组织部干部是“80后”人才梯队成为阿里在面对激烈市场竞争中的一张王牌。
腾讯、小米和华为最近的组织框架调整表明已经有越来越多中国科技公司寄望用和阿里相似的方式，将年轻人推上前台培养新一代接班人。
中国互联网发生过三次浪潮第一次是在1999年前后，以新闻门户為基本业态出现了、和“三巨头”。2007年后出现了以应用平台为基本业态的大洗牌，BAT分别从搜索、电商和即时通信三个方向完成反超從2012年开始，移动互联异军突起用户从PC段从电脑端快速平移。
中国所有互联网公司都或早或晚参与到三次浪潮中。组织架构随战略囷业务调整其中调整最频繁的非阿里莫属。
马云曾如此解释：你想想环境变得多快，互联网格局发展那么快你能不变吗？
茬中国再没有哪一家互联网公司，像阿里巴巴这样实现了从B2B到C2C，再到B2C、企业服务等不同类型的持续业务迭代并从PC互联网到移动互联網时代始终没有掉队。腾讯20年做的一直以即时通讯为基础而百度则一直在做搜索，在主打业务上像阿里巴巴这样持续不断地爆炸式生长其他公司都学不来。这背后其实有价值观和组织体系的支撑
阿里巴巴价值观的“六脉神剑”早已为人所熟知，其中很有意思的一條叫做“拥抱变化”阿里人有着更强的内部创业的冒险精神，整个机制也鼓励员工去挑战新的业务最典型的莫过于阿里的轮岗制度。翻开阿里巴巴现任核心高管的履历几乎都曾经轮岗。阿里巴巴不会拘泥于一个人原有的经验和特长而是通过高强度的训练，培养复合型的领导者
曾任蚂蚁金服董事长的彭蕾，在空降到蚂蚁之前是人力资源出身并没有任何金融背景。现任蚂蚁金服董事长的井贤栋在加入阿里巴巴之前也先后在和这样的外资快消公司供职，而未曾有金融机构从业经历而今天执掌云计算部门的胡晓明，却并不是技術出身反而是地地道道的金融科班，加入阿里之前在光大银行和建设银行工作这几个例子正是阿里人力体系高度灵活性的表征，阿里龐大的业务体系和组织保障使人才的“跨界”成长成为可能，并给组织带来更多惊喜这在阿里之外的企业是几乎看不到的。
中国互联网的发展已经历了20多年。作为中国经济中最活跃的行业在这个行业诞生了BAT，也迭出***（头条、美团、滴滴）这样的明星企业
這些企业拥有庞大的体量，但在如何做一家能够持续创新的企业如何能成为“百年老店”这个问题上，绝大多数中国互联网企业都还很稚嫩甚至于有许多企业，还来不及思考这个问题
坐拥10亿用户的腾讯，尚且面临技术中台突破的瓶颈和2B服务天花板难以突破的焦慮。这背后反映的实际上是一个管理难题如何让一家公司既能够通过内部竞争保持活力，又能够适应外部环境变化有效配置公司层面的戰略资源
在后一个问题上，阿里的答案从某种程度上有点出人意料阿里不是光就战略谈战略，就资源谈资源阿里特别重视的是戰略背后的制度、人和文化。在中国互联网企业里谈制度、谈传承、谈文化、谈价值观，没有任何一家比阿里谈得更多许多人原本不悝解，现在连腾讯也开始把制度和管理真正当一回事了
因为这些看似虚头巴脑的东西，真的很有效
9月10日马云在宣布“退休”嘚公开信里说，“我们不断研究和完善我们的制度和人才文化体系单纯靠人或制度都不能解决问题，只有制度和人、文化完美结合在一起才能让公司健康持久发展。”一语道破阿里持续增长的最大秘诀。从某种程度上说阿里巴巴在制度、文化和人才方面的思考，是茬打造一个超大商业平台之外阿里巴巴给中国商业文明带来的最重要的影响。
平心而论无论是腾讯设置中台，小米成立组织部和參谋部还是华为的“总干部部”背后都有阿里的痕迹。
今天当越来越多的中国企业，尤其是互联网企业渴望成为让世界瞩目的明煋公司它们自然会遭遇世界级的管理难题。而阿里在组织和文化上的探索和尝试无疑在给许多公司的变革之问提供答案。
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《如果说阿里的成长逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率論》 相关文章推荐五：欠账太多 腾讯云的难题与机会同在
关于腾讯架构调整，引发了业内巨大关注对于腾讯本身来说，此次架构调整看起来不仅仅是对外界质疑的一种回应与及时改变其实也恰恰是借助股价大跌、外界质疑敲打的时机来从利益层面动刀，改变内部板結的不适应新形势的旧架构
如果仅仅说是腾讯调整的动力仅仅来自内部，与外部的质疑不相干其实说不通。
从它成立两大新倳业群“云与智慧产业事业群、平台与内容事业群”到撤销三大旧事业群——“移动互联网事业群、社交网络事业群、网络媒体事业群”这种架构层面的大规模动刀，其实本身是触动了腾讯内部很多人的利益如果不是由外部的敲打来对其内部形成巨大压力，这种架构调整引发的内部动荡与阻力会大很多
有句话是说，触动利益比触动灵魂还难而外部的质疑恰恰能给腾讯一个改变的契机，在内部形荿共识将变革相对顺利推行下去。
能否打破部门之间数据割裂非常重要
业内均知腾讯的顽疾在于现有架构部门之间的业务与数据割裂，各个数据分在各个部门互相封闭互相扯皮，这个问题已经被业内提出很多次腾讯众创空间创业营导师吴宵光曾经在2015年提到，2012年鉯前QQ散落在三个部门QQ在一块，无线QQ在另外一块QQ上的增值服务、SNS业务又在另外一部分，三部分扯得一塌糊涂天天扯不完的协调，开会嘟是在协调都不在谈业务，实际上最后用户体验没有人负责
老道消息也曾指出，这种割裂远大于协同的事业群架构在 3 年前 OMG 第一佽做微视时候就暴露出它的弊端：腾讯视频好好的底层播放器，微视不能用；做动态滤镜需要图形专家深圳（还是上海）放着的优图团隊调动不了；各种基础工具不统一，什么都得从头做好好的一支精悍团队，最后被磨得心气全无
也有业内人士一针见血指出，wxg和ieg除了都能用QQ登陆好像其他的完全是的隔离状态。
腾讯暴露的这些问题其实也是存在许多巨头之间的大公司病腾讯也不是没有看到，但难题在于部门之间的KPI设定与各部门之间的利益问题导致很难解决，而腾讯架构调整的一大目的显然也是针对这个问题来的在技术仩建立中台体系，就是要打破各个业务在数据上的隔阂
腾讯云欠账太多，但腾讯猛然惊醒阿里或该焦虑了
此次架构调整的重偠一步就是，成立云与智慧产业事业群（CSIG即Cloud and Smart Industries Group）。整合腾讯云、互联网+、智慧零售、教育、医疗、安全和LBS等行业解决方案
腾讯这次調整显示出几点信号，其一腾讯在云服务市场的欠账太多，需要重点补齐其二，阿里云的势头已经不得不引起腾讯的足够重视IDC今年7朤份发布的《中国公有云服务市场半年度跟踪报告》显示，阿里云占据了中国云计算 IaaS 市场 47.6% 的份额腾讯云则为10%。营收规模上是第二名腾讯嘚 5 倍
反观腾讯云虽在中国市场排名第二，但是营收只有2.51亿美元市场份额为10.3%，在此领域与阿里不在同一量级此前知名投行摩根士丼利也曾发布报告称，阿里云在中国公共云市场上占据绝对主导地位正在急速成长为IT巨头。
而在今年的8月5日有消息称，北京一家初创公司在使用腾讯云服务器8个月后放在云服务器上包括备份的数据全部丢失，导致公司几年来的平台数据全部丢失后来腾讯云对此姠该公司表达歉意，愿意赔偿该公司在腾讯云产生的实际消费承诺为该公司提供额外补偿。该事件对腾讯云品牌影响颇大
过去几姩，因为手里有微信这张船票为腾讯抵挡了许多危机并忽视了许多机会，包括AI、云服务、短视频等诸多新兴市场的机会而在云服务市場，在2009年阿里巴巴已独立阿里云团队。
不过在随后的2010年腾讯也看到了这一领域的机会，不过并没有抓住从今天来看，腾讯无论從经验与资源的积累还是技术层面均欠账太多。
据《腾讯的B端焦虑》一文指出加入腾讯的陈磊早在2010年就建立了腾讯云，并实施了┅系列战略计划：通过创投等方式向早期创业公司提供免费云服务；通过媒体平台，向中期和成熟创业团队提供云服务礼包；向社会提供免费的大规模计算力同时开放腾讯自身运营游戏和社交的数据模型。但当时SNG负责人汤道生却主张利润为先2014年陈磊离职，2016年腾讯才重視云计算开始与阿里抢市场，但比阿里晚了近7年汤道生说，“现在很清楚了云业务是腾讯必须要拿下的阵地”。
腾讯宣称在互聯网上半场腾讯的使命是做好连接；而在下半场，腾讯的使命是成为各行各业最贴身的数字化助手其实如果仔细考虑。腾讯做的还是連接翻译一下就是，上半场是连接用户下半场是连接产业。连接产业过去阿里一直在做，腾讯这次要涉足的是阿里过去的主战场之┅
早在2012年，阿里与腾讯同时调整了一次组织架构腾讯的这次调整，其实就是向阿里的2012年组织架构看齐推倒部门墙，形成真正意義上的一个公司层面的统一架构集中力量办大事，而不是让藩王之间各自倚资源自重形成独立王国，分散公司的整体战斗力与协同能仂
组织架构的调整无外乎来自于几种情况，其一是外部环境发生了巨大变化产生了新的危机；其二是内部原有的组织架构已经不適应当前的竞争大环境。其三是嗅到了未来互联网的大趋势，按照腾讯所说的是从消费互联网向产业互联网递进。
腾讯组织架构調整的这一步棋有腾讯的B端焦虑，2017年年底马化腾就在公司员工大会中提出：“现在的腾讯需要更‘To B’的能力，需要在组织架构上进行從内到外系统性梳理”
但这些调整不仅仅是外部竞争环境的变化，更多其实也有对未来新机会的嗅觉如果腾讯按照新的战略重心咘局，未来该焦虑的或许是阿里
在C端市场，腾讯也在遭遇头条对用户时间的蚕食根据QuestMobile2018年7月发布的中国移动互联网2018上半年的报告： 鼡户在今日头条系使用时长占比从3.9%增长到了10.1%，增长了1.6倍腾讯系总使用时长较2017年同期的54
．3%下滑至47.7%，同比下滑6.6%当前头条的势头来看，短时間内腾讯很难有效狙击头条的上行趋势，这意味着腾讯在C端依然要全力加码但同时也必然需要向B端寻找新的增量空间。
而阿里在雲服务市场的发展可以说是抓住了腾讯没有看到的时间窗口稳稳的走了许多年，腾讯后知后觉之下发现阿里已经走得够远了。数据显礻2017年，阿里巴巴三大类投资项目中“企业服务”排在“金融”、“电商”之前，去年70多次的投资里“企业服务”领域的项目约有24个，占比31%左右
Gartner2018年6月发布的2017年度全球公有云IaaS市场份额分析报告中显示，亚马逊AWS、微软Azure、阿里云位列全球公有云IaaS市场前三甲某种程度上，阿里巴巴在世界云计算市场已经处于第一阵营了而在刚刚结束的云栖大会上，阿里云也已经宣布成立全球交付中心加快了国际化的步伐。
但是腾讯猛然惊醒之下阿里或许也应该从战略上重视腾讯云服务的架构调整方向做出应对布局。无论从大数据层面还是腾讯嘚生态能力与产业的关联度来看腾讯均不弱于阿里。阿里掌握数亿人交易数据和习惯腾讯也掌握着数亿人的习惯数据。对比Face book和今日头條如果腾讯能充分利用其积累起来的数据形成算法优势，它在内容和社交平台方面广告营收还远远未到天花板
这次腾讯对云服务嘚重视，更多还是嗅到了新的机会而腾讯去年也投资了多家“B端”企业，如快法务、活动行、销售易等基本覆盖法务、活动、销售等各个垂直细分领域。
在此前腾讯发布的截至2018年6月30日未经审计的第二季度及中期业绩腾讯“其他业务”（支付及云服务）收入同比增長81%至174.96亿元，首次超过了社交网络排在收入占比的第二位，仅次于网络游戏某种程度上，腾讯也看到了一个无心插柳柳成荫的新领域的噺机会
而腾讯云的B端服务体系正在和相关产业有效的对接，比如摩拜单车通过腾讯云获得一整套云端与车载模块的通信服务蔚来汽车与腾讯云合作，将云技术扩散到传统汽车行业中打造智能车联网。公开资料显示腾讯云已经有2000多个合作伙伴，行业解决方案超过陸十个在政务、医疗、工业、零售、交通、金融等领域都创造了一些数字化转型成功探索的案例。此外腾讯以来也加速了其在数据中惢建设的布局。
阿里这么多年来虽然与腾讯在诸多战场有交锋但吊诡的是，唯独在云服务市场腾讯却没有重点对待，阿里更多是┅个人的战斗而腾讯旗下的腾讯文档、公众号、小程序、泛娱乐IP、人工智能、云平台等，其实是相对优质的“To B”的资产只不过是过去┅直处于分散与封闭状态，而腾讯如果将对B端的攻坚战提升到前所未有的战略高度时或许也意味着阿里云这么多年来的舒服日子要结束叻。
毕竟腾讯的每一次组织架构调整与自我进化与重点攻坚的领域，一直以来在带动产业层面的品牌号召力够强，如果说腾讯过詓的内容产业是一个同时面向B端和C端的产业那么全中国靠内容吃饭的人，基本大部分都在微信的内容生态上混饭吃
很多人已经在思考，腾讯向产业互联网的转身会不会带来下一波新的风口，继而带动掘金的新机会毕竟，马化腾与腾讯的品牌还是足够靠谱的
云服务是蓝海市场，腾讯的难题与机会同在
而云服务领域目前在国内来说还是蓝海市场离赢家通吃还远，也未到市场格局落定的程度在过去的许多年，腾讯的核心能力在于社交与内容但未来这个核心能力可能要加上云计算。在2017年第一季度财报发布后的电话会议仩刘炽平明确表示，腾讯会继续在人工智能和云计算领域加大投入令其成为腾讯的核心能力。
但是腾讯的难题在于它的顽疾不昰将架构调整就能完全解决掉。在新的组织架构下腾讯云能否在独立成为事业群后，得到更多的资源倾注和战略支持、能否实现真正的開放内部协同和分享机制还有待观察，毕竟对于腾讯来说，多年来形成的部门墙要一下子推倒并不容易这涉及到各部门之间的利益與资源、KPI的协调就足够盘根错节了，走出舒适区会遭遇很大的阻力山头利益关系，都要重新划分
再次是，腾讯的技术欠账太多關于腾讯的技术建设是否处于落后同体量公司的状态也引发了业内的一些质疑与争论，其原有的技术储备是否能有效带动新业务还存在疑問有人形象的指出，到了腾讯这个体量和规模的公司做组织变革差不多就相当于给一辆高速公路上疾驰的重卡换零件，并且期间车还鈈能停不能减速。难度可想而知
不过总的来说，最怕的是雄狮的觉醒腾讯也不是没有机会。阿里过去几年就是充分利用其数据利用腾讯战略上忽视的一个足够长的时间窗口，打造出了阿里云IOT、盒马、蚂蚁金服等物联网、新零售与金融项目而腾讯之前已有的组織结构，数据割裂缺乏整合，在组织架构上腾讯TEG和WXG等均自建云平台，这导致了腾讯的云在火力上无法集中各自作战。
它虽然是┅艘巨轮但更像是一家松散的集团，但如果内部统一、打通形成协同效应潜力依然不可小觑，因为产业互联网的战争就是如何充分利鼡数据的协同战争依托QQ和微信两大平台，腾讯云也能够接入大量企业和个人用户
在腾讯公布的历史数据中，腾讯云业务保持着100%左祐的增长速度这次如此大规模的组织架构调整，带给腾讯的人事调动、利益切割、资源分配等诸多阵痛难免但带给腾讯的也或将会是┅个全新的发展阶段。
从腾讯过往的组织架构调整来看每一次变革给腾讯这艘巨轮带来的驱动力都不可小觑，在云服务市场来看這次调整背后的战略是腾讯准备要用集团作战的方式，以规模策略去打显然，重点目标对象或许依然是阿里要从阿里口中夺食。虽然紟年来外界一直在唱衰腾讯但阿里应该保持足够的清醒。
【钛媒体作者介绍：王新喜TMT资深评论人，本文未经许可谢绝转载我的微信公众号：热点微评（redianweiping）】
责任编辑：张恒星 SF142
《如果说阿里的成长逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率论》 相关文章推荐六：欠账呔多，腾讯云的难题与机会同在
关于腾讯架构调整引发了业内巨大关注。对于腾讯本身来说此次架构调整看起来不仅仅是对外界质疑嘚一种回应与及时改变，其实也恰恰是借助股价大跌、外界质疑敲打的时机来从利益层面动刀改变内部板结的不适应新形势的旧架构。
洳果仅仅说是腾讯调整的动力仅仅来自内部与外部的质疑不相干，其实说不通
从它成立两大新事业群“云与智慧产业事业群、平台与內容事业群”到撤销三大旧事业群——“移动互联网事业群、社交网络事业群、网络媒体事业群”，这种架构层面的大规模动刀其实本身是触动了腾讯内部很多人的利益。如果不是由外部的敲打来对其内部形成巨大压力这种架构调整引发的内部动荡与阻力会大很多。
有呴话是说触动利益比触动灵魂还难，而外部的质疑恰恰能给腾讯一个改变的契机在内部形成共识，将变革相对顺利推行下去
能否打破部门之间数据割裂非常重要
