1、化学原料药质量研究及质量具体标准常见问题讨论特性研究特性研究-理化、稳定性理化、稳定性对照品研究对照品研究- -标化、校正因子标化、校正因子方法研究方法研究- -建立、验证建立、验证杂质研究杂质研究- -工艺、残留溶剂工艺、残留溶剂1432200820072006 200520042003 200220012000 常见研究方法误区以及常见研究方法误区以及供参考的经验和体会供参考的经验和体会 新版药典动态对化学原新版药典动态对化学原料药质量研究的影响料药质量研究的影响 原始记录与资料表达常见原始记录与资料表达常见问题及改进建议问题及改进建议 主要讨论内容主要讨论内容 新药：新药： 尽可能研究详2、细、全面、规范尽可能研究详细、全面、规范 仿制药：仿制药： 重点考察与文献值的一致性重点考察与文献值的一致性 中国药品检验标准操作规范中国药品检验标准操作规范 注意测定方法的准确性与规范性注意测定方法的准确性与规范性! !物理常数研究物理常数研究理化常数研究理化常数研究 实验样品的纯度实验样品的纯度- - 精制品、干燥品精制品、干燥品 实验的条件实验的条件- - 温湿度记录！温湿度记录！ （环境、仪器）（环境、仪器） 温度校正温度校正 仪器台间差仪器台间差/ /编号编号物理常数研究物理常数研究理化常数研究理化常数研究碘值、皂化值、酸值碘值、皂化值、酸值 引湿性引湿性比旋度比旋度熔点熔点相对密度3、相对密度溶解度溶解度吸收系数吸收系数黏度黏度凝点凝点l新药：考察物质的溶解性能新药：考察物质的溶解性能l 为药物制剂的剂型选择为药物制剂的剂型选择l 为提取、精制工艺的溶剂选择为提取、精制工艺的溶剂选择l 为检验时供试品溶液的制备溶剂为检验时供试品溶液的制备溶剂选择选择l 提供参考信息提供参考信息l仿制药：考核仿制药品质一致性提供佐仿制药：考核仿制药品质一致性提供佐证证l （晶型、微粉粒径、成盐程度、（晶型、微粉粒径、成盐程度、纯度）纯度）l问题一：问题一：溶剂选择种类不当或不足溶剂选择种类不当或不足l 毒性毒性（三氯甲烷三氯甲烷）；后续试验；后续试验缺参考缺参考l问题二：问题二：提供数据不足4、，定位理由不提供数据不足，定位理由不充分充分l 两端两端（极易溶解、不溶极易溶解、不溶）才可才可一点确定一点确定 l 不给折算值不给折算值l问题三：问题三：试验样品质量试验样品质量l 精品精品- -与文献核对与文献核对l 3 3批批- -确定自己质量标准确定自己质量标准l按溶解度大小依次排列按溶解度大小依次排列l极易溶解极易溶解 不溶或几乎不溶不溶或几乎不溶l在同一溶解档中按溶剂极性大在同一溶解档中按溶剂极性大小排列小排列l水、甲醇、乙醇；乙酸乙酯、二氯甲烷、乙水、甲醇、乙醇；乙酸乙酯、二氯甲烷、乙醚等；醚等；l热水或热乙醇放在同一档之首（不用其他热热水或热乙醇放在同一档之首（不用其他热溶剂）5、溶剂）酸和碱酸和碱（注明浓度）（注明浓度）中的溶解度放最中的溶解度放最后后 物理意义为当溶液浓度为物理意义为当溶液浓度为1%1%（g/mlg/ml）, ,液层厚度为液层厚度为1cm1cm时的吸光度数值。时的吸光度数值。 研究意义及应用趋势的改变研究意义及应用趋势的改变 作为物理常数：新药考察与仿制药核对作为物理常数：新药考察与仿制药核对 溶出度或含量均匀度用其计算一定研究并放入溶出度或含量均匀度用其计算一定研究并放入标准标准 不用其计算但有紫外吸收也应研究但不用放入不用其计算但有紫外吸收也应研究但不用放入标准标准 拓展鉴别用途拓展鉴别用途 溶剂选择考虑制剂测定用溶剂溶剂选择考虑制剂测定用溶剂 6、一般大于一般大于100100才用于制剂测定，放入标准才用于制剂测定，放入标准 测定溶液浓度既要吸光值在测定溶液浓度既要吸光值在0707之间，也要兼之间，也要兼顾制剂测定溶液浓度顾制剂测定溶液浓度 限度范围一般为限度范围一般为3%3% 药典收载三种方法药典收载三种方法 第一法：测定易粉碎的固体药品第一法：测定易粉碎的固体药品 第二法：测定不易粉碎的固体药品第二法：测定不易粉碎的固体药品（如脂肪、石蜡（如脂肪、石蜡等）等） 第三法：测定凡士林或其他类似物质第三法：测定凡士林或其他类似物质 原始记录问题原始记录问题- -方法不对、信息不全方法不对、信息不全 干燥；校正；升温速率；传温液；初熔；全熔；7、干燥；校正；升温速率；传温液；初熔；全熔； 现象；次数（现象；次数（3 3次）次） 品种在标准中收载熔点需注意：品种在标准中收载熔点需注意： 第一：由于采用传温液，故收载的熔点宜在第一：由于采用传温液，故收载的熔点宜在200200以以 下。下。 熔点在熔点在200200以上的视需要而订。以上的视需要而订。 第二：应是在熔点以下遇热时晶型不转化，初第二：应是在熔点以下遇热时晶型不转化，初熔点和熔点和 终熔点易于判断的品种；对熔融分解且终熔点易于判断的品种；对熔融分解且不易明不易明 确判断的品种也可不订。