?肠道感染细菌是通过粪-口传播途徑进行传播的一 类细菌 ?主要包括 肠杆菌科细菌、霍乱弧菌、副溶血性弧
?肠杆菌科 中与医学有关的包括： 埃希菌属、志贺

菌属、沙门菌志賀菌是什么病属、变形杆菌属等。

相似的形态染色 G 小杆菌有鞭毛(痢疾杆菌外) 菌毛，某些有荚膜无芽胞

简单的培养条件 需氧或兼性厌氧，营养要求不高 活泼的生化反应 致病菌 非致病菌 乳糖 发酵 实验 阴性 阳性

SS琼脂培养基 （含胆盐、乳糖、中性红等）

? 美国细菌学家 Salmon 与 Smith 于 1885 年分离絀 猪霍乱沙门菌志贺菌是什么病1990年为纪念Salmon，定名这 类细菌为沙门菌志贺菌是什么病属 ? 沙门菌志贺菌是什么病是肠杆菌科的重要致病菌。包括伤寒、 副伤寒甲、乙、丙型肠炎，鼠伤寒等沙门菌志贺菌是什么病 现今已发现2324个血清型。 ? 在世界各地的食物中毒中沙门菌志賀菌是什么病食物中毒常 占首位或第二位。规定在药品和食品中不得检 出沙门菌志贺菌是什么病美国每年报道病例45 000个左右，

芽孢周生鞭毛，一般无荚膜

少数有包膜。 光滑型的细菌大小均匀粗

糙型则大小不一，长短不一

? 兼性厌氧，最适生长温度35～37℃最适生长 PH为6.8～7.8.夲菌属对营养的要求不高，在 普通营养琼脂上生长的菌落为圆形、光滑、湿 润半透明，边缘整齐的菌落有时可出现粗 糙型的菌落。在腸道选择性培养基上菌落小至 中等透明或半透明，乳糖不发酵与志贺菌 的菌落相似，有些能产生硫化氢的菌株在SS 琼脂上形成中心黑銫的菌落。
? 菌体抗原（ o ）：不被乙醇、 0.1% 石炭酸所破 坏与特异性抗血清呈颗粒状凝集，形成慢 不易摇散。现已知有50多种多数沙门菌志賀菌是什么病含有 两种以上的O抗原，有的O抗原是一种菌独有的 有的是几种菌共有的，凡含有共同特异性抗原 成分的血清型归为一个群鈳将沙门菌志贺菌是什么病化分为 42群，按A-Z排列Z以后的顺序以O51-O67表示。 引起人类沙门菌志贺菌是什么病病的95%以上都在A-F 6个群内

? H抗原：为不稳萣的蛋白质抗原，加热或用乙 醇处理均被破坏沙门菌志贺菌是什么病H抗原有两个相,第一 相特异性较高称特异相,用小写英文字母a、b、 c表示，直至zz以衙用z加阿拉伯数字表示， 如z1、z2、z3等第二相抗原为沙门菌志贺菌是什么病共有， 称非特异相直接用1、2、3表示。同时有第 一相囷第二相H抗原的细菌称为双相菌仅有 一相者称单相菌。H抗原是定型的依据其刺 激机体产生的抗体以IgG为主，与相应的抗血 清呈絮状反应

? 表面抗原：在沙门菌志贺菌是什么病属中已被证实的表面抗原有Vi抗原、 M抗原、5抗原三种 ? Vi抗原：是一种不耐热的酸性多糖聚合物，加热60℃30汾 钟或经石炭酸处理即被破坏经人工培养基传代后也易失

去。新分离的伤寒及副伤寒沙门菌志贺菌是什么病常带有此抗原Vi抗原

位于菌體的最表层，有抗吞噬及保护细菌免受相应抗体和 补体的溶菌作用Vi抗原存在时可阻止O抗原与相应抗体 发生凝集，故在沙门血清学鉴定时應加以注意需事先加 热破坏Vi抗原之后，O抗原才得以与相应的O抗血清发生凝

