克隆一个水稻为研究水稻d基因的功能实验思路和流程

条原则!"#参考$%端的起始密码子&’(的周围序列)(**#(**&+(**&’((规则,-#在起始密码子上游的同阅读框序列中是否存在终止密码子,.#根据已有的其他物种该类为研究水稻d基因的功能$%端序列与预测物種$%端的序列一致性比较/另外也可以根据杂交的结果判断该基因转录本的大小/ )-#对于通过基因组结构预测获得的基因7有时候难以确定其表达的時期7给89:;*8验证带来困难/一般可以根据其功能预测或查找相关的文献资料确定该为研究水稻d基因的功能表达时期7也可以同时测定各个时期和不哃组织的表达谱加以判断/

).#有些查询探针是来自与水稻同源关系较远的物种7给基因结构的人工分析带来困难/这种情况下可以借助于基因结构預测软件7使得结构分析变得简单而且准确/由于水稻为研究水稻d基因的功能基因组序列平均只有?@$A7只要将该基因估计的基因组序列)B "C>?#进行预测7一般都能得到比较准确的结果/

电子克隆技术是随着基因组和D E9计划的发展而产生的7开始主要应用于人类/-C C-年年初我国水稻基因组序列资料的发布使得水稻为研究水稻d基因的功能电子克隆成为可能/相信电子克隆很快就会在水稻的基因克隆中占有非常重要甚至主导性地位/与传统的基因克隆方法相比7电子克隆主要有以下优点!"#速度快/包括同源性比较F序列拼接组装等工作在计算机上完成7只需89:;*8序列验证即可/-#投入低/电子克隆只需能够上网的计算机和;*8仪等仪器即可进行7实验成本较低/.#技术要求低/实验室工作只涉及到80&抽提F反转录F;*8扩增等分子生物学的基本实验7研究人员很嫆易掌握/

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