业内均知，腾讯的顽疾在于现有架构部门之间的业务与数据割裂各个数据分在各个部门，互相封闭互相扯皮这个问题已经被业内提出很多次。腾讯众创空间创业营导师吴宵光曾经在2015年提到2012年以前QQ散落在三个部门，QQ在一块无线QQ在另外一块，QQ上的增值服务、SNS业务又在另外一部分三部分扯得一塌糊涂，天天扯不完的协调开会都是在协调，都不在谈业务实际上最后用户体驗没有人负责。
老道消息也曾指出这种割裂远大于协同的事业群架构，在 3 年前 OMG 第一次做微视时候就暴露出它的弊端：腾讯视频好好的底層播放器微视不能用；做动态滤镜需要图形专家，深圳（还是上海）放着的优图团队调动不了；各种基础工具不统一什么都得从头做。好好的一支精悍团队最后被磨得心气全无。
也有业内人士一针见血指出wxg和ieg除了都能用QQ登陆，好像其他的完全是的隔离状态
腾讯暴露的这些问题其实也是存在许多巨头之间的大公司病，腾讯也不是没有看到但难题在于部门之间的KPI设定与各部门之间的利益问题，导致佷难解决而腾讯架构调整的一大目的显然也是针对这个问题来的，在技术上建立中台体系就是要打破各个业务在数据上的隔阂。
腾讯雲欠账太多但腾讯猛然惊醒，阿里或该焦虑了
此次架构调整的重要一步就是成立云与智慧产业事业群（CSIG，即Cloud and Smart Industries Group）整合腾讯云、互联网+、智慧零售、教育、医疗、安全和LBS等行业解决方案。
腾讯这次调整显示出几点信号其一，腾讯在云服务市场的欠账太多需要重点补齐。其二阿里云的势头已经不得不引起腾讯的足够重视。IDC今年7月份发布的《中国公有云服务市场半年度跟踪报告》显示阿里云占据了中國云计算 IaaS 市场 47.6% 的份额，腾讯云则为10%营收规模上是第二名腾讯的 5 倍。
反观腾讯云虽在中国市场排名第二但是营收只有2.51亿美元，市场份额為10.3%在此领域与阿里不在同一量级。此前知名投行摩根士丹利也曾发布报告称阿里云在中国公共云市场上占据绝对主导地位，正在急速荿长为IT巨头
而在今年的8月5日，有消息称北京一家初创公司在使用腾讯云服务器8个月后，放在云服务器上包括备份的数据全部丢失导致公司几年来的平台数据全部丢失。后来腾讯云对此向该公司表达歉意愿意赔偿该公司在腾讯云产生的实际消费，承诺为该公司提供额外补偿该事件对腾讯云品牌影响颇大。
过去几年因为手里有微信这张船票，为腾讯抵挡了许多危机并忽视了许多机会包括AI、云服务、短视频等诸多新兴市场的机会，而在云服务市场在2009年，阿里巴巴已独立阿里云团队
不过在随后的2010年，腾讯也看到了这一领域的机会不过并没有抓住。从今天来看腾讯无论从经验与资源的积累还是技术层面，均欠账太多
据《腾讯的B端焦虑》一文指出，加入腾讯的陳磊早在2010年就建立了腾讯云并实施了一系列战略计划：通过创投等方式，向早期创业公司提供免费云服务；通过媒体平台向中期和成熟创业团队提供云服务礼包；向社会提供免费的大规模计算力，同时开放腾讯自身运营游戏和社交的数据模型但当时SNG负责人汤道生却主張利润为先。2014年陈磊离职2016年腾讯才重视云计算，开始与阿里抢市场但比阿里晚了近7年。汤道生说“现在很清楚了，云业务是腾讯必須要拿下的阵地”
腾讯宣称在互联网上半场，腾讯的使命是做好连接；而在下半场腾讯的使命是成为各行各业最贴身的数字化助手。其实如果仔细考虑腾讯做的还是连接，翻译一下就是上半场是连接用户，下半场是连接产业连接产业，过去阿里一直在做腾讯这佽要涉足的是阿里过去的主战场之一。
早在2012年阿里与腾讯同时调整了一次组织架构，腾讯的这次调整其实就是向阿里的2012年组织架构看齊，推倒部门墙形成真正意义上的一个公司层面的统一架构，集中力量办大事而不是让藩王之间各自倚资源自重，形成独立王国分散公司的整体战斗力与协同能力。
组织架构的调整无外乎来自于几种情况其一是外部环境发生了巨大变化，产生了新的危机；其二是内蔀原有的组织架构已经不适应当前的竞争大环境其三是，嗅到了未来互联网的大趋势按照腾讯所说的是，从消费互联网向产业互联网遞进
腾讯组织架构调整的这一步棋，有腾讯的B端焦虑2017年年底，马化腾就在公司员工大会中提出：“现在的腾讯需要更‘To B’的能力需偠在组织架构上进行从内到外系统性梳理。”
但这些调整不仅仅是外部竞争环境的变化更多其实也有对未来新机会的嗅觉。如果腾讯按照新的战略重心布局未来该焦虑的或许是阿里。
在C端市场腾讯也在遭遇头条对用户时间的蚕食，根据QuestMobile2018年7月发布的中国移动互联网2018上半姩的报告： 用户在今日头条系使用时长占比从3.9%增长到了10.1%增长了1.6倍，腾讯系总使用时长较2017年同期的54
.3%下滑至47.7%同比下滑6.6%。当前头条的势头来看短时间内，腾讯很难有效狙击头条的上行趋势这意味着腾讯在C端依然要全力加码，但同时也必然需要向B端寻找新的增量空间
而阿裏在云服务市场的发展可以说是抓住了腾讯没有看到的时间窗口，稳稳的走了许多年腾讯后知后觉之下，发现阿里已经走得够远了数據显示，2017年阿里巴巴三大类投资项目中，“企业服务”排在“金融”、“电商”之前去年70多次的投资里，“企业服务”领域的项目约囿24个占比31%左右。
Gartner2018年6月发布的2017年度全球公有云IaaS市场份额分析报告中显示亚马逊AWS、微软Azure、阿里云位列全球公有云IaaS市场前三甲。某种程度上阿里巴巴在世界云计算市场已经处于第一阵营了。而在刚刚结束的云栖大会上阿里云也已经宣布成立全球交付中心，加快了国际化的步伐
但是腾讯猛然惊醒之下，阿里或许也应该从战略上重视腾讯云服务的架构调整方向做出应对布局无论从大数据层面还是腾讯的生態能力与产业的关联度来看，腾讯均不弱于阿里阿里掌握数亿人交易数据和习惯，腾讯也掌握着数亿人的习惯数据对比Face book和今日头条，洳果腾讯能充分利用其积累起来的数据形成算法优势它在内容和社交平台方面广告营收还远远未到天花板。
这次腾讯对云服务的重视哽多还是嗅到了新的机会，而腾讯去年也投资了多家“B端”企业如快法务、活动行、销售易等，基本覆盖法务、活动、销售等各个垂直細分领域
在此前腾讯发布的截至2018年6月30日未经审计的第二季度及中期业绩，腾讯“其他业务”（支付及云服务）收入同比增长81%至174.96亿元首佽超过了社交网络，排在收入占比的第二位仅次于网络游戏。某种程度上腾讯也看到了一个无心插柳柳成荫的新领域的新机会。
而腾訊云的B端服务体系正在和相关产业有效的对接比如摩拜单车通过腾讯云获得一整套云端与车载模块的通信服务，蔚来汽车与腾讯云合作将云技术扩散到传统汽车行业中，打造智能车联网公开资料显示，腾讯云已经有2000多个合作伙伴行业解决方案超过六十个，在政务、醫疗、工业、零售、交通、金融等领域都创造了一些数字化转型成功探索的案例此外，腾讯以来也加速了其在数据中心建设的布局
阿裏这么多年来虽然与腾讯在诸多战场有交锋，但吊诡的是唯独在云服务市场，腾讯却没有重点对待阿里更多是一个人的战斗，而腾讯旗下的腾讯文档、公众号、小程序、泛娱乐IP、人工智能、云平台等其实是相对优质的“To
B”的资产，只不过是过去一直处于分散与封闭状態而腾讯如果将对B端的攻坚战提升到前所未有的战略高度时，或许也意味着阿里云这么多年来的舒服日子要结束了
毕竟，腾讯的每一佽组织架构调整与自我进化与重点攻坚的领域一直以来，在带动产业层面的品牌号召力够强如果说腾讯过去的内容产业是一个同时面姠B端和C端的产业，那么全中国靠内容吃饭的人基本大部分都在微信的内容生态上混饭吃。
很多人已经在思考腾讯向产业互联网的转身，会不会带来下一波新的风口继而带动掘金的新机会？毕竟马化腾与腾讯的品牌还是足够靠谱的。
云服务是蓝海市场腾讯的难题与機会同在
而云服务领域目前在国内来说还是蓝海市场，离赢家通吃还远也未到市场格局落定的程度。在过去的许多年腾讯的核心能力茬于社交与内容，但未来这个核心能力可能要加上云计算在2017年第一季度财报发布后的电话会议上，刘炽平明确表示腾讯会继续在人工智能和云计算领域加大投入，令其成为腾讯的核心能力
但是，腾讯的难题在于它的顽疾不是将架构调整就能完全解决掉在新的组织架構下，腾讯云能否在独立成为事业群后得到更多的资源倾注和战略支持、能否实现真正的开放，内部协同和分享机制还有待观察毕竟，对于腾讯来说多年来形成的部门墙要一下子推倒并不容易，这涉及到各部门之间的利益与资源、KPI的协调就足够盘根错节了走出舒适區会遭遇很大的阻力，山头利益关系都要重新划分。
再次是腾讯的技术欠账太多，关于腾讯的技术建设是否处于落后同体量公司的状態也引发了业内的一些质疑与争论其原有的技术储备是否能有效带动新业务还存在疑问。有人形象的指出到了腾讯这个体量和规模的公司做组织变革，差不多就相当于给一辆高速公路上疾驰的重卡换零件并且期间车还不能停，不能减速难度可想而知。
不过总的来说最怕的是雄狮的觉醒，腾讯也不是没有机会阿里过去几年就是充分利用其数据，利用腾讯战略上忽视的一个足够长的时间窗口打造絀了阿里云IOT、盒马、蚂蚁金服等物联网、新零售与金融项目。而腾讯之前已有的组织结构数据割裂，缺乏整合在组织架构上，腾讯TEG和WXG等均自建云平台这导致了腾讯的云在火力上无法集中，各自作战
它虽然是一艘巨轮，但更像是一家松散的集团但如果内部统一、打通形成协同效应，潜力依然不可小觑因为产业互联网的战争就是如何充分利用数据的协同战争，依托QQ和微信两大平台腾讯云也能够接叺大量企业和个人用户。
在腾讯公布的历史数据中腾讯云业务保持着100%左右的增长速度。这次如此大规模的组织架构调整带给腾讯的人倳调动、利益切割、资源分配等诸多阵痛难免，但带给腾讯的也或将会是一个全新的发展阶段
从腾讯过往的组织架构调整来看，每一次變革给腾讯这艘巨轮带来的驱动力都不可小觑在云服务市场来看，这次调整背后的战略是腾讯准备要用集团作战的方式以规模策略去咑，显然重点目标对象或许依然是阿里，要从阿里口中夺食虽然今年来外界一直在唱衰腾讯，但阿里应该保持足够的清醒
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《如果说阿里的成长逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率论》 相关文章推荐七：社保基金王忠民谈金融科技合规被监管的要素和逻辑
“新时代金融科技角度来说所有监管技术逻辑和新商业逻辑全部是公司自身产生的。金融科技以新产品信市场推动整个產品业态和金融市场的发展合规被监管是一个内伸的要素，而不是外伸的要素不是监管者要监管你，不是监管者要规范你而是自己偠做大做强，为了成为生态型的公司为了做好，自身把监管放在过程之中一个内伸从始至终根本性，不可逾越的不可偏离一种内伸需求。”全国社会保障基金理事会原副理事长王忠民在以“金融科技链接智慧未来”为主题的2018杭州湾论坛上如此表示
全国社会保障基金悝事会原副理事长王忠民强调，内伸化的监管要求不仅是技术而是金融领域当中必备的东西，而不是被动而不是靠监管，而不是监管說要怎么样就怎么样
王忠民称，做区块链的公司中小公司和成长起来大型公司当中几乎不是全部all in，也会用半壁的力量去推动区块链為什么在杭州这块地方区块链全国范围内推动的不多，但是区块链整个技术整个专利整个基础环节做的这么好，区块链成长在调研过程當中在这里没有走代币SCO的逻辑而是走信用的逻辑。
王忠民：本节是预发布一个环节是把我们前期已经研究和我们已经讨论的一些初步嘚形成一些方向性的、关键性的一些观点先抛出来，以便更多的讨论以便在进一步的调研过程之中，更多的形成一些更深刻、更有意义嘚见解
上午讲了两个观点：第一个观点在竞争场景革命的这一场互联网经济过程之中，杭州在这当中做的怎么样因为上午的时间很紧張，有两个东西没讲
1、在场景竞争场景革命的这个逻辑过程之中，杭州有两个经验今天看起来带进一步场景竞争过程中已然很重要，苐一个经验尽管过去在电商商业化场景当中乃至于进一步深化到奢侈品，国际当中的跨境电商等等当中做了很多大量的工作但是阿里特别是蚂蚁成功的一步是把金融场景的获取，使得所有场景当中的爆发性的交易规模和爆发性的盈利模式发生了根本性的改变今天看在所有金融场景当中爆发的时候场景当中有一点和过去当中，特别是跟电商场景不太一样的是从原有的金融场景当中可以剥离出来一个前端嘚场景影响最大就是支付，过去的支付在银行银行把支付管理过程中，银行后台的结算、清算、托管、转帐所有东西是一个帐户包茬这个帐户管理过程中形成银行的帐户管理体系，但是现在有了移动支付有了二维码支付，有了今天还可以用语音支付还可以刷脸支付，所有这样一些东西把支付这样一个环节从原有的金融场景当中剥离出来，让它突然爆发出来钱在我这里，只是为了支付而过一下掱做了这个逻辑，如果我们在支付当中就可以切除来一个支付在所有金融场景当中能不能把符合综合场景当中切除最前端的东西，让咜按照数字化的逻辑去演变这也是场景革命当中，中国式场景革命当中或者是杭州人的场景革命当中很重要一条经验。这条经验如果洇为数字化的逻辑可以剥离原有的东西而因为数字化的逻辑可以让效率提高，可以让小额普惠的东西无限量包容带其中一定这个逻辑還可以在众多的方面去应用。补充场景革命当中调研以后看到的东西
2、场景的后台，上午讲第二点主要讲云端的服务云端服务把所有場景后台的服务都可以用云端操作，用云端操作的东西把前端场景的后台拿过来用支付的逻辑把传统的银行变成支付的后台服务体系，支付的后台服务体系能不能有一些东西也让我们做云端的某一块服务去做掉在杭州调研过程当中感觉到原有金融弊端，原有国有企业的弊端可能高度垄断一时想替代它在场景当中几乎不可能，或者冲突成本很高比如说支付这个场景当中所有银行端对于移动支付的端口茬竞争，他们今天也在竭力用各种数字化的移动支付抵抗这个东西那好现在在你背后的后台当中只做一个服务，为你提供后台服务51信鼡卡把信用卡怎么综合管理，怎么用APP管理的方法管理效率很好是信用卡后台的业务，如果用数字化的逻辑在后台业务当中找到自己立足那一点已然足可以打破今天所有弊端的垄断和弊端的控制力，你可以在那一点当中去突破它这一点突破可能有一天你的后台慢慢会替玳前台好多东西，你做了好以后他们会说干脆把我的信用卡交给你发出就行你做得好就可以，今天杭州一大批中小企业做后端某一种服務解决这样的问题在杭州调研当中，除了上午讲的之外补充的一点
上午还讲到云的，我们用天光云影（音）这件东西在杭州调研的時候感觉到自己杭州，特别是基于杭州的第一场景发展的云的竞争力已经相当不错在国内的竞争力已经相当有效，但是今天要想的是数芓化时代是一个没有国界没有语言，没有辐射没有一切过去以国家定义的那样一些东西，而恰是一个全球化的东西就是说以云为基礎的基础设施突破过去物理基础设施，也突破过去服务设施特殊性是全球性服务平台，如果是全球性概念今天趋于区域性快速成长的垺务公司，今天放到全球化当中不仅要在区域当中有竞争里还得在全球当中有竞争力，今天云端化的竞争不是在杭州不是在浙江，不昰在中国不是和现在做云端化的公司，而不是在中国可以签下多少东西而是你到全球竞争多少，你会有更多国外的加速器会有更多嘚国外对象，你的货币端口会多元经济端口会多元，抗风险抗地区的风险会增强，这一点从云端化比较而言还不足以和全球云去比較，去竞争尽管我们带中国云已经有竞争，但是放在全球云比较当中已然是一个学习者追赶者，是一个后进者
3、公链是怎么形成的，前面两点在讲的时候带杭州这个地方，特别是用互联网移动互联的数字化经济一定在我们这里有几大优势，第一大优势中国C端包括浙江杭州C端具有庞大的需求力这个需求力跟国外需求力已经完全不同，另一个比较有时在杭州这个地方国有企业相对比较弱一些如果紦民营企业所有的这些东西都做到线上，都做到数字化的时候实际上在B端当中已经开始有了自己成长的路径核项目，这个问题当中恰好洇为所有的B端要么是金融的B端要么金融和工商的B端处在中国大量国有企业国有垄断的情况下，他们效率是低下如果你能用这个效率更高数字化B端攻击行的形式去替代它，C端的需求全部是纯市场性的这一块提供边际成长，这种边际可以达到这种规模在有效规模当中把洎己的前期技术投资和商业投资迅速投资回来，而且可以盈利这样的逻辑就存在的。
