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【报告】实验6家兔动脉血压的神经与体液调节 PDF
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【实验报告】家兔动脉血压的神经体液调节 影响尿生成的因素
生​理​实​验​报​告​样​例​
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.​ ​间​接​观​察​心​血​管​活​动​的​神​经​体​液​性​调​节​
​
.​ ​学​习​哺​乳​动​物​动​脉​血​压​的​直​接​测​定​方​法​
​
.​ ​学​习​用​膀​胱​插​管​法​记​录​尿​量​的​方​法​
​
.​ ​观​察​与​分​析​几​种​因​素​对​尿​生​成​的​影​响
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心血管的神经体液调节一直是医学研究的焦点。临床许多疾病的发生、发展都直接或间接地与心血管的调节功能密切相关。因此，我们此次研究是为了更好地理解心血管的神经体液以及药物对它的影响，便于我们在将来的学习中更好地掌握它们的机理，了解临床用药方面的选择问题。
（一）蛙类迷走交感干对心脏的作用，它能让我们了解蛙类或蟾蜍心脏的神经支配；观察迷走交感干对心脏活动的影响。
　（二）家兔动脉血压的神经体液调节及药物影响。它能阐述迷走、交感、减压神经对心脏血压的分别作用；肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素及其α、β的肾上腺素能受体拮抗剂对血压的影响；以及血管容量在血压变化中的作用，是一个综合型实验。
课题研究人员：
&& 组长：梁明强
&& 组员：廉长红、石蕾、黄艳、朱华芳
　　心血管活动的神经体液调节及药物影响
　　通过观察神经、体液因素及药物对动脉血压的作用及影响加深理解动脉血压作为心血管功能活动的综合指标及其相对恒定的调节原理和重要意义。正常心血管的活动在神经体液因素的调节控制下，保持相对稳定，动脉血压相对恒定。因而通过改变神经体液因素或施加药物观察动脉血压的变化，以间接反映诸因素对心血管功能活动的调节及影响。动脉血压的相对恒定对保持各组织、器官正常的血液供应个物质等代谢是极其重要的，动脉血压剧烈变化会影响各组织器官的正常活动。当动脉血压大大下降时，会造成组织器官的血供严重不足，功能障碍，甚至危及生命，此时需要及时救治。
【原理和目的】
　　心血管活动是在神经体液因素调节下进行的。各种内外感受器的传人信息经过心血管中许的整合处理，调节交感和副交感的紧张性活动而改变心输出量和外周阻力，使血压得到调节。心脏的交感神经兴奋时，其末梢释放去甲肾上腺素（NE），作用于心肌细胞膜上的β1受体，通过正性变力、变时和变传导作用，引起心率加快、心肌收缩力增强、心输出量增加，血压升高；支配心脏的迷走神经的兴奋时，其末梢释放乙酰胆碱（Ach）激活心肌细胞膜上的M受体，通过负性变性、变力、变时和变传导作用，引起心率减慢，心房肌收缩力减弱，心输出量减少，血压降低。肾上腺素和去甲肾上腺素是调节心血管活动的两种主要体液因素。肾上腺素对α和β1受体都有激活作用，可使心搏加快，加强，心输出量增加；它对心血管活动的作用要看哪种受体占优势，去甲肾上腺素主要激活α受体，引起外周阻力增高而升高血压。
&&& 蟾蜍或蛙的心脏受迷走神经和颈交感神经混合成的迷走交感干支配。在正常情况下，由于迷走交感的兴奋性较高，因而低频、低强度刺激迷走交感干时，多产生迷走效应；高频、高强度刺激时，易产生交感效应；中等频率和强度的刺激，往往表现为先迷走后交感的双重效应。若在心脏处滴加阿托品，可封闭迷走神经对心脏对心脏的影响，而表现单纯交感效应。