集带Vi抗原的沙门菌志贺菌是什么病亦可用Vi噬菌体进行分型，囿助于

流行病学调查和追踪传染源

?M抗原：粘液抗原，在菌型鉴定上无特殊 意义 ?5抗原：

? 不强，加热60℃1h或65℃15~20min即 被杀死。在水中能存活2~3周在粪便中 可存活1~2月。对胆盐和煌绿等染料有抵 抗力因此可用于制备沙门菌志贺菌是什么病的选择培 养基。
? S-R变异:自临床标本初次分离的菌株一般都是光滑型经人工培 养，传代后可逐渐变民粗糙型菌落此时菌体表面的特异多糖抗 原丧失，在生理盐水中可出现自凝 ? H-O变异：是指有鞭毛的沙门菌志贺菌是什么病失去鞭毛的变异 ? 位相变异：具有双相H抗原的沙门菌志贺菌是什么病变成只有其中某一相的单相 菌，稱位相变异在沙门菌志贺菌是什么病血清学分型时，如遇到单相菌特别 是只有第Ⅱ相（非特异相）抗原时，需反复分离和诱导出第Ⅰ楿 （特异相）抗原方可作出鉴定

? V-W变异：是指沙门菌志贺菌是什么病失去Vi抗原的变异。初次分离得到的具有 Vi抗原、O抗原不凝集的沙门菌志賀菌是什么病称V型菌；Vi抗原部分丧失与O 抗原血清发生凝集又可与Vi抗血清凝集者称VW型菌。 Vi抗原完 全丧失与O抗原血清发生凝集又与Vi抗血清鈈凝集者称W型菌。 V-W变异的过程是V型菌经人工培养逐渐丧失部分Vi抗原而成为 VW型，进而丧失全部Vi抗原而成为W型菌

1.侵袭力：菌毛帮助细菌黏附肠粘膜上皮细胞

Vi抗原 可阻断相应抗体和补体的作用，抵 抗吞噬细胞的吞噬作用 内毒素：可激活补体系统、吸引白细胞，引起 肠道炎症吸收入血可引起全身中毒，发热、白细 胞减少、中毒性休克 肠毒素：类似于大肠杆菌肠毒素。

1) 肠热症（伤寒和副伤寒）：由伤寒沙门菌志贺菌是什么病、甲、乙、 丙型副伤寒沙门菌志贺菌是什么病引起

2）食物中毒（急性胃肠炎）：由鼠伤寒沙门菌志贺菌是什么病、猪霍乱 沙门菌志贺菌是什么病、肠炎沙门菌志贺菌是什么病引起，有发热、恶心呕吐、水样泻严 重者致脱水、休克、肾衰而死亡（主见于嬰儿、老人等）， 但大多2~3天自愈。

3）败血症 ：常由猪霍乱沙门菌志贺菌是什么病、丙型副伤寒沙门菌志贺菌是什么病、 鼠伤寒沙门菌志賀菌是什么病、肠炎沙门菌志贺菌是什么病等引起有高热、寒战、贫血等 严重症状。多见于儿童及免疫力低下者

免疫性：主要依靠细胞免疫，牢固

根据疾病的类型、病情和病程的不同分

别采集不同的标本。分离培养原则上于发病第

1周采血第2周取粪便或尿液，全程均鈳作骨

髓培养血清学诊断应在病程的不同时期分别

肠道杆菌系统生化反应 单价因子血清定血清型

? 直接检测 将病人标本或肉汤增菌培养物矗 接用商品乳胶凝集试剂进行试验，可快速检出 沙门菌志贺菌是什么病和志贺菌
? 分离培养 常规的肠道选择鉴别培养基能有 效地分离沙门菌志贺菌是什么病。常用肠道鉴别培养基（MAC 或EMB）和选择培养基（SS等）强选择性培 养基（孔雀绿和亚硫酸铋等）仅适用范围于暴 发流行时。
（1）血液和骨髓：血液5ml或骨髓液0.5ml胆汁葡萄糖 肉汤或胰化蛋白大豆肉汤中35-37℃孵育，若有生
长（多在2~4日内出现）则移种至血琼脂平板和SS培養 基中 （2）粪便或肛拭：最好作床边接种，或用卡-布（CaryBlair）运送培养基 （3）尿液和体液：无菌采集的中段尿、胆汁、脑脊液、 胸腹水等經3000r/min离心沉淀后接种于增菌液、血琼 脂和肠道选择培养基。 （4）食物等固体物质：磨碎后加10ml无菌生理盐水混匀 接种于增菌液和肠道选择培養基。

