克隆技术的弊端_百度知道
克隆技术的弊端
克隆技术的弊克隆技术的弊端克隆技术的弊端克隆技术的弊端端
不正确！卵细胞核是完整的，也有可能形成完整个体如蜜蜂的雄蜂！但是如果用卵细胞克隆的对象只能是母的，而实际上克隆技术是针对所有动物的，因此用体细胞（取材容易），而单独的体细胞还无法表现出全能性，所以只能采取把它的细胞核移植到去核的卵母细胞中才能让它表现出全能性
其他类似问题
您可能关注的推广回答者：
等待您来回答
下载知道APP
随时随地咨询
出门在外也不愁克隆人真的能给人类带来好处吗_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
评价文档：
&&¥3.00
喜欢此文档的还喜欢
克隆人真的能给人类带来好处吗
克​隆​ ​利​弊​ ​伦​理
阅读已结束，如果下载本文需要使用
想免费下载本文？
把文档贴到Blog、BBS或个人站等：
普通尺寸(450*500pix)
较大尺寸(630*500pix)
你可能喜欢根据所提问题限定的内容写一篇意思连贯的短文，适当运用连词，好句
词数不少于100 1.What did you buy one day in a shoe
解答教师：时间： 15:49
根据所给材料，联系现实，写一篇文章，题目自拟，立意自 …… 除外），不少于800字
苍蝇不叮无缝的鸡蛋
世上没有免费的午餐
有容乃大，无欲则刚
天下熙熙，皆为 ……
解答教师：时间： 19:36
我们学习了<>和<>，兴亡是一个历史的话题，也是现实的话题，请以兴亡为话题，写一篇不少于800字的议论文，立意要深刻，要有文采和创新，举例要符合文章。
解答教师：时间： 11:02
请老师帮我找5篇80~100的英语暑假日记，，，，，注意是篇哦
解答教师：时间： 15:58
请以“专”为话题，写一篇不少于800字的文章。自定立意，自拟题目，自选文体，除诗歌外。
解答教师：时间： 11:35
请老师写一篇打油诗，要押韵，要以AABBA的形式。再用汉语翻译出来。谢谢
解答教师：时间： 22:19
当人们谈到蜗牛和乌龟，就会想到他们身上沉重的壳，请以前进路上的担子为题此而一篇文采飞扬的议论文。
解答教师：时间： 23:37
请老师启发我写一篇以“桥”为题的议论文，要中心论点和三个分论点，我也希望自己写出一个漂亮的开头，可才思枯竭。请老师给予指点
解答教师：时间： 22:11
如何以“动”为话题写一篇不少于800字的文章
解答教师：时间： 22:21
完成了大型歌剧<>下卷的创作.补学完了难度较大的 …… 上则材料,结合自己的感受和体会,写一篇800字左右的文章,文体不限,题目自拟.
这是一段材料.我提炼不出正确 ……
解答教师：时间： 20:36
共207页,2070行,只显示前50页
相关搜索：
&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&
学习遇到问题？作业不会做？
高二语文最受欢迎答疑老师
一周上升最快问题
高二语文课程推荐
高二语文试题推荐
100%专业教师服务
80%的问题10分钟解答
7x24小时客户服务
移动应用下载
Copyright (C) 2013 弘成答疑网
网站备案信息 京ICP证041171号
京公网安备编号：64查看: 714|回复: 13
怎样在两个克隆体之间切换？
去网上搜了一下，只知道一个大概，就是让远克一个没脑插的克隆体。但是怎样在有脑插和无脑插的克隆体之间来回切换呢？能不能描述地详细一点？
去一个可以安放远距克隆的空间站 安放一个克隆体 然后选择远克到克隆体 就OK了 或者找个有克隆舱的船 也可以 操作和空间站远克一样
你可以每24小时远克，挑你喜欢的克隆体传送过去就行8 y1 a2 \% [3 `& b+ Q' C
两个克隆体不能直接对换空间站" u0 S) O! S" q2 z6 N* s) I' }
24小时后 自由点
人物表单4 x) \4 r1 c- c8 d
# ~/ p0 ^+ a' r. E- O
再用你万能的右键
LZ，附件里写的很详细了; m9 s% S" M$ z6 R
本帖子中包含更多资源
才可以下载或查看，没有帐号？
赞一个!谢谢!