&&& 本实验采用家兔颈动脉插管法，通过切断、刺激支配心的神经，以及给药或体液因素等方法，观察了解动脉血压的变化。并通过观察蛙的迷走交感干对心脏活动的的单独作用。总之，让我们更好理解神经体液的调节及临床用药的选择。
&&& 实验（一）& 蛙类迷走交感干对心脏的作用
【实验对象】
　　蟾蜍或蛙。
【实验器材和药品】
　　常用手术器械、蛙板、蛙心夹、张力换能器、保护电极、刺激器、任氏液、玻璃分针、1%阿托品。
【实验步骤】
　　1.取蟾蜍或蛙一只，捣毁脑脊髓后背位固定在蛙板上。在一册下颌角与前肢之间剪开皮肤，分离深部的结缔组织后，可以看到一条长型的提肩胛，切断此肌即看到一血管神经束，其中含皮动脉、颈静脉和迷走交感干，该神经中包含出入延髓的迷走神经和以第四交感神经节发出的交感神经。分开血管神经束，用玻璃分针提取迷走神经干，穿线备用。
　　2.自剑突剪开胸骨柄，暴露心脏，剪开心包膜，用蛙心夹夹住心尖，连接张力换能器。保护电极仔细地安放在迷走交感干上。
　　3、打开张力换能器电脑软件，描记一段正常的心搏曲线，然后用连续脉冲刺激交感神经干10秒，观察和记录心搏活动的变化。用不同频率强度的刺激观察心搏停止的迷走神经效应。
　　4.在颈静脉窦和心房部位加1%阿托品溶液2―3滴。5分钟后再用原刺激强度刺激迷走交感干，观察并记录心博活动的变化。这时由于阿托品封闭迷走神经对心脏的作用，迷走效应不会出现，而表现单纯交感效应。
【注意事项】
　　1.神经周围的组织需要用棉球擦干，以防短路或电流扩散。
　　2.每次刺激的时间不能过长，两次刺激之间必须间隔3－5分钟，以防损伤神经。
　　3.需用任氏液湿润心脏和神经，以防组织干燥而失去生理机能。
　　实验（二） 家兔动脉血压的神经体液及药物作用
【实验对象】
【实验器材和药品】
　　兔手术台、生物信号采集处理系统、固定用绳、哺乳类动物手术器械、纱布、血压换能器、动脉插管、股动脉插管、动脉夹、三通管、万能支台、双凹夹、保护电极、刺激电极、头皮针、注射器（1ml、5ml、20ml）、有色棉线、20%氨基甲酸乙酯（乌拉坦）、肝素（1000单位）、1/10000去甲肾上腺素、1/10000肾上腺素、生理盐水、1/10000异丙肾上腺素、0.1%普萘洛尔、酚妥拉明、1/10000乙酰胆碱、阿托品、5%柠檬酸钠。
【实验步骤】
　　1.家兔称重、麻醉与固定：
　　用20%氨基甲酸乙酯5ml/kg从家兔耳缘静脉缓慢注入，（前2/3快速，后1/3缓慢），动物麻醉的标志为四肢松软，角膜反射消失。麻醉后用绳子将动物背位固定于手术台上。
　　2.动物手术：
　　剪去颈部皮毛（从甲状软骨到胸骨上缘间），在颈部沿正中线切开皮肤约6－7cm，用止血钳分离皮下组织和肌肉，暴露气管。用两把止血钳分别夹住气管两侧的皮肤和肌肉边缘，并将其拉向两侧，即可见到气管两侧与气管平行的左、右颈总动脉及与其平相伴而行的一束神经，这束神经中包括迷走神经、交感神经和减压神经。由于神经包绕于动脉鞘中，所以应小心分离颈动脉鞘，仔细辨认三条神经。迷走神经最粗，交感神经较细，减压神经最细且常与交感神经紧贴在一起，一般先分离颈总动脉与迷走神经，然后分离减压神经与交感神经。每条神经各分离出2－3cm，并在各种神经下穿一条不同颜色的细线以便区别和使用。右侧颈总动脉下穿一条线备用。向耳缘注入肝素以抗凝（1ml/kg) 。
　　3.动脉插管：
　　插管前先用肝素生理盐水注满插管，检查插管有无破裂，插管尖端是否光滑。并用胶管把插管连接到换能器上的三通管上备用（注意管内不应含有气泡），将左颈总动脉的远心端结扎。用动脉夹夹住动脉的近心端，结扎处与动脉夹之间的距离至少要在2cm左右。将近心端线打一松结，用眼科剪刀在动脉上做一斜形方向切口，约切开管径的一半，然后将动脉插管向心脏方向插入血管，将上述打松结的线扎紧，插管尖嘴部再在插管中部打结固定。插好后就保持插管与动脉方向一致，以防插管刺破血管。手术部位用温热的盐水纱布覆盖。