对于熔融时同确判断的品种也可不订。对于熔融时同时分解时分解 或另有要求的品种，均应在标准中标明8、。或另有要求的品种，均应在标准中标明。 第三：限度范围一般为第三：限度范围一般为2 244，包括初熔和全，包括初熔和全熔温度熔温度 个别可放宽至个别可放宽至66； 另加另加“熔距熔距”限制限制的除外的除外l重金属检查法：重金属检查法：lpHpH测定法：测定法：l不溶性微粒检查法：不溶性微粒检查法：l可见异物检查法：可见异物检查法：l渗透压摩尔浓度：渗透压摩尔浓度： 20102010年版年版20052005年版年版（1 1）供试品）供试品 符合药品质量标准符合药品质量标准 全检之后全检之后（2 2）称量瓶）称量瓶 试验前一天置试验前一天置25251 1 80 802%2%环境中预引湿环境中预引湿9、（3 3）瓶盖同条件放置）瓶盖同条件放置（1 1）供试品）供试品 干燥失重或水分符干燥失重或水分符 合限度要求合限度要求（2 2）称量瓶）称量瓶 没要求预引湿没要求预引湿（3 3）瓶盖）瓶盖 没提及没提及 实验日期（全检合格之后）实验日期（全检合格之后） 实验时间（实验时间（2424小时）小时） 实验温度、湿度实验温度、湿度 称量瓶提前放置记录称量瓶提前放置记录 在相对干燥或较低相对湿度环境中，一些药物或辅料在相对干燥或较低相对湿度环境中，一些药物或辅料不吸湿或很少吸湿。不吸湿或很少吸湿。 随着环境相对湿度的增大，吸湿量缓慢增加。当相对随着环境相对湿度的增大，吸湿量缓慢增加。当相对湿度到达某一10、定值时，药物的吸湿量急剧上升。湿度到达某一定值时，药物的吸湿量急剧上升。 吸湿量急剧上升时的相对湿度吸湿量急剧上升时的相对湿度(RH)(RH)即为该药物的临界即为该药物的临界相对湿度。相对湿度。 药物的临界相对湿度越大，则表明该药物不容易吸湿，药物的临界相对湿度越大，则表明该药物不容易吸湿，相反则容易吸湿。药物生产或贮存在该药物的临界相相反则容易吸湿。药物生产或贮存在该药物的临界相对湿度以下环境，能够延长药物吸湿平衡到达的时间。对湿度以下环境，能够延长药物吸湿平衡到达的时间。 l无机盐无机盐 温度温度（） 相对湿相对湿度度（RH% RH% ）l磷酸氢二钠磷酸氢二钠 NaNa2 2HPOHPO411、 412H12H2 2O 20 O 20 9898l硫硫 酸酸 锌锌 ZnSOZnSO4 47H7H2 2O 20 O 20 9090l硫硫 酸酸 氢钾氢钾 KHSOKHSO4 4 20 20 8686l硫硫 酸酸 铵铵 (NH(NH4 4) )2 2SOSO4 4 20 20 8181l氯氯 化化 铵铵 NHNH4 4Cl Cl 2 20 025 25 7979l醋醋 酸酸 钠钠 NaCNaC2 2H2O2H2O23H3H2 2O 20 O 20 7676l溴溴 化化 钠钠 NaBrNaBr2H2H2 2O 20 O 20 5858l重重 铬铬 酸钠酸钠 NaNa2 2CrCr2 2O O712、 72H2H2 2O 20 O 20 5252l氯氯 化化 钙钙 CaClCaCl2 26H6H2 2O 24.5 O 24.5 3131l醋醋 酸酸 钾钾 KCKC2 2H H3 3O O2 2 20 20 2020l氯氯 化化 锂锂 LiClLiClH2O 20 H2O 20 1515 Page 18干燥失重干燥失重 重金属重金属溶液的澄清度溶液的澄清度硫酸盐硫酸盐酸碱度酸碱度氯化物氯化物水分水分铵盐铵盐结晶性结晶性pHpH测定法：测定法： 氢氧化钙标准缓冲液氢氧化钙标准缓冲液 是要用是要用2525时取饱和溶液的上清液，所时取饱和溶液的上清液，所以临用时需核对温度才能取用上清液！以临用时需13、核对温度才能取用上清液！纯化水：取本品纯化水：取本品100ml100ml，加饱和氯化钾溶液，加饱和氯化钾溶液 极弱电解质品种的极弱电解质品种的pHpH值测定值测定可采用相同的测定方法可采用相同的测定方法l重金属检查法：重金属检查法： 甲管（标准）乙管（供试品）甲管（标准）乙管（供试品） + +丙管（标准丙管（标准+ +供试品）供试品） 如丙管颜色浅于甲管则将一法改为二法如丙管颜色浅于甲管则将一法改为二法进行检查进行检查 勘误！第二法规定乙管（标准）中显勘误！第二法规定乙管（标准）中显出的颜色与甲管（供试品）比较，不得出的颜色与甲管（供试品）比较，不得更深。更深。 l 氯化物氯化物 常用常用 硫14、酸盐硫酸盐 检查法检查法 铵盐铵盐 铁盐铁盐 l注意标准液的取用量！注意标准液的取用量！l应保证灵敏检测的需要！应保证灵敏检测的需要！