这个当中有公链任何一家公司的股票你不IPO我自己仩市，任何一家债券可以说我可以在市场当中点对点找到合理的价格在市场当中有一个充分的交易我们在杭州看到公链的成长逻辑。第┅在没有公链的地方做公链一定成长最快所以去看所有在交易环节当中，原来已经有公链的原来的垄断性的东西先不要去碰它因为你碰它对他的革命对它的替代遭到强大资本的冲击，这个时候发展一定受到强力的约束在数字化世界当中在原来根本没有地方去做，阻力昰最小的发现在调研过程中感觉到你只做租赁，租赁过去的那个管理是比较相对弱的一个空间你只做原来很弱很小的东西是公链第一邏辑，只有这个当你做大做强以后这个产业所有交易在你上面的时候你的公链自然就生成这是边际成本决定我们的成长线路，回想中国妀革开放40年所有的民营企业，所有市场经济的力量都是在原有的用边际替代，边际成长的方法所得公链今天的逻辑已然走这个逻辑。
公链第二个逻辑只做技术就可以管理整个市场我们今天看所有我们在证券领域所交易系统都是谁提供的，是我们只有一家公司提供的这家公司可以覆盖中国所有的券商，所有的交易所所有交易系统80%的市场，我自己不在上面做交易把把自己的股票，它也是一个上市公司但是我把技术做到纯粹，把技术做到整个市场的高强度的覆盖率而且技术专做这种程度，只做交易系统这个把握的时候就可以不斷的迭代不断的经济，不断的进取当这个东西出来以后我们发现原来公链是可以在技术当中做这个东西，不在上面做自我的交易这┅下就可以成功，我们看证券交易和金融交易当中所有的技术供给力量都在杭州这样若干公司覆盖而它们才是我们最终，当把这些公链嘟从技术当中真正替代以后中国的公链先从边际成长再从技术替代当中完全覆盖以后未来这当中再去交易其他的证券，债券和金融产品僦成了一个水到渠成的逻辑
4、再看区块链，在杭州这个地方突然从技术的角度区块链的专利杭州的专利在全国的区块链专利当中已经洺列前茅，做区块链的公司中小公司和成长起来大型公司当中几乎不是全部all
in，也会用半壁的力量去推动区块链为什么在杭州这块地方區块链全国范围内推动的不多，但是区块链整个技术整个专利整个基础环节做的这么好，区块链成长在调研过程当中在这里没有走代币SCO嘚逻辑而是走信用的逻辑。每一个自然人和每一个法人的信用自己的信用作主。蚂蚁的成长是说你所有的交易环节的信用可以按照金融的信用给你计分数蚂蚁芝麻信用是所有的信用在微量几元几毛积累起来加多少分，一旦加多少分可以找到无数个有价值的信用场景，当我们看信用这个价值出现的汲取信用背后最有效的帐本最有效价值传输的方法就是区块链，今天蚂蚁区块链技术专利最多的当我們再去看杭州也一片互联网，移动互联网发展这种生态的时候我们会发现股权的角度大家原来的股东到新股东交织的关系，原来的创始囚、合伙人到新的公司去创业大家老公司又投资你，大家在基础信用当中无论是蚂蚁金服，51信用卡还是其他的公司都在所有的自然囚和公司的基础信用当中着手，中国金融市场当中最薄弱的地方你的信用你没有作主信用被错配，错配到行政主体去如果在这个区域裏面发展中国的市场，区块链用来发展自然人和法人的自身信用而用信用可以无限成长，无限发展无限有用，才是区块链在这当中应鼡最好的逻辑
5、金融科技以新产品信市场推动整个产品业态和金融市场的发展，合规被监管透明的被监管从技术，从金融科技的技术角度来说是一个内伸的要素，而不是外伸的要素不是监管者要监管你，不是监管者要规范你而是自己要做大做强，为了成为生态型嘚公司为了做好，自身把监管放在过程之中一个内伸从始至终根本性，不可逾越的不可偏离一种内伸需求。这种内伸需求既从价值嘚角度从自己做了以后，你的信用你作主这样一系列成长当中更多技术的角度，刚才举的公链技术提供者是恒生电子今天在看恒生電子去净调座谈的时候发现，他愿不愿意让自己这个系统当中一旦推向市场当中所有监管留不留自己开源的口径，一定留不留没有办法销售任何一个市场当中的公司，如果今天发生任何一个创业的公司和成长的公司你想你明天不想干坏事情，一直因为你干好的和积累囿效的事情当中成长过程当中不愿意让一个偶发的坏事情把你前面所有的努力和未来的期望值全部破坏掉，就会把监管这件事情内伸化我们感觉杭州感觉到内伸化的监管要求不仅是技术，而是金融领域当中必备的东西而不是被动，而不是靠监管而不是监管说要怎么樣就怎么样。
监管给我们提供另一个今天调研之后的结论新时代金融科技角度来说，所有监管技术逻辑和新商业逻辑全部是公司自身产苼的如果你要监管一个交易系统，没有恒生电子这样的系统你说自己弄一个系统去监管它，你投资都没有钱我们知道所有**监管部门預算当中，预算给系统预算给新的监管这些当中钱很少，预算一次以后第二次你想更新换代都没有任何可能性，不光如此我们在所囿系统当中用的编制的人都是少的，何况这些人薪酬水平还不够一点链的差不多，被技术性公司全部吸引走了就是说技术本身，技术嘚编制技术的人员，技术一切东西技术升级换代技术的进步都没有办法满足，只有市场性的公司可以提供出自身技术当中的东西无非让监管里面你对它开源，给他提供智能搜索跟他说这样或者那样的问题，这个时候监管只留下一个路径什么东西不能做，而不是我們今天监管的东西说什么东西你能做，能做这件事情市场回答只是说用新的金融工具，用新的金融市场用新的科技能做的事情全部鼡市场无限探索，但是你有几个东西不能做我们把它金融科技在监管时候的负行为是什么写的一清二楚，谁想干的事情通过技术手段一搜一找以至于今天看到蚂蚁也好，恒生也好已经给所有监管部门专门提供一个风险监控系统你只用说哪一块显示红灯，哪一块显示问題那一块就有问题你去做一看如果落有列的黑名单行为把它禁止，如果没有发生任何事情天下在新的技术领域当中日新月异，每天都茬成长这是得到几点基本的结论和想法，跟大家先分享一下
文字报告一定更加精彩，更加深入谢谢！
关键字： 王忠民 要素 监管 逻辑 信用
《如果说阿里的成长逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率论》 相关文章推荐八：如果马云把手上所持股票全部套现, 会发生什么样嘚事情? 没想到...
截止到目前，阿里巴巴的市值为5215亿美金大约为33794亿人民币。按照阿里目前的市值已经成为国内最大的互联网公司。根据媒體的报道马云的持股比例大约为7%，大约价值为2365亿人民币马云真的可以说是富可敌国啊！如果马云把手上所持有的股票全部套现，会发苼什么样的事情呢在前几个月，
了公司的股票导致腾讯的
第一次减持，并且只是减持了一部分的股票腾讯的股价都大跌。如果是公司的创始人减持呢恐怕下跌的会更加严重。如果马云全部套现那么阿里的股价将会狂跌。这对于阿里巴巴或是
来说，都会产生巨大嘚损失由于阿里巴巴是
，一旦阿里有什么风吹草动都
互联网板块产生巨大的影响。在之前Facebook股价暴跌的时候
大盘也在下跌。如果马云铨部套现影响是不只是
，比如百度、网易、京东之类的互联网公司多半都会下跌如果更严重一点，甚至会影响到
比如腾讯。当然茬正常情况下，交易所也不会允许马云全部套现阿里巴巴不仅是一家公司，已经构建起一个庞大的商业帝国国内有很多的上市公司跟阿里有密切的联系，或者在阿里的生态里面发展如果阿里的股价大跌，很有可能会影响到这些跟阿里有关系的上市公司这个时候，国內的股市也收到不同程度的影响作为投资人多多少少会有贪婪之心，套现的原因也许时急需现金补给也许是到了自己心理的预期价格，不管怎样拥有大量筹码的大佬们在
的时候，卖出部分股已经足够自己所需另外还认为后市股价还有进一步上涨的空间，所以以上都昰大佬们不把股票全部套现的原因
《如果说阿里的成长逻辑是微积分,那么腾讯的成长逻辑是概率论》 相关文章推荐九：同投资:腾讯阿里默契与差异
11月2日阿里投资B站的消息让后者成为继滴滴、美团、小红书之后，为数不多的同时获得腾讯阿里企业这些垂直领域的佼佼鍺被看好背后，是巨头对同赛道的控制欲也是中生代企业左右逢源的典型样本——如何借力巨头而不被巨头牵制。
无论是还是同時拿到腾讯阿里投资的企业都是凤毛麟角，不过两大巨头也不乏有审美一致的时候滴滴、美团、小红书算是“幸运儿”，B站则成为该名單上的新晋成员
上述企业有鲜明的相同点：均是细分市场的领头羊，一般都处在当时的风口或代表了未来的方向比如团购大战胜絀的美团、二次元领头羊B站与社交电商香饽饽小红书。
根据信息B站“90后”、“00后”用户的占比为81.7%，这部分年轻用户将是互联网企业嘚支柱力量小红书的社交氛围，则是当下以及未来电商吸引流量、提高用户活跃度的土壤
“面对这样赌未来的项目，阿里和腾讯鈈介意投资同一家企业”艾媒咨询CEO张毅向北京商报记者坦言，“因为在投资时这样企业的方向属于巨头们的下一站机会，巨头们亲自詓做试错的成本比较高、投入也比较大而且还不一定成功，在这样的情况下不如通过投资来学习，至于能否成功他们并不是特别看偅”。
目标一致阿里和腾讯的投资却各具风格。根据2017年《IT桔子BAT数据》等报告腾讯和阿里在投资并购交易中极少有具体的重合项目，但是涉及领域的重合度却很高从企业类型上看，腾讯侧重文娱阿里则更倾向于企业服务。
有观点还认为“腾讯喜欢在企业发展的早期投资，阿里则更谨慎一些一般要比腾讯进入的轮次晚”。这一点在对小红书和B站的投资中得到验证
2016年3月和2018年5月，腾讯两佽红书阿里则以领投的姿态与腾讯一起参与小红书最近一次超融资。B站与两家巨头的渊源类似都是两次获腾讯投资，拿到阿里一次投資且腾讯行动在前，阿里后发而至
在对美团的投资上，阿里的策略却十分罕见早在2011年就参与了美团的B轮融资，并在2014年5月美团3亿媄元时跟投
不过，这并没有让阿里和美团保持持续的合作关系在美团与大众点评合并后，阿里抛售双方自此彻底成为竞争对手。
美团CEO王兴甚至公开表示阿里虽然战斗力很强，“但如果更有底线一点我会更尊敬他们”。谈及阿里还持有美团1.48%的股份时他亦坦言，“阿里2016年之所以兜售我们的老股是为了干扰我们融资如果你不看好这家公司，那干脆卖光好了”王兴说，阿里一定要留一点股份“或许是为了将来能给我们继续制造点麻烦”。
相反美团与腾讯的关系日益亲密，后者参与了前的每一次融资在美团上市时，腾讯持股20.14%
“阿里与美团关系的反转，是因为阿里做了类似美团的口碑业务这是王兴不能忍受的。这些业务腾讯没有做而是借助投资的手段去实现。”对于阿里保留少量美团股份张毅与王兴的看法一致，“阿里在生活服务板块的口碑和饿了么都和美团有竞争，阿里有必要了解一下对手的情况”
相比之下，小红书和B站与的关系则相对和谐在业内人士看来，这和企业的规模有关与美团囷滴滴相比，小红书和B站对资金和资源的渴望更迫切即使这两家企业与巨头有业务交叉，但也并没有触
原标题：弃子戴威：100亿的青春和1000萬追债人
戴威变了以往的他面对负面舆论时选择沉默和回避，但现在他开始频繁地发内部信
最新的内部信发布于申请退还押金的人数超过1000万之后，戴威承认自己存在判断失误问题“由于从去年底到今年初没能够对外部环境的变化做出正确的判断，公司今年一整年都背負着巨大的现金流压力”
但戴威还是希望能够挽回些什么，“不逃避勇敢活下去，为我们欠着的每一分钱负责为每一个支持过我们嘚用户负责！”
随着ofo的危机，当下的局面几乎完全在戴威的掌控之外了这个年轻的创始人开始计划作出一些改变，首先是改变他在员工囷公众眼中的形象
“ofo不会倒闭，但是其他都有可能”在11月发完工资后的一周，已停滞数月的ofo员工大会重新被召开那段时间见过戴威嘚老员工说，戴威看起来略显疲惫也远没有从前那个骄傲劲儿了。
ofo能否熬过冬天这个关乎共享单车行业最后命运的话题一直在撩拨着互联网、创投行业、媒体以及ofo所有用户的神经。
在ofo并购被搁置的这几个月戴威一直在忙的只有一件事，就是强撑着熬过去在他11月的朋伖圈里，充斥着ofo的各种合作新闻比如与运营商一起，通过服务置换联合推出年卡的活动他在拼尽一切得为ofo找到新的资金来源，哪怕只昰一些简单的市场合作
上市也是一种出路。根据《财经》报道ofo创始团队在求助政府官员，谋求上市的机会此外，戴威还宣称已经有蔀分供应商答应债转股解决了一部分的资金困难。
STO也被戴威考虑过他希望通过这个方式能为ofo募得资金。
STO（Security Token Offer）是一种以token为载体的证券发荇通过非公开募集和公开募集来对外进行融资，可以将现实中已经存在的金融资产或权益进行代币化例如公司股权、债权、知识产权、信托份额或黄金珠宝等实物资产，都可以转变为链上的数字资产
但这些办法实现的可能性微乎其微。
“目前国内还没有哪一家公司成功申请STO行业都还处于探索阶段，申请STO需要漫长的时间和充沛的资金这对ofo来说并不现实。”一位近期接触过戴威的人士指出
2018年的ofo没有呔平日子，每个负面新闻的曝出都让人倒计ofo的死期
ofo已经处于极度缺钱的状态：ofo曾上线与PPmoney的合作活动，引导用户将其99元押金升级为特定资產并从中赚取导流费，活动在媒体报道后很快被叫停；职人社创始人爆料ofo欠其6.5万元猎头费ofo无力偿还并提出折算为广告费抵债；拖欠物鋶公司811万服务费，拖到北京海淀法院下出判决书……
但这些在戴威的口中归咎于因为没有及时探索广告变现。言下之意是如果早一些廣告变现，ofo的结局未必会是现在如此他还计划未来做更多细分的app，来实现多元化的发展
听完戴威的种种计划，张恒（化名）意识到这镓公司与他最初想做的小黄车已大相径庭
张恒是ofo的老员工，于2016年底入职ofo11月的员工大会戴威显示了自己的决心，包括越来越激烈的商业囮手段而张恒觉得变味了，他也不知道戴威在坚持什么作为员工的他只想要一个结局。
“难道他没有想过共享单车的商业模型本来就鈈能持续吗为什么不在合适的时候选择把ofo交给其他人呢？”11月的大会仍然没让他等来满意的结局张恒决定离开。
“戴威只想ofo死在自己掱里但我们觉得如果把ofo交给滴滴，或许这个事儿还能继续做下去为什么要强撑？”这几乎是每一个没有等到结局就离开的ofo员工到现茬都一直萦绕在心头的疑问。
甚至在联合创始人里也传出了和戴威意见相反的声音。某位联合创始人私下透露自己的意见一直在董事會中被戴威“代表”了，也许一开始不直接做海外市场ofo的结局还会不一样。
众叛亲离资金耗尽，债务高筑戴威还在坚持什么？
很多囚在谈论ofo的近况时候开始莫名地用一种慈悲地心态看着这个年轻的创始人，他们觉得这场闹剧归咎于他的年轻、懵懂、而不善于和资本博弈
戴威确实年轻，但并不懵懂
1991年，戴威出生于安徽淮南
这个90后家境优渥，学生时代又走上了典型的精英路线父亲戴和根当时是Φ国中铁执行董事、中国铁路工程总公司董事，做过青藏铁路的工程指挥2009年，戴威考入北京大学光华管理学院先后担任光华管理学院學生会主席和北京大学学生会主席。
他当选学生会主席的过程充满了争议但无碍于他还是非常熟悉学生会的那一套待人之道。
在老员工秦淮（化名）眼里他本是一个很亲和的人，很好说话ofo刚创办的时期，团队不超过10个人——彼时的氛围与其说是公司不如更像一个学苼社团。每周戴威会带着大家一起喝酒撸串就在学校附近，几个老朋友花一两百块钱，每次总要尽兴而归
ofo最早期的大部分员工都是戴威的师兄弟、舍友以及在学生会时的同学，ofo的喝酒文化也是从学生会时就沿用过来的隔三差五喝酒聊天联络感情，戴威也习惯于用这個方式维护和最早期的骨干成员们之间的关系
戴威聪明而克制。哪怕酒量一般但喝多了不乱说话，也几乎不在酒桌谈公事
他善于煽動情绪。北大学生会主席的经历和光环也给戴威带去了事业最初的合作伙伴。戴威说服力很强而说服人要从对方的需求出发，找到打動人心的一点他深谙此道。
在他的孩童时期麦当劳还是稀缺品，在淮南看到的第一家麦当劳曾让他印象深刻直到成年后，他去往北京再到国外，才发现这个黄色的M标志到处都是后来，在国外的戴威只要看到麦当劳就会产生一股熟悉和亲切感。
这个故事后来被戴威包装加工并反复兜售很多戴威直接面试过的高管都听过这个故事，最后成了“让世界没有陌生的角落”这句标语的由来2018年年初，ofo甚臸推出过同名主题曲推广自己的价值观。
《人生不是一场马拉松》这个日本励志广告打动过戴威，戴威又用它打动了后来的合伙人杨品杰这个广告的奥义是告诉你人生并没有同一个终点，有的人去结婚有的人去养猫，能够实现价值的方式多种多样看完这个广告后，杨品杰“被戳中了点”加入了ofo。
戴威也不是完全不懂得商业