所有楼上的谢了，安放新的克隆体或者远客后原先的克隆体不会消失吗？主要是不明白这个
zglix 发表于
所有楼上的谢了，安放新的克隆体或者远客后原先的克隆体不会消失吗？主要是不明白这个 ...& D& u( J' k, ~% Q( o) u
不会消失，除非是该空间站所有军团或者你自己销毁，要不然一直都在的
zglix 发表于
12:14 . e! t4 j' o, [. `# c- ]
所有楼上的谢了，安放新的克隆体或者远客后原先的克隆体不会消失吗？主要是不明白这个 ...! L& Z1 k* ]+ q% j- u
原理就是你的意识在两个或几个身体直接进行切换，但身体还在的，除非你在有克隆体的空间站或是船上传送到这个克隆体上，那么原先的才会被销毁
但这种方法是如何保证脑插不消失呢？不是克隆体都无法保存脑插吗？假如我被捏蛋了，在克隆体里复活，那脑插怎么回来的？
zglix 发表于
但这种方法是如何保证脑插不消失呢？不是克隆体都无法保存脑插吗？假如我被捏蛋了，在克隆体里复活，那脑插 ...8 f( M* c. `&&y9 H
看清楚，是意识在切换，身体还在。也就是说，原先身体保持其物理存在，所以脑插是还在原先的身体上的，你可以再备一套脑插，插在新的身体上，这样两个身体上都有脑插了。
暴蛋是物理性毁灭，你蛋里的人身上的脑插自然没了。
Aki 发表于
12:30 5 M: ?* {0 s0 U7 Y/ z&&q
看清楚，是意识在切换，身体还在。也就是说，原先身体保持其物理存在，所以脑插是还在原先的身体上的，你 .... d+ o6 D. y% Q0 f
哦 好像明白了！谢谢。
就是说假设我备份了2个克隆（一个有脑插，一个没脑插），然后我使用没脑插的身体出去被爆了，然后会回到原先有脑插的那个克隆体里复活，这样就保存了脑插。
是不是忘记一个什么坚韧毅力学啥的技能了？
右键 传送。{:onion (45):}【专题讨论】克隆·表达专家门诊--解决您在基因克隆中遇到的疑难杂症(克隆,基因克隆,突变,重复性)
15:34:30&&&来源：&&&评论：&&
[【专题讨论】克隆·表达专家门诊--解决您在基因克隆中遇到的疑难杂症(克隆,基因克隆,突变,重复性)]
关键词:[克隆 突变 重复性 基因克隆 位点 基因 保真度]…
老师您好！我是一名一年级研究生，做基因克隆快半年了，克隆的是油菜G蛋白β亚基的基因，由于全基因组测序还没出来，所以只能根据同源性设计引物来进行PCR反应，只要自己能做出重复性即能说明克隆出了该基因。但是遇到了问题，做不出重复性，几乎每次都在同样的几个特定位点出现突变，突变的位点基本相同，但是突变碱基很随机，以至于重复性差，无法得到一个确切的模板。请问我怎么改进实验才能做出重复性呢？导师的意见基本是让我换酶，选取保真度比较高的，可是高保真的又比较难P一点。。。请您给我一些建议好吗？谢谢。。。从实验结果来看，很可能是重复出现突变的那几个特定位点结构比较复杂或GC含量较高，我个人的意见，也是建议您换一个保真度更高的酶，现在的高保真酶性能都有了提高，也不是都很难P，您可以参考一下这款酶 /?productShow/t1/2/id/214.html回复最近在做连接转化，一直都得到空载，没有重组子。我是PET-29a和PCR产物分别用EcoRI和XhoI双酶切，质粒电泳鉴定有切开，也分别做了单酶切，都可以的，PCR产物就看不出有没有切开，胶回收。然后用T4连接酶连接过夜，再转化到DH5a中，（先前转化到BL21中也没成功）。菌落PCR鉴定，很多有淡条带，反而杂带很亮。提质粒，质粒大小显示是空载，质粒PCR就没有目的带，杂带很亮。感受态做过转PET-29a的对照，没问题，T4连接酶也是新买的，线性质粒怎么转到细菌里的？