l建议：必要时改用仪器法判断建议：必要时改用仪器法判断l 2015 2015版药典科研课题版药典科研课题 u纯化水、注射用水的修订纯化水、注射用水的修订增订：增订： 电导率电导率 氯化物氯化物硫酸盐硫酸盐钙盐钙盐二氧化碳二氧化碳 总有机碳测定总有机碳测定 易氧化物易氧化物药典中新检验技术的应用药典中新检验技术的应用第一次飞跃第一次飞跃第二次飞跃第二次飞跃纯度控制纯度控制杂质控制杂质控制杂质谱杂质谱控制控制有关物质的研究有关物质的研究 杂质质控理念的变迁杂质质控理15、念的变迁lImpurity Profile （杂质谱）（杂质谱）: A description of the identified and unidentified impurities present in a drug substance. l对存在于药品中所有已知杂质和未对存在于药品中所有已知杂质和未知杂质的总的描述。知杂质的总的描述。 已鉴定杂质已鉴定杂质Identified Impurity特定杂质特定杂质Specified Impurity潜在杂质潜在杂质PotentialImpurity杂质谱杂质谱Impurity Profile已确证了已确证了结构特征结构特征的杂质的杂质在质量16、标准中在质量标准中规定检查并有规定检查并有自己限度标准自己限度标准的杂质。已鉴的杂质。已鉴定或未鉴定定或未鉴定理论推测在理论推测在生产或贮藏生产或贮藏过程中可能过程中可能产生的杂质产生的杂质实际产品中实际产品中不一定存在不一定存在存在于药存在于药品中的所品中的所有杂质组有杂质组成或模式成或模式选择选择最优最优多种多种互补互补新杂质新杂质研究研究比较杂质的数与量，一致或基本一致，比较杂质的数与量，一致或基本一致，物质基础相同决定可否桥接已上市药品物质基础相同决定可否桥接已上市药品的安全有效性结果的安全有效性结果杂质谱杂质谱比较比较杂质谱的比较杂质谱的比较原研原研标准标准EP7.0EP7.0USP17、34USP34JP15JP15国内国内标准标准拟定拟定标准标准方法 梯度洗脱色谱条件210nm254nm梯度线性洗脱色谱条件210nm254nm等度洗脱HPLC色谱条件210nm检测等度洗脱HPLC色谱条件210nm检测系统适用性限度分析方法的有效性（氨苄西林钠分析方法的有效性（氨苄西林钠/舒巴坦钠）舒巴坦钠）原方法原方法在对各国药典方法比较的基础上确定分析方法l不同色谱系统（流动相、色谱柱、不同色谱系统（流动相、色谱柱、波长）波长）l不同检测器（不同检测器（uv、DAD）l不同原理的方法不同原理的方法l-分离或检测分离或检测 l平行列表、逐峰比较平行列表、逐峰比较l新杂质个数新杂质个数l单一18、新杂质量（单一新杂质量（0.1%）l新杂质总量所占比例（新杂质总量所占比例（2.0%?） 峰序号峰序号溶剂峰溶剂峰对照药对照药峰峰/ /量量自制品自制品峰峰/ /量量峰性质峰性质新增杂质新增杂质总量总量10.20.20.2溶剂峰22.2/0.2%34.2/0.2%新增杂质48.2/0.5%8.2/0.3%原有杂质511.8/0.5%苯乙胺618.2/0.5%新增杂质（苯乙醇）杂质总量1.2%1.0%0.7%热分析热分析粉末衍射粉末衍射核磁核磁元素分析元素分析质谱质谱紫外紫外红外红外l斑马鱼斑马鱼毒性快速评价平台，对杂质的胚胚胎毒性、神经毒性，心脏毒性胎毒性、神经毒性，心脏毒性等进行评价。优点：19、优点：杂质用量少杂质用量少无需知道杂质结构无需知道杂质结构实验周期短实验周期短（34天一个周期）天一个周期）药物耳毒性检测药物耳毒性检测利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，检测毛细胞的存活状态，来判断检测物的耳毒性。检测毛细胞的存活状态，来判断检测物的耳毒性。下图中红色圈示耳蜗区域；给药组中红色箭头示给药后毛细胞减少，下图中红色圈示耳蜗区域；给药组中红色箭头示给药后毛细胞减少，黄色圈示给药后黄色圈示给药后1 1神经丘消失。神经丘消失。给药后给药后系统对照组系统对照组（正常幼体）（正常幼体）l建议表达方式：平行列表、20、图谱叠建议表达方式：平行列表、图谱叠加加l要搞清的重点问题：要搞清的重点问题：l杂质产生的途径、属性？杂质产生的途径、属性？l杂质产生需要的条件？杂质产生需要的条件？峰序峰序号号溶剂溶剂峰峰未破坏未破坏酸碱酸碱空白空白酸破坏酸破坏碱破坏碱破坏峰性质峰性质10.2分钟0.2分钟0.2分钟0.2分钟0.2分钟溶剂峰20.5分钟0.5分钟0.5分钟试剂峰32.2/0.2%2.2/0.2%2.2/0.2%工艺杂质48.2/0.3%8.2/11.8%8.2/0.3%工艺杂质和/或酸降解杂质511.8/0.5%11.8/1.5%11.8/1.9%工艺杂质和/或酸碱降解杂质618.2/0.5%碱降解杂质杂质21、总量1.0%13.5%2.9%l强制降解条件的摸索控制强制降解条件的摸索控制 记录记录l杂质增长杂质增长10%20%最佳最佳 不一定所有不一定所有条件条件l各峰分离程度的考察比较各峰分离程度的考察比较l色谱系统的评价色谱系统的评价l以图谱和数据为基础，针对以图谱和数据为基础，针对实验目的，作出相应的结论实验目的，作出相应的结论！ 