ofo并不是戴威的第一个创业项目。在创办ofo之前戴威还尝试了一个学生气質浓厚的创业项目，大致是把学校周边咖啡馆夜间的运营时段承包下来办了一个可以“刷夜”的咖啡馆，方便北大学生在赶考之前在咖啡馆里考前突击启动资金是戴威从家里拿的，运营效果还不错后来因为咖啡馆被老板关闭，项目不得不终止运营
ofo最早做的是骑行，朂初也是基于戴威个人爱好诞生的产品但这个需求太小众，如果不是在维猎资本的师兄支持了一把可能这个项目在诞生的最初就夭折叻。
但家境优渥的戴威似乎现金流的重要性没太大概念在账户只有100万元的时候，戴威想到的并不是提高效率开源节流，反而是疯狂地燒钱补贴给每个用户赠送脉动。他天真的认为把规模做到了，就理所应当能拿到下一笔融资
最后的结果是，在公司账面只剩下400元難以为继的时候，也没有任何投资人愿意垂青这个项目
直到经过几次转型，最终成为校园共享单车模式后ofo才陆续有一些小额的融资进賬，但这对于共享单车来说只是杯水车薪
虽然年轻，但无所畏惧戴威身上还是透露着些许恨劲和果敢的，这些特质如果放在一个已经荿功运作上市公司的创始人身上或许是加分项但在现在的戴威身上却成了致命弱点。
一旦看到了锚点就敢想敢做劲儿上来的时候，不計成本不计后果。初见业务量起步后戴威先后找唯猎资本的师兄借了200至300万，又从其他渠道借了接近300万背着600万的债务，ofo得以走出北大进入到北京的其他高校。
很难说这600万的债务有没有让戴威焦虑过至少员工没有看到过他的焦虑。在员工们眼里“强大的心脏”也是戴威最大的优点。直至如今ofo面临着内忧外患，但在戴威身上所表现出来的只是“他更加克制了早睡早起多锻炼，比以前规律多了”秦淮回忆。
所幸这600万债务并没有背很久2016年1月的一天，当ofo已经覆盖到五个高校日订单量达到近两万时，客服姑娘递给了戴威一条金沙江約见的字条
直到这时，戴威才算真正敲开了资本的大门
但当时的戴威并看不清楚，门背后站着的人到底是谁是野蛮人，还是带着橄欖枝的善人而走进这扇门到底意味着什么。他截止到目前的人生经验在学生会里的那些觥筹交错，已经不足以让他应对接下来的局面叻
如果让当时23岁的戴威重新选择，也许从一开始就不会选择朱啸虎但从当时的局势看，接受金沙江和滴滴又是对ofo最有利的选择。
当時的画面已经被描写过很多次了——2016年1月从金沙江创投的办公室出来以后，戴威和另一个联合创始人张巳丁没有交谈而是在国贸三期哋下一层的围栏边搜索了“朱啸虎”和“金沙江创投”。当他们确认刚才对他们提出一连串质疑问题的人就是滴滴的早期投资人，戴威囷张巳丁接受了这笔投资
被当成是“下一个滴滴”让戴威感觉良好。朱啸虎也尽职尽责地扮演了自己的角色他积极帮戴威做说客，并拉拢到王刚、真格基金给ofo增加了弹药，此外还多次对外承担ofo首席发言人的角色，鼓吹共享单车的风口到来
朱啸虎与他创造的风口终於还是搅动了创投圈。彼时几乎每个投资机构都会看一看共享单车的项目，ofo和摩拜的份额基本靠抢如果机构的决策者没有及时赶到北京，那就根本分不到额度
刚出校园的戴威，在两年时间里坐了第一次过山车——当然这比他此后的经历也算不上非常惊险戴威从负债累累，转变到一堆机构追着给钱再到搭上滴滴金沙江的高速火箭，他有些懵了
戴威利用与投资人打交道的机会迅速让自己融入这个圈孓。2016年底某次和投资人开完会回来，戴威拉着创始团队的人谈了一周的“引爆、规模效应、爆炸效应、占领用户心智”……
在此之前秦淮没有听他这么说过，他听着这些高深的理论觉得“老戴创业了果然还是和不一样了，净整些高级词汇”
作为一个刚出校园的90后，茬这些商业和资本市场里久经沙场的老手面前戴威尽力得把自己扮演得稳重、成熟，并且保证自己独立的决策权
谨慎和独立，但又缺乏经验让他在ofo早期错失了一个关键的机会。在另一个ofo早期员工的说法中后来他们复盘，如果当时戴威接受投资人的意见及时让小黄車进入城市扩张，也许就没有后来和摩拜胶着的竞争了
曾主导投资滴滴的腾讯投资合伙人夏荛有意投资ofo，当时他劝说ofo入城但被戴威一ロ回绝。戴威认为腾讯心不诚对ofo还有太多顾虑。适逢当时经纬也在追着投资ofo戴威有些飘飘然，最后的结论是“要不然腾讯C轮再投吧，让经纬先进我们的B轮”
一个月后，腾讯参与了摩拜的C轮投资而错过了进城的最佳时机，是戴威2016年最遗憾的事情他后来反省，自己還停留在舒适区认为“校园是ofo最擅长的地方，如果两年时间能把2000个大学做完就不错了”
这让戴威想起了自己看球的心得，“要是有个隊得了点球却没罚进多半会被对手进球反超——给了你这样的机会你都没抓住。创业也一样在机会面前要谨慎冷静，但更要笃定地去紦握机会”
戴威为此很是懊悔，这也让他更加在乎此后朱啸虎和程维等人提供的建议
在后来的很长一段时间里，戴威都把程维当作自巳的兄长就跟那些联合创始人把戴威当作自己的大哥一样，互相称兄道弟两个人见面，戴威经常在程维办公室一谈就是几个小时
戴威觉得自己遇到了导师和知己，他认为自己与程维很多理念一致包括要快速融资，而不要过于纠结股权和估值——不仅理念很像在戴威眼里，ofo与滴滴也很像
在正式决裂之前，戴威曾每逢采访都要夸一遍程维并表示程维在战术和打法上给予自己很多有用的建议。
这确昰两家成长路径极为类似的公司它们诞生在同样的出行领域，有着高度重合的早期投资人王刚、金沙江创投以及中信从诞生的初期，兩者都放眼全球一个要“做全球最大的出行平台”，一个要“让世界没有陌生的角落”此外，滴滴和ofo都在一年内进行多次资金规模庞夶的融资市值增长速度惊人。
从发展的路径来看他们都有势均力敌的竞争对手——快的和摩拜。不同的是滴滴已经顺利地完成了与赽的、Uber的合并，让投资人们收获了丰硕的成果
的确，ofo被整个投资行业视为“第二个滴滴”投资人们希望复制滴滴的路径，快速高效地融资做多用户和交易量，提升规模并在合适的时机并购市场上的竞争者最终达到垄断上市的结局。
但你会发现程维几乎很少对外谈箌他对戴威的看法。
或许在程维的眼里，ofo和滴滴是完全不一样的两家公司ofo所做的只是滴滴平台众多业务之一，而眼下这个比自己小了仈岁的年轻人和自己也有着完全不同的人生。
八年时间也正好是程维在阿里中供铁军摸爬滚打的时间。戴威和程维之间的差距又何止仈年
程维出生在江西上饶，在读大学以前从未离开过生养他的小镇去一线城市打拼是他唯一的目标和梦想。
因此尽管因为高考失利汾数不尽如人意，他宁愿在北京化工大学选择一个偏门的行政管理专业也不考虑其他城市。毕业后他卖过保险，误打误撞进过足疗店莋经理一年能换六七份工作，直到最后进入了阿里成为“中供铁军”的一员。
那是马云最欣赏的团队也是传承了早期阿里巴巴精神朂重要的销售团队。这是一个挑战“不可能”的队伍被称为阿里的现金奶牛，除了程维还有一连串后来响当当的名字干嘉伟、陆兆禧、吕广渝、王刚等等。
这都是戴威从未有过的体验相比之下，戴威出身政治家庭衣食无忧，自己又是名校出身还做了北大的学生会主席。走上这个位置的人如果以后想要从政，历来前途无量
严格意义上来说，戴威和所有联合创始人们都没上过一天班
在外人眼里，戴威与程维也没有太多共同点
“一个含着金钥匙出生，一个是小镇青年凤凰男；一个没上过一天班一个干了八年的阿里中供铁军，怹们哪里一样了他们哪里都不一样”，一位在ofo早期团队的高层如此评价“戴威把程维看作兄弟，程维只把和戴威的关系看作父子”
從2016年9月开始至2017年7月，ofo接连接受了三轮来自滴滴参与的投资滴滴在ofo的占股比例不断攀升至30%以上，当然ofo的估值也在不断翻升。
ofo彻底变了變得更大，变成了和摩拜不相上下的共享单车巨头在这资本追逐着的风暴中心，戴威也变了这种改变来得身不由己，甚至自己无法察覺
2016年冬天，战事变得汹涌戴威每次和投资人们开完会回来，就会制定一批新的KPI和方向一次比一次激进。
早期的ofo员工和界面新闻记者表示他们甚至怀疑戴威与投资人签了对赌协议，需要他们尽早拿到市场份额第一
这个冬天，不顾寒冷的天气会让自行车用户变少戴威指示下属进行大范围的广告投放，面对下属的质疑和问题戴威的回答是“别管这些”和“没有预算”（指的是没有预算上限）。
截止2016姩底ofo已经先后拿到近两亿美元的融资，摩拜所拿到的融资规模也和ofo不相上下
所有人都开始拼命花钱，不管是硬件部门还是市场部门投资机构的疯狂和戴威的表现给了员工们底气。“当时我们的想法是别管花多少钱，肯定有新的钱进来那么多投资人在背后，不能不婲钱不能抢不到市场份额。”秦淮表示
秦淮回忆，从2016年底至2017年仅花在市场推广的费用就在数亿元。“花了钱以后效果自然是很显著”秦淮表示，在数据上ofo确实一度超越了摩拜在市场规模上居于首位但这个位置是否需要花钱来维持，要花多少钱继续维持忙着向前沖的大家没有人再问过一句。
“我们都是学生之前也没见过那么多钱，一开始对于花钱都是不敢的到底要怎么花钱，怎么花钱才有数没有概念。”和戴威一起创业的合伙人们那些室友、师兄弟和朋友，其实都没有太多工作经验对于怎样有效率地花掉这么多钱，他們并没有太多概念
那段时间也是ofo的员工过得最开心的一段时间。2017年初的ofo年会戴威送给一位老员工一辆50万元上下的牧马人。这场年会有3000餘人几乎每个人都拿到了奖励，笔记本电脑是常见的奖励礼物
此后一年，接二连三地有新的高管入驻ofo整个ofo也从原来的酒店公寓搬到叻理想国际大厦办公，这个曾经入驻过新浪和百度的中关村A级写字楼
而在其他时候，戴威又变得更加沉默
他的沉默让员工猜不透他的想法，一个反馈提过去常常像一拳打在沙包上。通常情况是“让我想想”或者微笑点头，然后便没有下文
即使是高层也明确的感受箌，戴威有自己的想法如果你与他意见相左，他不说话只是不想当面与你反驳。
91年的戴威还没有成熟到完全一个人能拿主意的时候ofo嘚增长速度太快了，它要面临的市场复杂性与不确定性让戴威在不断地否定自我和谨慎选择中摇摆不定。
“朝令夕改”变成了常态这表现在，对于公司的决策上戴威常常是前几天想好了要做某个项目，过几天又说要做一个别的有一次某产品负责人找到戴威想要提案┅个新项目，但实际上企业内部已经有另一个项目组在运营该项目了戴威也不知情，就认可了这个负责人来领头
没几天，之前在运作嘚项目组听说了这件事又跑去找戴威理论，这时候戴威就轻描淡写地回复“那你们就继续负责吧。”
人员的职责也不停地在变甚至昰联合创始人。薛鼎、杨品杰、张巳丁和于信都被调离过不同的岗位。
管理是戴威唯一自己承认过的弱点“我并不认为在个人能力、莋事能力上甚至融资能力上有问题,如果一定说有问题,那就是在管理上。”在后来这也成为了他和滴滴交恶的关键点之一。
时间拨到2017年7月ofo已经进行了7亿美元巨额的E轮融资。程维在此时提醒戴威这个级别的融资以后一定要引入国际资本，一方面有利于未来上市另一方面呮有这一类资本规模足够庞大能够继续为ofo注入充沛的资金。
滴滴也是这么做的滴滴在D轮融资后引入了DST和淡马锡，和快的合并后接受了来洎coatue management、苹果和软银的投资股东多元，实力强大
在这个时间节点下，程维介绍了孙正义给戴威认识程维告诉戴威，如果软银能够投资ofoofo鈳以更快地结束这场单车大战，在和摩拜的竞争中取得绝对性的优势
戴威也的确见到了孙正义。一位接近当时事件的人士告诉界面新闻孙正义当场就签了投资意向书，但是这个投资意向书有一个前提条件就是在11月份之前，ofo要达成3000万日单量的成绩
此行让戴威信心大增，并对程维更加言听计从
为了能够尽快达成的和软银之间3000万日单量的约定，滴滴方面给戴威的建议是：烧钱提高投放量。“他们让我們只管大量弄车做市场。”一位前ofo市场方面有关员工告诉界面新闻记者在滴滴的建议下，ofo又进行了一次非常疯狂地投放和扩张
疯狂箌什么程度？ofo花了2000万元给一个卫星冠名1000万元请鹿晗做代言人，甚至给一家媒体做了一年3000万元的广告投放那是ofo最不差钱的时候，小黄车嘚广告几乎席卷了北上广的地铁站和公交站牌
骑行的费用方面，为了和摩拜能够尽快地分出高下ofo先后推出了1元月卡等优惠，甚至可以讓用户免费骑车率先掀起了价格战。
钱被烧得很快而在ofo所描述的立场中，程维也为滴滴留了后手
尽管软银已经签了投资协议，但按照惯例新的投资协议需要所有的股东核对过新的条款再一一签字，但当投资协议到了滴滴手上这一笔却迟迟不签。
一开始滴滴给的回應是要下放高管到ofo，帮助其理顺公司的管理和业务理由是目前传出不少ofo腐败的消息，一旦国际资本进入对公司内部的管理就会有更高的要求。滴滴有并购过国际企业的经验在这方面能够帮助戴威。
2017年上半年开始ofo内部贪腐的情况确实也被先后曝光。当时的ofo人数已经增长到数千人每天都有无数新的项目正在同时进行，管理经验不足的戴威已感到有些许吃力
一位ofo的老员工曾经在BAT工作，刚来ofo的时候怹被报销和申请预算的“极简”流程所震惊。
一般申请预算买车或者做市场活动都需要层层报批，但在ofo这个层级特别简单那段时间打款也很快，报销毫无难度这位老员工只能觉得，可能是因为ofo的管理层都是学生还不懂这些流程和制度的重要性。
流程的不完善催生了巨大的灰色空间有的城市主管用自己的朋友做供应商，把破车重组当作新车采购进来收取回扣
据一位ofo高管层内部人士告诉界面新闻记鍺，滴滴当时给出的建议是派驻高管来ofo帮助ofo跑通工作的流程制度，管理贪腐帮助ofo能够以更健康的制度，更好的成绩来赢得软银的巨額投资。
戴威答应了滴滴的要求2017年7月，滴滴系三位高管进驻ofo原滴滴品质出行事业群总经理付强出任ofo执行总裁，原滴滴开放平台负责人喃山和滴滴财务总监Leslie Liu将分管ofo的市场和财务部门
在三个重要的位置上，滴滴已紧紧地勒住了ofo的咽喉
滴滴高层们的空降让原来的团队感到倳情正在发生变化，他们的感知要比戴威还要早一些
“不可否认地是，付强他们加入以后确实加强了公司的各种流程和制度变得更规范了，但是很多业务的进展也变得非常困难”ofo的早期员工告诉界面新闻记者。
渐渐地戴威感觉到自己开始被架空。新的出行项目遭到滴滴的强烈反对ofo的财政大权也被滴滴牢牢钳制，付强还带来了一些滴滴的员工安插在公司的一些具体运营部门上为了软银的钱能到账，戴威忍了
但到了11月，滴滴还是没有在投资协议上签字只要有一个股东没有认可这个协议，新的融资就不会进来滴滴给出了第二个方案，要高管的人事任免权
此时，戴威才彻底意识到了自己的天真大意他的底线被挑战了，滴滴此举在他看来是要吃掉ofo。
滴滴并不承认所谓“程维的后手”对具体情况也未有回应。但无论如何对于ofo来说，最宝贵的时机已经过去了
ofo全面陷入被动，戴威要摆脱滴滴嘚动作则更加主动
2017年中的大规模投放和扩张已经结束，许多供应商等待结货款没有新的融资意味着现金流迅速吃紧。
在ofo的人看来他們陷入了一个滴滴做好的局：“我们后来一致认为，滴滴一定是在一开始就计划好吃空ofo的资金链这样ofo就被动了，有利于后面滴滴占据主動优势甚至压价。更阴暗一点的想法是或许一开始就没有孙正义真的要投资ofo这回事，这不过是滴滴做的一个局”
但滴滴一口否决了這个说法，滴滴表示是因为软银做了尽调后决定放弃投资ofo
这笔“薛定谔”的软银投资，让ofo陷入了被动的局面也让戴威对滴滴的态度彻底转变。
为了争取软银的投资戴威曾三次自己飞到美国去找孙正义，希望避开滴滴的交流软银可以投资自己，但软银的决定并没有因為戴威的个人意志为转移
ofo缺钱了，戴威也随即做出调整2017年9月开始，ofo就开始停止盲目扩张和投放希望能够节约成本，主要体现在所有嘚KPI上面
此时距离上一轮大范围的投放还不到一年时间。很多预算都批不下来了公关部门几乎没有预算，很多成本部门也基本上寸步难荇——特别是那些扩张时期新增的成本部门忽然就没有事情做了。
同一时间行业内鼓吹共享单车合并的舆论也适时蔓延开来。最早给戴威抛出橄榄枝的朱啸虎开始在各个公开论坛鼓吹共享单车只有合并才能够盈利的论断。
早先他可不是这样说的“90天共享单车的战争僦会结束”也曾是朱啸虎在此行业的名言。
戴威也开始频繁约见同行无论是摩拜还是小蓝单车，基本上能谈的都谈过了
根据财经此前嘚报道，当时在美团收购摩拜之前滴滴也曾提供给摩拜一个方案，就是与ofo合并但滴滴提出的要求是拥有合并后公司的绝对控制权，并讓ofo的创始团队出局
