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mir-214对胃癌细胞sgc7901侵袭迁移能力的影响
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官方公共微信肿瘤细胞侵袭和迁移的区别？_百度知道
肿瘤细胞侵袭和迁移的区别？
肿瘤细胞的侵袭和迁移能力有区别吗？是否存在迁移能力强而侵袭能力弱的肿瘤细胞？其可能的原理是什么？
我有更好的答案
借用粘着斑作为牵引点，细胞迁移和侵袭时往往会出现细胞粘着斑（整合素介导的细胞运动前缘的附着点），就是细胞三维迁移; Boyden小室：跨膜&#47，从细胞水平上讲、细胞划痕实验，细胞将自己拉向目的地。 四种主要的细胞迁移实验分别为、细胞隔离迁移实验（也称为二维细胞迁移实验或缺口封闭实验）和微流体技术细胞侵袭的一个特殊情况
有区别，我觉得迁移和侵袭是相联系的，迁移是说一个细胞向另一个地方转移的能力。但一个细胞能不能侵袭要看他有没有裂解细胞基质的能力，做侵袭实验的时候要先做这个实验。如果有一个细胞向浓度高的地方跑的能力强但没有裂解能力就会出现你说的问题。虽然很少。
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MicroRNA200c转染前后以外阴鳞癌A431细胞侵袭和迁移能力的影响
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官方公共微信不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞侵袭和转移能力的影响--《中国病理生理杂志》2012年02期
不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞侵袭和转移能力的影响
【摘要】：目的:探讨不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞黏附、侵袭和转移能力的影响及其可能机制。方法:不同浓度的低氧处理对数生长期的人肝癌HepG2细胞,采用MTT法、Transwell膜侵袭系统、免疫细胞化学方法、明胶酶谱分析和反转录PCR检测变异型白细胞分化抗原CD44v6、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、低氧诱导因子(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异。结果:HepG2细胞经低氧处理后,细胞的基质黏附率、穿透基底膜与游走迁移的细胞数均增高,以3%氧浓度最为显著(P0.05);3%和5%氧处理还可显著促进CD44v6的表达,增加MMP-2和MMP-9的表达,并可上调HIF-1α和VEGF。结论:适度缺氧能增强人肝癌细胞的黏附、侵袭和转移能力,其机制可能与CD44v6、基质金属蛋白酶、HIF-1α和VEGF的表达改变有关。
【作者单位】：
【关键词】：
【基金】：
【分类号】：R735.7【正文快照】：
原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,大部分肝癌患者就诊时已失去手术机会,经肝动脉化疗栓塞成了主要的治疗措施。然而化疗栓塞后高复发转移影响了患者的预后。多项研究结果表明[1-3],肝动脉化疗栓塞后残存肿瘤组织微血管密度增加,残存癌细胞侵袭转移能力增强,从而促进肝癌化
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【引证文献】
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淘豆网网友近日为您收集整理了关于mir-338-3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及SMO蛋白表达的影响的文档，希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍：mir-338-3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及SMO蛋白表达的影响 第 41卷第 3期 2013年 6月广州医学院学报 ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE Vo1.41 No.3 Jun.2013 mir.338.3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及 SMO 蛋白表达的影响区文伎孙凯吴承堂 雷尚通张晓槟(南方医科大学南方医院普外科,广东广州 510515) 摘要 目的:探讨微小 RNA一338.3p(miR一338.3p)对人结直肠癌细胞侵袭迁移能力及 Smoothened (SMO)蛋白表达的影响。方法:应用实时荧光定量 PCR(Real—time PCR)检测四种人结肠癌细胞系 Lovo、 HT一29、HCT116、SW620中 miR一338—3p表达状况,并以人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照。采取脂质体转染 miR一338.3p前体(pre—miR一338 3p)至人结直肠癌细胞系 SW620,观察细胞转染前后 miR.338—3p的表达变化.Transwell侵袭实验及划痕实验检测转染前后细胞侵袭及迁移能力的改变;以(来源：淘豆网[/p-5597005.html]) Western—blotting 和 RT.PCR分析 SMO蛋白及 mRNA表达状况。结果:检测四种结直肠癌细胞系中 miR一338—3p表达水平均较正常对照细胞显著降低,差异具有统计学意义(P&0.01);SW620细胞转染 pre—miR一338—3p后,miR一 338—3p表达水平升高,SMO蛋白表达下降,同时肿瘤细胞侵袭、迁移能力明显增强,与对照组相比差异具有统计学意义(P&0.01);但 SMO mRNA表达水平在转染前后差异无统计学意义(P&0.05)。结论: MiR一338—3p可通过抑制结直肠癌细胞系中 SMO蛋白表达从而抑制肿瘤细胞侵袭转移。关键词 结直肠癌:微小 RNA:Smoothened基因中图分类号:R574.62 文献标识码:A 文章编号:(1-05 Effects of m icroRNA-338-3p on invasion and m igration and SM O protein ex- p(来源：淘豆网[/p-5597005.html])ression in hum an colorectal cancer cells ou Wen—tao,SUN Kai,WU Cheng—tang,LEI Shang—tong,ZHANG Xiao—bin (Department ofGeneral Surgery,Affiliated Nanfang Hospital of Southern Medical University,Guangzhou 510515, China) Abstract