建议表达方式：列表建议表达方式：列表l要搞清的重点问题：要搞清的重点问题：l是否有漏检的杂质？是否有漏检的杂质？l是否有需要用校正因子计算的杂质？是否有需要用校正因子计算的杂质？l可接受的限度？（可接受的限度？（仪器误差仪器误差+响应因子响应因子）l个人观点！个人观点22、！杂质含量的计算杂质含量的计算对照品对照品外标法外标法主成分自主成分自身对照法身对照法加校正因加校正因子的自身子的自身对照法对照法面积归面积归一化法一化法项目项目20052005年版年版20102010年版年版含标量含标量93.093.0107.0107.093.093.0107.0107.0鉴别鉴别2 2项项2+12+1项（项（+HPLC+HPLC）检查检查干燥失重干燥失重酸度酸度酸度酸度-对照品对照品测定测定随机随机误差误差仪器仪器误差误差制备制备精制精制标定标定校正因子校正因子 校正因子测定常校正因子测定常见问题见问题 权威性权威性 真实性真实性 准确性准确性原始记录核查需要检查的问题：23、原始记录核查需要检查的问题：- - 质量研究所用的对照品质量研究所用的对照品/ /标准品是否标准品是否 具有合法来源？具有合法来源？- - 如果质量研究所用如果质量研究所用对照品对照品/ /标准品为标准品为 自制品，有否精制和标化记录与标化自制品，有否精制和标化记录与标化 结果？结果？ 权威性权威性 真实性真实性 准确性准确性- -发票、标签、批号、分析报告单、盐基发票、标签、批号、分析报告单、盐基/ /碱基、水分碱基、水分详细精制方法与记录、质量检详细精制方法与记录、质量检验报告标定方法与结果验报告标定方法与结果 详细富集精制方法与记录、质详细富集精制方法与记录、质 量检验量检验 报告、标定24、方法与结果报告、标定方法与结果详细合成精制方法与记录、质量详细合成精制方法与记录、质量检验报告、标定方法与结果检验报告、标定方法与结果 粗品精制粗品精制富集精制富集精制 合成精制合成精制使用自制的对照品使用自制的对照品热分析热分析粉末衍射粉末衍射核磁核磁元素分析元素分析质谱质谱紫外紫外红外红外200820072006 200520042003 200220012000 数据标定：用正确的方法由至少数据标定：用正确的方法由至少3位实验者，不同仪器进行不少位实验者，不同仪器进行不少于于10个数据的测定个数据的测定/核对核对待标品质量考察：证明不待标品质量考察：证明不仅是仅是对的对的而且还是而且还是25、好的好的 对数据进行数理统计处理对数据进行数理统计处理对照品的标定对照品的标定l标定者标定者 测定结果（测定结果（%） n 均值均值% RSDl 1. 98.82%，99.12%，99.18%，99.25%，99.17% 5 99.11% 0.17%l 2. 98.96%，99.04%，99.24%，98.98%，98.98% 5 99.04% 0.12%l 3. 99.12%，98.94%，99.04%，99.04%，99.18% 5 99.06% 0.09%l经经Corchan检验，三位标定者的方差没有差异，检验，三位标定者的方差没有差异，均来自同一正态分布。用均来自同一正态分布。用Dix26、on法检验法检验15组数组数据中的最大值据中的最大值99.25%，最小值，最小值98.82% 均非离均非离群值。群值。l TSl置信区间置信区间 l n1/2l标定结果的置信区间为标定结果的置信区间为99.1599.01%，因此，因此，本批对照品的色谱纯度总均值为本批对照品的色谱纯度总均值为99.08%。l！考虑仪器台间差与人员等单次检验的！考虑仪器台间差与人员等单次检验的误差误差优点优点缺点缺点50%定位易定位易定量准定量准要求高要求高成本高成本高70%有条件时首选的方法有条件时首选的方法优点优点缺点缺点50%不定位不定位成本低成本低定量粗定量粗70%没条件时首选的方法没条件时首选的方法优点27、优点缺点缺点50%不需不需定位定位成本低成本低定量粗定量粗70%不提倡使用的方法不提倡使用的方法影响多影响多 重复性差重复性差优点优点缺点缺点50%成本成本较低较低定量较定量较准确准确需标需标因子因子定位难定位难70%杂质与主成分响应因子差异大（超过杂质与主成分响应因子差异大（超过 ）且对照品不稳定或昂贵时选用的方法且对照品不稳定或昂贵时选用的方法校正因子校正因子响应因子响应因子使用与否使用与否加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法杂质杂质对照品对照品混合混合对照对照品品临时临时降解降解相对保留时间相对保留时间+ +参考图参考图峰定位峰定位l溶剂的选择无依据：溶剂的选择无依据28、：溶液稳定性考察溶液稳定性考察l- 溶解度高且稳定溶解度高且稳定l 8小时不需提示小时不需提示l 