卵磷脂的提取中最关键的影响因素

卵磷脂的提取及鉴定_生物化学实驗指导

实验二 卵磷脂的提取及鉴定

1.加深了解磷脂类物质的结构和性质

2.掌握卵磷脂的提取鉴定的原理和方法。

磷脂是生物体组织细胞的重要成分主要存在于大豆等植物组织以及动物的肝、脑、脾、心等组织中,尤其在蛋黄中含量较多(10%左右)卵磷脂和脑磷脂均溶于乙醚而不溶于丙酮,利用此性质可将其与中性脂肪分离开此外,卵磷脂能溶于乙醇而脑磷脂不溶利用此性质又可将卵磷脂和脑磷脂分离。

新提取的卵磷脂为白色当与空气接触后,其所含不饱和脂肪酸会被氧化而使卵磷脂呈黄褐色卵磷脂被碱水解后可分解为脂肪酸盐、咁油、胆碱和磷酸盐。甘油与硫酸氢钾共热可生成具有特殊臭味的丙烯醛;磷酸盐在酸性条件下与钼酸铵作用,生成黄色的磷钼酸沉淀;胆堿在碱的进一步作用下生成无色且具有氨和鱼腥气味的三甲胺这样通过对分解产物的检验可以对卵磷脂进行鉴定。

3.10%氢氧化钠溶液

4.鉬酸铵试剂:将6 g钼酸铵溶于15 ml蒸馏水中,加入5 ml浓氨水另外将24 ml浓硝酸溶于46 ml的蒸馏水中,两者混合静置一天后再用()

7.3%溴的四氯化碳溶液。

1.卵磷脂的提取:称取约10 g蛋黄于小烧杯中加入温热的95%乙醇30 ml,边加边搅拌均匀冷却后过滤。如滤液仍然混浊可重新过滤直至完全透明。将滤液置于蒸发皿内水浴锅中蒸干,所得干燥后的物质即为卵磷脂粗提取物

2.卵磷脂的溶解性:取干燥试管,加入少许卵磷脂再加入5 ml乙醚,用玻棒搅动使卵磷脂溶解逐滴加入丙酮3~5 ml,观察实验现象

(1)三甲胺的检验:取干燥试管一支,加入少量提取的卵磷脂以及2~5 ml氢氧化钠溶液放入水浴中加热15分钟,在管口放一片红色石蕊试纸观察颜色有无变化,并嗅其气味将加热过的溶液过滤,滤液供下面检验

(2)不饱囷性检验:取干净试管一支,加入10滴上述滤液再加入1~2滴3%溴的四氯化碳溶液,振摇试管观察有何现象产生。

(3)磷酸的检验:取干净试管一支加入10滴上述滤液和5~10滴95%乙醇溶液,然后再加入5~10滴钼酸铵试剂观察现象,最后将试管放入热水浴中加热5~10分钟观察有何变化。

(4)甘油嘚检验:取干净试管一支加入少许卵磷脂和0.2 g硫酸氢钾,用试管夹夹住并先在小火上略微加热使卵磷脂和硫酸氢钾混熔,然后再集中加熱待有水蒸气放出时,嗅有何气味产生

1.写出卵磷脂的化学结构,为什么卵磷脂是一种良好的乳化剂?

2.怎样分离卵磷脂和中性脂肪?怎樣分离卵磷脂和脑磷脂?

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