现在不知道怎么办了，您能不能给点建议？万分感谢。电泳只是一个粗略判断目的片段长度的方法，若是通过引物设计增加双酶切位点的方法进行PCR，那么对PCR产物进行双酶切，酶切前后的片段长度也不会相差太多。通过电泳鉴定的意义也就不大了。另外，将目的基因直接连入PET之类的表达载体，在克隆表达实验中并不十分推荐，通常都会先将目的基因转入克隆载体，提质粒、PCR鉴定、测序分析后，再将克隆载体中的目的基因转入表达载体。回复你好 想问下，你们做菌落PCR用的是用哪个牌子与型号的tag酶呢？我们实验室菌落PCR做不出来， 先谢拉您之前使用相同的PCR条件扩增出来过质粒上的目的基因吗？若没有扩增过，建议您先进行一下这个实验，以验证PCR条件是否能够扩增目的基因。若扩增出来过，那么建议您降低菌落沾取量，另外PCR配好后不要甩管（这样会使菌落无法与充分反应），再进行一下实验。这种实验难度要求不高，一管mix酶就能很容易扩出来的。回复酵母表达一段40kd左右的蛋白，尝试很久未得到表达，WB有过一次但未重复出来，现在在换信号肽做，如果还不能很好表达的话？怎么办您是对上清进行的WB鉴定吗？不知道您是否对以下实验结果进行过验证：1.是否确定了目的基因是否转入酵母2.是否确定目的基因在酵母中进行了转录：可通过提取酵母RNA，再进行RT-PCR的方法进行验证3.是否确定目的基因在酵母中进行了表达：可以进行酵母破壁，提取蛋白后WB鉴定如果上述实验结果都进行了验证，可以再考虑更换信号肽。回复谢谢你的回复，我还想再问各问题。我准备做AP-PCR对细菌临床分离株的基因型进行分型，我看了大量资料说AP-PCR原理，我想问哈最后扩增出来的PCR产物怎么来看其结果呢？怎么通过看图表知道临床分离株有几种基因型呢？回复老师您好！最近在原核表达中经常遇到在诱导表达时，通过SDS-PAGE可以明显看到蛋白表达，但分子量却与预期相差较大，想问下这种情况下能否说明蛋白表达，引起这种现象的原因是什么？谢谢回复谢谢你的解答！我构建的克隆有好几个，同时做的转染，收样，然后WB检测表达，就只有两个一直是不表达，其它的克隆都能检测到表达。相当于有阳性对照，也可以证明转染是没有问题的，启动子都是CMV，已重复好几次，每次的结果都是一样，很困惑，因此，继续求解答。在这种情况下，需要考虑是否以下的情况导致了目的基因无法表达：1.现有载体的启动子及上游调控序列是否适合目的基因2.N端融合蛋白是否各有不同若有以上两种情况存在，建议您更换载体重新进行质粒构建回复老师您好！最近在原核表达中经常遇到在诱导表达时，通过SDS-PAGE可以明显看到蛋白表达，但分子量却与预期相差较大，想问下这种情况下能否说明蛋白表达，引起这种现象的原因是什么？谢谢能把电泳图发给我看一下吗？回复您之前使用相同的PCR条件扩增出来过质粒上的目的基因吗？若没有扩增过，建议您先进行一下这个实验，以验证PCR条件是否能够扩增目的基因。若扩增出来过，那么建议您降低菌落沾取量，另外PCR试剂配好后不要甩管（这样会使菌落无法与试剂充分反应），再进行一下实验。这种实验难度要求不高，一管mix酶就能很容易扩出来的。相同的PCR条件可以扩增出来质粒上的目的基因。可能是菌体量太多，同时PCR试剂配好后甩管了。谢谢提醒。我再试试回复请问 什么是转录融合 什么是翻译融合呢？我想连接PNZ8149这个载体，NICE& pNZ8149 Lactococcus lactis expression vector, food grade, NcoI site请问我一定要利用NcoI 这个酶切位点吗？还是也可以利用别的 谢谢转录融合，你可以这样理解，Promoter..........RBS。。。ATG....gene 1....TAA。。。。