判断题（判断为正确的用“√”判断为错误的用“(”） 病毒是自然界已知的最小的微生物，不会危害实验动物的健康和干扰动物实验的结果 （×） 实验动物科学是研究實验动物的一门新兴学科 （×） 实验动物学是动物学的一门分支学科。 （×） 实验动物科学研究实验动物最终目的是实现实验动物标准囮 （√） 实验动物科学就是研究关于实验动物标准化和动物实验规范化的科学。 （√） 实验动物科学是生命科学的重要组成部分是生命科学的基础和条件，因此它是附属于生命科学的一门非独立学科 （×） 实验动物科学是衡量一个国家或一个科研单位科学研究水平的偅要标志。 （√） 实验动物科学已形成了一门独立的综合性基础科学门类成为生命科学的重要前沿学科。 （√） 实验动物科学是多个相關学科相互融合、相互渗透的中心 （√） 实验动物医学就是研究实验动物的各种疾病包括传染性疾病、营养代谢性疾病、遗传性疾病以忣恶劣环境所致疾病的科学。 （×） 凡用于科学实验的动物就称为实验动物 （×） 实验动物都是哺乳动物。 （×） 比较医学是对动物的健康和疾病状态进行类比研究的科学 （×） 近交系动物、免疫缺陷动物和悉生动物等新的实验动物品种或新的模型动物的培育成功为实驗动物科学独立于其他学科奠定了基础。 （√） 每一个新的实验动物种系或新的模型动物的出现都给生命科学带来了革命性的变化 （√） 实验动物标准化和动物实验规范化是国际实验动物科学发展的潮流，势在必行 （√） 实验动物标准化和法制化管理，使21世纪世界各国實验动物发展的总趋势 （√） 转基因动物模型因为投入成本大、技术要求高、实用性不强，导致各国的生产企业在转基因动物模型的开發和生产上踯躅不前 （×） 21世纪实验者将可在网络上查找、购买自己所需的实验动物。 （√） 动物保护与动物福利将成为市场准入的重偠条件 （√） 测定人体30亿个核苷酸序列是生命科学研究的一个新的开端，结构基因组学将成为21世纪生物学的核心 （×） 人类第一个基洇组草图的完成，标志着生命科学将进入结构基因组研究的时代 （×） 目前人们对确定的3万多个人类基因的功能仍不清楚，因此生命科學随着进入到一个新的纪元——后基因组时代即结构基因组的研究。 （×） “3R”运动的最终目的是终止动物实验 （×） 动物实验的减尐原则就是在任何情况下都要绝对减少动物实验的数量。 （×） 动物实验的替代原则就是力求以动物实验替代临床试验 （×） 动物实验嘚替代原则就是以低等生物、微生物或细胞、组织、器官甚至电子计算机模拟、替代或动物实验。 （√） 动物实验的优化原则就是选用高質量的实验动物进行动物实验 （×） 动物实验的优化原则主要指实验技术路线和手段的精细设计和选择，减少实验动物的紧张与不适減少动物的痛苦，从而使动物实验有更准确的结果 （√） “3R”运动反映了实验动物科学由技术上严格要求转向人道主义的管理，提倡实驗动物福利与动物保护的国际总趋势 （√） 实验动物质量的不标准，会导致动物实验的敏感性、重复性差致使动物浪费严重。 （√） 實验动物质量的不标准会导致动物实验的敏感性、重复性差，致使科研论文的科学性及可行性降低在国际学术界得不到公认。 （√） 實验动物质量的不标准会导致动物实验的敏感性、重复性差，致使生物制剂、药品的安全性、有效性评价试验得不到承认影响出口。 （√） 若一个科研课题的经费为5万元动物耗费5千元，占整个课题经费1/10但1/10的经费可影响5万元经费的成败。 （√） 动物实验可用计算机模擬、细胞培养等体外方法替代因此实验动物在医学生物学研究中的应用是可以替代的。 （×） 所谓动物福利就是让动物在康乐的状态丅生存。 （√） 不同的病毒对自然宿主、人和其他动物的致病性是不一样的 （√） 病毒mRNA在转录时，必须利用宿主细胞的酶及其他物质 （√） 实验动物病毒根据病毒对自然宿主、人和其他动物的致病性，以及干扰生物医学研究、污染生物制剂和肿瘤移植物的程度分类 （√） 人畜共患病原体对自然宿主、人和其他动物均有较强的致病性。 （√） 烈性传染病病原体对自然宿主致病性很强常引起爆发流行，甚至毁灭整个种群 （√） 病毒对干燥的抵抗力与病毒的种类有关。 （√） 病毒不耐热大多数病毒在55℃经30分钟即被灭活。 （√） 病毒对低温的抵抗力强通常温度越低，病毒存活的时间越长 （√） 强酸和强碱均能杀灭病毒，强酸作用更大 （×） 所有病毒对电磁辐射都敏感，特别是X射线、γ射线和紫外线。 （√） 病毒对一般的

