求解答！孕期长斑是什么情况？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2022-06-28 11:18 标签： 孕妇斑是什么原因造成的

我感觉现在市场上T4是不是多一些呀，T4也特别便宜，遗憾没有用过T1。

你这老是空载体，那你就多切一会儿呀，不知道你们实验室的程序，我酶切是2-3小时。

我感觉你的酶切那一步问题应该巨大。其他程序你没有详细说明，不好判断，我想你可以从下面几个方面去考虑:

1 酶切是不是没切开载体，酶连的片段通过什么获得的，同样是不是没切开(如果最后是从T载切下来胶回收的就无所谓了)(因为全是空载体，这一步应该问题大一些)

2 酶连是不是没连上，不用按说明书的程序，我用的T4说明书说连15 min，我从来都是过夜。

4 我们无缝克隆，无缝克隆特别简单，效率还高，就是贵一点，一个反应好像是 50块左右。

5 实在不行换个载体，(如果可以的话)

优先考虑酶切的问题。你这个序列太大了，确实不容易，我觉得无缝克隆会是非常好用的方式(保证切开），操作简单易懂，时间还短，你可以好好考虑考虑。

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