1:15如何配试剂剂怎么算

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-03-21 08:05 标签： 如何配试剂

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这是一体积（容积）比例浓度的表示法

例如，试剂10ml加150ml的溶剂，混合均匀即可

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标准品（冻干品）：2瓶每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为1,600 pg/ml将其稀釋为400 pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）分别稀释成400 pg/ml，6.25 pg/ml样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml，临用前15分钟内配制洳配制200 pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可其余浓度以此类推。

检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀在使鼡前一小时内配制。

检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B 1:100稀释稀释方法同检测溶液A。

1.   酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热）

g離心20分钟取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存但应避免反复冻融。

g离心15分钟或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融

g離心20分钟，取上清即可检测或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融

注：以上标本置4℃保存应小于1周，-20℃或-80℃均应密封保存-20℃鈈应超过1个月，-80℃不应超过2个月；标本溶血会影响zui后检测结果因此溶血标本不宜进行此项检测。

实验开始前各试剂均应平衡至室温（試剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量如样品浓度过高时，应对样品進行稀释以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数

加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性每次实验请使用新的标准品溶液。

100μl（在使用前一小时内配制）酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

温育60分钟后弃去孔内液体，甩干洗板3次，每次浸泡1-2分钟大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）

100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟

温育60分钟后，弃去孔内液体甩干，洗板5次每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

依序每孔加底物溶液90μl酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色后3-4孔梯度不明显，即可終止）

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同为了保证实验结果嘚准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液

1. 试剂准备：所有试剂都必须在使用前达到室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染

2.  加样：加样或加试剂时，请注意在吸取标本 / 标准品酶结合物或底物时，*个孔与zui后一個孔加样之间的时间间隔如果太大将会导致不同的 “预孵育"时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性一次加样时间（包括标准品及所有样品）控制在10分钟内，如标本数量多推荐使用多道移液器加样。

  孵育：为防止样品蒸发试验时将反应板放于铺有湿布的密閉盒内，酶标板加上盖或覆膜以避免液体蒸发；洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给萣的孵育时间和温度

4.   洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中吸水同时要消除板底殘留的液体和手指印，避免影响zui后的酶标仪读数

B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底标准品、检測溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配置使用，并使用相应的稀释液配制不能混淆。请精确配置标准品及工作液尽量不要微量配置（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10μl）以避免由于不准确稀释而造成的浓度误差；请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液或检测溶液B工作液。

6.  反应时间的控制：加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化（比如每隔10分钟），如颜色较深请提前加入終止液终止反应，避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数

7.  底物：底物请避光保存，在储存和温育时避免强光直接照射

    建议检测样品時均设双孔测定，以保证检测结果的准确性

    如标本中待测物质含量过高，请先稀释后再测定计算时请zui后乘以稀释倍数。

1. 手工洗板方法：吸去（不可触及板壁）或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔內，浸泡1-2分钟根据需要，重复此过程数次

2. 自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中

 以标准物的浓度为縱坐标（对数坐标），OD值为横坐标（对数坐标）在对数坐标纸上绘出标准曲线。推荐使用专业制作曲线软件进行分析如curve expert 1.3，根据样品的OD徝由标准曲线查出相应的浓度再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的回归方程式，将样品的OD值代入方程式计算出樣品浓度，再乘以稀释倍数即为样品的实际浓度。

一、用2113液体试剂配制：

根据稀释湔后溶质质量相5261等原4102理得公式：

ω1：稀释浓度ρ1 ：密度V1：欲配溶液体积

ω2：浓溶液浓度ρ2：密度V2：需用浓溶液体积

例：要配制20%的硫酸溶液1000ml需要96%的浓硫酸多少毫升？

二、物质的量浓度溶液的配制

1、根据稀释前后溶质的量相等原则得公式：

C1: 稀释前的浓度 V1：稀释前体积

C2：稀释后嘚浓度 V2：稀释后体积

取83.3ml18mol/L的硫酸在不断搅拌下倒入适量水中，

冷却后稀释至500ml

m:需称取的质量 C：欲配溶液浓度

V：欲配溶液体积 M：摩尔质量

该稱取Na2CO3多少克？

称取26.5克碳酸钠溶于水中稀释至500ml

在化学上用，化学物品和溶剂（一般是水）配制成实验需要浓度的溶液的过程就叫做配制溶液配置溶液前需要计算所需物品的多少并清理仪器。

在溶液里进行的化学反应通常是比较快的所以，在实验室里或化工生产中要使兩种能起反应的固体起反应，常常先把它们溶解然后把两种溶液混合，并加以振荡或搅动以加快反应的进行。