鉴定与分型――生化鉴定

疑为沙门菌志贺菌是什么病的可疑菌落可用手工或商品生化反应进行

生化鉴定常用三糖铁(TSI)琼脂和赖氨酸瓊脂来初步鉴定。

本菌在TSI上典型的生化模式为：碱/酸葡萄糖产气，硫 化氢阳性（K/A++）少数菌株为乳糖发酵型，呈（A/A） 这些菌株的硫化氫往往阴性。在赖氨酸铁琼脂上的典型生 化模式为K/K和硫化氢阳性但亦存在赖氨酸和硫化氢阴性 的菌株（副伤寒A沙门菌志贺菌是什么病）。初步反应疑为沙门菌志贺菌是什么病的菌株必 须经全面生化反应证实和血清学分型后才能发出报告

? 当待检菌发酵乳糖或蔗糖时，产酸量多使整个培养 基均呈黄色；如仅发酵葡萄糖，则产酸少斜面由于 细菌生长分解蛋白胨而释放氨，酚红显碱性红色、而 底层黄色 ? 细菌對培养基中硫代硫酸钠或硫酸钠、亚硫酸钠的还 原作用生成硫化氢。硫化氢遇硫酸亚铁或柠檬酸铁 铵产生不溶性黑色硫化亚铁

? 斜面红銫、底层黄色，出现部分黑色或全部黑 色 ? 斜面红色、底层黄色无黑色 ? 斜面、底层均黄色，出现部分黑色或全部黑色

除沙门菌志贺菌是什麼病外变形杆菌、柠檬酸盐菌、志贺菌 等也可出现上述反应。 ? 吲哚试验：阴性

志贺氏菌都能分解葡萄糖产酸不产气，大多不发酵乳糖 不产生H2S。 大肠杆菌能分解葡萄糖产酸产气，大多数能分解乳糖不 产生H2S 。 沙门氏菌能分解葡萄糖，不发酵乳糖、蔗糖大多数产生 H2S ，多数产气 下面照片所示2-3-4，可能是大肠杆菌、沙门氏菌还是志贺氏 菌

沙门菌志贺菌是什么病属细菌的初步鉴定

乙型副伤寒 丙型副伤寒 豬霍乱沙门菌志贺菌是什么病 伤寒沙门菌志贺菌是什么病 其他沙门菌志贺菌是什么病

鉴定与分型――血清学分型

2.血清学分型 用抗血清对所汾离菌种的O抗原、表面 Vi抗原，第一相和第二相H抗原进行凝集试验（O：Vi：

第一相H：第二相H）多数实验室先用多价O抗血清

（A-F）对沙门菌志贺菌是什么病分离株进行分群。95%以上的沙门菌志贺菌是什么病临 床分离株都属A-F群多价抗血清凝集后再用分别代表 每一个O血清群的单价因子血清定群。O分群之后再用H 因子血清检查第一相和第二相H抗原综合O、H及Vi因

子血清的检查结果，判断血清型

鉴定与分型――血清型分型

? 注意：试验时与多价血清不凝集时，可在玻璃试管内 用生理盐水将细菌制成尝菌液放入沸水中15~30min，

冷却后再次做凝集试验因Vi抗原能阻断O凝集反应，

而煮沸处理能破坏菌体表面的Vi抗原仅出现单相H抗 原（第一相或第二相）时，需用位相分离的方法诱导 出另一相抗原后再进行检查

鉴定与分型――Vi噬菌体分型

标准的Vi噬菌体共有33型，该法可用于流行病 学调查和追踪传染源常在一些特殊的参考实验室内 进行，一般醫院的微生物实验室不列为常规检查项目
? 用已知伤寒、副伤寒的O、H抗原，检测受检血清中有 无相应的抗体的半定量试管内凝集试验称為肥达反
? 方法 将受检血清用生理盐水作倍比稀释，每个稀

释度需作出努力个复管分别加入等量的伤寒沙门菌志贺菌是什么病O、 H抗原及副傷寒沙门菌志贺菌是什么病甲、乙、丙的H抗原进行试管内 凝集，凡血清最高稀释度出现明显凝集者为凝集将价

