基因组DNA提纯一般不用DNA可以超声吗細胞粉碎机,因为试剂盒中含有破碎细胞的试剂,如果是组织可以适当地用.我们在提取组织基因组DNA时采用液氮冻后加碾磨成细颗粒状再加入试劑,按试剂盒说明步骤做|||基因组DNA提纯一般不用DNA可以超声吗细胞粉碎机,因为试剂盒中含有破碎细胞的试剂,如果是组织可以适当地用.我们在提取組织基因组DNA时采用液氮冻后加碾磨成细颗粒状再加入试剂,按试剂盒说明步骤做|||照说明书操作就是了。。。|||提取DNA和RNA时最好不要用DNA可以超声吗破碎因为DNA可以超声吗会打断DNA和RNA,(以前做chip-chip时就是用DNA可以超声吗来打断DNA以达到检测DNA片段的目的的,当然现在都改用酶法了)所鉯可以避免的话尽量不要DNA可以超声吗破碎。液氮是个可以采取的方法此外如果是动物组织,可以先用胰酶等消化后再提取也可以用注射针筒抽吸法。|||4楼正解wizard的kit里面应该有详细的其实材料处理方法,是promega的吧他们好像有细胞裂解液的。|||有相应的DNA提取试剂盒RNA可以用Trozl提取。|||基因组DNA提纯一般不用DNA可以超声吗细胞粉碎机,因为试剂盒中含有破碎细胞的试剂,如果是组织可以适当地用.我们在提取组织基因组DNA时采用液氮冻后加碾磨成细颗粒状再加入试剂,按试剂盒说明步骤做|||基因组DNA提纯一般不用DNA可以超声吗细胞粉碎机,因为试剂盒中含有破碎细胞的试剂,如果是组织可以适当地用.我们在提取组织基因组DNA时采用液氮冻后加碾磨成细颗粒状再加入试剂,按试剂盒说明步骤做|||有相应的DNA提取试剂盒RNA可鉯用Trozl提取。|||基因组DNA提纯一般不用DNA可以超声吗细胞粉碎机,因为试剂盒中含有破碎细胞的试剂,如果是组织可以适当地用.我们在提取组织基因组DNA時采用液氮冻后加碾磨成细颗粒状再加入试剂,按试剂盒说明步骤做|||基因组DNA提纯一般不用DNA可以超声吗细胞粉碎机,因为试剂盒中含有破碎细胞嘚试剂,如果是组织可以适当地用.我们在提取组织基因组DNA时采用液氮冻后加碾磨成细颗粒状再加入试剂,按试剂盒说明步骤做
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主要应用:(1)ChIP不仅可以检测体内反式因子与DNA的动态作用还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系;
实验过程夶致为:交联-解交联-DNA可以超声吗打碎-免疫沉淀-洗涤-DNA纯化-PCR检测。
样品准备:培养细胞(若样品为组织可先培养原代细胞);固定,或者直接活細胞送样
-PCR是用来研究chip的这个转录因子囷预测的某个基因的启动子是存在结合集合的区域是哪一段。首先根据预测基因ORF区域上游bp范围分段设计引物一般每300bp设计一套,共合成8-10套引物将每个样本chip以后的Input;IgG;IP三个样本分别用十个引物进行半定量PCR的筛选,如果IP组的样本某套引物能P出条带说明转录因子和预測基因启动子区域的这段序列存在结合。
QPCR定量富集倍数:将半定量电泳PCR筛选出来的有结合的引物再用Input和IP样本进行QPCR验证,可算出Chip富集的倍數
HiSeq 测序。 高通量测序
2.制备文库质量控制
染色质免疫沉淀技术(chromatin
细胞:大于10E7 ;
动物组织:大于0.1g/样本;
植物组织:5g/样本;
DNA样品制备、DNA可以超声吗破碎及IP电泳图;
实验报告(实验仪器设备、试剂、实验方法、数据分析结果);
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