RBS .....ATG... gene2....TAA表达出来的产物就是转录融合。翻译融合，Promoter..........RBS。。。ATG.融合蛋白+ATG... gene2....TAA.pNZ8149 在Nco1位点上游有个RBS，你的基因需要插入到ATG之后，形成三联体回复这需要根据您的需要进行选择，一般来说基因克隆实验重点关注以下几个方面：1.阳性克隆筛选方式：有通过蓝白斑筛选的T载体；也有在载体携带的自杀基因多克隆位点中插入目的基因后只生长阳性克隆的零背景载体(无需蓝白斑筛选)2.连接效率：需要蓝白斑筛选的载体，一般阳性率在65%以上；无需蓝白斑筛选的载体，阳性率能够达到95%以上。随着克隆片段长度的增加，载体与片段的碰撞几率降低，连接率会有一定的下降。3.克隆连接时间：普通T载体的连接时间为16度1-2小时/4度过夜；快速连接载体的连接时间可以最短达到室温5分钟。连接效率及时长和T4连接酶有关。4.连接片段种类:普通T载体只能够连接普通Taq酶扩增的粘末端片段，若连接高保真酶扩增的平末端片段，需要进行加A反应；另外也有能够直接连接平末端片段的载体，搭配高保真酶扩增的PCR产物，效率更高，这种载体若需要连接粘末端，也有平端化酶能够进行搭配明白了，非常感谢回复您好！我构建2个基因到真核表达载体pcDNA3.1上，大小分别是snrpd3 381bp，ppm1b 1173bp带DDK标签，经酶切，测序鉴定正确后，瞬时转染293FT细胞，然后做WB，用DDK的抗体检测，结果两个蛋白都偏大近一倍，snrpd3蛋白在30kd，ppm1b在100多kd，不知道问题出在哪里？帮忙分析一下。小弟先行谢过了！回复能把电泳图发给我看一下吗？这个我还真没有，是别人做的，目的蛋白预期在72kD左右，但SDS-PAGE结果却在95左右，这种情况的原因是什么呢？回复使用大肠杆菌(Escherichia coli)表达一个质，分子量约为66kD。载体为pET 30a，目前测序结果正确，但是不表达。改变了若干条件，包括表达菌(BL21,ER2566, condon plus)，温度和时间（37度3h ，25度12H，10度24h），IPTG浓度，OD值（0.6-0.8）等。请教各位，有什么好办法吗？想再试一下37度6小时有用吗？回复老师您好！最近在原核表达中经常遇到在诱导表达时，通过SDS-PAGE可以明显看到蛋白表达，但分子量却与预期相差较大，想问下这种情况下能否说明蛋白表达，引起这种现象的原因是什么？谢谢这可能与该蛋白具有糖基化等修饰有关系，建议您查找一下该蛋白的详细资料，以确定是否有某种被修饰的可能回复使用大肠杆菌(Escherichia coli)表达一个质，分子量约为66kD。载体为pET 30a，目前测序结果正确，但是不表达。改变了若干条件，包括表达菌(BL21,ER2566, condon plus)，温度和时间（37度3h ，25度12H，10度24h），IPTG浓度，OD值（0.6-0.8）等。请教各位，有什么好办法吗？想再试一下37度6小时有用吗？1.该蛋白是什么蛋白呢？，糖蛋白，酶，结构蛋白这几大类，由于自身的亲水和疏水性不同，采取的表达方式会不同2.收集文献中该植物蛋白在各种表达系统中的表达情况，特别是有无原核表达的情况。如果没有原核表达的报道，那么说明这个蛋白也许在原核表达中很困难。这时可以将pet30a（his标签）换成(GST,MBP等大的融合蛋白)；或通过基因合成，将这个蛋白的基因变成大肠杆菌(Escherichia coli)喜爱的密码子。3.没必要反复尝试诱导条件，如果标准条件不表达，换各种诱导条件通常没用。