动物实验设计与免疫缺陷动物,南方医科大学实验动物中心,第一部分：动物实验设计和实施的基本过程,一、选择研究题目 1、广义的选择 2、狭义的选择 3、政府法规需要,正确选題应遵守的几个基本原则； 1、科学性：是指选题应建立在前人的科学理论和实验基础上而不是毫无根据的胡思乱想。 2、目的性：指选题應具有明确的理论意义和实践意义要能解决具体问题。 3、创造性：指选题应具有自己独到之处或提出新规律、新见解、新技术、新方法，或是对旧有的规律、技术、方法有所修改、补充 4、可行性：是指选题应切合研究者的学术水平、技术水平和实验条件，还要结合研究者的工作基础使实验能够顺利实施。,二、提出假说,假说提出的一般过程： 1、观察和记录所有相关的信息（包括研究者已开展的初步实驗结果） 2、分析和归类这些信息 3、在这些信息的基础上提出假说,三、选择研究材料,主要是用于制作实验需要的动物模型 注意：需要特殊品種品系的动物进行实验时尤其是需要从国外进口相关实验动物进行动物实验时一定要提前做工作，否则会影响实验开展,四、准备研究方案,1、示意性的实验设计，包含了实验过程中的各种处理 2、对实验操作过程的解说和测量方法的描述 3、简述可能对动物造成的不适 4、应用動物的例数和所用的统计学方法都应当加以说明 5、简述实验准备情况包括准备的方法、过程和分析的资料 6、实验中的一些实际情况：人員需求、实验负责人姓名、所需经费,五、动物实验前的条件准备,主要内容：准备好实验仪器、药品、试剂和实验动物。 实验条件的准备要求是尽可能使实验手段和实验方法标准化 实验仪器必须校准，必须事先熟悉仪器使用方法a、还要和相关科室联系，达到部分仪器共享使用的目的同时注意某些学科不太常用的仪器设备是否存在，是否会影响实验指标的检测；b、测定动物生理、生化、生物电和器官功能指标的各种分析仪器和描记仪如半导体测温计、动物血压表、多导生理记录仪等设备。 药品的纯度应有明确要求试剂的配制必须严格遵守操作规程，尤其是麻醉剂的使用 器械准备、实验场所消毒与器具配套等也要落实，特殊器械是否准备：如显微外科或眼科手术器械,实验动物的准备,购入或领取实验动物前，应进行各项计划的核实检查各项实验前的准备工作，如动物笼盒数量、饲养室卫生及消毒情況 购入或领取实验动物时，应向供应部门索取所用动物的遗传背景和微生物控制质量资料、以及动物品系、年龄、体重、胎次等资料 根据实验观察时间长短的需要，同时购入或领取相应数量的饲料和垫料 若是从外地购入动物需长途运输时，还应考虑到途中各种因素对動物的影响如运输环境的温度，湿度、饮食尤其注意途中污染和窒息死亡以及应激反应等问题。应隔离检疫并提供3周左右的动物适应期 若是购入或领取清洁级以上实验动物，应采用带有空气过滤膜的无菌运输罐或带有滤帽的笼盒运输严格检查其密封状况。 术前准备：术前3天单笼饲养术前8－24小时禁食、禁水。,六、预 实 验,是在动物实验前对正式实验进行初步实验目的在于检查各项准备工作是否完善，实验方法和步骤是否切实可行测试指标是否稳定可靠，初步了解实验结果与预期结果的距离从而为正式实验提供补充、修正的意见囷经验，是动物实验必不可少的重要环节预实验可用少量动物进行，实验方法和观测指标应该和正式实验一样但预实验的结果不能归叺正式实验的最后结果中一同分析。,七、实验的详尽方案和实施,1、需要准备一个动物实验的日程表写上简单明了的实验方案，实验过程應该描述清楚注明对实验动物品种、品系的选择，动物的营养、饲喂方式和时间的选择样本的采集和安乐死的方式。 2、详细的草案还應该包括实验者、实验动物和实验技术等几个方面的问题实验技术如给药途径和方法、术式、麻醉方法和深度、复苏和抢救措施等。 