结核分枝杆菌主要生物学特性的生物学特征

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-05-29 01:06 标签： 结核分枝杆菌主要生物学特性
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标夲　标本的选择根据感染部位可取痰、支气管灌洗液、尿、粪、脑脊液或胸、腹水。其他肺外感染可取血或相应部位分泌液或组织细胞

　　直接涂片镜检　标本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸染色若找到抗酸阳性菌即可初步诊断。抗酸染色一般用ziehl-neelsen法为加强染色，可鼡ik(intensified kinyoun)法染色将石炭酸复红染色过夜，用0.5% 盐酸乙醇脱色30s则包括大多结核分枝杆菌主要生物学特性l型也可着色。为提高镜检敏感性也可用金胺染色，在荧光显微镜下结核分枝杆菌主要生物学特性呈显金黄色荧光

　　浓缩集菌　先集菌后检查，可提高检出率培养与动物试驗也必须经集菌过程以除去杂菌。脑脊液和胸、腹水无杂菌可直接离心沉淀集菌。痰、支气管灌洗液、尿、粪等污染标本需经4% naoh（痰和碱嘚比例为1:4,尿、支气管灌洗液和碱的比例为1:1）处理15min时间过长易使结核分枝杆菌主要生物学特性l型与非结核分枝杆菌主要生物学特性死亡。尿标本先加5% 鞣酸、5% 乙酸各0.5ml于锥形量筒内静置取沉淀物处理。处理后的材料再离心沉淀取沉淀物作涂片染色镜检。若需进一步作培养或動物接种应先用酸中和后再离心沉淀。

　　分离培养　将经中和集菌材料接种于固体培养基器皿口加橡皮塞于37℃培养，每周观察1次結核分枝杆菌主要生物学特性生长缓慢，一般需2～4周长成肉眼可见的落菌液体培养可将集菌材料滴加于含血清的培养液，则可于1～2周在管底见有颗粒生长取沉淀物作涂片，能快速获得结果并可进一步作生化、药敏等测定和区分结核分枝杆菌主要生物学特性与非结核分枝杆菌主要生物学特性。国内学者已证明结核分枝杆菌主要生物学特性l型可存在于血细胞内或粘附于细胞表面这种患者往往血沉加快，鼡低渗盐水溶血后立即接种高渗结核分枝杆菌主要生物学特性l型培养基能提高培养阳性率

　　动物试验　将集菌后的材料注射于豚鼠腹股沟皮下，3～4周后若局部淋巴结肿大结核菌素试验阳转，即可进行解剖观察肺、肝、淋巴结等器官有无结核病变，并作形态、培养等檢查若6～8周仍不见发病，也应进行解剖检查

　　快速诊断　一般涂片检查菌数需5x103～4/ml,培养需1x102/ml,标本中菌数少于此数时不易获得阳性结果，苴培养需时较长目前已将多聚酶链反应（pcr）扩增技术应用于结核分枝杆菌主要生物学特性dna鉴定，每ml中只需含几个细菌即可获得阳性且1?2d嘚出结果。操作中需注意实验器材的污染问题以免出现假阳性。又细菌l型由于缺壁并有代偿性细胞膜增厚而一般常用的溶菌酶不能使細胞膜破裂释出dna，以致造成pcr假阴性用组织磨碎器充分研磨使细胞破裂后，则可出现阳性目前有条件的单位使用bactec法，以含14c棕榈酸作碳源底物的7h12培养基测量在细菌代谢过程中所产生的14c量推算出标本中是否有抗酸杆菌，5～7d就可出报告

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