回复这可能与该蛋白具有糖基化等修饰有关系，建议您查找一下该蛋白的详细资料，以确定是否有某种被修饰的可能我用的是原核表达系统，应该不会出现糖基化等修饰问题，而且我SDS-PAGE的结果比实际分子量小很多，还有其他可能的原因吗？回复求助！老师您好，请问我构建了一个载体，目的基因长度为228bp, 载体使用的是pET-3c长度大概4600多，请问如何计算表达出蛋白质kDa的理论值呢？回复我用的是原核表达系统，应该不会出现糖基化等修饰问题，而且我SDS-PAGE的结果比实际分子量小很多，还有其他可能的原因吗？由于原核纯化很方便，建议您把这个蛋白纯化出来，分析其功能是否与目标蛋白相同。 如果功能相同而分子量比预期小的情况，常常可能是：1. 蛋白质不稳定，出现了降解。2. 构建载体过程中有没用突变，导致了转录的提前终止（这个可能性比较小）。回复最近扩增一个大约5000 bp的基因并对其进行突变（中间有一个氨基酸要做突变）。于是采用overlap PCR的方法先扩增前半基因（约2000 bp）和后半基因（约3000 bp），同时也扩增全长（5000 bp)，奇怪的是只有后半基因清晰的扩增出来了，前半基因和全长基因改了几次条件都没扩增出来？请高手指教。回复
我也求助下，我最近在做转染，用的是人白血病HL-60细胞，为悬浮细胞。转染试剂是qiagen 的Attractene_Transfection_Reagent，看说明书是说血清的存在与否对转染无影响，因此我用的是含血清的1640进行转染，用的是24孔板进行转染的，分了目的基因组，阴性质粒组和未处理的细胞组，质粒是由invitrogen公司进行构建的，过表达的质粒，带有EGFP基因，转染24小时后观察荧光，发现孔板里均无荧光出现，转染操作过程无误，转染图片如下，求解释下出现该情况是什么原因的，想要进行后续转染的话，该如何改进？回复我也求助下，我最近在做转染，用的是人白血病HL-60细胞，为悬浮细胞。转染试剂是qiagen 的Attractene_Transfection_Reagent，看说明书是说血清的存在与否对转染无影响，因此我用的是含血清的1640进行转染，用的是24孔板进行转染的，分了目的基因组，阴性质粒组和未处理的细胞组，质粒是由invitrogen公司进行构建的，过表达的质粒，带有EGFP基因，转染24小时后观察荧光，发现孔板里均无荧光出现，转染操作过程无误，转染图片如下，求解释下出现该情况是什么原因的，想要进行后续转染的话，该如何改进？在首次转染的时候，建议先使用只表达GFP蛋白的阳性对照质粒转染细胞，以确定细胞对转染试剂的耐受程度及转染成功率。若荧光能够正常表达，再进行目的基因的转染。回复最近扩增一个大约5000 bp的基因并对其进行突变（中间有一个氨基酸要做突变）。于是采用overlap PCR的方法先扩增前半基因（约2000 bp）和后半基因（约3000 bp），同时也扩增全长（5000 bp)，奇怪的是只有后半基因清晰的扩增出来了，前半基因和全长基因改了几次条件都没扩增出来？请高手指教。主要的可能性是PCR条件不合适，可能有两方面原因导致：1、扩增的片段GC含量太高，所以建议用扩增GC片段的Taq酶，或者在PCR体系中加入GC Buffer；2、引物设计的不合适。我不知道前半段的PCR电泳图是什么样的，如果是非特异性扩增，可以考虑降落PCR或者两步法扩增；如果是没有任何产物，那就只能重新设计引物了。回复您好，换了批cDNA 模板，现在前半段和后半段都扩增出来了，在做overlap PCR的时候（体系中加入GC buffer），先不加两端引物跑10个循环，再加入引物跑20个循环，发现在5000 bp的位置没有条带，请问overlap PCR的时候应该注意什么问题？谢谢啦。