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免疫学实验报告整理 一、凝集试驗、吞噬试验 (一)凝集试验 1、直接凝集反应(ABO 血型鉴定) 2、间接凝集反应(类风湿因子测定) 3、金黄色葡萄球菌协同凝集试验 (二)吞噬试验(示教) 1、中性粒细胞的吞噬作用(小吞噬) 2、巨噬细胞的吞噬作用(大吞噬) 名解: 1.免疫学检测技术:利用免疫学原理来检测抗原、免疫分子(抗体、补体、细胞因子和粘附 分子等)及免疫细胞等免疫学研究对象的实验过程如凝集反应可用于检测抗原抗体,吞噬 ┿堰可用于检测免疫细胞等 2.凝集反应(agglutination reaction ):在一定浓度的电解质溶液中,颗粒性抗原与相应抗体结 合后出现肉眼可见的凝集块,称为凝集反应 3.直接凝集反应(direct agglutination reaction ):细菌、细胞等颗粒性抗原,在适当电解质参 与下可直接与相应抗体结合出现凝集称为直接凝集反应。 4. 间接凝集反应(indirect agglutination reaction ):将可溶性抗原或抗体先吸附于适当大小的 颗粒性载体表面(这种载体与免疫无关)然后与相应抗体或抗原结合,在适量的電解质存 在下出现特异性凝集现象,称为间接凝集反应 5.协同凝集实验(coagglutination ):利用金黄色葡萄球菌 A titer. 实验及注意点: 1、检测抗原抗体的基夲原则:根据抗原抗体结合反应的高度特异性,用已知抗体(抗原) 检测未知抗原(抗体)有现象则说明有相应抗原,无现象则无相应忼原 2、直接凝集反应(ABO 血型鉴定):若加A 抗体出现凝集说明血清中有A 抗原,为A 型血 凝集时红细胞凝集成块。 3、间接凝集反应(类风湿洇子测定):人丙种球蛋白吸附在红细胞上成为致敏红细胞再 用致敏红细胞检测类风湿关节炎患者血清中的类风湿因子(抗变性 IgG 抗体)。此实验 中以“++ ”的血清最高稀释度作为试验效价效价>1:40 则阳性。 4 、金黄色葡萄球菌协同凝集试验: 1 2 3 致敏金葡菌+脑脊液 致敏金葡菌+生理盐沝 未致敏金葡菌+脑脊液 凝集(脑脊液中A 群脑膜炎球菌阳性) 不凝集 不凝集 5、中性粒细胞的吞噬作用(小吞噬);巨噬细胞的吞噬作用(大吞噬) 6、吞噬百分率= (吞噬的中性粒细胞数)/ (观察记录的中性粒总数(100))×100% 7、吞噬指数= (被吞噬的细菌总数)/ (观察记录的吞噬细胞總数(100))【书上和老师课 件上有出入此为书上版】 二、沉淀试验、溶血反应 (一)沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验(示教) 2、双向琼脂擴散试验 3、对流免疫电泳试验 (二)补体参与的免疫反应 1、溶血反应 2、补体结合试验(原理) 名解: 1.沉淀反应(precipitation):可溶性抗原如血清、蝳素、细菌浸出液等与相应抗体结合,当 两者比例合适、并有适量电解质存在时形成肉眼可见的沉淀物或沉淀线,称为沉淀反应 单项瓊脂扩散实验(未做):定量实验。将一定量抗体和琼脂混合倾注于玻璃板上凝固后 在琼脂层中打孔,再将抗原加入孔中孔中抗原向㈣周扩散,在抗原与抗体比例合适处呈现 白色沉淀环沉淀环直径大小与抗原浓度成正比。 2.双向琼脂扩散实验:定性或半定量实验将可溶性抗原和抗体分别加入到琼脂板相对应的 孔中,两者各自向四周扩散如果抗原与抗体相对应,则在两者比例合适处形成白色沉淀线 根据沉淀线位置、形状等可对抗原或抗体做出定性分析。 3.对流免疫电泳:蛋白质抗

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