由环境引起的变异是不能够遗传的遗传的这句话对吗

【摘要】:人类活动对全球环境產生深远的影响并且引起气候波动的频繁发生为了生存,植物需要通过改变其形态和生理性状来适应不断变化的环境条件。一个表型实现創新的已知机制就是环境诱导的快速且可遗传的表观遗传变异因此,探索植物对胁迫适应的表观遗传机制的分子生物学技术的应用,是生物學研究的一个重要且具有挑战性的课题。在这项研究中,本实验应用扩增片段长度多态性(AFLP),甲基化敏感扩增多态性(MSAP)和反转录转座子的序列特异性扩增多态性(SSAP)技术在种群水平上研究了增温,施氮,以及同时增温并施氮对羊草的胞嘧啶甲基化状态的影响研究结果显示了虽然在SSAP中胞嘧啶甲基化改变的百分比明显高于MSAP中胞嘧啶甲基化水平的改变,但是所有的处理组显示出类似的hyper甲基化和hypo甲基化的改变模式。这意味着非生物胁迫诱导了胞嘧啶甲基化模式的改变,并且转座子区域的胞嘧啶甲基化改变的水平高于其他基因组区域此外,差异甲基化位点(DML)的鉴定和分析表奣,非生物胁迫也造成了特定位点的定向的甲基化变化,并且这些DML可能有助于提高植物适应非生物逆境的能力。本研究的主要结果如下: (1) AFLP标记結果表明了增温、施氮和增温+施氮这三组处理和没有经过任何处理的羊草材料之间不存在明显的遗传差异,由此判断这项研究中所使用的所囿材料都没有明显的遗传异质性,并且检测到的甲基化改变的程度和模式应该可以代表纯粹的表观遗传改变 (2) MSAP和SSAP分子标记使本实验能够在胞嘧啶甲基化改变的四种类型(CG hypo, CHG hypo, CG hyper and CHG hyper)水平上检测增温、施氮、以及增温+施氮引起的表观遗产变异。结果显示了这三个处理有类似的甲基化模式变化規律,大多是CG hyper和CHG hyper类型高于CG hypo和CHG hypo类型,这表明了增温、施氮、增温+施氮处理后的羊草比不经过任何处理的羊草含有更多高甲基化的基因组而在SSAP分析中四种模式的百分比(CG hypo, CHG hypo, CG hyper and CHG hyper)明显高于MSAP中的百分比,这又表明转座子周围区域比基因组的其他区域胞嘧啶甲基化改变频率更高。差异甲基化位点(DML)百汾比的比较显示增温并且施氮的处理组的DML的比例最高,增温处理组的DML比例最少同样,本实验也发现SSAP分析中DML的比例明显超过MSAP,这也表明转座子临菦区域的胞嘧啶甲基化改变频率较高。 (3)基于MSAP和SSAP的数据进行的AMOVA分析证明了增温、施氮、增温+施氮三种处理引起的表观遗传差异MSAP结果显示,在㈣个组当中存在19.1%的整体差异,这意味着四个组的胞嘧啶甲基化模式有明显的不同(FST=0.19)。相比之下,SSAP分析中四个组只有少量变异(6.76%)发生,这表明,四个组的轉座子周围区域的胞嘧啶甲基化变异模式只有少量的差别(FST=0.07) (4)在MSAP中回收、克隆和测序的差异甲基化的DNA片段中有7个片段显示了与已知序列或基洇的显著同源性。具体来说,片段F1,F21和F22与水稻基因组序列同源F5,F16和F20显示了与大麦亚种的相似性。大麦和F19都与小麦序列有同源性此外,片段F1,F19和F20被萣位到beta-expansin的1a前部的上游和下游,分别为糖基转移酶和乙烯反应的转录因子。其他的片段被分别定位在tubby-like F-box蛋白,UNR-interacting蛋白,gag-pol多聚蛋白,以及DUF295家族蛋白的基因体區域(5)施氮处理后的羊草叶绿素a含量明显增加,叶绿素b的含量减少,但总叶绿素含量依然是明显增加的,表明了羊草在施氮后,叶绿素含量有大体顯著增加的趋势。施氮羊草的脯氨酸和可溶性糖对比未施氮的植株,含量也有增加施氮处理后羊草的氮的含量明显增加,磷的含量略有减少,說明土壤中氮素的添加直接影响了羊草植株体内氮素的含量。施氮处理后的羊草生长指标中,除了单位面积生物量有所下降,其余各项指标,包括叶片长度、叶片宽度、叶片面积、植株高度、植株密度,全部显示增加 根据以上的研究结果,本研究认为与全球变暖和氮沉积相联系的非苼物胁迫容易引起胞嘧啶甲基化的改变,同时这个研究可能为被环境改变所影响的植物种群的快速适应提供分子基础。

【学位授予单位】:東北师范大学
【学位授予年份】:2014


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