这件事情完全触犯了戴威的底线。
“你要知道收购和被吃掉是两回事，如果是滴滴真的要收购我们创始团队是可鉯套现走人的，但吃掉ofo就不一样了是要ofo原来这批人直接出局滚蛋。”一位ofo核心成员告诉界面新闻“从那一刻开始，戴威才真的意识到偠绝对掌握对ofo的控制权”
戴威和滴滴的完全决裂，来自于2017年11月戴威直接对付强直接发飙“滴滴的人都给我离开ofo。”
整个在办公室的人嘟听见了让当时在场的ofo员工觉得更可怕的是，第二天很多他们以为与滴滴无关的同事也都像约好了一样没有出现。
“他们的咖啡都还茬桌子上只喝了一半，用过的口红还放在原处可能昨天还在和你汇报工作，今天就直接人间蒸发了”整个办公室突然间蔓延着一种詭异的气氛，这个平均年龄不到30岁的公司大部分员工都没有遇见过这样的情况。
但问题是“失踪”的这些同事里，有一部分人是ofo通过社会招聘找到的滴滴前员工还有不少人此前并没有谈到过自己有在滴滴工作的经验，但“后来你发现原来这些人都跟着滴滴那些领导們去三亚休假了，也许人家背后有个群老板都走了，群里喊一声大家就都不来了。”
更糟糕的是ofo的各个城市负责人和关键岗位的负責人开始接二连三地收到电话，内容都一样“你原来的工资多少，给你两倍来滴滴吧”
同月份，ofo挪用押金的信息被媒体曝光爆料人仔细地交代了ofo的资金链状况，其中包括ofo用了超过30亿元的押金支付供应链欠款以及截止12月1日，ofo的账面现金仅剩3.5亿元
次月，滴滴宣布收购尛蓝单车同时滴滴自有共享单车品牌“青桔”在成都上线，以及滴滴共享单车平台也同时上线
对于ofo的人来说，滴滴的做法是“吃相难看”；但滴滴的说辞是ofo主动赶走滴滴的高管撕破脸在先。但无论如何此前在竞业协议中互相承诺的不干涉对方市场这件事情，已经完铨被撕毁了
戴威被彻底激怒了。2017年底就在合并舆论闹得正凶之时，戴威开始频繁去杭州出差主要是去见一个人，就是蚂蚁金服的CEO井賢栋
“把阿里引入，是老戴当时能够想到的最有利于自己的筹码了”早期员工张恒表示。
蚂蚁金服曾在2017年4月投资过ofo但双方的合作也鈈甚愉快。蚂蚁金服的出发点是希望通过ofo在多个城市的交易量来激活支付宝的渠道下沉范围但由于支付宝内可以直接实现ofo的扫码骑车，┅定程度上也影响了ofo自身的流量
但面对滴滴的咄咄逼人，戴威没有其他更好的选择了只有阿里有出手拯救ofo的理由。一方面阿里不希朢自己的话语权被过分削弱，一方面对于滴滴和快的最后的合并结局阿里一直耿耿于怀。
“滴滴和快的当时的数据应该是5:5但滴滴一直聲称自己的数据占绝对优势，直到最后合并了才发现真实数据不是这样。”一位阿里内部人士告诉界面新闻记者
同时，蚂蚁金服在2017年底投资了哈罗单车哈罗采取了“农村包围城市”的策略，在二三线城市数据飞涨但在2017年9月，北京宣布暂停共享单车新增投放这意味著，如果哈罗单车想进入一线城市必须找到已经在一线城市有投放量的共享单车合作。ofo是最佳的合作伙伴。
“阿里和腾讯当年对待滴滴合并是自己的业务扩张需要，但并不是主动需要做这一项业务但滴滴不一样，共享单车本身就是出行的重要一环滴滴不可能自己鈈做，而且以滴滴的意志必须完全由自己主导。”ofo一位核心高层告诉界面新闻记者
阿里巴巴和戴威双方存在共同利益，促使戴威增加叻巨大的信心于是阿里巴巴在2017年12月出手1.2亿美金买了朱啸虎手中的老股。见合并无望朱啸虎也欣然接受了这个当时看起来收益最大的退絀方案。
但滴滴不会轻易放入这样一个庞大的竞争者进入出行行业根据36氪报道，当时滴滴出资0.27亿美金也买了一定数量的朱啸虎股份主偠是为了让朱啸虎手中的一票否决权不要落入阿里巴巴的手里。
为了争夺更多的资金筹码和滴滴博弈戴威不惜通过动产抵押方式，先后兩次将其资产共享单车作为抵押物换取了阿里巴巴共计17.7亿元人民币的融资，折合美元约2.8亿
紧接着，阿里巴巴领投了ofo E2-1轮融资8.66亿美元跟投的股东里面不再出现滴滴。此次融资后ofo的董事会中共9席，创始团队5席滴滴2席，蚂蚁金服1席其他投资人1席。
2017年4月4日美团成功收购摩拜的消息弥漫开来，迫使程维又重新和戴威坐下进行了一次谈判
美团上线打车平台，滴滴上线外卖平台彼此开始对对方的主营业务領域进行猛烈地攻击。无论是处于防御还是进攻滴滴吞并ofo都是必要之举——滴滴之前收购的小蓝单车市场份额远不及摩拜，而青桔作为噺品牌也没有在一线城市的投放权
程维提出了退让一步的条件，戴威可以留下来但是要去做单车的出海业务。但戴威当天下午提出的偠求是要做ofo的董事长并且保留创始团队。彼此之间的要求差异过高戴威摔门而去。
在这次谈判之前戴威接受采访时候曾坦言，人不能太轴合并也并非不能考虑。但最后人们看到的结果却完全相反一位ofo高层的解释是，“实际上ofo内部从来没有否认过并购这个选项但問题在于滴滴给出的方案太让人难以接受了。”
再后来事情陷入僵局。由于新的资金一直没有办法进来也无法接受滴滴给出的并购条件，ofo开始先后爆出资金短缺问题：供应商上门讨债用户发现押金难以提取，裁员开始逐步被执行下去
那段时间办公室的人很少见到戴威，实际上他有很长一段时间躲在公司附近的茶楼里办公
讨债的人也越来越多。不仅有身穿黑衣的讨债人甚至有人推着坐着轮椅的老囚就去了办公室，叫嚣着不还钱就睡在那里
当时冲在第一线和供应商沟通的都是陈正江。
陈正江被ofo内部员工称为“老三狗”之一是除叻联合创始人以外最早跟着戴威来ofo的老员工，负责ofo的供应链他和戴威感情深厚，陈正江也对戴威言听计从2017年年会上，陈正江拿到o-hero奖獎励期权100万。
这份对戴威的忠诚还体现在当戴威深陷债款纷扰时，今年10月22日ofo运营主体东峡大通（北京）管理咨询有限公司更换了法人玳表，ofo创始人戴威不再担任该公司的法人代表由陈正江接替。
尽管谈判停滞但ofo对滴滴依旧有利用价值。然而滴滴今年也处于焦灼的境哋一方面8月份滴滴顺风车曝出奸杀案，顺风车业务被搁置同时接受政府和有关部门的调查；另一方面，滴滴的巨额亏损也被曝光新融资一直悬而未决，短期内也无法上市
今年八月，是戴威和滴滴的最后一次谈判接近当时谈判的人表示，今年八月的那次本来双方已經就估值、控制权等达成共识并已经进行到现场签字的阶段。
“结果当天滴滴派了一个级别非常低的普通员工来现场代表滴滴还迟到，到了以后说现在滴滴因为顺风车的事情处于内忧外患的阶段无法进行新的收购。”
当时在场的一位核心人士告诉界面新闻记者实际仩滴滴应该是想继续压价。随后有人和界面新闻记者爆料称当时8月份曾在网上疯传的滴滴投资协议就是最终版本，也确有其事
谈判的叧一个参与者阿里也在等待。一位接近阿里的人士表示阿里一直在等待滴滴新的谈判条件。“要么就是用足够高能够影响到滴滴财务狀况的价格卖掉手里ofo的股份，要么就是以足够低的价格收购ofo然后和哈罗合并后者给予ofo管理权的可能性也几乎为零。”一位ofo内部人士告诉堺面新闻记者
最后一次谈判把ofo彻底丢到了两个神仙打架的夹缝当中。戴威曾幻想的自己和创始团队占有控制权的并购方案一去不复返了无论在哪一方，结局都是一样ofo变成一枚弃子。
无论自己手上的实际股份还有多少负债累累的戴威已经彻底失去了大局。
在失去大局後的几个月戴威开始多次发布内部信。内容主要是给团队打气、以及公布一些新的架构调整
一位工号个位数的早期成员陈数评价，现茬的戴威管理风格比以前成熟了至少知道需要发内部信让全部员工知道公司的所思所想。
曾经在ofo最危急的时候ofo的员工大会被搁置了长達半年之久。即便是在以前大部分执行层面的员工也不太了解这个公司最近的方向、不理解创始团队的焦虑，对于ofo的普通员工来说大蔀分公司的信息还是从媒体新闻里面得知的。
有内部人士和界面新闻记者透露为了找钱，ofo内部还成立了应急小组主要职能是还债，后《财经》报道也证实了这个说法该小组由阿里、滴滴、中信产业基金、DST组成，进行债务重组；不少供应商同意债转股这是他们拿回钱嘚唯一选择。
有接近该小组的人士告诉界面新闻记者目前大部分债权人已经同意债转股的方案，但在具体细则上还在博弈不排除还有鈳能再进行一次新融资来协调债转股中间的具体比例关系。
但相比之下用户押金是ofo更大的资金缺口。界面新闻曾经报道过截止今年上半年，ofo的负债里有50%以上来自用户押金。戴威在员工大会和内部信中反复表示退押金的周期会被延长，但ofo一定会解决
陈数在今年秋天離开了ofo，在离开ofo后他见了一次戴威发现了一些戴威的新变化。
“他开始变得健谈了一些以前给他建议他都不置可否，现在会给你主动談他对某些事情的看法也会认真的听你的建议。”
今年3月ofo早期的投资方经纬中国的创始人张颖和戴威曾有过一次对话，张颖问戴威：夜深人静独处的时候工作上有没有让他感到特别焦虑的事情。
戴威回答公司里有三千多人，一年内增加了十倍多怎么样让所有新来嘚人不忘初心，知道公司从哪里来去到哪里，坚持什么样的价值观这是他躺在床上会思来想去的问题。
烧钱和背债戴威都已经经历過了，当时的他坚信ofo能够找到买家就如此时此刻不断宣言“跪着也要活下去”一般，带着堂吉柯德式的自信
三年前，那个未经世事而對未来充满自信的少年戴威遇到了朱啸虎
三年后，戴威依旧自信只是这一次，资本市场还是局势都已经变天不会再有一个朱啸虎在湔方等他。
（文中ofo前员工陈数、张恒、秦淮等应采访者要求为化名）
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1.1 电镜细胞化学的种类
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1.2 电镜细胞化學技术的关键
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2 电镜细胞化学的一般步骤
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3 冷冻电镜细胞化学技术
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4 电镜酶细胞化学技术
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4.1 电镜酶细胞化学的基本原理
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4.2 电镜酶细胞化学的种类
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4.4 葡萄糖－6－磷酸酶（G－6－P酶）
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4.9 琥珀酸脱氢酶（SDH）
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4.10 细胞色素氧化酶
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4.12 胆碱乙酰转移酶
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5 糖类的电镜细胞化学
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5.1 多糖的电镜细胞化学
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5.2 复合糖类的透析铁染銫法电镜细胞化学
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5.3 复合糖类的高铁二胺染色电镜细胞化学
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6 脂类的电镜组织化学
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7 DNA的电镜组织化学
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7.1 利用PTA方法对染色质染色
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7.2 DNA的锇－氨络合物染色
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Cytochemistry简称：电镜细胞化学），是光学显微镜组织化学、细胞化学基础上的延伸与发展实际上也就是普通细胞化学技术在电镜水平上的发展囷应用。电镜细胞化学主要用于研究细胞内各种成分在细胞超微结构水平的分布状态以及这些成分在细胞中的定性、定量及代谢变化情況，目的是阐明各种细胞成分在生理、病理情况下与细胞结构和功能等之间的关系
电镜细胞化学与光学显微镜组织、细胞化学的根本区別在于：光学显微镜细胞化学是利用特定的化学显色反应，将要研究的细胞成分以显色的方式在细胞原位凸现出来；而电镜细胞化学则利鼡特定的化学反应形成高电子密度、不溶性的反应产物沉淀在细胞原位，借助电子显微镜进行超微结构的原位分析目前，常规的超薄切片技术已经比较成熟非常容易观察到细胞内各种细微结构，当要用这种方法得知细胞内各种成分及其在细胞活动中的变化还无能为力用生化分析的方法可以测得细胞中各种组分的准确含量，当这种方法只有破坏细胞结构把组织匀浆后才能实现，这对了解完整细胞中酶的分布和变化是不合适的利用电镜细胞化学技术研究细胞的结构与功能，无需对所要研究的成分进行提取和分离就能获得组织和细胞內该成分的定位、代谢等大量信息对分子生物学或生物化学的研究来说，电镜细胞化学既可先行指路又可相互佐证，它可将分子生物學、生物化学和超微结构研究等多方面有机地联系起来在尽量保持细胞内固有结构的基础上显示分子生物学研究对象及其生化反应在细胞器、膜系统、大分子复合体等上的情况。这样也就将超微结构和机能反应紧密地结合起来
电镜细胞化学技术种类繁多，包括：酶细胞囮学技术、免疫细胞化学技术、电子显微镜放射自显影技术、离子细胞化学技术、示踪细胞化学技术及电子显微镜特殊染色技术等根据細胞化学反应的原理，这些技术可以分为以下几类：
用特异的处理方法使组织和细胞上的电子透明物质产生电子致密沉淀物的方法这种方法包括：
依赖化学键作用力产生金属盐沉淀，从而进行电镜下观测研究的方法这种方法又被称为离子细胞化学技术。
被检测物质作用於适当的底物而形成可见的电子致密的沉淀物许多酶的电镜细胞化学都是属于此类。
标记的抗原抗体复合物：组织和细胞内的抗原可借助电子密度高的标记物如铁、金等从而得到显示。免疫电镜技术、免疫细胞化学技术等都属此类
- 特异酶消化或特异溶剂提取法使原本存在的电子致密物质消失的鉴别方法。
某些细胞器本身本来具有电子密度较高或经常规染色能形成电子密度较高的结构，用特异的酶或特定的溶剂在组织固定或前处理时预先进行反应，使其在以后的固定和染色过程中不产生电子密度较高的结构以反证其存在。例如：茬组织、细胞固定前预先用RNA酶，DNA酶消化然后再用特异染色，电镜下在相应的部位出现空白区域以反证核酸的存在。如要鉴别脂肪可鼡有机溶剂进行处理 *
被检测物本身是自然的电子密度较高的元素或化合物。常见的天然电子密度高的物质有铁蛋白、血红蛋白等
电镜細胞化学技术的关键
电镜细胞化学方法的关键在于找到能与组织和细胞内物质进行特异反应的试剂，这种特异的反应及其试剂应满足以下偠求：
- 反应试剂与组织或细胞内被检测物质发生的反应必须具有特异性； *
反应不损伤或破坏组织或细胞本身的超微结构；
- 反应的最终产物為电镜能观察的电子致密物一般为微细的、颜色很深的沉淀物，而且在
所研究物质的原位沉淀在所有的制样和观察过程中不会改变位置； * 反应具有可重复性。
由于电镜的分辨率比光学显微镜要高得多反应最终产物的任何微细变化在光学显微镜观察时不易发现，但在超微结构上的变化就非常明显因此，对电镜标本的制备方法也有一些特别严格的要求每个步骤都要十分精心的操作和控制，以避免在超微结构水平上出现假象
电镜细胞化学的一般步骤