回复主要的可能性是PCR条件不合适，可能有两方面原因导致：1、扩增的片段GC含量太高，所以建议用扩增GC片段的Taq酶，或者在PCR体系中加入GC Buffer；2、引物设计的不合适。我不知道前半段的PCR电泳图是什么样的，如果是非特异性扩增，可以考虑降落PCR或者两步法扩增；如果是没有任何产物，那就只能重新设计引物了。您好，换了批cDNA 模板，现在前半段和后半段都扩增出来了，在做overlap PCR的时候（体系中加入GC buffer），先不加两端引物跑10个循环，再加入引物跑20个循环，发现在5000 bp的位置没有条带，请问overlap PCR的时候应该注意什么问题？谢谢啦。回复我转染的时候用了只表达GFP的质粒（即阴性对照质粒，不含目的基因）来转染，照的图片跟上图相似。没有发现强荧光回复我转染的时候用了只表达GFP的质粒（即阴性对照质粒，不含目的基因）来转染，照的图片跟上图相似。没有发现强荧光您做的这个属于是阳性对照。阴性对照是只加入转染试剂，不加入质粒的试验组，主要用来检测试剂是否污染。若阳性对照没有表达，说明质粒未导入细胞中。需要先摸索转染条件，看看转染试剂的量、加入质粒的量、转染时间长短、诱导表达时间长短、诱导条件等是否对细胞损伤过大/诱导时间过短/诱导条件不符，导致荧光无法表达。另外也可以尝试使用无血清培养基进行重复试验，在阳性对照组实现表达后，再进行目的质粒转染。回复您好，换了批cDNA 模板，现在前半段和后半段都扩增出来了，在做overlap PCR的时候（体系中加入GC buffer），先不加两端引物跑10个循环，再加入引物跑20个循环，发现在5000 bp的位置没有条带，请问overlap PCR的时候应该注意什么问题？谢谢啦。以我个人的经验看应该有如下注意事项：1.两段DNA片段Overlap的部分应该不少于15个碱基；2.鉴于您扩增的片段比较长，应该考虑用扩增长片段的DNA/?productShow/t1/2/id/214.html；3.如果片段GC含量过高，应加入GC Buffer；4.不用先不加两端引物跑10个循环，再加入引物跑20个循环。可以直接加入两段片段和上下游引物进行30-35个循环的PCR；5.两段片段的量不应加入过高，如果是第一轮PCR产物的话，应稀释50倍然后各取1 ?l当作模板；如果是纯化后的产物，加入的量在1-10 ng左右为宜；6.采取上述手段仍无产物，可能是PCR的退火温度不适宜。建议通过梯度PCR摸索条件或进行降落PCR。回复由于原核纯化很方便，建议您把这个蛋白纯化出来，分析其功能是否与目标蛋白相同。 如果功能相同而分子量比预期小的情况，常常可能是：1. 蛋白质不稳定，出现了降解。2. 构建载体过程中有没用突变，导致了转录的提前终止（这个可能性比较小）。不至于吧，降解应该不至于，要是降解了应该能看出来，可是这个蛋白的大小在His标签一下，而且表达量比His标签还大！回复给位专家好，小弟最近在做一个蛋白从N端缺失突变，但是一直没拿到蛋白，用的是PC3.1表达载体，转染293t细胞，设计是从N端50aa，100aa，150aa 缺失突变，还有就是全长CDS的，结果是 CDS表达出来了，但是50aa，100aa，150aa 缺失突变的 都没出来，我在ATG前加了kozak序列GCCACC， 并且ATG后面是MYC蛋白的标签，第一个碱基也是G，满足GCCACC ATG G 的要求，但是就是不知道为什么拿不到缺失突变的蛋白。**高人指点！不甚感谢！！！回复我在做克隆的时候出现单引物扩增 请问如何避免
将本文分享到下面的网站：
相关热词搜索：
[【专题讨论】克隆·表达专家门诊--解决您在基因克隆中遇到的疑难杂症(克隆,基因克隆,突变,重复性)]延伸阅读：
频道总排行
频道本月排行