简述耐药性质粒图谱的分类及其特征。

牛源大肠杆菌Ⅰ类整合子分子特征及其与耐药性关系的研究
近年来,一种被称作整合子/基因盒系统的新型可移动遗传因子被发现,其可介导耐药基因在染色体、质粒和转座子之间移动,从而导致细菌耐药性的传播(Mazel,2006;Cambray等,2010;Hall,2012)。整合子的种类根据整合酶基因碱基序列不同至少可划分为8类,在临床耐药菌株中以Ⅰ类整合子最为流行。整合子通过位点特异性重组捕获外源基因盒并使之表达,同时整合子可位于质粒上,或自身作为转座子的一个组成部分而参与转移(Cameron等,1986;Mazel等,2000),使耐药基因发生播散。整合子因其在细菌耐药性基因水平传播中的重要作用而受到研究者的关注。目前在整合子中发现的基因盒已超过80种,大部分是耐药基因盒,编码产物可使细菌产生对几乎全部临床常用药物的耐药性(Maz-el,2006)。同一个整合子可变区可带有多个基因盒,使宿主菌对多种药物产生耐药性。与整合子阴性菌株相比,整合子阳性菌株更趋向于多重耐药。目前,畜牧业生产中对大...&
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随着抗菌药物的广泛使用,尤其是不合理的使用,使耐药菌株不断产生。整合子是近年来新发现的一种天然克隆表达系统,能通过位点特异性重组捕获和表达外源性基因盒,同时整合子可位于质粒上或自身作为转座子的组成部分而参与转移,使耐药基因在细菌间快速播散[1-5]。本研究对临床分离的大肠埃希菌进行Ⅰ类整合子及可变区基因盒检测,并探讨其在细菌耐药性中的作用。1材料与方法1.1材料1.1.1菌株来源收集2011年非重复分离自本院就诊患者尿标本中的大肠埃希菌108株,所有菌株均经法国生物梅里埃公司VITEK-64全自动微生物分析鉴定系统鉴定。Ⅰ类整合子阳性对照菌株由本实验室保存。1.1.2主要试剂与仪器试剂:2×Premix TaqDNA聚合酶试剂、LA Taq DNA聚合酶、DNA标志物购自大连TaKaRa公司,细菌基因组DNA提取试剂盒购自上海生工生物公司。仪器:VITEK-64全自动微生物分析鉴定系统(法国生物梅里埃公司),PE9700PCR扩...&
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整合子能通过位点特异性重组捕获和表达外源性基因盒,是革兰阴性菌耐药性产生最重要机制之一,同时整合子可位于质粒、转座子等可移动性基因结构而参与转移,使得耐药基因在细菌间得以快速播散[1-5]。整合子通常根据整合酶基因的同源性进行分类,常见的有4类,其中Ⅰ类整合子在临床菌株中分布最广泛,基因盒种类丰富[1]。目前在整合子中发现的耐药性基因盒已130种,其编码产物可赋予细菌对全部临床常用药物产生耐药[2]。关于整合子在住院患者分离菌株中的分布研究较多,然而整合子在社区感染患者分离株中的分布少见报道。本研究对临床分离自门诊患者尿液标本的114株大肠埃希菌进行Ⅰ类整合子及可变区基因盒检测,并探讨其在细菌耐药性中的作用。1材料与方法1.1材料1.1.1菌株来源收集2011年8月-2012年10月非重复分离自医院门诊就诊患者尿液标本中的大肠埃希菌114株。1.1.2主要试剂细菌基因组DNA提取试剂盒购自上海生工生物公司,2×Premix Ta...&
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近来的研究显示,革兰阴性菌中一种基因捕获和表达的遗传单位——整合子(integron)在细菌获得抗生素抗性机制中起了重要作用。整合子由整合酶(integrase)基因(intl)、整合酶特异性重组点attI和数目不定的基因盒(gene cassette)组成。基因盒往往由一个编码抗生素抗性的开放读码框(ORF)和一个整合位点attC组成。基因盒可从整合子中切除成为游离的环状分子,或者将外源基因盒捕获并整合入整合子。近些年临床上分离的志贺菌对以往临床常用的抗生素逐渐耐药,有的菌株甚至多重耐药。以往研究表明,结合性质粒在志贺菌耐药性形成起了重要作用。新近数起研究报道了志贺菌中Ⅰ类和Ⅱ类整合子与菌株耐菌性关系。本研究对杭州地区近年分离的福氏和宋内氏志贺菌株进行Ⅰ类和Ⅱ类整合子的检测,了解其分布特征;进一步通过克隆测序和Southenblot,确定其携带的基因盒组成特征以及其在基因组中的位置;在研究中发现了一种缺少3’保守区的非典型Ⅰ类...&
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研究背景与目的随着抗生素的应用越来越广泛,细菌的耐药性就越来越严重。我国是世界上滥用抗生素最为严重的地区之一,细菌的耐药性问题已经引起人们的高度关注。我国目前临床上分离的细菌对常规抗生素的耐药率逐年上升,而且细菌在异常的抗生素选择压力下,产生多重耐药的情况不断出现,因此研究细菌耐药机制是十分必要和紧迫的。细菌耐药的生化机制非常复杂,通常是细菌对药物作用靶位、渗透性的改变,产生灭活酶和钝化酶,排外系统的作用以及生物膜的产生等方面。而从分子生物学角度认识细菌的耐药机制,主要集中于基因突变和耐药基因水平传播。基因转移是细菌耐药性迅速扩散的主要原因。携带耐药基因的基因转移元件有:质粒、转座子、整合型噬菌体和整合子,以及最近几年才发现的插入序列共同区(ISCR)。耐药基因可以通过接合、转化、转导和转座等方法在细菌间转移。通过转座的方式,整合子、ISCR和转座子可以导致多个耐药基因在单个质粒中聚集成束,这是多重耐药株产生的重要原因。ISCR...&
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沙门氏菌和大肠杆菌是医学和兽医临床上最常见的病原菌,给人类的健康和畜牧业的发展造成严重的损害。随着抗菌药物的广泛使用,细菌耐药性问题日益突出。调查研究沙门氏菌、大肠杆菌耐药性、扩增Ⅰ类整合子分子流行病学对从基因水平上探讨耐药性转移的分子机制具有重要的理论和实践意义。本研究采用纸片扩散(K-B)法,测定了从规模化养殖场分离鉴定的42株猪源沙门氏菌,19株鸡源沙门氏菌和48株猪源大肠杆菌对丁胺卡那霉素,卡那霉素,庆大霉素,新霉素,链霉素、氨苄青霉素,强力霉素,氟哌酸,先锋Ⅴ,氯霉素,磺胺异恶唑,四环素,头孢唑啉13种药物的耐药率。根据NCCLS(2004)的标准判定其耐药性。结果表明:61株沙门氏菌和48株大肠杆菌对四环素、强力霉素和磺胺异恶唑的耐药率最高,在89.58%~98.36%,对链霉素、氨苄青霉素的耐药率超过80%;61株沙门氏菌和48株大肠杆菌中耐三种药物以上的菌株分别为56株和48株,沙门氏菌和大肠杆菌的多重耐药率分别...&
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