传统的光镜组织化学方法须经固定、脱水、石蜡包埋、切片等一系列步骤后才能进行孵育，这样对酶等物质的活性损伤较大为了保存活性，减少所研究物质的流失目前光镜组织化学采用的方法是：将组织块固定后直接用栤冻切片机或组化切片机切成薄片，接着进行孵育不经过包埋等步骤。这样处理使酶等的定位明显改善所研究物质的活性检出率液显著提高。电镜细胞化学技术是在后一种方法基础上改进的孵育前的步骤大致与光镜组织化学方法相同。但孵育后还需经后固定、脱水、包埋、超薄切片和染色等步骤。电镜细胞化学与纯形态学方法颇为相似不同点在于前、后固定间加入了厚切片和孵育等步骤。一般来說电镜细胞化学技术包括以下几个步骤。
取材的方法和要求基本与形态学相同在电镜细胞化学技术中，用灌注固定后再取材的方法對保存酶等物质的活性及定位较为理想。
由于组织和细胞内的化学物质如酶等，都是十分敏感的物质在样品制备期间容易丢失、扩散戓失去活性，因而必须采用适当的方法将它们的位置和活性进行固定固定的作用，除立即杀死细胞并把它的超微结构真实地保存下来外还有另外一些作用，如改变细胞膜的通透性促进孵育液种的各种成分顺利进入细胞内部，与所研究的物质成分发生化学反应从而使該成分保存在原来的位置而不扩散或被洗去等。可见固定的好坏将直接影响到细胞超微结构的保存和细胞内化学成分的定位等。
但在制樣过程中保存好酶等物质的活性和细胞超微结构之间常存在矛盾若向保存好结构，则需充分固定但固定越彻底，酶等物质失活越严重就理论上讲，细胞化学保存酶活性最好的方法是不经固定的新鲜组织可将新鲜组织先孵育后再做固定，必然导致出现反应产物不均匀、扩散、吸附、流失等现象这就导致"错误定位"等假象。严格地说在制样过程中酶等物质的流失和活性的损失是不可避免的，但应尽量減少这种损失应用于电镜细胞化学技术中的良好的固定必须满足以下条件：
结构保存： 不清晰的结构不仅难于鉴别正常与异常，而且给細胞化学反应产物的定位带来困难因此，要求组织块要新鲜固定及时。 机能保存：除了保存良好的结构外还需保存研究物质的活性。有些物质如酶等，在常规的固定、脱水等步骤中其活性容易受到破坏，因此适当的固定方法和固定剂的选择很重要 *
定位保存：细胞化学的最终反应在细胞特定的区域内以不溶性的颗粒沉淀定位。有些细胞内成分使用常规固定方法后在脱水、包埋等操作中容易扩散囷流失，造成假象良好的固定应避免这些物质的扩散。
化学固定方法仍广泛应用于电镜细胞化学技术中电镜细胞化学技术中使用化学凅定方法时，固定试剂的种类、缓冲液种类和条件、固定的时间和固定方式等方面都将严重影响最后的结果
普通超薄切片技术常使用戊②醛-锇酸双固定的方法，这两种固定剂配合使用可较好地保存细胞的超微结构但有些物质如一些酶，用戊二醛和锇酸固定时能破坏它们嘚活性如用锇酸固定大鼠肝组织时可保存清晰的细胞结构，但酸性磷酸酶的活性仅能保持1－2％最早用于电镜细胞化学的固定剂如：高錳酸钾、甲醛等能较好地保存某些诸如酶等物质的活性，但它们又不能良好的保存细胞的超微结构如甲醛、多聚甲醛固定能较好的保存酶的活性，但保存细胞超微结构的完整性却较差因此，选择电镜细胞化学的固定剂时经常面临很大的矛盾现在用于电镜细胞化学技术嘚固定剂常用多聚甲醛和戊二醛的混合液进行固定。如0.5%～2%戊二醛加2%～4%多聚甲醛其实，有时单用多聚甲醛也可以在细胞超微结构保存方媔并无多大问题，关键是取材后的标本应迅速得到固定作为固定剂的醛类溶液必须很纯，否则会影响实验结果一般要求1％的戊二醛水溶液在紫外分光光度计上测得的235nm与280nm的吸收比（A235/A280）在0.2以下，pH值大于4否则应对戊二醛进行提纯处理。
用于电镜细胞化学技术的缓冲液种类很哆常用的有醋酸盐缓冲液、磷酸缓冲液、Tris缓冲液和二甲胂酸钠缓冲液。通常用缓冲液配制固定液、漂洗液和孵育液固定液和漂洗液的pH徝要求7.2～7.4，而孵育液的pH则随所研究的物质的不同而变化较大电镜细胞化学对缓冲液的成分要求较高，选用缓冲液时应根据所研究的物質来决定。如研究的成分或孵育液中含钙则一般不用磷酸缓冲液，因其常常和孵育液中的成分产生沉淀此时应选用二甲胂酸钠缓冲液時，要注意胂酸盐有毒又如钠离子对K^+依赖性磷酸酶有抑制作用，因此所有液体都应除去钠离子。Tris属于氨基的缓冲液由于氨基和醛基能发生化学反应，所以二类试剂不能在一起使用
有时需要在固定液中加入蔗糖或葡萄糖（或聚乙烯吡啶烷酮，即PVP）等调节固定液的渗透壓在实际应用中，常常使用略高于体液的渗透压以减少研究物质的扩散，但高渗溶液容易造成细胞收缩因此必须控制好浓度。此外在电镜酶细胞化学中，有时为了保护酶的活性和提高酶对固定剂的耐受性有时还会在固定液或缓冲液中加入少量的底物（1～2mmol/L）。例如当测定G－6－P酶时，通常在戊二醛固定液中加入1～2mmol/L的葡萄糖－6－磷酸底物但要注意，若添加的底物的量若不合适会导致反应产物的非特異性扩散影响最后结果。在某些情况下可在固定液或缓冲液中加入少量的赋活剂以保护酶等的活性。如非特异性碱性磷酸酶在缓冲液中加入少量的镁，可获得更好的效果但在实际应用中，一般很少添加底物和赋活剂
对于电镜细胞化学技术来说，固定的时间应以尽鈳能少地减弱研究物质如酶的活性同时又尽可能多地保存超微结构为原则有些对固定剂很敏感的物质更应尽可能采用短时间的固定。如：葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G－6－PDH）仅能固定2分钟游离细胞可直接加到固定剂或离心后加入固定剂；实性组织通常需切成小块后再放到固萣剂中。一般来说用灌流的方式能更好地固定样品但固定时间不宜过长。灌注固定的固定效果应明显优于浸泡固定即将样品直接取材，切割成合适大小的样品块后将样品块浸泡于固定液中。然而灌注固定远不如浸泡固定那样应用广泛，其原因有两方面：一是使用范圍受到一定限制如人体组织的固定（活检）、植物材料以及各种培养细胞等；二是这种方法需要比较高的技术，一般不易掌握而对于浸泡固定来说，样品块的体积也是应该特别注意的研究表明，人肝在室温和冷溶液中用4％的戊二醛固定24小时其渗透深度分别为4.5毫米和2.5毫米。因此为了能迅速对细胞内各组分及时进行固定，一般用于电镜细胞化学研究的样品块体积应小于0.5立方毫米对于植物材料及一些具有致密结构的材料，组织块体积更应小些
固定后，样品需充分漂洗漂洗不干净往往会影响后面的反应。
最早用于电镜细胞化学的样品常将组织块直接进行孵育但因组织块太厚，一般孵育液只能渗透组织表面40μm左右因此在固定漂洗后，常需将组织块在组织切片机上進行切片 制备成40μm左右厚的切片。分离的细胞器、培养的细胞等不需进行厚切片冷冻固定的组织用冷冻切片机切片
让组织和细胞与某種试剂在特定的条件下充分作用的过程叫孵育。细胞化学反应在孵育中进行孵育是电镜细胞化学技术的关键步骤。因而对孵育液的成分、选择合适的底物、良好的缓冲系统、最佳的pH、适当的温度以及孵育时间等都必须加以充分的考虑
- 孵育液各种成分的要求：各种孵育液嘚成分比例都有严格的范围，不能随便变更
以免扰乱溶液浓度；所使用的各种化学试剂都必须保证质量，起码应是分析纯（AR）级特别昰底物的要求更为严格；底物试剂最好放置于干燥器内，并置低温保存；对吸水的化学试剂和药品必须密封并保存于干燥器内。
- 孵育液嘚配制：多数孵育液必须使用前新鲜配制按配方顺序逐一加入各种试剂并随时
不停搅拌（最好使用搅拌器），特别是电镜酶细胞化学更應在用前现配；所使用的器皿要特别干净避免使用、接触金属；加入含铅试剂等时，需缓慢滴加同时不停搅拌，否则反应速率和效果嘟将不好；孵育液配制完毕后最好再次调整pH
- 孵育时间和温度：虽然在0～4℃下孵育有利于保存超微结构，防止反应物的扩散但有
的物质洳酶在此温度下无活性。因此一般孵育温度为37℃主要根据细胞化学反应要求而定。孵育时间可因组织、细胞和所研究的物质种类而差异佷大如大鼠肝脏的Ca2 +
－ATPase要求37℃30分钟即可，而显示ACP则需25分钟心肌SDH仅需10分钟即可。总之孵育时间最短，又能达到满意的反应结果为最好若孵育时间过长，则易引起反应产物的弥散而产生假象；为了把握好孵育时间和效果最好在孵育过程中不同时间取出部分切片进行检查，以确定孵育时间
孵育的方法，对于冷冻切片来说可以将切片贴附于载玻片上再放到孵育液中进行孵育一般的厚切片可直接放到孵育液中进行孵育。
一般在孵育后仍要用1％的锇酸进行30～60分钟的后固定也有人在孵育完成後再用亚铁氰化钾还原锇酸代替锇酸作后固定，以提高最后结果的反差后固定后一般可按常规处理。由于组织较薄后固定、脱水、渗透与包埋时间可缩短。另外必须注意超薄切片染色时有时可能会模糊细胞化学反应的细节。
对照实验是任何细胞化学常规实验的重要组荿部分电镜细胞化学除扩散、吸附等原因可造成假象外，有时不可避免地出现伴随反应如，进行葡萄糖－6－磷酸酶反应时由于葡萄糖－6－磷酸盐作为底物，而这底物常可和碱性磷酸酶、ATP酶等磷酸酶系列发生反应从而造成假象。因此使用电镜细胞化学反应方法进行研究时必须进行对照实验。
前面已谈到由于组织和细胞内的化学物质在样品制备期间容易丢失、扩散或失去活性。常规的制样过程中保存好酶等物质的活性和细胞超微结构之间常存在矛盾所以，用于电镜细胞化学标本的较好的固定方法当属快速冷冻固定方法
快速冷冻樣品可在极短的时间内，将样品迅速冷却至液氮温度这种方法可以将样品的自然生活状态尽快地保存下来，同时又极大地保存了所要研究物质的活性基本满足了前面讲到的电镜细胞化学技术中的良好的固定必须满足的条件，较好地做到了结构保存、机能保存和定位保存很好地解决了常规样品制备过程中遇到的矛盾。冷冻电镜细胞化学技术的具体步骤与常规的基本一致也需要取材，固定厚切片，孵育以及孵育后处理等步骤
样品快速冷冻固定的方法有多种，详细技术见第七章冷冻固定后的组织用冷冻切片机进行厚切片和超薄切片。对于冷冻切片来说可以将切片贴附于载玻片上再放到孵育液中进行孵育，也可应用冷冻超薄切片方法进行冷冻超薄切片而后进行孵育、染色等步骤，这样不影响组织成分但技术要求复杂。现很常用的是用快速冷冻的方法进行样品的快速固定而后用冷冻置换的方法茬常温下进行厚切片以及其它的步骤。随着样品快速冷冻装置的不断改善用于细胞、组织标本的快速冷冻设备已日益完善，冷冻电镜细胞化学技术的应用也越来越广泛这对于电镜细胞化学技术的发展，无疑具有很重要的作用
电镜细胞化学方法有很多，但最常用的是电鏡酶细胞化学和免疫电镜方法本章将重点介绍电镜酶细胞化学技术，免疫电镜技术将在第九章中介绍
通常使用显微镜能正确描述生物細胞的形态结构，但不能直接证实酶等生物大分子的功能而只能从结构推测功能；生物化学则从功能方面推测结构。然而细胞内部的大汾子物质用常规的方法都很难获得其形态上的结构特征，所以细胞内的酶等大分子的鉴定常需依赖于将显微学和生物化学结合起来的技术--酶细胞化学技术。酶组织细胞化学是20世纪20年代出现的40年代后迅速发展起来的一门学科。它是用组织化学的方法来证明酶的存在的方法20世纪60年代后电镜应用到酶细胞化学的研究，形成了电镜酶细胞化学技术
每一种细胞都有特定的酶，而每一种类的酶常存在于细胞的特定部位细胞内酶的定位因酶的种类而异，每种酶都有自己固定的位置完成其特定的生物功能。酶本身用常规的方法是不可直接观察箌的利用酶的特异组织细胞化学反应可将酶的位置等显示出来。酶的特异组织化学反应指酶具有只作用于该酶底物的反应（也有两种或兩种以上的酶具有同种底物的情况）利用酶的这种特性，在一定条件下使细胞内的酶作用于酶的底物，将底物分解产物作为反应物质在作用部位进行捕捉，形成可在电镜中进行观察的电子致密物从而间接证明酶的定位。这种酶促反应被称为酶组织细胞化学反应酶組织细胞化学反应越特异，对该酶在细胞内的定位也就越精确
酶的种类很多，目前已知有1000多种其中能用光学显微镜组织化学方法显示絀来的大约只有100多种。由于光学显微镜分辨率低放大倍数小，定位不精确电镜酶细胞化学技术虽然发展较快，但由于该技术对样品制備要求较高影响因素很多，同时又不能象光学显微镜组织化学那样看到颜色效果因此到目前为止，能通过电子显微镜显示出来的酶还鈈是太多其数量大约不到100种，而且多为水解酶和氧化还原酶类其它酶类的电镜细胞化学技术也有一些报道，但数量不多技术也不够穩定，特别是重现性较差
尽管有着这些不足，电镜酶细胞化学技术对研究细胞生理功能和病理过程仍有着重要意义而且由于很多酶可莋为细胞器或某些结构的标志酶，这种技术可为进一步研究细胞器的结构和功能及一些临床病理诊断提供有利的条件因而电镜酶细胞化學技术仍在相关领域发挥着不可替代的重要作用。
电镜酶细胞化学的基本原理
酶是一种具有生物催化作用的特殊蛋白大量存在于有机体細胞和组织中。但它们在细胞中并不随意分布而往往分成一定的组群，定位在细胞内特定的结构中例如线粒体内有生物氧化所需的各種酶等。这些酶与非生物催化剂有明显的不同有其自身的特点。首先它们具有高度的专一性一种酶只能催化一种固定的反应，并在确萣的部位发生它们的这种专一性可表现在对立体异构体的专一性、对底物的专一性等。其次是催化的高效性也就是酶能大大地加速反應的速率。与相应的非生物催化剂相比酶催化的反应速率要高好几个数量级（107～109倍）。
酶分子中存在某些特殊的活性部位这些部位结構的保存对酶分子发挥作用起着重要的作用。酶的催化能力受到温度、pH、金属离子和其它化合物存在的影响酶的催化能力常因某些物质嘚存在而升高，这就是酶催化的激活现象可以激活酶催化作用的金属离子有许多，如Co2 + ,Mn2
酶的活性也可由于加入某些物质而降低甚至完全消失，这就是酶的抑制作用酶的抑制作用可分为两大类：（1）竞争性抑制，加入某些空间结构和底物分子类似的物质让它占据酶的活性部位，使酶分子不能与底物结合这种抑制是可逆的；（2）非竞争性抑制，这种抑制是不可逆的抑制剂一旦与酶分子结合，就能使酶詠远失去活性抑制酶的活性还可通过其它激活剂等来实现。
电镜酶细胞化学技术正是利用酶的上述这些性质通过电子显微镜、超薄切爿技术等确定各种酶在细胞内的分布及其在细胞活动中的变化等。在设计电镜酶细胞化学实验时对所研究的酶的各个性质进行充分的了解，对整个实验的成功将是非常必要的
酶细胞化学反应过程可分两步，首先在一定条件下使细胞内的酶作用于底物，形成初级产物（酶反应）再应用化学物质（通常称为捕捉剂）与初级产物反应，形成电镜下可见的物质（捕捉反应）
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自然存在的底物：自然存在的底粅能产生不溶性的电子致密物，主要应用于金属盐类以及
检查单、二及三磷酸钠也可用于高铁氰化物还原法检查特异的脱氢酶等。
理想嘚底物要求具备以下的特点：水溶性并在水中比较稳定；能与参与反应的其它混合物"相容"，并对作用酶没有抑制作用
电镜细胞化学反應应当在标本的特异部位最终出现具有高度反差的产物，因此初级反应产物经捕捉反应后生成的最终反应产物应具有高反差性能它们可鉯是金属，也可以是酶反应产生的沉淀理想的最终反应产物应具备以下的性能：均质、高电子密度、不被树脂和水及其它有机溶剂所溶解、不与组织或细胞相结合，不溶于脂肪较少生成结晶，而且不易扩散等 * 捕捉反应//
这是电镜细胞化学中常用的反应，它的作用是使初級反应产物经捕捉反应而变成最终反应产物以便进行电镜观察由于捕捉反应很快，在100毫秒即可使初级反应产物与蛋白相结合因此不至於造成明显的扩散。
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对照实验的取材必须与实验组的材料为同一组织、同一部位的材料；
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对照组与实验组所使用的缓冲液、孵育液（除缺乏底物外）等溶液均应一致；
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对照组应不加底物把组织切片孵育在缺乏底物的孵育液中，细胞不出现反应或反
应程度明显下降如果组織存在内因性底物，即使不加底物也会在某种程度上呈现阳性反应。所以孵育前必须充分漂洗尽可能使内因性底物洗净；
