微量凯氏定氮法测定蛋白质含量实验报告
1、学习微量凯氏定氮法得原理
2、掌握微量凯氏定氮法得操作技术(未知样品得消化、蒸馏、滴定及其含氮量得计算等)
凯氏定氮法常用于测定天然有机物(如蛋白质,核酸及氨基酸等)得含氮量。
当天然含氮有机物与浓硫酸共热时,其中得碳、氢被氧化成二氧化碳与水,而氮则变成氨并进一步与硫酸作用生成硫酸铵.此过程称为“消化"。
此过程进行得相对较为缓慢,通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高溶液得沸点,并加入硫酸铜作为催化剂,以促进反应得进行。氧化剂过氧化氢也能加速反应。
蒸馏:在消化完全得样品溶液中加入浓氢氧化钠使呈碱性,加热蒸馏,即可释放出氨气.
吸收与滴定:蒸馏所放出得氨,可用硼酸溶液进行吸收,待吸收完全后,再用盐酸标准溶液滴定,直至恢复溶液中原来氢离子浓度为