可变区的重链与轻链重连的比例怎么计算


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: 目的 探讨抗红细胞H抗原单链抗體(scFv)中可变区重链(VH)和轻链重连(VL)顺序对该单链抗体活性的影响.方法 采用PCR方法

《》2001年02期 张徽,张波,韩继生,侯琳 下載(29)被引(0)

目的:为了制备抗端粒酶蛋白hTERT可变区基因方法:采用Ni-NTA树脂层析法从PBKTRT转染的 E.coli JM109阳性菌中分离纯化端粒酶蛋白hTERT,并免疫小鼠從免疫的小鼠脾脏中提取淋巴细胞中总RNA,逆转录成cDNA以逆转录合成的cDNA第一条链为模板,分别用VH和VL引物通过PCR进行扩增。结果:PCR扩增反应产苼350bp大小的抗hTERT重链和轻链重连可变区基因VH和VL基因片段的获得为进一步制备抗hTERT单功能区抗体(dABs)和单链抗体ScFv奠定了实验基础。结论:提示该方法具有稳定性好易于重复,扩增后VH和VL量较高的优点

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