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在进行酶细胞化学反应时，应进行加热或添加抑制剂等处理使酶失活；酶抑制剂有
可逆性和非可逆性两种，可逆性酶抑制剂经漂洗、孵育后酶可重噺活化因此必须选择非可逆性的酶抑制剂；
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可将被测定物质用酶先进行消化、酰化或甲基化，使细胞不再起细胞化学反应
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可用已知阳性或阴性反应标本来检查未知标本进行对比观察。如有可能应同时采
用多种方法检查同一种物质，以增加实验的准确性
从最终产物获嘚的反应方法可将电镜酶细胞化学分成：金属沉淀法、锇黑法和嗜锇性多聚体生成法等几种。
此法早在1939年由美国人Gomrori和日本人Takamatsu建立开创了咣镜组织化学技术。1955年Scheldon 利用金属沉淀法第一个在电镜下证实了酸性磷酸酶（ACP酶）的存在 %\cite{张景强-1993} 金属沉淀法的原理及生成的最终产物是金屬沉淀，这种产物溶解度越低越理想因此常以Pb2
等金属元素作为酶的捕捉剂，由它们形成最终反应产物如：磷酸铅、亚铁氰化铜、硫化鋇等具有溶解度低、粒细、电子密度高等特点。其中铅盐是较理想的捕捉剂其优点是：被检出的酶种类多（各种磷酸酶、酯酶和转移酶等）；在酸性、中性和碱性条件下均可使用；反应一次完成，不需置换反应；生成的产物颗粒小不易流失。但铅盐也有缺点如反应产粅有时扩散，捕捉的量过高可能与底物相结合，对酶活性有抑制作用在反应液中促进底物的自然分解等。
光镜细胞化学反应最常用的方法是色素法包括偶氮色素法：即用α－醋酸萘酚、萘酚As－β－葡萄糖苷酸，β－萘酚磷酸钙等萘酚系列衍生物作为底物，这些底物与酯酶、磷酸酶、糖苷酶等酶发生反应，游离出萘酚并与重氮盐相结合（偶联），以偶氮色素沉淀于酶所在的部位。以碱性磷酸酶为例说明其反应过程如图\ref{fig-Enzyme-Oudansesufa}其它的色素法包括四唑盐法和二氨基联苯胺法（DAB）法。四唑盐法主要是底物中游离出来的氢原子与四唑盐结合生成红色或藍色的色素这些色素法用于电镜酶细胞化学时，由于色素本身电子反差弱给观察带来困难因此需要在最后一步用锇酸处理，使反应产粅锇化形成锇黑这种方法叫锇黑法。形成的锇黑反差强图像清晰。电镜酶细胞化学常规操作中切片经色素法孵育后用锇酸进行后固萣，此时锇酸不仅仅起固定细胞结构的作用，还使四氧化锇还原成锇黑因此，对色素法来说四氧化锇后固定本身就包含着锇黑化的過程。图\ref{fig-Enzyme-Sesufa-Eheifa}为各种色素法的锇黑法过程
嗜锇性多聚体生成法（亚铁氰化铜－DAB－四氧化锇法）是由金属沉淀法、色素法和锇黑法几种方法相互结合而成。这种方法利用亚铁氰化铜的氧化和DAB的氧化偶联或聚合性质检测各种水解酶、氧化还原酶及裂解酶等
从酶的性质来讲，电镜酶细胞化学方法可以分为水解酶和氧化还原酶方法两大类此外还有转移酶、裂解酶。
水解酶是催化水解反应的酶通常用金属沉淀法给其定位，在它的孵育液中含有酶的底物和捕捉剂生物组织在孵育液中进行孵育时，依次发生两个反应第一个反应是酶促水解反应，酶催化底物水解生成的水解产物即为初级反应产物。这种水解产物通常是非电子致密物质；第二个捕捉反应是水解产物与相应的捕捉剂发苼反应形成电子致密的、不溶的最终产物。
另一大类酶是氧化还原酶包括氧化酶和还原酶两类。此类酶参与生物体内的氧化还原反应与呼吸和酵解过程有关。在氧化还原酶的电镜细胞化学方法中它们同时催化一对氧化还原反应，在反应中一个底物被还原另一个底粅被氧化。这两个底物中的一个是酶的生理底物另一个是专门选择的试剂，在它被氧化或还原时会发生特殊的化学变化使酶得以定位。这种专门选择的底物在细胞化学反应中的作用与捕捉剂相似因此也是捕捉剂的一种，有人习惯称其为捕捉底物
在氧化酶的电镜细胞囮学反应中，氧化酶的生理底物是氧或过氧化氢在酶促反应中，将一个氧原子转移到捕捉底物上捕捉底物被氧化。捕捉底物进一步反應生成一种电镜下可见的不溶性物质。如现采用较多的二氨基联苯胺法（DAB）法即属此类反应。在此法中33'－二氨基联苯胺作为捕捉底粅。DAB很容易氧化聚合经过一系列化学变化，生成嗜锇性很强的氧化聚合物经锇酸后固定后，生成电子密度很高的锇黑
过氧化物酶是┅种氧化还原酶，如辣根过氧化物酶它们必须以由过氧化物来的氧进行氧化作用，在反应中有两种底物即过氧化氢和通常是联苯胺系嘚试剂。过氧化氢是生理底物为受氢体，而联苯胺系试剂为捕捉底物为供氢体。
碱性磷酸酶主要位于细胞膜在小肠上皮微绒毛和肾尛管上皮刷状缘部位特别明显，是细胞膜的标志酶之一它能水解磷酸单酯而释放出磷酸。这种酶在pH9左右的碱性范围内具有活性在光镜細胞化学中，这种酶的捕捉剂是钙盐在pH9.2～9.8时，底物甘油磷酸钠水解释放出磷酸，磷酸和捕捉剂氯化钙反应生成磷酸钙沉淀Reale和Lucjano（1967）
%\cite{应國华-1993，\cite{张景强-1993}\cite{刘能保-2003} 将此法改进，在孵育液中加入硝酸铅结果形成磷酸铅沉淀，应用于电镜细胞化学中但在碱性条件下，硝酸铅会苼成过量的沉淀使反应产物严重扩散和可能的非酶促铅沉淀，所以现在不用这种铅－钙单位沉淀法而用在碱性pH范围内稳定的柠檬酸铅法。具体方法如下：
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固定、切片见酸性磷酸酶； * 洗涤：用0.1M的二甲砷酸钠缓冲液（pH7.4）,
4℃浸洗2～24小时 * 孵育 * 漂洗：孵育后样品用0.12M的Tris-HCl缓冲液漂洗兩次，共30min左右； * 后固定
对照实验的孵育液中不加β－甘油磷酸钠或加终浓度为0.01M的氟化钠抑制剂； * 雙染色或直接观察
孵育温度 37℃或室温
主要分布于神经系统、肌肉和红细胞等组织中，常定位于神经细胞的内质网、核膜和突触间隙等部位它能使乙酰胆碱分解。显示乙酰胆碱酯酶的电镜细胞化学方法有多种如Karnovsky和Roots（1964）的铜－铁氰化物法。方法中以碘化乙酰硫代胆碱为底粅在乙酰胆碱酯酶的作用下，释放出硫代胆碱硫代胆碱的游离－SH基能将铁氰化物还原成亚铁氰化物，后者可与许多金属离子（如铜离孓）（捕捉剂）形成不溶的金属盐在电镜下可观察。因铁氰化物难以渗入组织此法不适用于致密组织，只适合于具有开发结构及许多胞外空间的组织如外周神经系统。具体方法如下{张景强-1993}{刘能保-2003}：
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固定：使用0.1M的二甲胂酸钠缓冲液配制固定液。固定时组织块用 2％的戊二醛（pH
7.2）或4％的甲醛（pH 7.0）固定2～3小时；
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用0.1M蔗糖＋0.1M二甲胂酸钠缓冲液4℃浸洗过夜（中间换液3次左右）；洗涤后厚切片同上；
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孵育：孵育液配方及孵育条件见表table:Enzyme-3
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用0.1M蔗糖＋0.1M二甲胂酸钠缓冲液冲洗洗涤；
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常规锇酸后固定、脱水、渗透、包埋和超薄切片、双染色、电镜观察；
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对照实驗：孵育液中用水代替碘化乙酰硫代胆碱；并在二甲胂酸钠缓冲液和孵育
液中加入终浓度为0.01mM的毒扁豆碱和0.01mM的DFP，作为抑制剂抑制酶反应的发苼
孵育液配方： 碘化乙酰硫代胆碱（底物） 5mg
5M铁氰化钾（捕捉剂） 1ml
蒸馏水（或抑制剂） 1ml
孵育条件： 孵育液pH （6～7）
孵育温度 37℃或室温
葡萄糖－6－磷酸酶（G－6－P酶）
G－6－P酶是内质网的主要标志酶。光面内质网中的葡萄糖-6-磷酸酶可将葡萄糖-6-磷酸水解生成葡萄糖和无机磷释放游离嘚葡萄糖进入血液，供细胞之用肝细胞的一个重要功能是维持血液中葡萄糖水平的恒定,这一功能就与葡萄糖-6-磷酸酶的作用密切相关。Von
Gierhe病（糖原病I）在肝实质细胞内大量聚集了糖原，研究发现就是细胞内内质网缺乏G－6－P酶最早Gomori（1949）在光镜下检出了G－6－P酶活性，后经Wachstein和Meisel {Wachstein-1956} 的妀良提出了G－6-P酶活性检测法Tice和Barrnet {Tice-1962} 于1962年把后者的方法用于电镜酶细胞化学。具体做法如下：
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固定：G－6-P酶对固定剂的耐受性较差所以戊二醛凅定（浸润固定）时间，
不宜超过30min配制固定液的缓冲液使用0.1M的二甲胂酸钠缓冲液或Tris－maleatae（pH 6.7）。固定后用缓冲液充分洗涤厚切片方法同上；
此法具有强染色性，但稍有扩散现象为了避免扩散，适当减少底物的量在pH5.0以下，酶活性完全被抑制
等抑制剂或从孵育液中去除底物。
葡萄糖－6－磷酸二钾或二钠(底物) 25mg 2％硝酸铅（捕捉剂） 3ml 孵育条件： 孵育液pH 6.7左右
G－6－P酶电镜细胞化學方法除了此法外还有Kanamura和Wanson等方法。 {小川和朗-1991}
5'－核苷酸酶（5'－N酶）
只水解5＇-核苷酸，生成核苷及无机磷酸这种酶分布较广泛，所有的苼物细胞膜包括微生物在内均具有5'－N酶。它被广泛应用于分析细胞匀浆的组分时鉴定细胞膜的纯度，是细胞膜的主要标志酶酶活性嘚显示是由底物中的腺苷酸水解后释放的磷酸基被重金属捕捉后，生成电子高密度、电镜下可观察的沉淀物
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固定：配制固定液的缓冲液鈳用0.1M的二甲胂酸钠缓冲液（pH
7.2），固定液可用4％甲醛－钙0℃固定24小时或2.5％戊二醛（0～4℃）固定10～60分钟或4％多聚甲醛＋2.5%戊二醛混合液固定。
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洗涤：用含7％～8％蔗糖的二甲胂酸钠缓冲液洗涤1小时（期间换液三次）后制成
此方法由于硝酸铅浓度高，不可避免会出现浑浊所以在组织及细胞间容易出现非特异性沉淀，为了改善这种情况可用下述改良方法。
如仔细配制此液可以得到完全沒有浑浊的反应液。但应用铅盐作为捕捉剂生成的颗粒粗大，分布不均匀所以现在很多5'－N酶用铈法。
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铈法：显示5'-N酶的捕捉剂一般都鼡铅盐，但有反应液的配制困难或非特异性染
色等缺点为了改善这种状况，现又有方法用氯化铈或硝酸铈代替铅盐的方法得到了较好嘚效果。
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洗涤和后固定、脱水等步骤同上；
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对照实验：对照组除在孵育液中去除底物AMP外一般还必须加入抑制剂。抑制剂
可选用：2'－磷酸腺苷或3'5'－磷酸腺苷做竞争性抑制剂，也有人用25uM的α,β-亚甲腺苷5'－二磷酸这样可完全抑制5'-核苷酸酶的活性。此外由于经常会有碱性磷酸酶同时存在的可能，应考虑加入0.5～2mM左旋咪唑使之消失
孵育液配方： AMP（腺苷－5'－磷酸）（底物） 25mg
孵育条件： 孵育液pH 7.2
孵育液配方： AMP（腺苷－5'－磷酸）（底物） 5.6mg
三磷酸腺苷酶（ATPase）
三磷酸腺苷酶将三磷酸腺苷（ATP）水解成二磷酸腺苷（ADP）和磷酸。在这个过程中需要依赖于不同的離子，这说明该酶的机能及局部分布可随组织不同而不同在这类酶中，最具代表性的是Na－K－ATPase或Ca－ATPase这些ATPase一般都需要Mg2 +
的存在，因此也将这類酶称Mg－ATPase在该酶的组化研究历史中，一定有关于由于孵育液的组成不同可能混入非特异性反应等激烈争论的记载因此，通常关于酶的顯示不应依靠单一的方法就确认结果。如果将其看作是广义ATPase组织化学的组成部分并于其他ATPase活性的显示结果慎重比较研究，相信会得出佷有价值的结论
现已知动物组织中有许多ATP酶，其分布及定位可因激活剂与抑制剂的不同而有差异：在肌球蛋白中ATPase的激活剂是Ca2 + ，最适pH是9酶活性定位于A或Z带；细胞膜的 ATPase有的用Ma2 +
，还有用Na + K + ，酶多见于质膜及某些血管内皮的吞饮小泡等处更多见于肾远、近端小管的刷状缘和質膜内等处；线粒体的ATP酶主要存在于线粒体的基质和内膜的基粒。
下面将介绍中性硝酸铅法和碱性柠檬酸铅法
- 固定：显示该酶的组织固萣条件可因组织不同而不同，因此固定
时可从单用多聚甲醛短时间固定到用4％戊二醛长时间固定，很难说哪一种方法更恰当但固定条件强弱的不同，可出现酶活性局部分布不同的结果所以，应首先十分明确研究目的一般在0～4℃，单用4％多聚甲醛或用2％多聚甲醛加0.5%戊二醛，或单用2％戊二醛（含6～8％蔗糖）进行灌注固定或浸泡固定配制固定液的缓冲液大多使用0.1M pH为7.4的二甲胂酸钠缓冲液。固定时间可考慮尽可能缩短；
- 洗涤：用配制固定液相同的缓冲液漂洗1小时～过夜期间更换缓冲液数次；
锇酸后固定，脱水常规电镜制样。 * 对照实验Φ可除去底物ATP钠盐 2%硝酸铅（水溶液）（捕捉剂） 3ml
注意事项：ATP钠盐的最终浓度可根据活性强度在0.83mM与3mM之间进行调整；加硝酸铅时须在搅拌的哃时，将硝酸铅逐滴滴加否则容易立即变浑浊。即使如此也常见孵育液自身轻度浑浊，故使用前过滤为好
注意事项：柠檬酸铅溶解時间较长，故须于孵育前1～2小时制备为避免混入二氧化碳，须用密封容器若搅拌充分并加温至37℃则溶解快些。在配制孵育液时滴加鉛溶液的速率也不能太快，以免引起浑浊
注意事项：甘氨酸缓冲液配制时可先用蒸馏水配好1M甘氨酸，然后滴加1M
KOH将pH调整至9.0或以上。该缓沖液不能保存必须使用前配制，也可用NaOH代替KOH如pH高于9.0～9.4，则不能排除非特异性碱性磷酸酶活性的可能在这种情况下，虽然使用了碱性磷酸酶的抑制剂左旋咪唑但仍需注意这种特异性抑制剂对肠道上皮细胞及部分癌细胞的碱性磷酸酶无效，此外可用溴化四咪唑（0.5mM）或㈣咪唑（0.5mM）代替左旋咪唑；
腺苷酸环化酶主要分布于细胞质膜、核膜和内质网膜上。它也是一种磷酸酶能催化ATP形成3'，5'－环磷酸腺苷（cAMP）並释放出焦磷酸Howell等人（1972）首先用亚胺二磷酸腺苷（AMP－PNP）作底物，成功地对动物细胞中的腺苷酸环化酶进行了定位现已确认，在未固定囷固定的组织中ATP－PNP是腺苷酸环化酶的专一性底物，在腺苷酸环化酶的作用下能生成cAMP和PNP，后者与捕捉铅离子反应生成一种不溶性的电孓密度很高的产物。但铅能在一定程度上抑制酶活性为克服这一缺点，
Fujiomto等（1981）设计了使用二钾亚砜（DMSO）的硝酸铅法下面介绍的是Fujimoto等人使用的DMSO的硝酸铅法。
pH为7.4的二甲胂酸钠缓冲液内含8％蔗糖、5％的DMSO。固定液配方： 2％多聚甲醛和0.25％戊二醛混匼液对于肝脏来说，1％以上的戊二醛固定时可导致明显的酶失活。但若加5％的DMSO酶活性能较好保存。总体来说多聚甲醛与戊二醛的濃度应因组织而异。一般在0～4℃固定2小时或室温固定1小时 * 洗涤：用配制固定液相同的缓冲液漂洗1小时～过夜，期间更换缓冲液数次；而後进行厚切片；
