基因文库与基因组文库扩增的利弊是什么

方法:限制性酶切法、机械剪切法

过程:1.载体DNA片段的制备。

2.供体DNA片段的制备

细胞中总DNA分离,纯化机械剪切法分离特定大小DNA片段限制性酶切,分离特定大小DNA片段

3.供體与载体DNA连接。

4.重组DNA分子的转移和基因组文库的扩增

利用转化或感染方法将连接DNA分子导入宿主细胞,让其自主复制重组DNA分子被扩增。

5. 基因组文库质量的评价

文库规模:随机挑取一些转化子或重组子,提取质粒DNA电泳测定插入片段大小,然后根据上述公式计算文库大小

偅组频率:频率越高,质量越高可大大减轻后续筛选基因工作量。

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