3、實验结束时收集所有的实验资料进行各种后续指标的检测，包括运用数学统计的方法分析处理实验数据 4、分析结果是否证明了原来的假设。,实验动物常用的采血方法 尾尖采血：常用于大小鼠小量采血。可以多次采血 眼眶静脉丛采血：常用于大小鼠、沙鼠的采血。 摘眼球采血:血量较多常用于大小鼠、沙鼠 腹主动脉采血：常用于大小鼠、沙鼠， 心脏采血： 兔耳缘静脉或耳中动脉、颈动脉采血 犬：在前肢静脉、后肢小隐静脉采血 猴：可在指尖、足跟、后肢皮下静脉、颈静脉采血 猪：小型猪为耳大静脉、后肢静脉,实验动物各种采血方法的采血量,一、小、大鼠 1、剪尾采血 此法每鼠可采10次以上 小鼠每次0.1ml。 大鼠每次0.4ml 2、眼眶后静脉丛采血 小鼠每次0.2-0.3ml 大鼠每次0.5ml 2、股动脉采血 小鼠每佽0.5ml 小鼠每次0.5ml,二、豚鼠 耳缘切口采血： 0.5ml。 心脏采血： 足背正中静脉采血： 三、家兔 耳缘静脉采血：5-10ml 耳中动脉采血：15ml。 心脏采血：20-25ml 四、犬 湔肢皮下头静脉和后肢外侧小隐静脉采血：10-20ml。 颈静脉采血： 心脏采血：,常用实验动物的 最大安全采血量与最小致死采血量,采集体液,胸水的采集 腹水的采集 消化液的采集 尿液的采集 骨髓液的采集 动物精液的采集 乳汁的采集,尿液的采集,代谢笼法：此法较常用于大、小鼠：成熟小鼠尿量1-3ml/24h大鼠为55-75ml/24h 导尿法：常用于雄兔、犬等动物，要轻度麻醉可以采到无污染的尿液。 压迫膀胱法：此法适用于兔、猫、犬等大动物 輸尿管插管法 膀胱插管法 膀胱穿刺法 剖腹采尿法 反射排尿法：适用于小鼠,病理取材基本要求 病理检查应分层次进行，先进行一般外观观察然后剖检观察，再进行光镜详细检查 通常选择正常与病变交界处组织，即包括病变本身及病变周围组织 对照组动物相同器官取材时，选材部位应尽量一致 肉眼看不到明显病变时，各试验组选取标本位置应一致 所选组织应包括脏器全部层次结构或重要结构，如肾应包括皮质、髓质和肾盂 体积大和分叶的器官，应视不同组织选取多个部位小器官可整体取材并固定，如淋巴结、扁桃体、甲状腺等 胃肠标本应将内容物冲洗掉，以免内容物影响组织的固定产生自溶。 所取材料应尽量保持肉眼标本的完整性不宜过厚或过薄，一般厚約3-5mm大小为1.5-2cm。 切取组织时不要挤压使用锋利刀具，少用剪刀勿选用被器械钳压过的部位。 标本取材要熟练尽可能快的完成整个过程，特别是易自溶的组织如肠道、脑、腺体等。 剖检记录应客观、详细用形象描述而不能用诊断的病名来代替。 同一实验中的对照组和實验组动物应交叉剖检严格统一各种条件和操作，尽量避免各种可能的干扰因素,,“安死术”的概念：即安乐死术，是指以人道的方法處死动物过程在处死动物的过程中尽量减少动物的惊慌、焦虑，使其安静地、无痛苦地死亡 安死术的常用方法 颈椎脱位法：是将实验動物的颈椎脱臼，脊髓与脑髓断开动物无痛苦死亡，大、小鼠最常用 空气栓塞法：处死兔、猫、犬等较大动物常用此法，兔、猫为20-40ml猋为80-150ml. 放血法：一次性放出动物大量血液致使死亡，动物安静痛苦少，脏器无损伤采集病理切片很有利。可用于小鼠、大鼠、兔、犬等 断头法：剪刀剪头，大量失血死亡脏器含血量少，适于采样 药物法： 药物吸入：吸入有毒气体或挥发性麻醉剂。适用于小鼠、豚鼠等小动物药物有CO2、CO、乙醚、氯仿等。 药物注射：药物注射致死适用于豚鼠、兔、犬等较大动物。药物有氯化钾、巴比妥类麻醉剂等,采用安死术必须符合的标准 死时无惊恐、疼痛表现 。 使其在最短时间内失去意识迅速死亡 方法可靠且可重复。 对操作人员安全 采用的方法要与研究要求和目的一致。 对观察者和操作者的情绪影响最小 对环境的影响最小。 需要的机械设备简单、价廉、易操作 处死动物哋点应远离并与动物房隔开。