表面抗体低于多少要加强免疫浓度有人推荐下吗？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2023-10-12 20:16 标签： 表面抗体低于多少要加强免疫
小Q：罗工您好，我有个流式问题想请教一下 。情况是这样的：我要做Treg的流式分型检测，指标有CD4,CD25,CD127,其中CD25我用的是FITC。上机结果发现，CD25分群很不好，我同时做了同型对照和单阳对照。您能帮我判断下原因吗？因为CD25比较重要，它的染色结果会直接导致Treg的分群结果。罗工：Treg中使用的指标CD25，它是一个表达比较低的指标，在配色的时候通常需要遵循强弱搭配是原则，即：弱表达的抗原要选择亮的荧光素去标记。如下是一张抗原密度表达高低的参考图，仅供参考。（样本来源：Human PBMC）。从下图可以看到CD25是表达相对较低的抗原。
小Q：谢谢罗工，我大概了解问题出现在哪里了。我们这里的仪器是Calibur，是个两激光四通道的仪器，您建议搭配哪个荧光素呢？我这个panel中，PE和APC已经占用了。罗工：荧光素的亮弱强度是根据染色指数（Stain Index,SI）来判断的，SI是指特定流式细胞仪器上荧光素相对强度，SI越大，荧光素越亮。如下这个图片就是根据SI将各种荧光素强弱进行分类，可以参考。因为Calibur只有四个通道，而PE好APC已经占用，所以我推荐您使用BB515。BB515和FITC是在同一个通道，但是BB515是非常亮的荧光素，所以可以替代FITC染色CD25。
如下CD25-FITC和CD25-BB515的染色结果案例：用BB515有明显的分群效果的。
小Q：谢谢罗工，我再对方案进行重新调整。罗工，我还有另外一个问题。平时抗体用量都是按照之前师兄师姐的经验，没有一个很标准的用量，一般流式抗体的用量怎么推荐呢？您一般是如何推荐的？罗工：抗体用量最准确的方法就是做一个抗体滴定。这个方法用来确定最佳的抗体用量和抗体浓度，以实现阳性信号尽可能强，而阴性信号尽可能低，得到一个最优的S/N（信噪比值），S/N最佳的浓度就是你要找的最好的抗体浓度。小Q：罗工，这个抗体滴定怎么做呢？罗工：抗体滴定的操作很简单，流程可分为四步：1、确定起始浓度，如无法确定，通用起点10ug/mL 抗体；2、倍比稀释，连续稀释6-8个梯度；3、计算S/N，阳性群体MFI/阴性群体MFI；4、绘制曲线，S/N最高值对应的抗体浓度或者稀释倍数即为最佳抗体浓度。比如看如下的图片，是CD4-FITC的抗体滴定结果，通过计算，可以看到，当抗体浓度在0.68ug/mL的时候，S/N是在最高点，所以最佳的抗体使用浓度即是0.68ug/mL。
所以你GET到了吗？小Q：太谢谢罗工，今天又学到很多。马上要做起来。罗工，最后一个问题：在做抗体滴定的时候有有什么注意事项吗？罗工：在做抗体滴定的时候需要注意以下几点：1、抗体滴定的样本浓度与实际试验样本浓度保持一致（推荐106个细胞/mL）；2、抗体滴定背景干净，保证检测群体中有不表达该指标的阴性细胞；3、抗体浓度很关键，染色体积增大，抗体量也应该增大；4、滴定得到的浓度跟细胞数相关，细胞增加会影响染色效果，但是该数量范围很大，10-50倍波动均可行；5、做抗体滴定时，在文章中写抗体浓度，不要写稀释比哈。小Q：哇哦，了解，谢谢罗工！各位小伙伴，除了今天推荐的BB515外，BD公司很多新荧光素跟之前的传统荧光相比确实好用，比如还有BB700。上海优宁维生物科技股份有限公司试剂
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回答者：网友
　　一抗的用量和样品中的目标分子含量相关，如果含量较高，就不需要用太多一抗，以免浪费和条带太亮不易分析。推荐采用厂家的抗体浓度（义翘神州会提供抗体用量、少兰怀正该进孩伟天然细胞株检测结果），如果样品与厂家的不是一种细胞，可以尝试上下摸索一两个浓度梯度；　　二抗的用量，红和你所在实验室常规的用量就可以，如果出现效果不理想的状态，二抗的作用可以通过阳性对照和阴性对照、以及其他人的使用效果看出来有没有问题。
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　　原标题：家里要购备蒙脱石散和制氧机？（主题）广东省卫健委组织专家答疑（副题）　　文/广州日报全媒体记者何雪华