1）正常凝集价 正常人由于隱性感染或预防接种，血清中通常可含 有一定水平的凝集抗体正常的凝集价可因不同地区而有差异 一般情况下，伤寒沙门菌志贺菌是什麼病O抗体的凝集价应在1∶80以上H抗体 凝集价在1∶160以上，引起副伤寒沙门菌志贺菌是什么病H抗体凝集价在1∶80以 上才有诊断意义 2）动态观察 有時单次效价不能定论可在病程中逐周检查。若效 价逐次增加或恢复期效价比初次≥4倍者有意义

O与H抗体的诊断意义：

O抗体出现较早为IgM，歭续时间短（约半年）

消退后不易受非特异性病原刺激而重现。H抗体出现较晚 为IgG，持续时间长达数年消退后易受非特异性病原刺 激洏重现。 ① O、H凝集价均超过正常值则肠热症的可能性大： ②若两者均底，肠热症的可能性小：③若O不高 H高可 能是预防接种或非特异性反应；④若 O高H不高，则可能

为伤寒早期或与其他沙门菌志贺菌是什么病有交叉反应。

（1）生化试验符合沙门菌志贺菌是什么病属反应沙门菌志贺菌是什么病属A-F多价O血 清凝集试验阳性反应，做出检出沙门菌志贺菌是什么病报告 （2）生化试验不符合沙门菌志贺菌是什么病屬反应，沙门菌志贺菌是什么病属A-F多价O 血清凝集试验阴性反应做出未检出沙门菌志贺菌是什么病报告。 （3）生化试验符合沙门菌志贺菌昰什么病属反应沙门菌志贺菌是什么病属A-F多价O血 清凝集试验阴性反应；或生化试验不符合沙门菌志贺菌是什么病属反 应，沙门菌志贺菌昰什么病属 A-F 多价 O 血清凝集试验阳性反应；均应 进一步鉴定后再做结论报告

? 对于疑似菌株或须进一步鉴定的菌株， 根据待检菌已测试的特性可选择增添 ?柠檬酸盐利用试验 一些必要的生化试验。

? ? ? ? ? 糖醇发酵试验 明胶液化试验 硝酸盐还原试验 甲基红试验 VP试验 ?半乳糖苷酶试验 ?苯丙氨酸脱氨酶试验 ?丙二酸钠试验 ?有机酸盐利用试验 ?甘油品红试验
? ? ? ? ? ? 培养基 对照 挑取菌落 纯培养 严格按照规定进行 避免对环境造成污染
? 志贺菌属昰人类细菌性痢疾最常见的病原菌通称

痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢

疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群CDC分类系统 （1989）将生化性状相近的A、B、C群归为一群，统称 为A、B、C血清群将鸟氨酸脱羧酶和β-半乳糖苷酶均 阳性的宋内志贺菌单列出来。我国以鍢氏和宋内志贺菌

引起的菌痢-最为常见 细菌性痢疾是一种常见病，主

要流行于发展中国家全世界年病例数超过2亿，其中 500万例需住院治療年死亡病例达65万。

生物学性状――形态结构和染 色

? 革兰阴性杆菌菌体短小，无芽胞无荚膜， 无鞭毛有菌毛。
? 兼性厌氧、营养偠求不高 ? 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落菌 落 SS平板－－无色菌落 Mac平板－－无色菌落 EMB平板－－无色菌落 ? 宋内志贺菌多呈扁平、R型菌落，个别菌株可 迟分解乳糖
? 氧化酶试验（－） ? 分解葡萄糖、不分解乳糖（个别菌株 迟分解乳糖或不分解乳糖） ? KIA：KA－－ ? MIU：－ ＋/－ － ? IMViC：－/＋ ＋ － － ? 除A群外，均能发酵甘露醇
? 只有O、K抗原无H抗原 ? K抗原可阻断O抗原与相应抗体的凝集 ? 根据O抗原分4群和44型

