BEAS-2B细胞膜主要功能有ENaC表达吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-04-30 11:42 标签： 细胞膜主要功能

【摘要】：【研究背景及目的】腫瘤的发生是一个复杂的过程,我们实验室一直致力于肿瘤发病机制与干预的研究mi RNAs(micro RNA,mi RNA,mi R)在肿瘤发生中的作用是近年来关注的热点,我们前期的研究中用mi RNAs芯片杂交分析经过As2O3急性诱导的SHP2+/+野生型和SHP2D61G/+突变的MEFs中mi RNAs表达谱的变化。结果发现,在数十种表达有差异的mi RNAs中,mi R-100的表达是递减的而SHP2D61G/+突变的MEF细胞發生了恶性转化,并且用As2O3诱导后,细胞的恶性行为更加明显,由此我们推测,mi R-100参与了细胞的恶性转化过程,于是我们进一步研究mi R-100的作用。近年来,mi R-100与肿瘤关系的研究也有了新的进展研究发现,mi R-100在一些肿瘤中如前列腺癌中的表达是升高的,并且促进前列腺癌的转移,发挥着促癌基因的作用;而在叧一些肿瘤中,如宫颈癌、膀胱癌、肺癌中呈现低表达,发挥着类似于抑癌基因的作用。有人研究发现,用低剂量的砷长期慢性诱导人支气管上皮细胞BEAS-2B细胞后,细胞的增殖和生长能力增加,发生了一定程度的恶性转化,同时研究也发现,长期的砷暴露也增加了肺癌的发生风险,因此mi R-100与砷都和肺癌的关系密切于是我们选择人支气管上皮细胞BEAS-2B细胞作为研究对象,研究mi R-100对BEAS-2B细胞行为学的影响。慢病毒具有感染效率高、感染谱广、稳定表达且安全性高的优点,可以将目的基因导入细胞并稳定的表达因此,我们拟通过构建mi R-100抑制剂的慢病毒载体并稳定感染BEAS-2B细胞,研究沉默mi R-100表达对BEAS-2B細胞行为学的影响,为进一步研究mi R-100的功能奠定基础。【研究方法】1.构建mi R-100抑制剂的慢病毒表达载体并稳定感染BEAS-2B细胞2.用RT-PCR的方法检测慢病毒感染後的BEAS-2B细胞中mi R-100的表达。3.用MTT实验和克隆形成实验来检测慢病毒感染的BEAS-2B细胞生长情况;用软琼脂集落形成试验来检测细胞的非依赖生长能力;4.用粘附試验和Transwell迁移实验来检测细胞的粘附能力和体外迁移能力【研究结果】1.成功的构建了mi R-100抑制剂的慢病毒表达载体并稳定感染BEAS-2B细胞株。2.慢病毒感染的BEAS-2B中mi R-100的表达被明显的抑制3.MTT实验和克隆形成实验结果显示,抑制mi R-100的表达后,BEAS-2B细胞生长增殖能力有所增加。4.抑制BEAS-2B细胞中mi R-100的表达后,细胞的锚定非依赖生长能力增强,形成了较大的集落5.粘附试验和Transwell迁移实验结果表明,抑制mi R-100的表达后,BEAS-2B细胞的粘附和体外迁移能力有一定程度的增强。【研究结论】1.通过mi R-100抑制剂慢病毒载体稳定感染BEAS-2B细胞,成功的抑制了BEAS-2B细胞中mi R-100的表达2.抑制mi R-100的表达,促进了BEAS-2B细胞的增殖、生长和迁移能力。

【摘要】：目的检测经长期氡暴露而发生恶性转化的人永生化支气管上皮细胞(BEAS-2B)中甲基化转移酶(DNMT)基因的动态变化,从表观遗传学层面探索氡致肺癌的作用机制方法应用流式細胞仪分析法,软琼脂集落形成及裸鼠成瘤实验鉴定长期氡暴露过程中BEAS-2B细胞的恶性转化程度,以QPCR方法检测DNMT1、DNMT3A的mRNA表达量。结果与对照组细胞相比,染氡30代传代至40代的细胞软琼脂克隆形成率已升高至27.27%±1.10%(P0.05),转化细胞在裸鼠体内成瘤率达到30%(P0.05),呈低分化癌;QPCR结果显示各染氡组传至40代细胞DNMT1 mRNA表达量均低於对照组,DNMT3A mRNA表达量均高于对照组结论建立并确认了体外染氡诱发BEAS-2B细胞恶性转化模型,且细胞恶性程度随染氡代数和传代代数的增加呈现剂量-效应关系,细胞出现移植成瘤。本试验条件下,DNMTs表达的改变导致细胞增殖失控,打破内环境平衡,这可能是在表观遗传学中,长期氡暴露致BEAS-2B细胞恶性轉化的机制之一


石雪迎,赵凤志,由江峰,戴欣,王洁良,崔湘琳,邵宏权;[J];世界华人消化杂志;2005年04期
李冰燕;洪承皎;张保国;左保齐;;[J];激光杂志;2006年04期
尹航;张锡慶;王晓东;张亚;王科文;;[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年06期
薛霞;朱运峰;毛建平;;[J];南方医科大学学报;2007年06期
贾坤志;华子春;;[J];东南大学学报(医学版);2010年01期
瓮媛媛;续惠云;安龙;商澎;;[J];中国细胞生物学学报;2010年02期
肖扬名,胡昌智,罗敏华,代橄,施凯;[J];湖南医科大学学报;1997年05期
伍津津,刘荣卿,叶庆佾,钟白玉,唐书谦;[J];重庆醫学;1998年06期
李涛,胡江,王翠茹,陶祖莱;[J];医用生物力学;2000年02期
贺永文,潘延凤,王萍,郭劲松;[J];实用肝脏病杂志;2004年02期
张敏,刘芳,游泳,何伟,邹萍,陈智超,刘仲萍,刘陵波;[J];中华血液学杂志;2004年12期
刘仁明;张凤秋;阎新惠;袁斌;徐大光;张建民;唐伟跃;;[J];光谱实验室;2007年01期
朱萍;冯吉;杨荟敏;谷利;张红;;[J];中国生物化学与分子生物学報;2010年04期
唐国华;贺修胜;龙治峰;唐朝克;;[J];中南医学科学杂志;2011年01期
沈宝荣;姜隽;齐颖新;姜宗来;;[J];医用生物力学;2011年03期

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