通讯员粤卫信　　1.蒙脱石散可备用，但非必需品　　2023年初，蒙脱石散成为继退热药和感冒药之后的另一个被抢购一空的药品。有传言美国目前流行的奥密克戎新变种XBB.1.5主要攻击消化道和心血管系统，可导致感染者严重腹泻，需准备蒙脱石散等腹泻治疗药物。目前该传言已得到了辟谣，那么家庭是否需要备货蒙脱石散呢？　　蒙脱石散是什么药？　　蒙脱石散是一种吸附剂，口服后可覆盖保护消化道黏膜，对胃肠道的病毒、细菌以及产生的毒素有固定、抑制作用，可减少腹泻次数和量。但是，急性腹泻的治疗以预防和纠正脱水、电解质紊乱为主，蒙脱石散并非急性腹泻的一线治疗药物。急性腹泻患者可以通过摄入糖盐水、运动饮料或口服补液盐等来保证液体和电解质摄入。　　XBB新冠病毒感染需使用蒙脱石散吗？　　既往有报道新冠病毒感染者中约10%会出现腹泻，但XBB毒株目前并无科学研究证据显示更容易侵犯消化道和心血管系统，一般仍以呼吸道症状为主。因此，如果没有腹泻症状是不需要使用蒙脱石散的。腹泻是自限性疾病，病程短，所以建议家庭可以适当准备1至2盒即可，但大量囤药就大可不必了。如果暂时买不到蒙脱石散也不用急，这个药也不是家庭腹泻必需品，成年人也可选用洛哌丁胺止泻，而儿童可选用益生菌止泻。　　蒙脱石散服药有讲究　　适量用药：蒙脱石散过量服用可能会导致便秘或胃（肠）结石。　　合并用药需分开：由于蒙脱石散的吸附作用，与其他药物合用时需间隔至少1-2小时，减少对其他药物吸收的影响。　　2.免疫球蛋白不能预防新冠病毒感染　　免疫球蛋白来源于健康献血员的血浆，受制于血浆原料的稀缺性等因素，一旦出现断货，短期内难以补足供应。　　在《新型冠状病毒感染诊疗方案（试行第十版）》中推荐治疗新冠病毒感染的是“COVID-19免疫球蛋白”，这是从新冠病毒感染康复者身上采集的含有新冠病毒特异性抗体的血浆，而非提取自健康人的“静注人免疫球蛋白”。　　人免疫球蛋白是否适用于COVID-19患者呢？　　人免疫球蛋白是一种血液制品，含有广谱抗病原体的抗体，具有中和毒素、增强机体抗感染能力和免疫调节的功能。疫情初期，专家曾尝试使用该药治疗新冠病毒感染患者，并开展了临床试验研究。可惜的是，并没有足够高质量的循证医学证据支持。　　人免疫球蛋白也有副作用　　作为一种血液制品，静注人免疫球蛋白在使用时有严格的限制与规定。输注时也可能出现各种副作用，如过敏、头痛、发热、乏力、恶心等。　　3.辅酶Q10不能预防心肌炎　　新冠病毒会感染并损害心肌细胞，引发心肌炎。虽然发病率低，但因为心肌炎在年轻人中发病率更高，且可致命，因此又有人抢购辅酶Q10预防心肌炎。　　辅酶Q10能够预防心脏疾病？　　辅酶Q10是一种天然存在于人体的类维生素物质，在心脏、肝脏和肾脏中的含量高，主要参与细胞能量代谢过程，同时具有抗氧化作用。目前该药在国内适应证中包括病毒性心肌炎、慢性心衰的辅助治疗，《成人暴发性心肌炎诊断和治疗指南2018》也将辅酶Q10定义为辅助用药的治疗方法。目前并无明确证据支持辅酶Q10可以预防心脏疾病。病毒性心肌炎的预防需要注意休息、避免剧烈运动，老年人低盐低脂饮食，如果合并有基础疾病也要积极治疗控制。　　辅酶Q10如何补充最好？　　辅酶Q10可以在人体中合成，也可从食物中获取。正常均衡饮食的话，通常不会缺辅酶Q10。如果因为心血管疾病需要补充辅酶Q10，可以通过食补的方式。食物中肉类和全谷物中含量高，比如动物内脏、猪肉、鸡肉、鱼肉、大豆、坚果、植物油等。如果饮食无法保证，也可服用辅酶Q10药物，但要注意与抗凝药华法林的相互作用，用药前可以咨询药师或医师。　　4.制氧机不是家庭必需品　　随着近期老年人住院率增加，“沉默性低氧”引发关注，制氧机的热度也跟着攀升。常见的家用制氧机的工作原理就是分子筛过滤掉空气中的氮气，提取出高浓度氧气供病人使用。　　哪些人群需要吸氧呢？　　从医学角度来说，重度的慢阻肺患者、已出现低氧血症的心血管疾病患者、出现低氧血症的其他疾病如晚期癌症患者，以及氧气含量低的高原地区，需要使用制氧机。　　普通家庭是否需要准备制氧机？　　新冠病毒感染者是否需要吸氧需依据病情而定，对于轻症患者不需要吸氧，中型患者按需吸氧，重型和危重型患者需要吸氧。新冠病毒感染者的氧疗属于辅助治疗，需要在联合治疗的基础上使用，而且应该在医生等专业人士的指导下进行，因为浓度过高或时间过长都会导致氧中毒。因此，制氧机主要供慢性呼吸系统疾病等患者使用，一般健康家庭无需在家中配置制氧机。新冠病毒感染患者如果出现明显的胸闷、气喘、呼吸困难或其他低氧血症症状，指夹式血氧仪测量到血氧饱和度低于93%，建议及时去医院就诊，必要时可拨打120。更多精彩资讯请在应用市场下载“央广网”客户端。欢迎提供新闻线索，24小时报料热线400-800-0088；消费者也可通过央广网“啄木鸟消费者投诉平台”线上投诉。版权声明：本文章版权归属央广网所有，未经授权不得转载。转载请联系：cnrbanquan@cnr.cn，不尊重原创的行为我们将追究责任。

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