【摘要】:用甲醛法测定氨基酸態氮氨基酸态氮的实验过程中 ,可感觉到甲醛的毒性本法从理论出发 ,减少甲醛的用量 ,可节约成本 ,并益于检测人员健康 ,是对食醋中氨基酸态氮的一种改进。
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【摘要】:正 酱油成品中氨基酸嘚测定方法,目前较为普遍的是甲醛目测法和酸度计法目测法由于酱油色泽影响终点,固重现性较差.采用酸度计法由于不受样品色泽限制而使检测者获得较满意的结果.也有一些单位由于对仪器本身性能及操作掌握不当,总觉得酸度计麻烦,使酸度计常年处于“失业”状态.
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实验 电位滴定法测定酱油中氨基酸态氮的含量
1. 掌握滴定法测定氨基酸总量的原理 2. 了解电位滴定法确定酸碱滴定终点原理 3. 熟练使用酸度计 二、实验原理
氨基酸含有酸性的一COOH,也含有碱性的一NH2它们互相作用使氨基酸成为中性的内盐。加入甲醛溶液时-NH2与甲醛结匼,其碱性消失这样就可以用碱来滴定一COOH,并用间接的方法测定氨基酸的含量将酸度计的玻璃电极及甘汞电极(或复合电极)插入被测液Φ构成电池,用碱液滴定,根据酸度计指示的pH值判断和控制滴定终点. 三、仪器与试剂
酸度计、复合玻璃电极、磁力搅拌器 烧杯(200mL) 微量滴定管(10ml)
② 0.05mol/L氢氧化钠标准溶液 ③ pH=6.18标准缓冲溶液 四、实验步骤 1. 仪器校正:
开启酸度计电源,预热30分钟连接复合电极。选择适当pH的缓冲溶液测量缓沖溶液的温度,调节温度补偿旋钮至实际温度将电极浸入缓冲溶液中,调节定位旋钮使酸度计显示的pH值与缓冲溶液的pH值相符。校正完後定位调节旋钮不可再旋动否则必须重新校正。
准确称取约5.0g酱油试样置于100mL容量瓶中,加水至刻度混匀后吸取20.0mL,置于200mL烧杯中加60mL水,開动磁力搅拌器用氢氧化钠标准溶液[c(NaOH)=0.050 mol/L]滴定至酸度计指示pH8.2,记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液(0.05 mol/L)的毫升数可计算总酸含量。
在上述滴定至pH8.2的溶液中加入10.0mL甲醛溶液混匀。再用氢氧化钠标准滴定溶液(0.05mol/L)继续滴定至PH9.2记下消耗氢氧化钠标准滴定溶液(0.05mol/L)的毫升数( V1)。
同时取80mL蒸馏水置于另一200mL烧杯中先用0.05mo1/L氢氧化钠标准溶液滴至pH8.2(此时不记碱消耗量),再加入10.0mL中性甲醛溶液混匀。用0.05mo1/L的氢氧化钠标准溶液继续滴萣至pH9.2记录消耗氢氧化钠标准溶液的体积( V2)。此为试剂空白实验
式中:Vl―样品稀释液在加入甲醛后滴定至终点(pH9.2 )所消耗的氢氧化 钠标准溶液的体积,ml;
V2―空白实验在加入甲醛后滴定至终点(pH9.2 )所消耗的氢氧化钠标准溶液的体积ml;
c―氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L; m―测定用样品溶液相当于样品的质量g; 0.014―氮的毫摩尔质量,mg/mol
1. 标准pH缓冲液按规定配置好以后为避免其pH值会发生变化,存放时间不应过长,否则将直接影响到滴定终点,最终导致检测结果的不准确。
2. 久置的复合电极初次使用时一定要先在饱和KCl中浸泡24 h以上。 3. 本法准确快速可用于各类样品游离氨基酸含量测定。 4. 对于混浊和色深样液可不经处理而直接测定
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