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近日有客户就样品的收集以及保存的问题来电,希望我司能给出建议正确的收集和保存也是保证实验成功的重要基础。 1)-----操作过程中避免任何细胞刺激使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2)血浆-----、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测1000×g离心30分钟去除颗粒。 3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物 4)组织匀浆-----将组织加入适量shengli盐水捣碎。1000×g离心10分钟取上清液 5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血如果血清中大量颗粒,检测前先离心或不要在37℃或更高的温度解冻。进口elisa盒应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻 ELISA试剂盒怎么用操作步骤: 1)使用前,将所有试剂充分混匀不偠使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡产生加样上的误差。 2)根据待测样品数量加上的数量决定所需的板条数每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内 3)加叺稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的盖上膜板,轻轻振荡混匀37℃温育1小时。 4)甩去孔內液体每孔加满洗涤液,振荡30秒甩去洗涤液,用吸水纸拍干重复此操作3次。如果用洗板机洗涤洗涤次数增加一次。 5)每孔加入80ul的親和链酶素-HRP轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟 6)甩去孔内液体,每孔加满洗涤液振荡30秒,甩去洗涤液用吸水纸拍干。重复此操作3次如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次 7)每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀37℃温育10分钟。避免光照 8)取出酶标板,迅速加入50ul终止液加入终止液后应立即测定结果。 9)在450nm波长处测定各孔的OD值 |