4小时提示临用现配或立即进样小时提示临用现配或立即进样l 2小时改换溶剂小时改换溶剂 - 无背景干扰或小无背景干扰或小 溶剂峰、倒峰溶剂峰、倒峰 - 低毒价廉低毒价廉l- 不规定不规定l（不需加温且对温度不敏感）（不需加温且对温度不敏感） - 25或或30 （不需加温但对温度敏感，需保持恒温）（不需加温但对温度敏感，需保持恒温） - 35 70 l（需加温且对温度敏感，需保持恒温）（需加温且对温度敏感，需保持恒温）l 50 以上要加预热管以上要加预热管l检出杂质的数与量检出杂质的数与量l干扰因素干29、扰因素l操作的便捷性操作的便捷性 检测波长的选择检测波长的选择l色谱柱与流动相性质不匹配色谱柱与流动相性质不匹配l100%的水或的水或Buffer最好选水相柱（最好选水相柱（AQ柱柱 ）l普通普通C18柱流动相中用到离子对试剂，用后应柱流动相中用到离子对试剂，用后应好好冲好好冲l最好专用！最好专用！l因色谱柱填料性质已与原来有所不同因色谱柱填料性质已与原来有所不同l在该柱上所摸索的色谱条件，可能在其它同类在该柱上所摸索的色谱条件，可能在其它同类柱子上得不到重现！柱子上得不到重现！ l 杂质控制杂质控制微粒控制微粒控制安全性安全性控制控制注射剂所用的原辅料应从来源及工注射剂所用的原辅料应从来源及30、工艺等生产环节进行严格控制并应符艺等生产环节进行严格控制并应符合注射用的质量要求。合注射用的质量要求。标准标准增项增项杂质谱的比较杂质谱的比较供注射用原料质控重点供注射用原料质控重点应在制剂申报资料中体现！应在制剂申报资料中体现！ 结合药品的制法和工艺特点，以及杂质的特结合药品的制法和工艺特点，以及杂质的特殊性设立特色有针对性检测项目，最大限度殊性设立特色有针对性检测项目，最大限度解决安全隐患。解决安全隐患。 人尿制品增加乙肝表面抗原检查：如尿激人尿制品增加乙肝表面抗原检查：如尿激酶、尿促性素、绒促性素、乌司他丁等酶、尿促性素、绒促性素、乌司他丁等重组品种增加菌体蛋白残留量、外源性重组品种增加31、菌体蛋白残留量、外源性DNADNA残留量如重组人生长激素、重组人胰岛素残留量如重组人生长激素、重组人胰岛素等。等。含不饱和脂肪酸的品种增加甲氧基苯胺值含不饱和脂肪酸的品种增加甲氧基苯胺值检查：如多烯酸乙酯（检查：如多烯酸乙酯（P P272272）等。）等。含有含有不饱和脂肪酸不饱和脂肪酸的药物在生产和贮藏过的药物在生产和贮藏过程中易被氧化，初级氧化产物一般不稳定，程中易被氧化，初级氧化产物一般不稳定，又可进一步生成又可进一步生成醛类醛类等化合物，而甲氧基等化合物，而甲氧基苯胺值（也称苯胺值（也称p-茴香胺值）就是茴香胺值）就是ISO推荐的推荐的一种对此类降解产物进行评价的手段，欧一种对此类降解32、产物进行评价的手段，欧洲药典附录收载了此测定方法。药物的甲洲药典附录收载了此测定方法。药物的甲氧基苯胺值越高，说明其劣变程度越严重。氧基苯胺值越高，说明其劣变程度越严重。测定原理：测定原理：甲氧基苯胺甲氧基苯胺与与醛醛反应生成醇胺，反应生成醇胺，醇胺脱水生成的醇胺脱水生成的醛亚胺醛亚胺可采用紫外可采用紫外-可见分可见分光光度法在光光度法在350nm波长处测定。波长处测定。 注意：注意：甲氧基苯胺试剂为无色结晶，具有一定毒性，使用甲氧基苯胺试剂为无色结晶，具有一定毒性，使用时应避免接触皮肤，一旦失误，需用水冲洗时应避免接触皮肤，一旦失误，需用水冲洗1515分钟分钟以上。甲氧基苯胺的冰醋酸溶液不稳33、定，需当天配以上。甲氧基苯胺的冰醋酸溶液不稳定，需当天配制使用。以异辛烷作空白做基线校正时，如果测得制使用。以异辛烷作空白做基线校正时，如果测得的甲氧基苯胺冰醋酸溶液的吸光度超过了，则需重的甲氧基苯胺冰醋酸溶液的吸光度超过了，则需重新配制试剂。新配制试剂。供试品溶液中加入的供试品溶液中加入的4-4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液后甲氧基苯胺冰醋酸溶液后应注意避光，在应注意避光，在350nm350nm波长处的吸光度随时间的延波长处的吸光度随时间的延长缓慢增加，需准确放置长缓慢增加，需准确放置1010分钟后测定，尽量减小分钟后测定，尽量减小误差。误差。本试验受水分影响较大，样品及试剂中水分的存在本试验受水分34、影响较大，样品及试剂中水分的存在会导致反应不完全，测定值偏低，当样品中水分含会导致反应不完全，测定值偏低，当样品中水分含量超过量超过0.1%0.1%时，可按时，可按10g10g样品加样品加1 12 g2 g无水硫酸钠无水硫酸钠的比例脱除水分后测定。另外，应取用新开启包装的比例脱除水分后测定。另外，应取用新开启包装的供试品。的供试品。