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来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2021-06-22 19:50 标签：

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口eaks：l=Trypsin2=Bacterl01ysln，3=BSA4=Oviparous 4小结 评价了一种国产噺型PS．DVB摹质的MKFRP—HPLC乜谱拄H々各项乜谱№能。结粜发明俊 色谱柱恩有高度化学机械稳定H：，并扫四种常见蛋白的分离|]辰现d1较-岛的桂效和优樾的分离 一件能。以此为基础柏·蛋白、多肽等多种生物分予的HPLCSj"离中聚合物趔色谱填利将会发搦：越 米越重鉴的作用。同时为聚合物碰高效液相色谱填料仵国山的发展提供了重篮的理论和实践 万咖肋参考。 基于z．h8册嵌合操纵子的构建及其在大肠杆菌中表达的a哆 关梅1，賈坤志’李芳5，贳根和’喻吾根，华子春(南京大学生命科学院医药生物技术国謇 重点实验室，南i 210093) 摘要：通过PCR等重组DNA技术构建了含rhaS8屆动子表达调控元件，RhaR基因、报告基固 gsf(谷胱甘肤一S一转移酶j的两个嵌合操纵于．井插人走腑杆菌表述栽体酣L肼中构成pALEX—PRl 和pALEX—PR2其中pALEXPR2的RhaR基固仩游为原有的sD序列，而pALEXFRl的RhaR基因 上游则插入了增强的sD序列把这两个重组表达质粒分别转入走肠杆菌BL21(DE3)中，报告基 固gsf能够在L一鼠李糖诱导下表達其表达量是非谤导争件下的4～5倍、且pALEXPRl的表 14倍。以上结果表明gsr的表达既受L一鼠李糖诱导，同时又圣Rbar 达量是pALEX—PR2的3 L 的正调控SDSPAGE结果显示，GST占犬肠杆菌培养物总可溶蛋白的541％(w／w)平均1 培养物可获得30 酶活性分析表明，本丈中所构建的嵌合操纵子表达的GST mg纯化的GST 保持了正确的构型且具有很高的活性 的蛋n负责鼠李糖的运输，rhaBAD编码i种与鼠李糌代谢有关的蛋白强近研究发现．大腑牛1 距rhaSR转录起始点一32到甚2的序列结台，来憫控忆tSR的转录。n没仃L-鼠李糖的『肯扰F． 的转录0目控足种』F调控即新形成的KhaR能促进rhaSR的进一步转录．产生更多的RhaR和 P&aS。神丈肠杆菌中当L一鼠李帮存d时，加船n0嵌达世J叮增加440倍斟P。Rbs与环腺苷 酸受体蚩闩(cAMP receptor 启动予、l游的远侧调控序列r来激活HlaBAD的转录，以产生代谢L-鼠李糖所需的酶：哃叫 它i’】与DNA的结台还抑制HmSR的转录(剖1) 盐盟 剖1HlaSR一小aBAD操纵予之问的凋挖区(该冈BI自Egan∽ 乖文利?；f』大肠¨苗J*d脚操纵子竹-L一鼠李船诱导肝，其宵的受剐估R【F*日控表达的特忡 纵丁，阔叫去|靖：了RhaS埘HaSR操纵予的鱼响挣，以㈨使报告堆相gst神犬肠杆曲山宴舰J、r捌 拄的高教发达一巳获得i述嘚嵌合操纵了，就州以迎过把坚发达的lq的照旧取代报告牡㈨ 使该日的基凶竹：大肠轧卣山『可样实现l-rfJ≈择的高效表达。 通过本项目的实施存望获得其有自主知识产权的以rhaSR操纵予为基础的可诱导的重组高 教发达系统。该表达体系nT用于生产各种虽白包括诲悱蛋白。同叫该表达体系还一叮以应刷十 与E．coli有相同基㈦农达特盹的蓝藻和十＆物叶绿体中以获得生产药物、高价值农产品等的新 型生物反应器。 1材料與方法 1 1实验材料 1 1

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