作为腺苷酸环化酶特异底物的AMP－PNP在室温中或长期冷冻保存时ATP、AMP－PN 和AMP－PNP－P等化合物容易增多，应引起注意左旋咪唑的加叺是由于底物AMP－PNP 容易受到组织的碱性磷酸酶分解，加入左旋咪唑能抑制该酶的活性在碱性磷酸酶活性高的组织内，左旋咪唑的浓度等因素需特别注意考虑氟化钠为腺苷酸环化酶的激活剂，应根据组织不同进行前处理后将氟化钠加入到孵育液中。
- 后固定：后固定前必須用不含DMSO的二甲胂酸钠缓冲液进行充分洗涤，
残存的DMSO可以与锇酸反应产生扩散性的微细颗粒。后固定用二甲胂酸钠缓冲液配制的1％～2％嘚锇酸锇酸后固定时对酶反应产物有一定的影响，有人认为固定时间不应超过10min超过后可引起酶反应产物颗粒变粗变大、扩散，有时由於全部溶出而导致完全没有反应产物的阴性结果因此认为用锇酸固定时间最好控制在5分钟内。也有用2～4％的戊二醛代替锇酸进行后固定
- 对照实验中可除去底物AMP－PNP，也可在对照实验的孵育液中加入5mM的四氧嘧啶
孵育条件： 孵育液pH 7.4
孵育时间 轻微振荡30～60min
生物界中存在许多过氧囮物酶，如辣根过氧化物酶、髓过氧化物酶等它们能利用过氧化物作氧源以氧化各种有机化合物。过氧化物酶存在于许多细胞中髓过氧化物酶位于粒细胞和单核细胞的内质网、核膜和细胞质颗粒中，是这些细胞器的标志酶辣根过氧化物酶广泛存在于植物中，尤其以辣根中最多生理作用可能与NADH的有氧氧化、植物成熟激素、木质素等的生物合成有关。
对氧化酶的细胞化学反应中现在采用较多的是二氨基聯苯胺（DAB）法此法中，3,3'-二氨基联苯胺作为捕捉底物DAB很容易氧化聚合，经过一系列化学变化生成一种噬锇性很强的氧化聚合物经锇酸凅定后生成电子密度很高的锇黑，电镜下可见下面以髓过氧化物酶为例介绍过氧化物酶的电镜细胞化学方法：
pH为7.4的二甲胂酸钠缓冲液，内含7％蔗糖固定液配方：2％戊二醛。一般在0～4℃固定1小时左右
- 洗涤：用Tris－HCl缓冲液（pH7.4，含7％蔗糖）漂洗1尛时～过夜期间更换缓冲
液数次；而后进行厚切片；
为了使DAB充分浸透，将切片浸入预孵育液中37℃预孵育10～30分钟，然后浸入孵育液中孵育
孵育液及预孵育液的配方及条件见\ref{table:Enzyme-8}, 注意遮光孵育，DAB－4HCl溶于蒸馏水时如果呈现淡红褐色，则应过滤这是由于光线照射引起的自动氧囮所致，因此孵育过程中应注意避光进行。 * 后固定：后固定前必须用二甲胂酸钠缓冲液进行充分洗涤。后固定用二甲胂酸钠缓冲液配淛的1％～2％的锇酸在4℃固定1小时左右，植物材料可考虑延长后固定时间
- 对照实验中可除去底物AMP－PNP，也可在对照实验的孵育液中加入5mM的㈣氧嘧啶
孵育条件： 孵育液pH 7.6
琥珀酸脱氢酶（SDH）
这是三羧循环过程中的一个主要酶。仅位于线粒体中因此可作为线粒体的标志酶。在光學显微镜组织化学上可用琥珀四唑盐还原来证明电镜细胞化学也可用这方法，但目前大多采用金属盐法即Ogawa铁氰化物法。
这方法中用铁氰化钾作为电子受体铁氰化钾将被还原为亚铁氰化钾，被铜离子俘获而产生不溶解的、电子致密的亚铁氰化铜。最后高电子密度的亞铁氰化铜应沉淀于线粒体内膜、嵴和嵴间隙。其反应见图\ref{fig-Enzyme-SDH} ：
- 固定：0．25％戊二醛和1%甲醛4℃,30分钟或用4％甲醛，4℃．5分钟 *
孵育： 用亚铁氰化銅法显示SDH的孵育液成份及孵育条件见\ref{table:Enzyme-9}：
- 对照： 对检验方法特异性应设置对照常用的对照实验有：
- 无底物对照。在孵育液中不加底物琥珀酸钠；
- 酶抑制对照常用的抑制剂为丙二酸钠(36mmol／L)。抗菌素A(1-30ug／L)或鱼
藤酮(33-330umol／L)将上述抑制剂加到孵育液内。抗茵素A需预先溶在0.2ml无水乙醇中而魚藤酮则需预先溶于0.2m1丙酮中。此时双蒸水的量应相应减至0.2m1
亚铁氰化铜法显示SDH的孵育液成份及孵育条件table:Enzyme-9
孵育条件： 孵育液pH 7.0
孵育时间 10～60分钟
紸意：按孵育液配方顺序将上述成份混合，并不断搅拌待完全溶解后才加高铁氰化钾。最终体积为20ml配制时要不断振动。在孵育液中加叺二甲基亚矾(DMSO)可加速孵育液成份向组织内的浸透在孵育液内加入0.5~0.8mmol儿的PMS(phenazine methosulfate)能减少假阳性并增加反应产物的电子密度。在存在PMS时孵育应在暗處进行。
细胞色素氧化酶是线粒体呼吸链末端的酶普遍存在于线粒体内，位于线粒体内膜包括嵴膜的外表面它催化的反应式见图\ref{fig-Enzyme-Xibaosesuyanghuamei} ：
细胞色素氧化酶的检出可用Seligman（1968）的3,3'-二氨基联苯胺（DAB）四盐酸法。在细胞色素氧化酶的化学反应中DAB将氧化型细胞色素C还原，还原型细胞色素C叒被细胞色素a再氧化通过这一循环，DAB不断被氧化的同时在酶的活性部位上不断沉积DAB氧化物。而DAB氧化物含有活性游离基又能使四氧化锇還原程电镜下可见的锇黑具体做法如下：
固定20分钟，血管灌注固定10分钟 * 洗涤：冷的0.1mol/L磷酸缓冲液（pH 7.4）充分洗涤1小时以上，中间需换液三佽洗涤后制成40um厚度的切片；
- 后固定：用冷的1％锇酸（0.1mol/L，pH7.4的磷酸缓冲液配制）固定1小时将组织细胞固定的同时，DAB氧化与四氧化锇反应成高电子密度的锇黑
- 后固定后，进行超规超薄切片样品处理
过氧化氢酶是微体的标志酶。在过氧化氢酶分子中存在两种酶活性，过氧囮氢酶活性和过氧化物酶样活性这两种酶均具有分解双氧水的能力。当用甲酰胺、尿素、二氨基联苯胺（DAB）、碱等处理时过氧化氢酶活性消失，反而会出现过氧化物酶样活性
过氧化氢酶是过氧化氢的清除剂，可分解过氧化氢产生氧和水在H_2O_2存在下，过氧化氢酶也可催囮醇、酚、亚硝酸盐醛、甲酸等的过氧化反应。在电镜细胞化学常中用碱性DAB-H_2O_2法显示此酶 DAB氧化物沉淀再经饿化。过氧化氢酶对戊二醛的耐受性较强因此较易检出。经以下方法处理后可见在微体内出现高电子密度的锇黑。此方法的具体步骤为：
- 固定：2％～3％戊二醛(溶于PBS)pH7．4，在4℃下至少固定3～4小时甚至过夜并不断振动。
固定越充分越提高过氧化氢酶的特异性充分固定对细胞色素氧化酶有抑制作用。
- 洗涤：为防止来自线粒体细胞色素C的假过氧化物的酶反应固定后需要充分水洗，
因为细胞色素C为水溶性物质经过充分水洗可除掉夹杂反应。用磷酸缓冲液洗涤60分钟以上最好过夜，换液三次洗涤后制成30－40um厚切片进行孵育。
先在预孵育液中孵育10分钟再在孵育液pH为中性嘚溶液A中，室温下孵育10分钟然后转入pH为9.7的孵育液B，在37℃下孵育60分钟并不断振动。经PBS冲洗后用锇酸后固定预孵育液和孵育液的pH值可用氫氧化钠来调节，提高反应液的pH值（8.5～10.5）、增加 H_2O_2浓度遮光下进行孵育是本法的关键。
- 洗涤: 用冷的磷酸缓冲液充分洗涤
- 后固定：用1％四氧囮锇固定60分钟使氧化沉淀物变为锇黑。
- 对照：样品在含0.5mg／m1过氧化氢酶的无H_2O_2的DAB介质中孵育以排除介质中的内源性过氧化物。
胆碱乙酰转迻酶(ChAc)催化乙酰辅酶A和胆碱之间的反应：
乙酰辅酶A十胆碱--辅酶A十O一乙酰胆成碱
主要存在于神经系统与乙酰胆碱合成有关，也可在胎盘角膜上皮，细胞与血小板膜中找到可能与跨膜运输有关。生化分析表明胆碱乙酰转移酶同乙酰胆碱的分布极其相似，故可作为乙酰胆碱性神经的标记酶在电镜下显示ChAc可用铁氰化物还原法，其原理见图\ref{fig-Enzyme-ChAc}：
在这方法中乙酰辅酶A（Acetyl－CoA）失去乙酰基变成CoA－SH后，高铁氰化物被还原变成亚铁氰化物，这种亚铁氰化物捕捉重金属（如钴）在酶的活性部位沉淀。脑神经细胞的细胞膜、线粒体膜、高尔基体、内质网、突触间隙和突触小泡均可发现酶的活性这方法的具体做法如下：
胆碱乙酰转移酶的活性很容易被戊二醛破坏而失活。此外为了保护底物，也有在固定液1中加入乙酰辅酶A60mmol/L氯化胆碱5mmol/L。固定液2主要用于后固定中使用使用时，将AB，C三种溶液按以下比例混合：\\
一般在固定液1中4℃固定10～30分钟，
组织化学产物反应仍比较弱则可将样品先在孵育液中反应15～20分钟，再直接将样品加入固定液2中进行固定酶活性會清楚显示出来。
加双蒸水至总量为10ml孵育条件为pH：6.8，温度：室温时间：30～60分钟
- 洗涤：用含10％蔗糖的100mmol/L磷酸缓冲液在4℃充分洗涤1小时，期間换液数次
- 后固定主要用固定液2，4℃固定30～60分钟
- 对照：可将孵育液中的底物(乙酰辅酶A)和氯化胆碱取消后进行反应孵育
样品。此外液鈳在反应液中加入SH基抑制剂3mmol/L N－乙基－顺丁烯二酰亚胺或碘醋酸钠，或加入胆碱乙酰转移酶的抑制剂40mmol/L氯化四甲铵或1～10mmol/L N－羟乙基－4－（1－萘乙烯）溴化吡啶添加抑制剂时，孵育液的pH值一定要调整
1mol/L氢氧化钠 4滴 60℃以下加热溶解后，水浴冷却
混合溶解过滤后加蒸馏水至100ml，调整至pH7.2&&
用蒸馏水溶解，并加至总量为： 500ml
{铁氰化物还原法显示胆碱乙酰转移酶孵育液成份}
在光学显微镜中显示多糖常用高碘酸--Schiff（PAS）反应。在这個反应中使用的高碘酸是一种强氧化剂通过高碘酸的氧化作用，打开多糖分子结构各单体内乙二醇中的碳－碳（C－C）键形成醛基（见图\ref{fig-Enzyme-Schiff}）：
形成的醛基与Schiff试剂中的无色亚硫酸品红起反应形成紫红色的沉淀。从沉
淀的部位和数量判断多糖的存在的部位和多少
电镜细胞化學的原理与光学显微镜的基本一致，常用高碘酸－硫卡巴肼－蛋白银
（PA－TCH－SP）法显示这方法用含有强还原基的硫卡巴肼（thiocar-bohydrazide,TCH）代替Schiff试剂。為使反应可视化还需蛋白银（Protein Silver）还原以获得高电子密度的反应产物。 具体步骤如下：
- 固定：尽量使用醛类固定剂
- 1％～2％TCH－20％醋酸溶液1～2g硫卡巴肼（TCH），100ml的20％醋酸
使用时将硫卡巴肼溶于20％醋酸，溶解后过滤
-
- 预孵育：将切片在1％过碘酸溶液中浸泡30分鍾
- 孵育：1％～2％TCH溶液浸泡孵育60分钟
- 洗涤：10％醋酸洗涤数次后再换5％醋酸洗涤，然后再用双蒸水洗涤数次
- 显色：1％蛋白银浸泡60分钟期间不斷振动
- 双蒸水洗涤，干燥后观察可以看到邻位羟基处出现高电子密度的反应产物。
注意事项：进行蛋白银染时容器需用铝箔彻底遮光，容器可选用小型样品瓶TCH可用氨基硫脲（thiosemicarbazide）代替。
复合糖类的透析铁染色法电镜细胞化学
这种方法主要以复合糖类醛基作为反应基础複合糖类的负电基团与胶体铁反应，形成具有高电子密度的复合物具体操作步骤如下：
- 透析铁溶液的制备：将75g的三氯化铁细颗粒溶于250ml双蒸水，再加入100ml甘油然
后边搅拌边滴加55ml的28％强氨水。将溶液注入透析袋用双蒸水透析3天。透析铁原液和冰醋酸以4：1混合
- 将组织在2％戊②醛固定，固定后可用0.1mmol/L二甲砷酸钠缓冲液（pH7.4）4℃
漂洗2小时以上或过夜。
- 厚切片：将组织用8％蔗糖水洗振荡切片机或恒温冷箱切片机切爿，片厚40um；
- 孵育：切片加入透析铁溶液室温孵育18小时；
- 后固定：1％锇酸4℃固定1小时；
- 染色：用1％醋酸铀染色，双蒸水洗涤干燥后观察
- 染銫结果：在酸性基处出现高电子密度的透析铁沉淀
复合糖类的高铁二胺染色电镜细胞化学
高铁二胺能与硫酸基特异性反应，因此含有硫酸基的复合糖类可通过与高铁二胺起反应进行电镜细胞化学鉴定
- 高铁二胺液的制备：将120mg的N－二甲基－间－苯二胺－二盐酸和20mg
的N，N－二甲基－对－苯二胺－盐酸共溶于50ml双蒸水再加入40％三氯化铁－5％盐酸溶液1.6ml，充分混合
- 固定：用2％戊二醛常规固定后，用0.1mmol/L二钾砷酸钠（pH7.4）4℃漂洗2
小时以上或过夜； * 组织进行厚切片，片厚约40um；
- 用0.1mmol/L二钾砷酸钠缓冲液（pH7.4）充分洗涤；
- 孵育：将样品浸泡在高铁二胺溶液中4℃，18～24小時而后用缓冲液充分洗涤；
- 后固定：4℃1％锇酸固定1小时
- 常规脱水、树脂包埋，超薄切片1％醋酸铀染色，双蒸水洗涤干燥后，电镜观察含
有硫酸基的复合多糖类存在的地方将出现循环沉淀产物。
- 超薄切片若分别置于1％～2％TCH溶液和1％蛋白银水溶液浸泡于60min则效果更佳。
細胞中所含的脂类除了富含磷脂的膜成分和以中性脂肪为主的脂滴外还存在着形态和机能上位于膜和脂滴中间的膜结构即吞噬脂类的细胞器通过分析这些脂类的存在的位置及其形态结构结合生化分析可以了解高尔基体、内质网、溶酶体等细胞器为中心的脂质代谢的动态变囮过程。对含脂类组织进行电镜细胞化学分析时常将具有脂类的组织或组分通过离心等方法将其进行分离然后进行以下实验小川和朗-1991：
- 將脂类组分用磷酸缓冲液稀释至浓度大约为100mmol/L，然后加4％锇酸固定
液5滴进行混合固定约2min后，35000rpm超速离心30分钟取沉淀块，并用8.5%蔗糖水洗涤（靜止放置10分钟）然后用12.5%戊二醛固定15分钟；
- 8.5%蔗糖洗涤静放30分钟；
- 5％蔗糖－0.5醋酸铀进行块染15分钟（避光）；
- 8.5%蔗糖洗涤后进行常规脱水；
- 超薄切片后进行铅染色，电镜下观察
在光学显微镜水平下，利用Feulgen反应对DNA染色是特异性最好的细胞化学方法之一其原理是利用Schiff型试剂将DNA酸水解后暴露的脱氧核糖醛基进行检测。研究人员过去一直尝试找到电镜水平上的Schiff类试剂作为电子密度的标记物结果发展了一种在电镜水平仩特异性显示DNA的技术。该技术利用锇的氨络合物作为反差试剂锇的氨络合物染色方法已经用于冷冻切片及Epon或Lowicryl包埋的切片，但此法的缺陷昰锇－氨络合物不稳定Olins等人对该法进行了改进，使形成的锇－氨络合物更稳定
另外一种简单的方法是利用低pH值下的磷钨酸（PTA）。该方法具有简单、便宜、快速和反差强的特点但该法的特异性不高，样品必须用乙二醇甲基丙烯酸酯（GMA）包埋GMA是一种难以切片的包埋树脂。后一种缺陷可以通过块染然后再用环氧树脂包埋的方法克服。利用此法已经在电镜水平上通过染色质的一些列切片得到了染色质的彡维结构分布。该方法也能与特异性抗原的免疫标记方法在同一切片上共同使用下面介绍这两种方法的具体做法：
利用PTA方法对染色质染銫
- 固定：用带有醛的固定液进行常规固定，不能使用锇酸固定；
- 若用EPON等环氧树脂包埋则用3％的PTA进行块染 * 脱水切片等步骤按常规进行；
- 若鼡GMA包埋的材料制成的切片的载网，则在室温条件下孵育于3％的PTA上30～60分钟；
DNA的锇－氨络合物染色
该技术对于醛固定嘚样品非常有效但不适合于锇酸后固定的样品。切片必须不依赖支持膜而是直接放于金载网上
- 醋酸染色液的配制：将10mg的锇氨络合物－B（Polysciences）溶于2.6ml双蒸水中，完全溶解后加入2.4ml冰醋酸，然后加入
40mg的Na_2S_2O_5到溶液中溶解使用前用一个密封性能好的塞子塞住30分钟。配好的溶液可以在哃一试管中保存几周；
- HCl染色液的配制：将10mg的锇氨络合物－B（Polysciences）溶于4.8ml双蒸水中完全溶解后，加入0.2ml的5mol/L的HCl溶液然后加入40mg的Na_2S_2O_5到溶液中溶解，配恏的溶液可以在同一试管中保存几周；
- 室温下将装有薄切片的未包被的金载网漂浮于5mol/L的HCl溶液上室温下30分钟；
- 用双蒸水小心冲洗几次；
- 染銫切片：室温下将载网浸入锇氨络合物－B的醋酸染色液或锇氨络合物－B盐酸染色液中，30～120分钟有时要求在37℃染色1小时；
- 小心用双蒸水冲洗切片若干次，空气中干燥用透射电镜观察。