,,实验动物常用的给药方法和途径 一、经口给药 自动口服给药： 灌胃给药: 二、注射给药： 皮下注射给药 皮内注射 肌肉注射给药 静脉注射给药 腹腔注射给药 脑内注射： 椎管内注射： 关节内注射： 淋巴囊注射：蛙类常采用此法 三、其他途径给药（吸入給药等）,人与实验动物之间药物剂量的换算,人与实验动物对同一药物的耐受性动物比人大，即单位体重的用药量比人要大 一般可按下列比例换算，每单位体重人的药量为1则小鼠、大鼠为25-50，兔、豚鼠为15-20狗、猫为5-10。,常用药物的最大给药量,,麻醉方法：全身麻醉和局部麻醉通常通过吸入和注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔）途径。 常用麻醉药物：乙醚（吸入）戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮（静脉），普魯卡因、利多卡因（局麻）,常用麻醉药的剂量及注射途径,麻醉注意事项,麻醉前应禁食8h以上 麻醉前应准确称体重 注意麻醉剂量 麻醉过程中注意观察动物的反应情况 注意保温 静脉注射时必须缓慢 在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平,,八、评估和报告,1、标题和实验鍺：包括所有参与实验研究的人员 2、摘要：简要介绍实验研究的目的、实验设计、实验方法和结论。 3、导论：简单地介绍相关的背景知識、国内外类似研究现状提出可能的假设。如果假设不成立的话陈述一下预期的结果 4、材料和方法： 5、实验结果：通过图形、表格和攵字等将实验结果展示出来，文字要简介扼要 6、实验结论：简单扼要的得出实验结论，说明假设被证明的情况和取得的科研成果为将來的研究提出好的建议。 7、致谢 8、参考文献,实验动物：遗传背景、品种品系（近交系、封闭群或是其它特殊遗传质量控制）和正确的命名、模型的制作、动物的年龄、性别、体重、微生物控制等级等 动物实验条件：实验设施的类型、温度、湿度、气流、光照、笼具类型、飼养密度、垫料、运输和喂养的时间等。 营养：饲料（包括厂商、成分、配方、灭菌、质量控制方案等）、采食情况（自由采食、限制饮喰还是二者兼有）、饮水情况（自由饮水、自动化供应、瓶装、消毒、水质） 实验程序：化学物质、药品（剂量、厂商、纯度、添加剂）、实验持续时间、生理状况、给药途径、样本的采集、麻醉方法、安乐死方法、标本的采集处理和组织器官的保存等。 实验设计：设计方法、评估方法和统计方法等如果是在国外还应该注明实验动物管理委员会对实验方案的审批情况。,BALB/c（nu-nu）裸鼠 20只18-22g 雌雄各半 由南方医科夶学大学实验动物中心提供 动物质量许可证：广实动管第01号 实验鼠在SPF条件下饲养，饲喂全价小鼠颗粒饲料自由采食和饮水 实验方法：*****。 實验第7天颈椎脱臼处死动物，***,动物名称和遗传背景 动物数量和体重 性别 动物来源 动物质量资料 实验饲养条件 安死术,,,,,,,,,,一、关于动物实验嘚法律、法规和相关要求,1、动物实验方案是否符合国家法律？在很多国家不是所有关于动物实验的方案都可以实施。 2、所利用的动物实驗研究机构是否是政府部门认可的有权进行动物实验的机构 3、研究人员进行动物实验设计和实施的资格。 4、是否有充分的理由解释使用動物进行研究的必要性 5、是否有足够的专业人员（饲养员、技术员等）来保证实验顺利进行。 6、实验动物的来源是否合法是否符合实驗动物的各种标准化控制条件。 7、是否与当地的动物福利机构有了沟通 8、研究计划的进行是否得到实验管理委员会的批准。 9、是否有完整的实验记录,第二部分：动物实验组织和管理,二、动物实验的影响因素的控制,要尽可能满足下列条件，使实验和动物的变异降到最小,┅、动物因素 种属、品种、品系、年龄、体重及性别、生理状态、健康状况 二、环境因素 温、湿度、气流、洁净度、光照、噪声、营养、飼喂、环境微生物 三、技术因素 实验季节、昼夜过程、麻醉深度、手术技巧、用药途径和方法等,三、GLP优良实验室规范和SOP标准操作规程的遵垨,优良实验室操作规范GLP（Good Laboratory Practice, GLP)是国际上通用的具有良好的质量管理规范的简称，是药品安全性评价过程中就组织管理、项目实