IFA试验无水乙醇固定撸管会不会影响身高破坏蛋白

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【求助】怎样固定悬浮细胞?
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大家好!我养的是悬浮细胞HL-60。做共聚焦要漂洗很多次,每洗一次就减少了很多细胞,结果很难找出一个有3,4个以上细胞的图片来,请问大家有什么办法固定悬浮细胞啊?谢谢啊!!!
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zwy200899 大家好!我养的是悬浮细胞HL-60。做共聚焦要漂洗很多次,每洗一次就减少了很多细胞,结果很难找出一个有3,4个以上细胞的图片来,请问大家有什么办法固定悬浮细胞啊?谢谢啊!!!1、悬浮细胞离心收集后,用适当培养基或者Hanks或者PBS稀释到合适细胞浓度。2、准备细胞载片或者国产的10孔抗原片,洗净后无水乙醇浸泡,用前取出晾干。3、在400ml甘油中加入一个鸡蛋的蛋清,混匀。滴一滴于手掌边缘,将载片滴加细胞一面快速抹过,使载片上均匀涂上一层薄的蛋清/甘油。抹过要快,不要太厚,否则滴上细胞后不宜干。加入蛋清的原因是在玻璃表面增加一个蛋清涂层,这样细胞容易结合到片子上。甘油则可降低背景。(在400ml甘油中+1个鸡蛋的蛋清混匀后可以在4度的冰箱保存的,如果整个实验用量较少的话可以按照20:1(甘油:鸡蛋清)的比例来配制哈。这个是现在实验室使用的一种方法。)4、细胞滴片,置于37摄氏度培养箱约30分钟晾干,如未干,可用吹风机吹干。在酒精灯火焰上过几下,加强固定效果。5、用甲醇/乙醇(V:V=1:1)固定约30分钟。晾干后用于IFA检测或者-20度保存。
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关于丁香园无水乙醇改性的α半水硫酸钙人工骨材料的研制及其相关生物学实验研究α,生物,材料..
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无水乙醇改性的α半水硫酸钙人工骨材料的研制及其相关生物学实验研究
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JSRV衣壳蛋白单克隆抗体的制备及免疫学鉴定
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PTDFoxp3融合蛋白对小鼠类风湿性关节炎模型治疗作用的初步研究
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