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下面是分离分解尿素的细菌所用的培养基，据表回答下列问题。
（1）该培养基中含有的最主要碳源是________________。该培养基除了能够提供碳源外，还可以提供&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
（2）该培养基按物理性质划分属于___________培养基，该培养基具有选择作用的原因是________________________________________________。
（3）在该培养基中，可以通过检测pH的变化来判断尿素是否被分解，所依据的原理是_____________________________________________________________________。方法是在培养基中加入___________，若尿素被分解，则培养基变成_______色。
（4）如果将此培养基改为用来培养分离分解纤维素的微生物的培养基，则提供碳元素的物质应改为________________。
（1）葡萄糖&& 氮源、水和无机盐&&&
（2）固体&&& 该培养基中唯一的氮源是尿素，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖
（3）在分解尿素的过程中，微生物产生的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的PH升高&&&&& 酚红指示剂&&&& 红 g免费Q.cOoco.Net.cn提问中心>&&&&&
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分解尿素的细菌;分解纤维素微生物的分离要点.ppt 73页
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2、制备培养基的操作排序
①溶化（使各种原料、琼脂等加热溶化）
④计算（各成分用量） ⑤称量
⑥倒平板(培养基冷却至50℃,倒入培养皿)
正确的操作顺序：___________________ ④ ⑤ ① ③ ② ⑥ 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ 原因：土壤中各类微生物的数量（单位：株/kg）是不同的。例如在干旱土壤中的上层样本中：好氧及兼性厌氧细菌数约为2 185万，放线菌数约为477万，霉菌数约为23.1万。 结论：为获得不同类型的微生物，就需要按不同的稀释度进行分离，同时还应当有针对性地提供选择培养的条件。 接种环 接种针 结果：培养一定时间后，该菌数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯化培养分离。 思考： 1、所有的培养基都必须含碳源、氮源、水、
无机盐吗？ 2、培养基中的营养要素，除了水以外的无机
物只能是无机盐？
3、CO2既自养型生物的碳源也是能源物质？
4、利用动物细胞培养液培养病毒，行吗？ 否；可以无碳源，也可无氮源 否；碳源和氮源也可能是无机物 否；光能或化学能 病毒无细胞结构，只能寄生在活细胞中生存。所以，要利用活细胞培养病毒。 一、微生物概念及种类
1、概念：是指自然界中那些形态微小、
结构简单，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看清楚的生物。
2、种类：无细胞结构病毒、原核生物界（细线支蓝衣）、真菌界（酵母菌、霉菌、蘑菇等）、原生生物界（草履虫、变形虫等） 3、代谢特点：异常旺盛 微生物所需的营养要素 碳源 氮源 水 无机盐 无机碳源：CO2等—自养型 有机碳源：葡萄糖等—异养型 N2：固氮菌（根瘤菌等） NH3：硝化细菌 其他：铵盐、硝酸盐、尿素、蛋白胨 特殊营养物质（维生素、氨基酸和碱基等）、PH、温度、氧气等 练习：（10全国）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于＿＿＿＿培养基。按照化学成分分类，该培养基属于＿＿＿培养基。从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于＿＿＿＿。
葡萄糖 尿素 琼脂 选择 合成 异养型 无菌技术 1、获得纯净培养物的关键是？
防止外来杂菌的入侵 2、消毒与灭菌的区别？
消毒是杀死部分对人体有害的微生物；灭菌
是杀死所有微生物。 3、对培养基灭菌的方法是_______________，对接种针灭菌的方法是_________，对玻璃器皿灭菌的方法是________，对实验操作者的手用酒精_______处理，实验操作结束需不需要灭菌？_________ 高压蒸汽灭菌法 灼烧灭菌 干热灭菌 消毒 需要 2、实验操作——大肠杆菌的纯化培养
1）制备培养基： 计算 称量 溶化 调PH值 灭菌 倒平板 * * * * 讲完第1点后讲课本P22中间楷体字内容引出2、3、4、内容 * 之后讲课本P22的最上面内容 讲完后讲P23楷体字部分 之后讲课本P22的最上面内容 * * * 3）常见的分解尿素的微生物 芽孢杆菌、小球菌、假单胞杆菌、克氏杆菌、棒状杆菌、梭状芽孢杆菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。 4）课题目的 ① 从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ② 统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 如何从土壤中分离能够分解尿素的细菌（目的菌）并对其进行计数？试通过小组讨论写出实验设计的基本思路。 讨论： 思考：如何寻找目的菌？ 思考：如何寻找和分离某种微生物？ 实例1： 启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。 多聚酶链式反应是一种在体外将少量DNA大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温（930C）的DNA聚合酶。如果让你寻找这种耐高温的酶，你会去哪找？ 启示：分离菌种要人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长，即用选择培养基来分离菌种。 原因：因为热泉温度70～800C，淘汰了绝大多数微生物，只有耐热菌被筛选出来。 思考：为什么耐热菌能从热泉中被筛选出来？