　　4.实验装置连接：
　　将血压换能器固定在万能支台上，其输出端连接到计算机通道上。打开换能器三通上的开关，除去动脉夹启动系统，选择“动物动脉血压测定”,开始实验观察。
【观察项目】
　　1.描记正常的血压曲线： 动脉血压随心室的收缩和舒张而变化。心室收缩时血压上升，心室舒张时血压下降，这种血压随心动周期波动称为心搏波（一级波），与心率一致。此外，动脉血压随呼吸而变化，吸气时血压先下降后上升，呼气时先上升后下降，这种波叫呼吸波（二级波），与呼吸节律一致。
　　2. 夹闭右侧颈总动脉：用动脉夹夹闭右侧颈总动脉15秒，观察血压有何变化。
　　3. 牵拉颈总动脉：手持左侧总动脉远心端的结扎线，向心脏方向轻轻拉紧，然后有节奏反复牵拉，持续5－10秒，观察血压变化。
　　4. 刺激减压神经：用保护电极刺激右侧完整的减压神经，观察血压变化，然后用两条线在神经中部分别结扎并在两结扎间将神经剪段，用上述同样的电流分别刺激切断的中枢端,与末梢端（向心端），观察血压变化。
　　5. 刺激迷走神经：结扎右侧迷走神经，与结扎线头侧将神经剪断，然后用保护电极刺激末梢端,观察血压变化。
　　6. 刺激交感神经：观察两耳血管网的密度及血管扩张程度，再结扎右侧交感神经，并与结扎线末梢端剪断，稍待片刻后再观察两耳血管网的密度及血管扩张程度的变化，然后用上述电流刺激交感神经头侧端，同时观察两耳血管的密度及血管扩张程度变化（尤其右侧）。
　　7. 耳缘注入肾上腺素：从耳缘静脉注入1：10000的肾上腺素0.3毫升，观察血压和两耳扩张程度的变化。
　　8. 耳缘注入去甲肾上腺素：从耳缘静脉注如入1：10000 去甲肾上腺素0.3毫升，观察血压变化。
　　9. 耳缘注入异丙肾上腺素：从耳缘静脉注入1：10000 异丙肾上腺素0.3毫升，观察血压变化。
　　10. 耳缘注入酚妥拉明：从耳缘静脉注入酚妥拉明，用药2－5分种后重复上述7、8、9实验，观察血压变化。
　　11. 耳缘注入普萘洛尔：从耳缘静脉注入普萘洛尔，用药2－5分种后重复上述7、8、9实验，观察血压变化。
　　12.耳缘注入Ach和阿托品：从耳缘注入1:10000的Ach 0.3ml,观察血压变化。注入阿托品2－5 分钟后，再注入0.3ml Ach,观察血压变化。
　　13.股动脉插管和放血：
　　在后肢腹股沟切开皮肤3－5 cm，用血管钳钝性分离皮下组织及筋膜，可看到股神经，股静脉和股动脉，股动脉的位置在中间偏后，恰被股神经和股静脉所遮盖。小心分离动脉约2－3 cm，穿线备用。用两个动脉夹分别夹闭末梢端和近心端，在两个动脉夹之间剪开一斜口，向近心端方向插入股动脉插管，并结扎固定；插管所边导的末端置于量怀中，以防止血液凝固，可在量怀中加入少许5%柠檬酸钠或肝素。待准备就绪，松开近心端动脉夹（不要移去）开始放血，同时密切观察血压变化，当血压下降至原水平的50%上下或出现休克现象，即停止放血，同时记录，观察血压等变化。随即以较快的速度从耳缘静脉输入所收集的血液并进行同样的观察。
【注意事项】
　　1.麻醉过程要熟练掌握，不可过量。
　　2.整个实验过程中，均需保持动脉插管与动脉平行，以免刺破动脉。
　　3.每项观察都待血压平稳后，才能再次进行。
　　4.每次注射药物之后，立即用一注射器静脉注入0.5 ml生理盐水，以防药液残留在针头及局部静脉中影响下一种药物作用。
参考文献：
　　1.辽宁医学院，《机能实验教材》。
　　2.人民卫生出版社，第六版《生理学》教材。　　3.人民卫生出版社，第六版《药理学》教材。
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