增设的特色项目增设的特色项目-甲氧基苯胺值甲氧基苯胺值 2-2-乙基己酸乙基己酸l-内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用对生产工艺过程中使用2-2-乙基乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增35、订为附录方法增订为附录20102010年版药典二部（附录年版药典二部（附录 L L）；）； 如如: :头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄西林钠西林钠等。等。2-2-乙基己酸乙基己酸 勘误：勘误：l-内酰胺类抗生素内酰胺类抗生素对生产工艺过程中使用对生产工艺过程中使用2-2-乙基乙基己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；己酸的原料，增加此项检查，采用气相色谱法测定；方法增订为附录方法增订为附录20102010年版药典二部（附录年版药典二部（附录 L L）；）； 如如: :头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头孢孟多酯钠、氨苄头孢地嗪钠、头孢呋辛钠、头36、孢孟多酯钠、氨苄西林钠西林钠等。等。勘误：勘误： 目前中国不仅接受了目前中国不仅接受了ICHICH对化学药品中残留溶剂控对化学药品中残留溶剂控制的理念，而且结合中国国情，建立了具有中国制的理念，而且结合中国国情，建立了具有中国特色的残留溶剂检查方法。特色的残留溶剂检查方法。中国药典中国药典20052005版中，对残留溶剂的分类及限度标准已版中，对残留溶剂的分类及限度标准已经与经与ICHICH的要求完全一致，但仅在附录中作为原则性统一要的要求完全一致，但仅在附录中作为原则性统一要求。求。 中国药典中国药典20102010版中，原料药要求在各论项下根据其生版中，原料药要求在各论项下根据其生产工艺制37、定残留溶剂检查方法产工艺制定残留溶剂检查方法抗生素原料药几乎所有品种均在各论项下增订了详细的残抗生素原料药几乎所有品种均在各论项下增订了详细的残留溶剂检查方法留溶剂检查方法p 从附录走向各论从附录走向各论残留溶剂残留溶剂 如：头孢泊肟酯如：头孢泊肟酯 残留溶剂残留溶剂 照残留溶剂测定法（附录照残留溶剂测定法（附录 P P）测定。）测定。 甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、异丙醇、丁酮、乙酸乙甲醇、乙腈、丙酮、二氯甲烷、异丙醇、丁酮、乙酸乙酯、四氢呋喃、乙酸丁酯、酯、四氢呋喃、乙酸丁酯、1,2-1,2-二氯乙烷、乙酸异丙酯、二氯乙烷、乙酸异丙酯、苯、四氯化碳、环己烷、二氧六环、甲基异丁基酮、吡啶、苯、38、四氯化碳、环己烷、二氧六环、甲基异丁基酮、吡啶、甲苯甲苯 色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 略略 内标溶液的制备内标溶液的制备 取正丙醇适量，用二甲基亚砜稀释制成每取正丙醇适量，用二甲基亚砜稀释制成每1ml1ml中约含中约含200g200g的溶液，作为内标溶液。的溶液，作为内标溶液。残留溶剂残留溶剂 检测方法选择：检测方法选择：l直接进样？顶空进样？等温？程序升温？限度直接进样？顶空进样？等温？程序升温？限度比较？对照品法？标准加入法？内标？外标？比较？对照品法？标准加入法？内标？外标？l验证项目确定：验证项目确定：l回收试验？最低定量限？最低检测限？线性？回收试验？最低定量限39、？最低检测限？线性？耐用性试验？耐用性试验？残留溶剂方法建立、验证与常见问题残留溶剂方法建立、验证与常见问题 检测方法选择：检测方法选择：l直接进样？顶空进样？等温？限度比较？对照直接进样？顶空进样？等温？限度比较？对照品法？标准加入法？内标？外标？品法？标准加入法？内标？外标？l验证项目确定：验证项目确定：l回收试验？最低定量限？最低检测限？线性？回收试验？最低定量限？最低检测限？线性？耐用性试验？耐用性试验？残留溶剂方法建立、验证与常见问题残留溶剂方法建立、验证与常见问题原始记录较常发现的问题原始记录较常发现的问题l连带问题：连带问题：按无水无溶剂计算按无水无溶剂计算残留溶剂方法建立、验证40、与常见问题残留溶剂方法建立、验证与常见问题原料原料 制剂制剂 头孢唑肟钠头孢唑肟钠 注射用头孢唑肟钠注射用头孢唑肟钠 头孢替唑钠头孢替唑钠 注射用头孢替唑钠注射用头孢替唑钠 头孢尼西钠头孢尼西钠注射用头孢尼西钠注射用头孢尼西钠 头孢噻吩钠头孢噻吩钠 注射用头孢噻吩钠注射用头孢噻吩钠 磺苄西林钠磺苄西林钠 注射用磺苄西林钠注射用磺苄西林钠 阿洛西林钠阿洛西林钠 注射用阿洛西林钠注射用阿洛西林钠 美洛西林钠美洛西林钠 注射用美洛西林钠注射用美洛西林钠 氯唑西林钠氯唑西林钠 注射用氯唑西林钠注射用氯唑西林钠 苯唑西林钠苯唑西林钠 注射用苯唑西林钠注射用苯唑西林钠 普鲁卡因青霉素普鲁卡因青霉素 