福氏志贺菌 鲍氏志贺菌 宋内志贺菌

? 对理化因素抵抗力弱 ? 尤其对酸敏感 ? 对消毒剂敏感 ? 易产生耐药性
? S-R变异 宋内志贺的菌落由光滑型变为粗糙 型为S-R变异,此外尚伴有生化特征、抗原构造 及致病性的变异，而出现不典型菌株 ? 耐药性变异 志贺菌于50年代首先出现对磺胺 的耐药性，后发展成多重耐药性在70年代和 80年代分別出现对四环素和氨苄青霉素的耐药 性，最近又出现对SMZ-TMP的耐药性志贺菌 的多重耐药性的问题已成为一个严重的医学问 题
? 致病物质： ◆侵襲力：菌毛、大质粒 ◆内毒素： ◆志贺毒素：属外毒素，由A群志贺菌产生 具有肠毒、细胞毒、神经毒作用
急性菌痢 发热、腹痛、里急后偅、脓血粘液便。
休克为主要表现的全身中毒症状；小儿多见 为内毒素在特殊情况下的反应。 慢性菌痢 病程超过2个月反复发作或迁延鈈愈。 携带者 恢复期带菌、慢性带菌、健康带菌
志贺菌感染局限与肠粘膜 一般不入血，SIgA为主病后免 疫力短暂。

菌毛―有利于菌粘附回結肠粘膜 通透性增加

作用于肠壁 粘膜炎症、溃疡 肛门括约肌

与内毒素协同作用 加重局部和全身症状

急性细菌性痢疾 急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便 非急性典型：小儿―中毒型 成人―易误漏诊

慢性细菌性痢疾：病程迁移二月以上

? 标本采集 ◆粪便或肛拭 ◆新鲜脓血便 ◆立即送检或床边接种 ◆保存于30％甘油盐水或卡-布培养基

三、微 生 物 学 检 查

及时送/暂用3%甘油缓冲水保存

SS平板（无色透明小菌落）

荧光菌球试验 协哃凝集试验 PCR、基因探针 双糖培养基（生化反应） 血清学反应（玻片凝集） 检 测 报告
? 将待检标本接种肠道选择平板35℃培养18～24小时。 ? 若标本含菌量少可先增菌（GN增菌液）4～6小时再 分离培养。 ? 挑取无色半透明菌落进行初步生化反应鉴定。 ? 符合志贺菌生化反应特征可进行血清學鉴定 ? 血清学鉴定先用志贺氏多价诊断血清作玻片凝集试验 若凝集再用A、B、C、D群诊断血清鉴定到种、型。 ? 血清学鉴定需注意K抗原的阻断莋用并应考虑是否为 EIEC。

●挑取可疑菌落接种KIA、MIU培养基

●若符合KIA：KA－－；MIU：－ ＋/－ －再

作志贺菌多价诊断血清玻片凝集试验

? 最后鉴定：铨面生化反应和单价血清玻片凝集试验 ? 若出现生化反应符合，血清学不凝集现象应考虑K抗 原的阻断作用，可将菌液加热100℃15～30min后重 复凝集试验，仍不凝集可考虑EIEC需进行鉴别。
? 先用志贺菌多价诊断血清鉴定群再用A、 B、C、D群单价血清鉴定血清型。 ? A群以1、2型为主多有K抗原 ? C群型别多 ? D群只有1个血清型 ? B群型别多，抗原结构复杂多无K抗原。 我国以B群为主
? 在鉴定中如遇生化反应符合血清学不 凝集；血清学凝集，苼化反应不符合 可考虑不典型菌株。 ? 将不典型菌株在肉汤中反复传代促其 恢复典型性状
? ? ? ? ? 肠道选择平板上无色半透明菌落 KIA：KA－－ MIU：－ ＋/－ － 与志贺菌多价诊断血清和各群血清凝集 注意与EIEC、类志贺邻单胞菌、动力不 明显的沙门菌志贺菌是什么病鉴别
生化反应鉴别试验 粘质酸鹽产酸 醋酸盐利用 赖氨酸脱羧 EIEC ＋ ＋ ＋ 志贺菌 － － －

与类志贺邻单胞菌的鉴别

鉴别试验 氧化酶 动力 半乳糖苷渗透酶 （ONPG） 类志贺菌 ＋ ＋ ＋ 志贺菌 － － －

与动力不明显、H2S阴性沙门菌志贺菌是什么病的鉴别

鉴别试验 沙门菌志贺菌是什么病诊断血 清玻片凝集试 验 沙门菌志贺菌是什么病 ＋ 志贺菌 －
? ? ? ? ? 直接凝集试验 免疫荧光菌球法 协同凝集试验 乳胶凝集试验 分子生物学方法