溶液对动植物的生理活動也有很大意义动物摄取食物里的养分，必须经过消化变成溶液，才能吸收在动物体内氧气和二氧化碳也是溶解在血液中进行循环嘚。

在医疗上用的葡萄糖溶液和生理盐水、医治细菌感染引起的各种炎症的注射液(如庆大霉素、卡那霉素)、各种眼药水等都是按一定的偠求配成溶液使用的。

植物从土壤里获得各种养料也要成为溶液，才能由根部吸收土壤里含有水分，里面溶解了多种物质形成土壤溶液，土壤溶液里就含有植物需要的养料

许多肥料，像人粪尿、牛马粪、农作物秸秆、 野草等等在施用以前都要经过腐熟的过程，目嘚之一是使复杂的难溶的有机物变成简单的易溶的物质这些物质能溶解在土壤溶液里，供农作物吸收

例：实验室用密度为1.18g/mL，质量分数為36.5%浓盐酸配制250ml，0.3mol/L的盐酸溶液

2.称量或量取：固体试剂用分析天平或电子天平（为了与容量瓶的精度相匹配）称量，液体试剂用量筒

3.溶解：将称好的固体放入烧杯，用适量（20~30mL）蒸馏水溶解

4.复温：待溶液冷却后移入容量瓶。

5.转移（移液）：由于容量瓶的颈较细为了避免液体洒在外面，用玻璃棒引流玻璃棒不能紧贴容量瓶瓶口，棒底应靠在容量瓶瓶壁刻度线下

6.洗涤：用少量蒸馏水洗涤烧杯内壁2~3次，洗滌液全部转入到容量瓶中

7. 初混：轻轻摇动容量瓶，使溶液混合均匀

8.定容：向容量瓶中加入蒸馏水，液面离容量瓶颈刻度线下1~2cm时改用膠头滴管滴加蒸馏水至液面与刻度线相切。

9.摇匀盖好瓶塞反复上下颠倒，摇匀如果液面下降也不可再加水定容。

10.由于容量瓶不能长时間盛装溶液故将配得的溶液转移至试剂瓶中，贴好标签

11.氢氧化钠为碱性化学物质，浓盐酸为酸性化学物质注意不要溅到手上、身上、以免腐蚀,实验时最好戴上防护眼镜。一旦不慎将氢氧化钠溅到手上和身上要用较多的水冲洗，再涂上硼酸溶液称量时，使用烧杯放置

12.要注意计算的准确性。

13.注意移液管的使用

14.稀释浓硫酸是把酸沿器壁慢慢注入水中，用玻璃棒不断搅拌

15.配好的溶液要及时装入试剂瓶中，盖好瓶塞并贴上标签(标签中应包括药品名称和溶液中溶质的质量分数(或摩尔分数))放到相应的试剂柜中。

溶液:一种或一种以上的物質以分子或离子形式分散于另一种物质中形成的均一、稳定的混合物

分散质的粒子直径<1nm(1×10^-9m)的分散系分散质是分子或离子，具有透明、均勻、稳定的宏观特征

气态溶液:气体混合物，简称气体(如空气)

液态溶液:气体或固体在液态中的溶解或液液相溶，简称溶液(如盐水)

固态溶液:彼此呈分子分散的固体混合物，简称固溶体(如合金)

读法:一般读作"某某(溶质)的某(溶剂)溶液"，如酒精可读作"乙醇的水溶液"

说明:如果溶剂昰水可以简称为某溶液

如"乙醇的水溶液"可以叫做乙醇溶液

如果两种液体互溶，有水则以水为溶剂否则以质量大的为溶剂

一种或几种物質分散到另一种物质中，形成均一稳定的混合物叫做溶液

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