一二三异丙醇胺,哪个ph值缓冲效果好?

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60mL8.04.将溶解定容至1L。5.高温高压灭菌后,室温保存。约 42mL注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差很大,温度每升高1C,溶液的0.03个单位。2、1.5 M Tris-HCl 质份浓度 1.5 M Tris-HCl(

2、pH8.8)0 己制量 1L通己置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。pH值大约降低2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解3. 用浓盐酸调pH值至8.8。4. 将溶液定容至1L。5. 高温高压灭菌后,室温保存。注意:应使溶液冷却至室温后再调定 pH值,因为Tris溶液的 pH值随温度的变化差异很大,温度每升高 1C,溶液的pH值大约 降低0.03个单位。3、

5、杯中,加 入约30 mL的去离子水搅拌溶解。2. 加去离子水将溶液定容至 100mL。3. 使用0.22滤膜过滤除菌。4. 密封瓶口于室温保存。注意:醋酸铉受热易分解,所以不能高温高压灭菌。7、 Tris- HCl平衡苯酚0己置方法1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸熠便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避 免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160C对其进行重蒸熠除去诸如醍等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯 键的断裂或导致 RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、 RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实

6、验。2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触 过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。3. 苯酚平衡:因为在酸性 pH条件下DNA分配于有机相,因 此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其 pH值达到7.8以上,苯酚 平衡操作方法如下:液化苯酚应贮存于-20C,此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68 C水浴中使苯酚充分溶解。 加入羟基喳唏(8-Quinolinol )至终浓度0.1%。该化合物 是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂, 同时因其呈黄色

7、。有助于方便识别有机相。 加入等体积的1M Tris-HCl ( pH8.0),使用磁力搅拌器搅 拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 重复操作步骤。 加入等体积的0.1M Tris-HCl ( pH8.0),使用磁力搅拌器 搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 重复操作步骤,稍微残留部分上层水相。 使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。 将苯酚置于棕色玻璃瓶中4C避光保存。8、苯酚/氯仿/异戊醇0己置方法1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯 /酚/氯仿/异 戊醇(25: 24: 1)。氯仿可使蛋白(25 : 24 : 1)质变性并有 助于液相与有机相的分离

8、,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24: 1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4C保存。9、10% ( W/V ) SDS Cffl份浓度 10% (W/V ) SDS0己制量100mL通己置方法1.称量10g高纯度的SDS置于100200mL烧杯中, 加入约80mL的去离子水,68 C加热溶解。2.

9、过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。2. 称取8g NaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。3. 待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100mL4. 将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。11、 2.5 N HCl顷份浓度 2.5 N HCl0己制量100mL通己置方法1.在78.4mL的去离子水中加入 21.6mL的浓盐酸 (11.6N),均匀混合。2. 室温保存。12、 5 M NaCl如份浓度 5 M NaCl0己制量1L0己置方法 1.称取292.2g NaCl置于1L烧杯中,加入约 800mL 的去离子水后搅拌溶解。2. 加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。

室温保存。此溶液保存时间最好不要超过一个月。注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌。16、 Solution III如份浓度 3M KOAc , 5M CH3COOH(质粒提取用)0己制量500mL项己置方法1.量取下列

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