高聚物41、高聚物凝胶色谱法（凝胶色谱法（20102010年版新增的年版新增的1919个标准）个标准）高聚物高聚物-高分子杂质高分子杂质-有关物质有关物质2010版：品种增加版：品种增加,方法多元化方法多元化 1、 自填柱和商品玻璃柱：填料常用葡聚糖凝胶自填柱和商品玻璃柱：填料常用葡聚糖凝胶G-10（Sephadex G 10）；短柱子的使用，减少分离时间）；短柱子的使用，减少分离时间 2、 商品凝胶柱商品凝胶柱TSK-GEL G2000SWXL ：头孢地嗪（北：头孢地嗪（北京所）京所） 3、ODS柱，聚合物柱，聚合物-氨苄西林钠舒巴坦钠（浙江所氨苄西林钠舒巴坦钠（浙江所) 4、柱切换（中检所），实现凝胶42、色谱与反相色谱的统、柱切换（中检所），实现凝胶色谱与反相色谱的统一一Sephadex G-10系统系统TSK-Gel G2000swxl系统系统 Sephadex G-10系统系统TSK-Gel G2000swxl系统系统 1 - 头孢羟氨苄；2 - 高分子杂质l头孢他啶：头孢他啶：l取本品取本品5 5份，每份，加份，每份，加1%1%碳酸钠溶液（经滤膜滤过）溶碳酸钠溶液（经滤膜滤过）溶解，依法检查（附录解，依法检查（附录 H H），应符合规定。），应符合规定。l头孢地嗪钠：头孢地嗪钠：l取本品取本品5 5份，每份，分别加微粒检查用水溶解，依法检份，每份，分别加微粒检查用水溶解，依法检查（附录查43、（附录 H H），应符合规定。），应符合规定。l临用前，也在自然光下目视检查（避免阳临用前，也在自然光下目视检查（避免阳光直射），如有可见异物，不得使用。光直射），如有可见异物，不得使用。 l用于本试验的供试品，必须按规定随机抽用于本试验的供试品，必须按规定随机抽样。样。l方法改变：重复方法改变：重复3 3次，总时限为次，总时限为2020秒。供试秒。供试品装量每支（瓶）在品装量每支（瓶）在10ml10ml及及10ml10ml以下的，以下的，每次检查可手持每次检查可手持2 2支（瓶）。支（瓶）。l明显可见异物明显可见异物- -金属屑、玻璃屑、长度或最金属屑、玻璃屑、长度或最大粒径超过大粒径超过244、 2的纤维和块状物等的纤维和块状物等l微细可见异物微细可见异物- -如点状物、如点状物、2 2以下的短纤以下的短纤维和块状物等）维和块状物等） l增加乳状液型注射液增加乳状液型注射液 l有些品种如碱性药物与玻璃容器久置起反应，有些品种如碱性药物与玻璃容器久置起反应，产生白点、白块和玻璃屑产生白点、白块和玻璃屑l有些品种如甲硝唑等与重金属发生反应产生有些品种如甲硝唑等与重金属发生反应产生不溶物不溶物l有些品种如喹诺酮类药物对金属设备产生腐有些品种如喹诺酮类药物对金属设备产生腐蚀，易有金属屑蚀，易有金属屑l有些品种如胰岛素等提取的生化大分子易产有些品种如胰岛素等提取的生化大分子易产生蛋白沉淀生蛋白45、沉淀l有些品种如头孢噻肟钠等成盐不完全，溶解有些品种如头孢噻肟钠等成盐不完全，溶解度太低，产生白点、白块度太低，产生白点、白块l控制生产环境和过程中的污染控制生产环境和过程中的污染- -外源异外源异物物l考察药物与容器的兼容性考察药物与容器的兼容性- -内源异物内源异物l考察活性成分的稳定性以及与溶剂考察活性成分的稳定性以及与溶剂/ /添添加物的稳定性加物的稳定性- -内源异物内源异物l药品的质量源于设计药品的质量源于设计l是什么？从哪里来？为什么去不掉？安是什么？从哪里来？为什么去不掉？安全性如何？限度多少合适？全性如何？限度多少合适？l头孢他啶：头孢他啶：l取本品取本品3 3份，加份，加146、%1%碳酸钠溶液（经滤膜滤过）溶解制成碳酸钠溶液（经滤膜滤过）溶解制成每每1ml1ml中含中含30mg30mg的溶液，依法检查（附录的溶液，依法检查（附录 C C），每），每1g1g样品中含样品中含10m10m以上的微粒不得过以上的微粒不得过60006000个，含个，含25m25m以以上的微粒不得过上的微粒不得过600600个。个。l头孢曲松钠：头孢曲松钠：l取本品取本品3 3份，加微粒检查用水溶解并制成每份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml1ml中含中含50mg50mg的溶液，依法检查（附录的溶液，依法检查（附录 C C），每），每1g1g样品中含样品中含10m10m以上的微粒不得过以上的微47、粒不得过60006000个，含个，含25m25m以上的微粒以上的微粒不得过不得过600600个。个。