获取获得目的基因途径的方法有哪些(详细)

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重组DNA技术中,可用于获取目的基因的方法有:A.化学合成法B.PCRC.Western blottingD.基因敲除
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提问人:匿名网友
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重组DNA技术中,可用于获取目的基因的方法有:A.化学合成法B.PCRC.Western blottingD.基因敲除此题为多项选择题。请帮忙给出正确答案和分析,谢谢!
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>>>下列不属于获取目的基因的方法是[]A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法..
下列不属于获取目的基因的方法是
A.“鸟枪法”B.转录法 C.反转录法 D.根据已知氨基酸序列合成法
题型:单选题难度:偏易来源:0103
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据魔方格专家权威分析,试题“下列不属于获取目的基因的方法是[]A.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法..”主要考查你对&&基因工程的基本操作程序&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下:
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因为篇幅有限,只列出部分考点,详细请访问。
基因工程的基本操作程序
基因工程的基本操作程序:1、目的基因的获取(1)目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因。(2)获取方法:①从基因文库中获取;②人工合成(反转录法和化学合成法);③PCR技术扩增目的基因。2、基因表达载体的构建(1)目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传至下一代,使目的基因能够表达和发挥作用。(2)组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。如图:①启动子:是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。②终止子:也是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的尾端。③标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。(3)基因表达载体的构建过程:3、将目的基因导入受体细胞(1)转化的概念:是目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。(2)常用的转化方法:
(3)重组细胞导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。4、目的基因的检测和表达(1)首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子杂交技术。(2)其次还要检测目的基因是否转录出mRNA,方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。(3)最后检测目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。 (4)有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。知识点拨:1、构建基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下,便于获得所需的目的基因。 2、PCR技术:是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。PCR扩增是获取目的基冈的一种非常有用的方法,也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。目的:通过指数式扩增获取大量的目的基因。 3、基因文库中不是直接保管相应基因,基因文库中的基因保存在受体菌中。 4、在基因工程的四个操作步骤中,只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对,其余三个步骤都涉及碱基互补配对。5、原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少,有利于目的基因的复制与表达,因此常用大肠杆菌等原核生物作为受俸细胞。 6、植物细胞的全能性较高,可经植物组织培养过程成为完整植物体,因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞;动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。7、转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中,从而使受体生物获得了新的遗传特性的现象,从其变化的实质看,这种变异属于可遗传变异中的基因重组。 知识拓展:1、基因文库的构建:(1)概念①基因组文库:含有一种生物的全部基因。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因组文库。 ②cDNA文库:只包含了一种生物的部分基因。 (2)构建过程
2、人工合成目的基因(1)反转录法:(2)人工合成目的基因3、PCR技术扩增目的基因①原理:DNA双链复制②过程:第一步:加热至90~95℃DNA解链;第二步:冷却到55~60℃,引物结合到互补DNA链;第三步:加热至70~75℃,热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。
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887888521687659834478386172511以下试题来自:
问答题简答题常用的目的基因的获取方法有哪些?
制备基因组文库、构建cDNA文库、PCR扩增目的基因、人工合成DNA技术
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&求助 获取目的基因的方法
求助 获取目的基因的方法
作者 fancy868
我想不通过提DNA与直接合成的方法获得一段序列做模板,该序列已知。请问有哪些方法?
你可以通过公司 一个碱基一个碱基的合成
有了序列也就是有了基因名称,那就好办了,查找包含该序列的相关质粒载体,拿来作模板即可.可通过google或其他pubmed搜索相关序列的文献,找作者索要质粒等途径获得模版.,
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