Objective:To investigate the effects of microRNA一338—3p(miR一338—3p)on cell invasion and migration and Smoothened protein(SMO)expression in human colorectal cancer(CRC)cells,Methods:Real—time polymerase chain reaction(RT—PCR)(来源：淘豆网[/p-5597005.html])was employed to detect the miR-338—3p expression in Lovo,HT-29,HCT116 and SW620,the four types of human CRC cell lines,and in human umbilical vein endothelial cells(HUVEC),the controls.Human CRC cell line,SW620,was transfected with a miR一338—3p precursor(pre—miR一338—3p)by using liposomes.This allowed determination of the changes in miR一338—3p expression,and CRC cell invasion and migration by Transwell and scratch assays following transfection.W este(来源：淘豆网[/p-5597005.html])rn—blotting and semi—quantitative RT—PCR were adopted to analyze Smoothened(SMO)protein and mRNA expression.pared with control cells, all human CRC cell lines yielded a significantly attenuated expression of miR一338·3p(all P&0.01).Transfection of SW620 cells with pre—miR一338—3p,pared with control cells,was associated with augmented miR一338— 3p expression,attenuated SMO protein expression and improved capacity of invasion and migration(all P (来源：淘豆网[/p-5597005.html])&0. 01),but not the expression of SMO mRNA(P &0.05).Conclusion:MiR一338—3p suppresses CRC invasion and migration via inhibiting SMO protein expression. Key words
colorectal cancer:microRNA :smoothened gene DOI:10 3969/j.issn.. 基金项目:国家自然科学基金青年科学基金项目() 作者简介:区文伎(1987一),男,住院医师,在读硕士研究生。研究方向:胃肠肿瘤治疗。通讯作者:E—mail:wct66@163.con ·论著· 广州医学院学报(J GZMC) ) 结直肠癌(CRC)是我国常见多发的恶性肿瘤之一,其发病率呈逐年上升趋势_1j。微小 RNA (microRNA,m(来源：淘豆网[/p-5597005.html])iRNA)是一类可负性调控基因表达的非蛋白编码的 RNA家族,可通过与靶 mRNA分子相互作用而发挥生物学效应.而其表达失衡亦可促进多种肿瘤的发生发展_2 。MiR 338.3p定位于染色体 17q25.3,该位点常为多种恶性肿瘤的突变“热点”,且其突变后表型与肿瘤侵袭转移等恶性生物学行为相关 J。我们前期实验已证实 miR一338.3p 在 CRC组织与癌旁组织中存在差异性表达.提示 miR.338.3p可能与 CRC发生发展密切相关,但其具体通过何种机制调控 CRC生长尚不明确 l6]。本研究通过调节 miR一338.3p在 CRC细胞中的表达水平.观察其对肿瘤细胞生物学行为的影响,以期为 CRC发病机制及诊断治疗提供一定的理论依据。 1 材料和方法 1.1 细胞系及主要试剂人 CRC细胞系 Lovo、HT.29、HCT1 16、SW620及正常对照人脐静脉内皮细胞(HUVEC)均由南方医科大学病理学教研室保存。由 miRbase数据库(/)查找基因序列,使用软件 Primer.Expre(来源：淘豆网[/p-5597005.html])ss 2.0进行引物与探针的设计。 miR.338.3p上游引物 5’.ACA CTC CAG TGG GTC CAG CAT CAG TGA TrT T.3’,下游引物 5’一CTC AAC TGG TGT CGT GGA.3’,扩增片段 72内参片段 U6上游引物 5’.CTC GCT TCG GCA GCA CA一 3’。下游引物 5’.AAC GCT T CA CGA A1Tr TGC GT- 5’,扩增片段 94SMO mRNA上游引物 5’.CAT TAC CTY CAG A CT.3’。下游引物 5’一CTr TGG CTC ATC GTC ACT CT一3’.扩增片段 292 bp:内参照 B—actin上游引物 5’.TGG ATC AGC AAG CAG GAG TA.3’.下游引物 5’一TCG GCC ACA TTG TGA ACT 1Tr一3’,扩增片段 275 bp:上述引物均由上海生工合成。MiR 338.3p前体(pre—miR.338.3p)和(来源：淘豆网[/p-5597005.html])无义序列阴性对照均购自上海吉玛制药技术有限公司。 1.2 实验方法 1.2.1