供注射用的原料药增加不溶性微粒检查以保供注射用的原料药增加不溶性微粒检查以保证制剂能符合注射剂的要求证制剂能符合注射剂的要求由于光阻法测定结果仅与一定浓度范围内样由于光阻法测定结果仅与一定浓度范围内样品溶液成正比，故标准给出了不溶性微粒检品溶液成正比，故标准给出了不溶性微粒检查供试品溶液浓度查供试品溶液浓度制剂最多有制剂最多有1111个规格，均按每个规格，均按每1g1g样品中含样品中含1010 m m以上的微粒不得过以上的微粒不得过60006000粒，含粒，含2525 m m以上以上微粒不得过微48、粒不得过600600粒；粒； 强化不溶性微粒等项目控制强化不溶性微粒等项目控制供注射用原料不溶性微粒检查供注射用原料不溶性微粒检查l原始记录问题原始记录问题l不详细不详细l无趋势无趋势l缺方法摸索及分析缺方法摸索及分析l原始记录建议：逐支、固定编号记原始记录建议：逐支、固定编号记录录无菌检查是药物安全性风险控制的重要项目之一，无菌检查是药物安全性风险控制的重要项目之一，但具体检查方法以前标准中均不给出，由检验者自但具体检查方法以前标准中均不给出，由检验者自己摸索。抗生素阳性菌选用不注意抗菌谱，存在试己摸索。抗生素阳性菌选用不注意抗菌谱，存在试验的有效性、一次成功率等问题验的有效性、一次成功率等49、问题对每个品种均要求经过验证，确定样品使用的最适对每个品种均要求经过验证，确定样品使用的最适宜方法（直接接种法？薄膜过滤法），最佳溶解方宜方法（直接接种法？薄膜过滤法），最佳溶解方式、最佳冲洗液、冲洗方式、敏感的阳性对照菌等式、最佳冲洗液、冲洗方式、敏感的阳性对照菌等操作关键因素，并将上述内容按统一规范格式在质操作关键因素，并将上述内容按统一规范格式在质量标准中单独立项表述详细。量标准中单独立项表述详细。供注射用原料无菌检查供注射用原料无菌检查l头孢呋辛钠：头孢呋辛钠：l取本品取本品3 3份，加份，加1%1%碳酸钠溶液（经滤膜滤过）溶解制成碳酸钠溶液（经滤膜滤过）溶解制成每每1ml1ml中含中50、含30mg30mg的溶液，依法检查（附录的溶液，依法检查（附录 C C），每），每1g1g样品中含样品中含10m10m以上的微粒不得过以上的微粒不得过60006000个，含个，含25m25m以以上的微粒不得过上的微粒不得过600600个。个。l头孢曲松钠：头孢曲松钠：l取本品取本品3 3份，加微粒检查用水溶解并制成每份，加微粒检查用水溶解并制成每1ml1ml中含中含50mg50mg的溶液，依法检查（附录的溶液，依法检查（附录 C C），每），每1g1g样品中含样品中含10m10m以上的微粒不得过以上的微粒不得过60006000个，含个，含25m25m以上的微粒以上的微粒不得过不得过60060051、个。个。氧氟沙星氯化钠注射液：氧氟沙星氯化钠注射液： 无菌无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，用取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%无菌蛋无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于500ml），每管培养），每管培养基中加入硫酸锰溶液基中加入硫酸锰溶液1ml，以大肠埃希菌为阳性对照菌，以大肠埃希菌为阳性对照菌，依法检查（附录依法检查（附录 H），应符合规定。），应符合规定。乙酰谷酰胺注射液：乙酰谷酰胺注射液： 无菌无菌 取本品，经薄膜过滤法处理，用取本品，经薄膜过滤法处理，用0.1%0.1%无菌蛋无菌蛋白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于白胨水溶液分次冲洗（每膜不少于100ml1052、0ml），以金黄色），以金黄色葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查（附录葡萄球菌为阳性对照菌，依法检查（附录 H H），应），应符合规定符合规定。l纯度要高、杂质要少、生物纯度要高、杂质要少、生物负荷要负荷要低低l从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、从源头控制杂质的数和量、染菌的数和量、热原或细菌内毒素热原或细菌内毒素l重点品种为营养性、无抑菌性、制剂有注射剂重点品种为营养性、无抑菌性、制剂有注射剂型型l注射剂用原料注重数量注射剂用原料注重数量l口服原料也要限定菌属种类（沙门氏菌）口服原料也要限定菌属种类（沙门氏菌）原料药微生物限度检查原料药微生物限度检查l胰岛素（制剂为注射剂）胰岛素（制剂为注射剂）l取本品取本品0.2g,依法检查（附录依法检查（附录 J），每），每1g中含中含细菌数不得过细菌数不得过300个。个。l胰酶（制剂为口服制剂，来源于动物提取）胰酶（制剂为口服制剂，来源于动物提取）l取本品取本品,依法检查（附录依法检查（附录 J），每），每1g供试品中细菌数供试品中细菌数不得过不得过10000个，霉菌和酵母菌总数不得过个，霉菌和酵母菌总数不得过100个。并个。并不得检出大肠埃希菌；每不得检出大肠埃希菌；每10g供试品中不得检出供试品中不得检出沙