分离微生物原理：选择培养基分离 培养基的唯一氮源为尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作为氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生长发育繁殖，而受到抑制，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。 4) 培养基选择分解尿素的微生物的原理 15.0g 琼脂 1.0g 尿素 10.0g
正在加载中，请稍后...【答案】（1）脲酶      分解尿素的细菌是异养型生物，不能利用CO2来合成有机物    为细胞生物生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料
（2）尿素       其他两组都含有NH4NO3，能分解尿素的细菌和不能分解尿素的细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用
（3）为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定
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（15分）。尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示，KH2PO4% i: O. S) d6 F9 C3 Z6 F: X
Y2 HNa2HPO4' O5 G# `4 E9 f( L2 Q3 Z5 M) E6 iMgSO4·7H2O: I2 W2 e8 g& H葡萄糖, Y# I/ R
C! V, `2 D尿素& U# H+ D: H/ Z8 `& U- h/ K琼脂# L5 T+ L2 H% @- T) P5 Z1.4 g; U" i% @6 N1 R0 b+ \2.1 g; L" M0 F# W1 ^; U3 J* c0.2 g) ]7 j! `1 _* [6 T8 L10 g) d9 A% J+ S* D; K0 E- R( [9 R1 g$ K' U$ D; `0 J15 g# ?/ `7 D4 e. ?- R: L4 F/ a将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到100 mL) K5 c% F! Q$ @/ f. M% F
B! D- B&实验步骤如图所示。请分析回答。（1）此培养基&&&&&&&&&（能/不能）用于植物组织培养，理由是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（2）培养基中加入尿素的目的是&&&&&&&&&&&&&&&&，这种培养基属于&&&&&&&&培养基。（3）“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的&&&&&&&&&&和&&&&&&&&&&，实验需要振荡培养，原因是&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&。（4）图中将细菌转到固体培养基上时，可采用&&&&&&&&&&&&&&或&&&&&&&&&&&&&&接种，获得单菌落后继续筛选。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定：在以尿素为惟一氮源的培养基中加入&&&&&&&&&&指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成&&&&&&&&色，则可准确说明该菌种能够分解尿素。（5）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是&&&&&&&&&&，需要消毒的是&&&&&（填序号）。①培养细菌用的培养基与培养皿 ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管 ③实验操作者的双手（6）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有&&&&&（填序号）。①土样不同&②培养基污染&③操作失误&④没有设置对照（7）实验结束后，使用过的培养基应该进行&&&&&&&&&&&&&&处理后，才能倒掉。
答案（15分） （1）不能&缺少植物激素（或缺少植物需要的一些营养成分）（2）筛选目的菌&选择&&&（3）尿素&葡萄糖&为目的菌提供氧气（4）平板划线法&稀释涂布平板&酚红&红（5）①和②&③&&&（6）①②③&&&（7）灭菌
解析试题分析：（1）不能直接用于植物组织培养，因为缺少植物激素。（2）加入尿素的目的是筛选目的菌，属于选择培养基。（3）氮源是尿素，碳源是葡萄糖，震荡培养是为目的菌提供氧气。（4）常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，尿素培养基中加入酚红指示剂，指示剂变为红色说明将尿素分解产生了氨，（5）①培养细菌用的培养基与培养皿需要灭菌， ②玻棒、试管、锥形瓶和吸管需要灭菌， ③实验操作者的双手需要消毒。（6）A同学筛选出的菌落较多原因可能是①土样不同②培养基污染③操作失误。（7）为了防止污染环境，实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉。考点：本题考查微生物的培养和分离相关知识，意在考察考生对知识点的识记掌握程度。