细胞培养及转染 细胞常规复苏后,以含 10%胎牛血清(v/v)的 L 15培养基重悬,置于 25 cm 培养瓶 37 oC、5%CO,9呼育箱中静置培养,待细胞接触密度至 80% ~90%时常规胰酶消化传代,细胞正常传 2~3代后作实验用。取指数生长期的细胞接种于 24孑L板(细胞密度 50 ooo/￣L),约 80%细胞融合时开始实验。细胞转染按 Lipofetamine2000(invitrogen)试 2 剂盒说明书进行,转染 50 nmol/L的 pre—miR.338.3p 或阴性对照,设置空白对照组、阴性对照组、pre— miR.338.3p转染组,每组设 6个复孔,培养 24 h后换新鲜培养液。 1.2.2
Rea1.time PCR检测 miR.338—3p表达 z(J1 试剂(Invitrogen)抽提总 RNA,并取 l
g样品加人无菌蒸馏水共 12 L,混匀后以 85℃孵育 5 min打(来源：淘豆网[/p-5597005.html])开 RNA二级结构,随即置于冰上,防止 RNA复性再次恢复二级结构;在另一去 RNase的 PCR管中配置反应液:10 mmol/L dNTP(promega)2.0 IxL、RNase inhibitor(promega)0.5 IxL、miR.338.3p逆转录引物 0.5 IxL、U6逆转录引物 0.5
L、5 X buffer 4.0 IxL、 M.MLV(promega)0.5 IxL;配好后两溶液混匀,42℃孵育 60 min。构建 miR一338—3p和 U6的 Rea1.time RT. PCR反应体系:cDNA(1:20)5.0 IxL、上游引物 0.5 L、下游弓I物 0.5
L、2× SYBR Green PCR Master Mix 10 IxL、无菌蒸馏水 4.0 IxL;反应条件:变性 595 oC 15 s、65 qC 30 S、72 qC 32 s。共 40个循环; 循环结束后 72℃延伸 10 min,每个标本均作复管 PCR反应(试剂(来源：淘豆网[/p-5597005.html])购自 TOYOBO公司.PCR仪采用 ABI PRISM@7500 Sequence Detection System)。采用内参照 U6的拷贝数作为校正基数。通过 Light Cycler软件直接获得各样本中 miR.338—3p的 Ct (cycle threshold)值,与同样本中 u6的 值相减, 即获得该样本中 miR.338.3p的 ACt值:由于 Rea1. time PCR检测 RNA时.存在不同 RNA样本中不同的逆转录效率的限制。以本次检测均数最大的 ACt值作为校正.得出一AACT值。按目的基因表达量=2|△△c 公式计算各样本中 miR.338.3p的确切含量。 1.2.3
Transwell侵袭实验 4qC溶解 Matrigel过夜,用预冷的无血清培养基以 1:3的体积比稀释 Matrigel,取 4o L加入预冷的 Transwell小室中,37℃孵育 2 h使 Matrigel凝固。吸走小室中多余的液体, 并在上室、下室分别加入 100、600 IxL无血清培养基,37℃平衡过夜。在处理细胞后第 2天,计数 1× 10 个细胞,用 100 L无血清 DMEM—F12培养基重悬,加入 Transwell上室,在下室加入 600 L完全培养基。在 37 oC、5%CO,孵育 48 h后,取出小室,用棉签擦去上室的细胞.4%多聚甲醛固定并结晶紫染色,检测细胞是否穿过小孔,如有穿过终止其他实验组.并拍照统计。 1.2.4 划痕实验先用 marker笔在 6孔板背后, 间隔 0.5~1 cm均匀划横线横穿过孔。取对数生长期细胞接种于 6孔板内,每孔 1×10 个细胞,各组第 3期 区文瞍,等.mir一338—3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及 SMO蛋白表达的影响据考虑 SMO可能是 miR一338—3p在 CRC中的作用靶点,且进一步证实了高表达 miR一338—3p导致对 CRC 细胞中内源性 SMO表达的抑制作用,同时 CRC细胞表现出侵袭转移能力的减弱,说明 miR.338—3p可通过抑制 CRC细胞中 SMO蛋白表达而发挥抑癌作用:而结合半定量 RT.PCR检测结果,推测 miR 338. 3D可能通过不完全互补配对的方法与 SMO mRNA 结合,从而抑制内源性 SMO蛋白表达。此为 miR. 338—3p对 CRC细胞生物学特性的影响奠定了后继研究基础。参考文献[1]Sun K,Wang W ,Zeng JJ,et a1.MicroRNA一221 inhibits CDKN1 C/p57 expression in human colorectal carcinoma [J].Acta Pharmacol Sin,):375—384. [2]孙凯,曾俊杰,王伟,等.微小 RNA一221对结直肠癌中 CDKN1C/p57表达的调控研究『J].中华胃肠外科杂志,):41.55. [3]王伟,孙凯,吴承堂,等.特异性 miR-221抑制剂对结直肠癌细胞增殖及凋亡的影响『J].南方医科大学学报,):674.677. [4]曾俊杰,孙凯,吴承堂,等.结直肠癌与毗邻癌旁组织中 microRNA一221与 CDKN1C/p57的差异表达[J].中华实验外科杂志.):19—21. [5]Tsuchiya S,Oku M,Imanaka Y,et a1.MicroRNA一338—3p and
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mir-338-3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及SMO蛋白表达的影响 第 41卷第 3期 2013年 6月广州医学院学报 ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE Vo1.41 No.3 Jun.2013 mir.338.3p对结直肠癌细胞侵袭迁移能力及 SMO 蛋白表达的影响区文伎孙凯吴承堂 雷尚通张晓槟(南方医科大学南方医院普外科,广东广州 510515) 摘要 目...
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