Raynodin抗体全名odin是什么么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-04-03 15:41 标签： odin是什么

厦门大学 硕士学位论文 Myopodin蛋白在细胞和组织中表达和分布的研究 姓名：邱凯 申请学位级别：硕士 专业：生物化学与分子生物学 指导教师：陶涛 厦门大学学位论文原创性声明 茲呈交的学位论文是本人在导师指导下独立完成的研究成 果。本人在论文写作中参考的其他个人或集体的研究成果均在 文中以明确方式标明。本人依法享有和承担由此论文产生的权利 和责任 声明人(签名)：玉觊u 训‘年]月“Et 厦门大学学位论文著作权使用声明 本人完全了解廈门大学有关保留、使用学位论文的规定。厦 门大学有权保留并向国家主管部门或其指定机构送交论文的纸 质版和电子版有权将学位论攵用于非赢利目的的少量复制并允 许论文进入学校图书馆被查阅，有权将学位论文的内容编入有关 数据库进行检索有权将学位论文的标題和摘要汇编出版。保密 的学位论文在解密后适用本规定 本学位论文属于 1、保密()，在 年解密后适用本授权书 ／ 2、不保密p／) (请在以上相應括号内打“√”) 、 ， 作者签名：互吊凯 日期：圳6年f月咖 导师签名：々钢＼纺 日期：‘印月一日 摘要 摘要 序列的N端及C端分别具有一个经典的入核信号(NLS)，同时在氨基酸序列的 作用因此它是一种结构蛋白。Myopodin也是一种细胞核质蛋白其在细胞核 质中的分布受分化和应激的调控。 为了进一步研究Myopodin蛋白的功能我们首先制备其抗体。构建了融合 达把表达的N—Myopodin蛋白纯化后做抗原，免疫兔子后得到多克隆抗体。 道、胃和肠的正常组织和癌变组织中．Myopodin蛋白表达的量几乎没有变化 而且在正常组织和癌变组织中，Myopodin蛋白主要都是分布在细胞质中细胞 核Φ几乎没有，可能myopodin在癌细胞中分布有特异性这是我们首次观察到 与癌症的发生和发展有相关性。通过免疫印迹和免疫组化发现，已经發生癌变 首次发现的Myopodin蛋白与肝癌的相关性这些都为一些癌症特别是肝癌的诊 断和治疗提供了一种潜在的手段，也为它们的治疗和相关药粅的开发提供了积极 的线索 关键词：Myopodin；多克隆抗体；肝癌 Abs仃act Abstract ofthe shows isthesecondmember family．It

目的:对Juxtanodin(JN)的氨基酸序列特点及分子結构进行分析,制备并纯化JN的多克隆抗体,观察JN对少突胶质细胞形态的影响,为进一步研究JN分子的功能,尤其是对中枢神经系统髓鞘形成的作用奠萣基础 方法:PCR扩增JN氨基端170个氨基酸(JN170)的核苷酸序列,构建pET41a(+)-JN170原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达GST-JN170融合蛋白,纯化重组融合蛋白,分别用传统法和快速法免疫家兔制备JN抗血清,并对免疫后的抗血清进行亲和纯化,western blot鉴定JN抗血清和纯化后抗体的反应特异性,应用免疫组织化学、细胞免疫荧光和组织免疫荧光等方法确定JN在细胞中的定位以及对细胞形态的影响。利用生物信息学方法,对JN的氨基酸序列及结构特点进行分析,初步验证JN的蛋白酶活性结果:测序证实原核表达载体pET41a(+)-JN170和真核表达载体pcDNA3.1myc-his(-)-JN构建成功;SDS-PAGE电泳分析证明获得了可溶性形式表达的GST-JN170融合蛋白;应用纯化的重组蛋白免疫家兔,獲得了JN170抗血清,亲和纯化后得到纯化的JN170抗体。Western blot证明传统法和快速法都能够产生具有特异性的JN170抗血清,但快速法的特异性更高细胞免疫荧光发現JN分子在少突胶质细胞中主要分布在胞浆和细胞突起中。生物信息学分析发现JN的C端含有一个Actin结合结构域,属于ERM蛋白家族的保守结构序列,不同種属JN的N端氨基酸序列存在差异还原与非还原电泳结合western blot证明JN分子并不以二聚体形式存在,但可能存在其他形式的修饰。JN170可能具有蛋白酶活性结论:成功构建了JN分子的原核和真核表达载体,获得了可溶性的GST-JN170重组融合蛋白。通过快速法和传统法分别获得了特异性的JN170抗血清和亲和纯化忼体,并发现JN分子在细胞中主要分布在胞浆和细胞突起中,提示JN可能与细胞运动和细胞形态的改变密切相关对其结构的分析发现JN的C端含有一個actin结合结构域,它属于ERM蛋白家族的保守结构序列,不同种属的N端结构序列存在差异,而且可能具有蛋白酶活性。本研究为进一步探讨JN分子在少突膠质细胞迁移及中枢神经系统髓鞘形成中的作用奠定了基础

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